2. Культивирование/Культивирование бактерий
• Микробная культура – это метод размножения микроорганизмов,
позволяющий им размножаться в заранее определенных питательных
средах в контролируемых лабораторных условиях.
• Микробные культуры используются для определения типа организма, его
численности в тестируемом образце или того и другого.
3. Цель культивирования
• Выделение бактерий.
• Свойства бактерий, т.е. культивирование бактерий, является первым шагом
в изучении их морфологии и идентификации.
• Поддержание исходных культур.
• Оцените жизнеспособное количество.
• Проверить чувствительность к антибиотикам.
• Создать антигены для лабораторного использования.
• Определенные генетические исследования и манипуляции с клетками
также требуют культивирования бактерий in vitro.
• Культивирование на твердой среде – еще один удобный способ разделения
бактерий в смеси.
4. Культурные СМИ
Искусственная питательная среда должна обеспечивать такие же условия
окружающей среды и питания, которые существуют в естественной среде обитания
бактерии.
Культуральная среда содержит воду, источник углерода и энергии, источник азота,
микроэлементов и некоторых факторов роста.
Уровень pH среды должен быть установлен соответствующим образом.
Использование:
Увеличить количество бактерий.
Выбирайте определенные бактерии и подавляйте другие.
Дифференцировать бактерии разных видов.
5.
6. Агар
• Агар, полисахарид, извлеченный из морских водорослей,
используется для затвердевания определенного питательного
раствора.
• В отличие от других гелеобразователей, он не разрушается
многими бактериями.
• Его нелегко разрушить при более высоких температурах,
поэтому его можно стерилизовать путем нагревания, в
результате чего он также разжижается.
• После затвердевания агаровая среда останется твердой до
тех пор, пока
V. Культуральная среда содержится в чашке Петри,
двухчастном контейнере со стеклянной или пластиковой
крышкой.
7. Классификация по консистенции:
А. Жидкие среды: их можно использовать в пробирках, бутылях или колбах.
Жидкие среды иногда называют «бульонами» (например, питательным бульоном). В
жидкой среде бактерии растут равномерно, вызывая общее помутнение. Агар не
добавляется. Чаще всего используется для приготовления инокулятов.
B. Твердые среды: Чашка с агаром представляет собой чашку Петри, содержащую
питательную среду (обычно агар плюс питательные вещества), используемую для
культивирования микроорганизмов. Добавляется 2% агара. Агар – наиболее часто
используемый затвердевающий агент. Можно оценить морфологию колоний,
пигментацию, гемолиз. Примеры включают питательный агар и кровяной агар.
C. Полутвердые среды. Такие среды довольно мягкие и полезны для демонстрации
подвижности бактерий и отделения подвижных от неподвижных штаммов. Примеры
полутвердых сред (окислительная ферментация Хью и Лейфсона). Добавляют 0,5%
агара.
https://www.youtube.com/watch?v=Bwjxi3vS0K4
9. Метод висячей капли
Метод висячей капли в микробиологии часто применяется для изучения лекарственных средств под микроскопом. Такой препарат создан
для изучения микроорганизмов в жидкой среде и изучения жидких микропрепаратов.
1. Подготовьте покровное стекло.
2. Нанесите на него каплю суспензии с микроорганизмами. Используйте для этого биологическую петлю.
3. Переверните стакан так, чтобы капля свисала.
4. Поместите образец над отверстием покровного стекла, в центре которого имеется специальная выемка. Важный! Капля
не должна касаться стекла, она должна свободно свисать.
10. Как выполнить тест на каталазу
https://www.youtube.com/watch?v=krHqynVe6-g
11. Стерилизация – это удаление всех форм микроорганизмов с поверхности предмета. Включает как
споровые, так и вегетативные формы.
Физическая стерилизация включает в себя следующие методы:
● Тепловая стерилизация
Тепловая стерилизация — наиболее эффективный метод стерилизации, при котором уничтожение
микробов достигается за счет разрушения компонентов клеток и ферментов. Это делается двумя
методами:
A. Влажно-тепловая стерилизация: это один из лучших методов стерилизации. Влажно-тепловая стерилизация
осуществляется с помощью инструмента, называемого автоклавом. Автоклав работает по принципу производства пара
под давлением. Таким образом, стерилизация влажным теплом также известна как стерилизация паром. Воду кипятят в
автоклаве при температуре 121-134℃ и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм. Это приводит к коагуляции белков
микроорганизма, и они эффективно погибают.
B. Стерилизация сухим жаром: этот метод используется для объектов, чувствительных к влаге. К поверхности или объектам
применяется невлажное тепло или сухое тепло, что приводит к денатурации и лизису белков, что приводит к
окислительному повреждению, и в конечном итоге микробная клетка отмирает или может даже сгореть. Некоторые
методы стерилизации сухим жаром включают мусоросжигательные печи, печи с горячим воздухом и методы горения.
12. ● Облучение
Облучение — это процесс воздействия на поверхности или предметы различных видов радиации для стерилизации. Он бывает
двух типов:
A. Неионизирующее излучение: на объект воздействует ультрафиолетовое излучение, которое поглощается
нуклеиновыми кислотами микроорганизмов. Это приводит к образованию димеров пиримидина в цепи ДНК,
что вызывает ошибку репликации, и в конечном итоге микроб погибает.
B. Ионизирующее излучение: при воздействии ионизирующего излучения, такого как гамма-лучи и
рентгеновские лучи, образуются активные формы кислорода, такие как перекись водорода и ионы
супероксида, которые окисляют клеточные компоненты микробов, и они погибают.
13.
14. Дезинфекция — это химический процесс, используемый для уничтожения или подавления роста
бактерий и других патогенов, которые могут вызывать инфекционные заболевания у людей и
животных. Дезинфицирующие средства — это химические растворы, используемые для защиты
от инфекций. К ним относятся спирт, йод, хлор и т. д.
