Dokumen ini membahas pemisahan dan analisis kromatografi niacinamide dalam krim perawatan kulit menggunakan air sebagai fasa gerak. Tujuannya adalah untuk membandingkan metode HPLC dan RPLC serta mengevaluasi alat kromatografi yang berbeda. Selain itu, dokumen ini juga menjelaskan preparasi sampel dan larutan standar untuk analisis kromatografi.

1. Pemisahan dan Analisis Kromatografi
Niacinamide Dalam Krim Perawatan Kulit
Menggunakan Air Sebagai Fasa Gerak
Putri Amalia
(3325100152)
Erriska Rahma Putri (3325102418)
Nugroho Windu
(3325102420)
Immanuelle Orchidea (3325102413)
Ninda Ramadhani N (3325102402)

2. TUJUAN
Mengetahui perbedaan antara metode HPLC
dengan RPLC
 Dapat membandingkan antara alat kromatografi
kolom : Hamilton PRP-1 Column, Water Xterra MS
C 18 Column, dan water X Bridge C 18 Column.
 Mengetahui kelebihan menggunakan eluen air.


3. PENDAHULUAN
Vitamin B3 digunakan secara luas dalam kosmetik,
terutama krim kulit karena dapat mengatasi
masalah kulit seperti jerawat dan kerutan,
memutihkan dan meningkatkan perlindungan kulit
terhadap radikal bebas
 Vitamin B3 digunakan untuk mempertahankan
warna merah segar pada daging


4. Bahan:
 Niacin, Niacinamide
 Amonium Asetat
 4-asetamidophenol
 Metanol dan asam format khusus HPLC
 Air demineraralisat
 Krim perawatan kulit Olay
 Niacinamide-placebo-sample (didapat
dari P&G, USA)

5. alat:
 Instrumen HPLC
 Gelas piala
 Neraca analitik
 Spaltula
 Pengaduk kaca

6. Preparasi diluen
Internal standard
solution & larutan
sediaan
Larutan standar
kerja :
• 200 ml HCOOH 50 mM +
• 300 ml amonium asetat 50 mM
• 0,1±0,01 g 4-asetamidofenol
• Larutkan dengan metanol dalam labu ukur 100 ml
• 0,1±0,05 g niacinamide
• Larutkan dengan diluen dalam labu ukur 10 ml
• 1 ml larutan sediaan + 8 ml diluen
• 1 ml internal standard solution (4-asetamidofenol) + 8 ml
diluen

7. Preparasi sampel
 Krim kulit diaduk hingga homogen
 Timbang 0,2 ± 0,05 g dalam gelas piala 25 ml
 Tambahkan 1 ml internal standard solution ( 4acetamidophenol+metanol) dan 5ml metanol,
aduk rata, tambahkan 5 ml diluen, kocok
perlahan
 saring dengan kertas saring 0,45µm whatman
GD/X , tempatkan ke dalam wadah sampel
2ml untuk analisis kromatografi
 Sampel plasebo dicampur dengan 1ml larutan
sediaan, lalu ulang langkah-langkah di atas