SlideShare a Scribd company logo
1 of 39
Download to read offline
‫الرحیم‬ ‫الرحمن‬ ‫اهلل‬ ‫بسم‬
‫گرداورندگان‬
‫امیری‬ ‫شبنم‬
‫حسناچراغی‬
‫غفاری‬ ‫مریم‬
‫فهرست‬
.1‫کروماتوگرافی‬ ‫ی‬ ‫وتاریخچه‬ ‫مقدمه‬
.2‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫روش‬ ‫بر‬ ‫مروری‬
.3‫متحرک‬ ‫وفاز‬ ‫فازساکن‬
.4‫دستگاه‬ ‫مختلف‬ ‫های‬ ‫اجزاوقسمت‬HPLC
.5‫کروماتوگرام‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫اطالعات‬
.6‫انالیزکمی‬
.7‫داخلی‬ ‫استاندارد‬
‫مقدمه‬‫تاریخچه‬ ‫و‬‫کروماتوگرافی‬
•‫روش‬ ،‫جداسازی‬ ‫روش‬ ‫پرکاربردترین‬ ‫و‬ ‫مهمترین‬ ‫شک‬ ‫بدون‬"‫کروماتوگرافی‬"‫است‬.‫کروماتوگرافی‬
(CHROMATOGRAPHY)‫یک‬ ‫بوسیله‬ ،‫شناس‬‫گیاه‬‫روسی‬‫بیستم‬ ‫قرن‬ ‫اوایل‬ ‫در‬ ،‫تسوت‬ ‫نام‬ ‫به‬(1903)‫شد‬ ‫کشف‬.‫او‬
‫کلروفیل‬ ‫مانند‬ ‫گیاهی‬ ‫مختلف‬ ‫های‬‫رنگدانه‬ ‫جداسازی‬ ‫برای‬ ‫تکنیک‬ ‫این‬ ‫از‬‫و‬ ‫ها‬‫ها‬‫گزانتوفیل‬‫کرد‬ ‫استفاده‬.
•‫میشوند‬ ‫بندی‬ ‫دسته‬ ‫کلی‬ ‫مفهوم‬ ‫دو‬ ‫ی‬ ‫برپایه‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫های‬ ‫روش‬:‫فیز‬ ‫مفاهیم‬ ‫براساس‬ ‫جداسازی‬ ‫اول‬ ‫درروش‬‫یکی‬
‫م‬ ‫سطحی‬ ‫وکروماتوگرافی‬ ‫ستونی‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫گروه‬ ‫دو‬ ‫وشامل‬ ‫گرفته‬ ‫صورت‬‫باشد‬ ‫ی‬.
•‫اساس‬‫فاز‬ ،‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫نوع‬ ،‫است‬ ‫تر‬‫مرسوم‬ ‫که‬ ‫دوم‬ ‫بندی‬‫دسته‬ ‫در‬ ‫گذاری‬‫نام‬‫ب‬ ‫شده‬ ‫ایجاد‬ ‫تعادل‬ ‫نوع‬ ‫همچنین‬ ‫و‬ ‫ساکن‬‫دو‬ ‫ین‬
‫است‬ ‫فاز‬.‫شامل‬ ‫دسته‬ ‫این‬‫دو‬‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫کلی‬ ‫گروه‬(‫باشد‬‫می‬ ‫مایع‬ ،‫متحرک‬ ‫فاز‬)‫گاز‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫و‬‫ی‬(‫فاز‬ ‫با‬
‫گاز‬ ‫متحرک‬)‫ا‬‫ست‬.
‫ستونی‬ ‫کروماتوگرافی‬
‫ستونی‬ ‫کروماتوگرافی‬
‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫روش‬ ‫بر‬ ‫مروری‬(HPLC)
‫کروماتوگرافی‬‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬(HPLC)‫جداسازی‬ ‫های‬‫تکنیک‬ ‫جمله‬ ‫از‬(SEPARATION)‫علوم‬ ‫از‬ ‫بسیاری‬ ‫در‬ ‫مرسوم‬
‫است‬.‫به‬ ‫ابتدا‬‫انجام‬ ‫منظور‬ ‫به‬ ‫وآزمایشگاهی‬ ‫دستگاهی‬ ‫پارامترهای‬ ‫دقیق‬ ‫انتخاب‬ ‫نحوه‬‫پارامترهایی‬‫انتخاب‬ ‫قبیل‬ ‫از‬‫و‬ ‫ستون‬ ‫نوع‬
‫آشکار‬ ‫انتخاب‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫بستگی‬ ‫آنالیت‬ ‫قطبیت‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫انتخاب‬‫ها‬‫ویژگی‬ ‫و‬ ‫ساختار‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫مناسب‬ ‫ساز‬‫نمونه‬ ‫شیمیایی‬ ‫ی‬
‫کروماتوگرام‬ ‫کیفی‬ ‫و‬ ‫کمی‬ ‫آنالیز‬ ‫نحوه‬ ‫به‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫دارد؛‬ ‫بستگی‬‫اشار‬‫میشود‬ ‫ه‬.
‫کروماتوگرافی‬ ‫در‬ ‫کلیدی‬ ‫مفاهیم‬
‫آنالیت‬ ‫مقداری‬ ‫تفاوت‬ ‫پایه‬ ‫بر‬ ‫جداسازی‬ ،‫کروماتوگرافی‬ ‫های‬‫روش‬ ‫درتمامی‬(‫جداسازی‬ ‫مورد‬ ‫ماده‬)‫ساکن‬ ‫فاز‬ ‫دو‬ ‫در‬
(Stationary Phase)‫و‬
‫متحرک‬(Mobile Phase)‫شود‬‫می‬ ‫انجام‬.‫با‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫که‬ ‫گردد‬‫می‬ ‫تعادلی‬ ‫تشکیل‬ ‫به‬ ‫منجر‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ،‫مقدار‬ ‫تفاوت‬ ‫این‬
‫توزیع‬ ‫ثابت‬ ‫نام‬ ‫به‬ ‫پارامتری‬(K)
‫کنند‬‫می‬ ‫بیان‬.‫رابطه‬ ‫این‬ ‫در‬Cm‫و‬Cs‫است‬ ‫ساکن‬ ‫فاز‬ ‫و‬ ‫فازمتحرک‬ ‫در‬ ‫آنالیت‬ ‫مولی‬ ‫غلظت‬ ‫دهنده‬‫نشان‬ ‫ترتیب‬ ‫به‬.
•‫متفاوتی‬ ‫شیمیایی‬ ‫و‬ ‫فیزیکی‬ ‫های‬‫پدیده‬ ‫که‬ ‫دهند‬‫می‬ ‫نشان‬ ‫تحقیقات‬ ‫نتایج‬‫پ‬ ‫همچنین‬ ‫و‬ ‫جداسازی‬ ‫سرعت‬ ‫روی‬ ‫بر‬‫دیده‬ ‫باند‬ ‫هنای‬
‫دارند‬ ‫تاثیر‬ ‫آنالیت‬ ‫هر‬ ‫برای‬ ‫شده‬.‫پردازند‬‫می‬ ‫عوامل‬ ‫این‬ ‫محاسبه‬ ‫و‬ ‫توجیه‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫موجود‬ ‫های‬‫تئوری‬ ‫بین‬ ‫از‬‫تئوری‬ ،
‫فرضی‬ ‫های‬‫بشقابک‬(PLATES)‫دارد‬ ‫بیشتری‬ ‫کاربرد‬.‫های‬‫الیه‬ ‫سری‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫هرستون‬ ‫که‬ ‫شود‬‫می‬ ‫فرض‬ ‫تئوری‬ ‫این‬ ‫در‬
،‫اند‬‫گرفته‬ ‫قرار‬ ‫متوالی‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫که‬ ،‫هم‬ ‫از‬ ‫مجزا‬ ‫کامال‬ ‫و‬ ‫افقی‬ ،‫باریک‬‫است‬ ‫شده‬ ‫تشکیل‬.‫ب‬ ،‫ها‬‫الیه‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫یک‬ ‫هر‬ ‫به‬‫شقابک‬
‫شود‬‫می‬ ‫گفته‬.‫سا‬ ‫و‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫بین‬ ‫تعادلی‬ ‫در‬ ‫آنالیت‬ ،‫ها‬‫بشقابک‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫کدام‬ ‫هر‬ ‫در‬‫ب‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫قرار‬ ‫کن‬‫بین‬ ‫انتقال‬ ‫ا‬
‫پذیرد‬‫می‬ ‫صورت‬ ‫جداسازی‬ ‫عمل‬ ‫ها‬‫بشقابک‬.‫عبارت‬ ‫به‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫درستون‬ ‫موجود‬ ‫های‬‫بشقابک‬ ‫تعداد‬ ‫به‬ ‫ستون‬ ‫هر‬ ‫کارایی‬‫دی‬،‫گر‬
‫دارد‬ ‫بستگی‬ ‫ستون‬ ‫در‬ ‫شده‬ ‫ایجاد‬ ‫های‬‫تعادل‬ ‫تعداد‬ ‫به‬.‫های‬‫بشقابک‬ ‫تعداد‬ ،‫ستون‬ ‫کارایی‬ ‫بررسی‬ ‫برای‬ ‫بنابراین‬‫فرض‬(N)‫را‬
‫کنند‬‫می‬ ‫زیرمحاسبه‬ ‫رابطه‬ ‫از‬
•‫رابطه‬ ‫این‬ ‫در‬H‫و‬ ‫بشقابک‬ ‫هر‬ ‫ارتفاع‬ ‫دهنده‬‫نشان‬L‫نمایش‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫ستون‬ ‫طول‬‫گذار‬‫می‬‫د‬
•،‫کارایی‬ ‫محاسبه‬ ‫منظور‬ ‫به‬ ‫دیگری‬ ‫مختلف‬ ‫تعاریف‬ ‫و‬ ‫پارامترها‬ ‫مباحث‬ ‫این‬‫اندازه‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫آزمایشگاهی‬ ‫شرایط‬‫گیری‬
‫دارند‬ ‫وجود‬ ‫آنالیت‬ ‫کمی‬.
‫کروماتوگرافی‬‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬
•‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ،‫جداسازی‬ ‫های‬‫تکنیک‬ ‫میان‬ ‫از‬(HIGH PERFORMANCE LIQUID
CHROMATOGRAPHY -HPLC)‫رشد‬ ‫بیشترین‬ ،‫خرید‬ ‫صرف‬ ‫دالر‬ ‫ها‬‫میلیون‬ ‫سالیانه‬ ‫و‬ ‫است‬ ‫داشته‬ ‫را‬ ‫کارایی‬‫و‬
‫های‬‫دستگاه‬ ‫فروش‬HPLC‫شود‬‫می‬ ‫دنیا‬ ‫در‬.‫حساسیت‬ ‫به‬ ‫توان‬‫می‬ ‫را‬ ‫رشد‬ ‫این‬ ‫علت‬‫ب‬‫اال‬‫ب‬ ‫صحت‬ ‫با‬ ‫کمی‬ ‫مقدار‬ ‫تعیین‬ ،،‫اال‬
‫با‬ ‫که‬ ‫دما‬ ‫به‬ ‫حساس‬ ‫و‬ ‫غیرفرار‬ ‫های‬‫نمونه‬ ‫آنالیز‬ ‫قابلیت‬‫تکنیک‬‫گاز‬ ‫کروماتوگرافی‬‫ی‬(GC(‫پذیر‬‫امکان‬،‫نیستند‬‫ن‬‫سبت‬‫داد‬.
‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫و‬ ‫ساکن‬ ‫فاز‬
•‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫کلی‬ ‫قاعده‬ ‫یک‬ ‫متحرک‬ ‫و‬ ‫ساکن‬ ‫های‬‫فاز‬ ‫قطبیت‬ ‫مورد‬ ‫در‬.‫ن‬ ‫باید‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫و‬ ‫شونده‬‫حل‬ ‫قطبیت‬ ،‫قاعده‬ ‫این‬ ‫طبق‬‫به‬ ‫زدیک‬
‫با‬ ‫ولی‬ ،‫باشد‬ ‫هم‬‫فاز‬‫باشد‬ ‫داشته‬ ‫اختالف‬ ‫ساکن‬.‫است‬ ‫زیر‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫ترکیبات‬ ‫در‬ ‫عاملی‬ ‫های‬‫گروه‬ ‫قطبیت‬ ‫ترتیب‬:
•‫هیدروکربن‬<‫اترها‬<‫استرها‬<‫ها‬‫کتون‬<‫آلدئیدها‬<‫آمیدها‬<‫ها‬‫آمین‬<‫ها‬‫الکل‬
•‫خصوصیات‬‫در‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬HPLC‫است‬ ‫آمده‬ ‫زیر‬ ‫در‬:
‫د‬‫رصد‬‫باال‬ ‫خلوص‬(،‫باال‬ ‫بسیار‬ ‫خلوص‬ ‫درصد‬ ‫با‬ ‫هایی‬‫حالل‬HPLC GRADE‫دارد‬ ‫نیز‬ ‫باالیی‬ ‫قیمت‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫موجود‬ ‫بازار‬ ‫در‬ ،(
•‫ستون‬ ‫دمای‬ ‫از‬ ‫باالتر‬ ‫جوش‬ ‫نقطه‬(‫گرمکن‬ ‫با‬ ‫که‬ ‫مواردی‬ ‫در‬ ‫خصوص‬ ‫به‬(OVEN)‫شود‬‫می‬ ‫کار‬(
‫کم‬ ‫پذیری‬‫واکنش‬(INERTNESS)
‫قابل‬‫یت‬‫آشکارساز‬ ‫با‬ ‫تطابق‬
‫اجزاء‬‫دستگاه‬ ‫مختلف‬ ‫های‬‫قسمت‬ ‫و‬HPLC
•‫حالل‬ ‫خازن‬:‫است‬ ‫شده‬ ‫ریخته‬ ‫ستون‬ ‫شستشودهنده‬ ‫های‬‫حالل‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫آنها‬ ‫در‬ ‫که‬.
‫موتور‬‫پمپ‬ ‫یا‬:‫نیا‬ ،‫ستون‬ ‫طویل‬ ‫نسبتا‬ ‫فضای‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫همچنین‬ ‫و‬ ‫حالل‬ ‫انتقال‬ ‫منظور‬ ‫به‬‫سیس‬ ‫در‬ ‫فشاری‬ ‫ایجاد‬ ‫به‬ ‫ز‬‫که‬ ‫است‬ ‫تم‬
‫آن‬ ‫ایجاد‬ ‫برای‬‫حداقل‬‫ا‬‫ز‬‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬ ‫موتور‬ ‫یا‬ ‫پمپ‬ ‫یک‬.‫حالل‬(‫متحرک‬ ‫فاز‬)‫ثابت‬ ‫جریان‬ ‫و‬ ‫سرعت‬ ‫با‬ ‫پمپ‬ ‫توسط‬‫روی‬ ‫بر‬ ‫ی‬
‫شود‬‫می‬ ‫داده‬ ‫حرکت‬ ‫ساکن‬ ‫فاز‬.‫فشار‬‫سیستم‬‫به‬‫اندازه‬(‫سایز‬)‫گرانروی‬ ،‫ستون‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫ذرات‬(VISCOSITY)‫سرعت‬ ‫و‬
‫دارد‬ ‫بستگی‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫جریان‬.‫میزان‬ ،‫جداسازی‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بسته‬‫سرعت‬‫گردد‬‫می‬ ‫تعیین‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫جریان‬.‫موار‬ ‫در‬‫با‬ ‫که‬ ‫دی‬
‫صورت‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫خود‬ ،‫شده‬ ‫جدا‬ ‫گونه‬ ‫هر‬ ،‫هستیم‬ ‫مواجه‬ ‫ها‬‫آنالیت‬ ‫از‬ ‫تعددی‬‫در‬ ‫پیک‬ ‫یک‬
‫حالل‬ ‫خازن‬
‫تزریق‬ ‫های‬ ‫پمپ‬
‫دهد‬‫می‬ ‫نشان‬ ‫نهایی‬ ‫کروماتوگرام‬.‫جد‬ ‫و‬ ‫یافته‬ ‫افزایش‬ ‫ها‬‫پیک‬ ‫بین‬ ‫فاصله‬ ،‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫کمتر‬ ‫جریان‬ ‫سرعت‬ ‫در‬‫اساز‬‫بهتری‬ ‫ی‬
‫داشت‬ ‫خواهیم‬.‫مرسوم‬ ‫قطر‬ ‫با‬ ‫هایی‬‫ستون‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫شود‬‫می‬ ‫گفته‬ ‫معموال‬(‫از‬ ‫کمتر‬5MM (‫از‬ ‫باالتر‬ ‫نباید‬ ‫جریان‬ ‫سرعت‬2/5
ML/MIN‫شود‬‫می‬ ‫آن‬ ‫مفید‬ ‫عمر‬ ‫کاهش‬ ‫و‬ ‫ستون‬ ‫به‬ ‫زدن‬ ‫صدمه‬ ‫باعث‬ ‫که‬ ‫چرا‬ ‫باشد‬.
•‫به‬‫تواند‬‫می‬ ‫خالص‬ ‫حالل‬ ‫یک‬ ‫ازای‬ ‫در‬ ‫ها‬‫حالل‬ ‫از‬ ‫مخلوطی‬ ،‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫عنوان‬‫شود‬ ‫گرفته‬ ‫کار‬‫به‬.‫م‬ ‫فاز‬ ‫اجزاء‬ ‫نسبت‬‫تحرک‬
‫تزریق‬ ‫یک‬ ‫طی‬ ‫در‬‫ممکن‬‫ایزوکراتیک‬ ‫روش‬ ‫آن‬ ‫به‬ ‫صورت‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫باشد‬ ‫ثابت‬ ‫است‬(ISOCRATIC)‫شود‬‫می‬ ‫گفته‬.‫در‬
‫گرادیانت‬ ‫روش‬ ‫آن‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫دیگر‬ ‫حالتی‬(GRADIENT)‫گفته‬‫ک‬ ‫ای‬‫برنامه‬ ‫طبق‬ ،‫زمان‬ ‫پیشرفت‬ ‫با‬ ‫و‬ ‫تزریق‬ ‫یک‬ ‫طی‬ ،‫شود‬‫می‬‫ه‬
‫حالل‬ ‫چند‬ ‫یا‬ ‫دو‬ ‫از‬ ‫متفاوتی‬ ‫درصد‬ ،‫است‬ ‫شده‬ ‫تعریف‬ ‫سیستم‬ ‫برای‬ ‫قبل‬ ‫از‬‫مخلوط‬‫شده‬‫پمپ‬ ‫توسط‬ ‫سیستم‬ ‫در‬ ‫و‬‫جریان‬
‫یابد‬‫می‬.
‫کننده‬‫تزریق‬: (INJECTOR)
•‫انجا‬ ‫خودکار‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫دستی‬ ‫شکل‬ ‫دو‬ ‫به‬ ،‫دستگاه‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بسته‬ ،‫نمونه‬ ‫تزریق‬‫گیرد‬‫می‬ ‫م‬.‫ظ‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ،‫خودکار‬ ‫روش‬ ‫در‬‫روف‬
‫گیرد‬‫می‬ ‫قرار‬ ‫دستگاه‬ ‫در‬ ‫شده‬ ‫تعبیه‬ ‫محل‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫ریخته‬ ‫مخصوصی‬.‫را‬ ‫تزریق‬ ‫دستور‬ ‫اپراتور‬ ‫اینکه‬ ‫از‬ ‫پس‬(‫طریق‬ ‫از‬
‫افزار‬‫نرم‬)‫شود‬‫می‬ ‫منتقل‬ ‫سیستم‬ ‫به‬ ‫سرنگ‬ ‫یک‬ ‫توسط‬ ‫نمونه‬ ،‫دهد‬‫می‬.‫های‬‫ظرفیت‬ ‫با‬ ‫هایی‬‫سرنگ‬ ‫از‬ ،‫دستی‬ ‫روش‬ ‫در‬‫مختلف‬
‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬ ‫نمونه‬ ‫تزریق‬ ‫برای‬.‫شده‬ ‫تزریق‬ ‫نمونه‬ ‫حجم‬(‫روش‬ ‫دو‬ ‫هر‬ ‫در‬)‫بردار‬‫نمونه‬ ‫حلقه‬ ‫حجم‬ ‫به‬ ،(LOOP)‫بستگی‬
‫حد‬ ‫در‬ ً‫ال‬‫معمو‬ ‫آن‬ ‫مقدار‬ ‫و‬ ‫دارد‬5‫تا‬500‫است‬ ‫میکرولیتر‬.‫ب‬ ‫سیستم‬ ‫شدن‬ ‫ازآماده‬ ‫پس‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫حلقه‬ ‫این‬ ‫وارد‬ ‫ابتدا‬ ‫نمونه‬‫ه‬
‫شود‬‫می‬ ‫ستون‬ ‫وارد‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫همراه‬.
‫ستون‬
•‫ستون‬‫پیش‬ ‫نام‬ ‫به‬ ‫قسمتی‬ ‫وارد‬ ‫ابتدا‬ ‫نمونه‬ ،‫تزریق‬ ‫از‬ ‫پس‬(PRE-COLUMN)‫محافظ‬ ‫ستون‬ ‫یا‬(GUARD
COLUMN)‫شود‬‫می‬.‫است‬ ‫اصلی‬ ‫ستون‬ ‫از‬ ‫محافظت‬ ،‫ستون‬ ‫این‬ ‫نقش‬.‫است‬ ‫متر‬‫سانتی‬ ‫حد‬ ‫در‬ ‫معموال‬ ‫ستون‬ ‫این‬ ‫طول‬‫و‬
‫است‬ ‫زنگ‬ ‫ضد‬ ‫فوالد‬ ‫از‬ ‫آن‬ ‫جنس‬.‫پرکننده‬ ‫ماده‬(PACKING)‫اصلی‬ ‫ستون‬ ‫پرکننده‬ ‫ماده‬ ‫مشابه‬ ‫جنسی‬ ‫از‬ ‫محافظ‬ ‫ستون‬
‫است‬.‫ذر‬ ‫با‬ ‫که‬ ‫ای‬‫ماده‬ ‫اگر‬ ‫که‬ ‫دارد‬ ‫را‬ ‫مزیت‬ ‫این‬ ‫پرکننده‬ ‫نوع‬ ‫بودن‬ ‫جنس‬ ‫هم‬‫موج‬ ‫نمونه‬ ‫در‬ ‫شود‬ ‫واکنش‬ ‫وارد‬ ‫ستون‬ ‫ات‬‫ود‬
‫آس‬ ‫دچار‬ ‫را‬ ‫اصلی‬ ‫وستون‬ ‫افتاده‬ ‫دام‬ ‫به‬ ‫محافظ‬ ‫ستون‬ ‫در‬ ‫ابتدا‬ ‫در‬ ،‫باشد‬‫کند‬‫نمی‬ ‫یب‬.‫دستگ‬ ‫اصلی‬ ‫های‬‫ستون‬ ‫طول‬‫معموال‬ ‫اه‬
‫حدود‬30-10‫پوست‬ ‫فرم‬ ‫دو‬ ‫از‬ ‫یکی‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫موادی‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫ستون‬ ‫درون‬ ‫و‬ ‫بوده‬ ‫متر‬‫سانتی‬‫ک‬ ‫پر‬ ،‫است‬ ‫متخلخل‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫دار‬‫ه‬‫اند‬‫رده‬.
‫مت‬ ،‫دارد‬ ‫فراوانی‬ ‫تاثیر‬ ‫جداسازی‬ ‫کیفیت‬ ‫بر‬ ‫که‬ ‫پرکننده‬ ‫مواد‬ ‫این‬ ‫سایز‬‫حد‬ ‫در‬ ‫معموال‬ ‫و‬ ‫بوده‬ ‫فاوت‬3‫تا‬5‫است‬ ‫میکرومتر‬.
•‫باشد‬ ‫غیرقطبی‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫قطبی‬ ‫تواند‬‫می‬ ‫ستون‬.‫به‬ ‫توان‬‫می‬ ‫غیرقطبی‬ ‫های‬‫ستون‬ ‫ترین‬‫مرسوم‬ ‫از‬C18‫سیالن‬ ‫اکتادسیل‬ ،(ODS)‫اشاره‬
‫کرد‬.‫ها‬‫ستون‬ ‫جنس‬‫از‬‫ضدزنگ‬ ‫فوالد‬(STAINLESS STEEL)‫است‬.،‫قطبیت‬ ‫تفاوت‬ ‫براساس‬ ،‫ستون‬ ‫به‬ ‫نمونه‬ ‫ورود‬ ‫از‬ ‫پس‬
‫نام‬ ‫با‬ ‫متفاوتی‬ ‫های‬‫زمان‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫مختلف‬ ‫اجزاء‬‫زم‬‫ان‬‫بازداری‬(RETENTION TIME)‫برای‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫جدا‬ ‫یکدیگر‬ ‫از‬
‫آشکارساز‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫ماده‬ ‫نوع‬ ‫تشخیص‬(DETECTOR)‫شوند‬‫می‬ ‫هدایت‬.
•‫در‬‫دهیم‬ ‫شستشو‬ ‫را‬ ‫ستون‬ ‫باید‬ ‫کار‬ ‫اتمام‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫نهایت‬.‫ت‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫متفاوتی‬ ‫حالل‬ ،‫ستون‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بسته‬ ،‫شستشو‬ ‫برای‬‫خاص‬ ‫رتیب‬
‫کنیم‬‫می‬ ‫انتخاب‬.‫برای‬‫مثال‬‫قط‬ ‫حالل‬ ‫یک‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫ستون‬ ‫ابتدا‬ ،‫کار‬ ‫اتمام‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫غیرقطبی‬ ‫های‬‫ستون‬ ‫در‬‫بی‬(‫آب‬ ‫معموال‬)‫و‬‫با‬ ‫سپس‬
‫غیرقطبی‬ ‫حالل‬ ‫یک‬(‫متانول‬ ‫معموال‬)‫شستشو‬‫دهند‬‫می‬.
‫آشکارساز‬(DETECTOR)
•‫شود‬‫می‬ ‫انتخاب‬ ‫آنالیت‬ ‫نوع‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫آشکارساز‬.‫باش‬ ‫زیر‬ ‫های‬‫ویژگی‬ ‫دارای‬ ‫باید‬ ‫خوب‬ ‫آشکارساز‬ ‫یک‬ ‫کل‬ ‫طور‬ ‫به‬‫د‬:
•
>‫باال‬ ‫حساسیت‬
•
>‫بودن‬ ‫غیرتخریبی‬(NONDESTRUCTIVE):‫نکند‬ ‫تخریب‬ ‫را‬ ‫نمونه‬ ،‫شناسایی‬ ‫روند‬ ‫طول‬ ‫در‬.
•
>‫وسیع‬ ‫دامنه‬ ‫در‬ ‫غلظت‬ ‫به‬ ‫خطی‬ ‫پاسخ‬(‫محاسبات‬ ‫در‬ ‫سهولت‬ ‫برای‬(
‫شود‬‫می‬ ‫اشاره‬ ‫مرسوم‬ ‫ازآشکارسازهای‬ ‫تعدادی‬ ‫به‬ ‫درادامه‬:
•‫الف‬-‫سنج‬‫طیف‬ ،‫آشکارساز‬ ‫انواع‬ ‫پرکاربردترین‬ ‫از‬UV-VIS‫باشند‬ ‫داشته‬ ‫جذب‬ ‫ناحیه‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫اجسامی‬ ‫برای‬ ‫که‬ ‫است‬
‫گیرد‬‫می‬ ‫قرار‬ ‫استفاده‬ ‫مورد‬.‫نوری‬ ‫منبع‬ ‫با‬ ‫نمونه‬ ‫جذب‬ ‫میزان‬ ‫تفاوت‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬ ‫آشکارساز‬ ‫این‬ ‫در‬‫ن‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫اولیه‬‫با‬ ‫هایت‬
‫شود‬‫می‬ ‫گیری‬‫اندازه‬ ‫نمونه‬ ‫غلظت‬ ،‫المبرت‬ ‫بیر‬ ‫قانون‬ ‫از‬ ‫استفاده‬.‫ا‬ ‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬ ‫آشکارساز‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫که‬ ‫مواردی‬ ‫در‬‫نتخاب‬
‫بگیرد‬ ‫قرار‬ ‫نظر‬ ‫مد‬ ‫بایست‬‫می‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫مواردی‬ ‫از‬ ‫یکی‬ ‫مناسب‬ ‫موج‬ ‫طول‬.‫موج‬ ‫های‬‫مزاحم‬ ‫نباید‬ ،‫انتخابی‬ ‫موج‬ ‫طول‬ ‫در‬‫ود‬
‫باشند‬ ‫داشته‬ ‫جذب‬ ‫حالل‬ ‫همچنین‬ ‫و‬ ‫نمونه‬ ‫در‬.
•‫ب‬-‫شکست‬ ‫ضریب‬ ‫آشکارساز‬:‫سی‬ ‫شکست‬ ‫ضریب‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫تغییراتی‬ ‫مبنای‬ ‫بر‬ ‫آشکارساز‬ ‫این‬ ‫کار‬ ‫اساس‬‫ست‬‫به‬ ‫حالل‬ ‫م‬
‫همراه‬ ‫حالل‬ ‫سیستم‬ ‫و‬ ‫تنهایی‬‫با‬‫شود‬‫می‬ ‫ایجاد‬ ،‫نمونه‬.‫دلی‬ ‫همین‬ ‫به‬ ‫و‬ ‫بوده‬ ‫وابسته‬ ‫حرارت‬ ‫به‬ ‫آشکارساز‬ ‫این‬ ‫پاسخ‬‫به‬ ‫معموال‬ ‫ل‬
‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬ ‫ازآن‬ ‫ندرت‬.
•‫ج‬-‫آشکارساز‬ ‫از‬ ‫تر‬‫حساس‬ ،‫فلورسانس‬ ‫آشکارساز‬UV/VIS‫فلورسانس‬ ‫خاصیت‬ ‫که‬ ‫موجودند‬ ‫کمی‬ ‫ترکیبات‬ ‫ولی‬ ‫است‬
‫کاربرد‬ ‫درنتیجه‬ ‫باشند؛‬ ‫داشته‬‫ا‬‫ین‬‫است‬ ‫محدود‬ ‫نیز‬ ‫آشکارساز‬.
•‫د‬-‫اح‬ ‫و‬ ‫اکسید‬ ‫های‬‫واکنش‬ ‫برپایه‬ ‫آن‬ ‫عملکرد‬ ‫که‬ ،‫الکتروشیمیایی‬ ‫آشکارساز‬‫آمپرومت‬ ‫های‬‫روش‬ ‫شامل‬ ‫و‬ ‫باشد‬‫می‬ ‫یا‬‫ری‬
(AMPEROMETRY)‫پالروگرافی‬ ،(POLAROGRAPHY)‫سنجی‬‫کلون‬ ،(COULOMETRY)‫سنجی‬‫هدایت‬ ‫و‬
(CONDUCTOMETRY)‫است‬.
•‫ا‬‫شکارساز‬‫جرمی‬ ‫سنج‬‫طیف‬(MS):‫ا‬ ‫مورد‬ ‫وسیعی‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫دارد‬ ‫که‬ ‫زیادی‬ ‫مزایای‬ ‫دلیل‬ ‫به‬ ‫امروزه‬ ‫مورد‬ ‫این‬‫قرار‬ ‫ستفاده‬
‫گیرد‬‫می‬.‫جمله‬ ‫این‬ ‫از‬‫میت‬‫وان‬‫تشخیص‬ ‫حد‬ ‫به‬(LOD)‫انتخابگری‬ ‫و‬ ‫حساسیت‬ ،‫پایین‬ ‫بسیار‬(SELECTIVITY)‫و‬ ،‫باال‬
‫شیمیایی‬ ‫های‬‫مزاحم‬ ‫حضور‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫بررسی‬ ‫امکان‬‫ا‬‫شاره‬‫کرد‬.‫در‬،‫کرد‬ ‫استفاده‬ ‫نتوان‬ ‫موارد‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫کدام‬ ‫هیچ‬ ‫از‬ ‫صورتیکه‬
‫سازی‬‫مشتق‬ ‫از‬(‫نمونه‬ ‫روی‬ ‫شیمیایی‬ ‫تغییرات‬ ‫ایجاد‬)‫یک‬ ‫هر‬ ‫در‬ ‫فعال‬ ‫نمونه‬ ‫ایجاد‬ ‫جهت‬‫ا‬‫ز‬‫ش‬ ‫ذکر‬ ‫آشکارسازهای‬ ‫این‬‫ده‬
‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬.‫دستگاه‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫نمایی‬ ‫زیر‬ ‫شکل‬HPLC‫است‬ ‫کشیده‬ ‫تصویر‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫مختلف‬ ‫اجزاء‬ ‫همراه‬ ‫به‬ ‫را‬.
‫اطالعات‬‫کروماتوگرام‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫حاصل‬
‫یک‬‫نمونه‬‫کروماتوگرام‬‫در‬‫شکل‬2‫نشان‬‫داده‬‫شده‬‫است‬‫که‬‫در‬‫آن‬‫سه‬‫نوع‬‫قند‬‫از‬
‫یکدیگر‬‫جدا‬‫اند‬‫شده‬.‫اطالعات‬،‫کمی‬‫نیمه‬‫کمی‬‫و‬‫کیفی‬‫از‬‫ولتاموگرا‬‫م‬‫قاب‬‫ل‬
‫استخراج‬‫است‬.
‫کاربردهای‬‫کیفی‬
•‫شود‬‫می‬ ‫انجام‬ ‫ترکیبات‬ ‫نوع‬ ‫شناسایی‬ ‫و‬ ‫تشخیص‬ ‫برای‬ ،‫کیفی‬ ‫آنالیز‬.‫بازداری‬ ‫زمان‬ ‫که‬‫آنجایی‬ ‫از‬(RETENTION
TIME)‫و‬ ‫سیستم‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫ماده‬ ‫هر‬ ‫برای‬‫شرایط‬‫تعیی‬ ‫جهت‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫توان‬‫می‬ ،‫باشد‬‫می‬ ‫مشخص‬ ‫و‬ ‫ثابت‬ ‫آزمایشگاهی‬ ‫خاص‬‫ن‬
‫کرد‬ ‫استفاده‬ ‫آنالیت‬ ‫نوع‬.‫با‬ ‫را‬ ‫آنالیت‬ ‫کروماتوگرام‬ ‫منظور‬ ‫این‬ ‫به‬‫کروماتوگرام‬‫آنال‬ ‫آن‬ ‫استاندارد‬ ‫از‬ ‫آمده‬ ‫دست‬‫به‬‫مقایسه‬ ‫یت‬
‫کنند‬‫می‬.‫تعی‬ ‫را‬ ‫ماده‬ ‫نوع‬ ‫قطعیت‬ ‫با‬ ‫توان‬‫می‬ ‫بازداری‬ ‫زمان‬ ‫بودن‬ ‫یکسان‬ ‫صورت‬ ‫در‬‫کرد‬ ‫ین‬.‫ذکر‬‫اس‬ ‫الزم‬ ‫نکته‬ ‫این‬‫این‬ ‫که‬ ‫ت‬
‫کام‬ ‫دستگاهی‬ ‫و‬ ‫آزمایشگاهی‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫تنها‬ ‫کروماتوگرام‬ ‫دو‬ ‫این‬ ‫مقایسه‬‫است‬ ‫معتبر‬ ‫یکسان‬ ً‫ال‬
‫آنالیز‬‫کمی‬:
•‫ترک‬ ‫پیک‬ ‫ارتفاع‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫پیک‬ ‫زیر‬ ‫سطح‬ ،‫آنالیت‬ ‫مقدار‬ ‫کمی‬ ‫تعیین‬ ‫منظور‬‫به‬‫مق‬ ‫استاندارد‬ ‫نمونه‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫مجهول‬ ‫یب‬‫کنند‬‫می‬ ‫ایسه‬.‫در‬
‫ها‬‫پیک‬ ‫که‬ ‫مواردی‬‫ب‬‫اریک‬‫برخو‬ ‫بیشتری‬ ‫سرعت‬ ‫و‬ ‫صحت‬ ‫از‬ ‫پیک‬ ‫ارتفاع‬ ‫گیری‬‫اندازه‬ ،‫باشند‬ ‫متقارن‬ ‫و‬‫است‬ ‫ردار‬.‫چند‬ ‫هر‬
‫سطح‬ ‫و‬ ‫ارتفاع‬ ‫توان‬‫می‬ ‫راحتی‬‫به‬ ‫امروزه‬ ‫که‬‫زیر‬‫باالی‬ ‫صحت‬ ‫و‬ ‫دقت‬ ‫با‬ ‫الکترونیک‬ ‫های‬‫دستگاه‬ ‫کمک‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫پیک‬‫محاسبه‬ ‫ی‬
‫کرد‬.‫در‬ ‫که‬ ‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫مجهول‬ ‫مقدار‬ ‫محاسبه‬ ‫جهت‬ ‫مختلفی‬ ‫های‬‫روش‬‫اد‬‫امه‬‫شود‬‫می‬ ‫اشاره‬ ‫ها‬‫روش‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫برخی‬ ‫به‬:
‫روش‬‫خارجی‬ ‫استاندارد‬:(EXTERNAL STANDARD)
•‫استاندارد‬ ‫از‬ ‫مختلف‬ ‫های‬‫غلظت‬ ‫با‬ ‫هایی‬‫محلول‬ ،‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬(‫نظر‬ ‫مورد‬ ‫آنالیت‬ ‫استاندارد‬)‫اس‬ ‫بر‬ ‫سپس‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫ساخته‬‫اس‬
‫پیک‬ ‫زیر‬ ‫سطح‬ ‫یا‬ ‫ارتفاع‬‫بدست‬‫کالیبراسیون‬ ‫منحنی‬ ،‫استانداردها‬ ‫این‬ ‫کروماتوگرام‬ ‫از‬ ‫آمده‬(‫و‬ ‫ارتفاع‬ ‫منحنی‬‫زیر‬ ‫سطح‬ ‫یا‬
‫غلظت‬ ‫حسب‬ ‫بر‬ ،‫پیک‬)‫شود‬‫می‬ ‫رسم‬.‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬‫معادله‬‫نمون‬ ‫پیک‬ ‫زیر‬ ‫سطح‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫ارتفاع‬ ‫مقدار‬ ،‫آمده‬ ‫بدست‬ ‫خط‬،‫مجهول‬ ‫ه‬
‫شود‬‫می‬ ‫محاسبه‬ ‫آنالیت‬ ‫دقیق‬ ‫مقدار‬.
‫استاندارد‬ ‫افزایش‬ ‫روش‬:(STANDARD ADDITION)
•‫حا‬ ‫که‬ ‫ظرف‬ ‫چند‬ ‫به‬ ‫سپس‬ ،‫شود‬‫می‬ ‫آنالیز‬ ،‫مجهول‬ ‫ماده‬ ‫ابتدا‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬‫های‬‫حجم‬ ،‫است‬ ‫نمونه‬ ‫از‬ ‫یکسانی‬ ‫مقدار‬ ‫وی‬
‫اضافه‬ ‫استاندارد‬ ‫از‬ ‫مشخصی‬‫شود‬‫می‬‫س‬ ‫یا‬ ‫ارتفاع‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫آنالیز‬ ‫را‬ ‫مرحله‬ ‫هر‬ ‫به‬ ‫مربوط‬ ‫کروماتوگرام‬ ‫و‬‫زی‬ ‫طح‬‫پیک‬ ‫ر‬
‫رسم‬ ‫شده‬ ‫اضافه‬ ‫استاندارد‬ ‫حجم‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫را‬ ‫ها‬‫نمونه‬‫کنند‬‫می‬.‫ن‬ ‫غلظت‬ ‫توان‬‫می‬ ‫موجود‬ ‫روابط‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬ ‫نهایت‬ ‫در‬‫را‬ ‫مونه‬
‫کرد‬ ‫محاسبه‬.،‫شود‬‫می‬ ‫ها‬‫نمونه‬ ‫ماتریس‬ ‫و‬ ‫بافت‬ ‫حفظ‬ ‫سبب‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫استفاده‬‫در‬‫مزاح‬ ‫احتمال‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫با‬ ‫نتیجه‬‫مت‬
‫بافت‬(MATRIX INTERFERENCE)‫شود‬‫می‬ ‫برده‬ ‫بین‬ ‫از‬ ‫نمونه‬.
‫استاندارد‬‫داخلی‬: (INTERNAL STANDARD)
•‫خطا‬ ‫نوع‬ ‫دو‬(‫تصادفی‬ ‫و‬ ‫سیستماتیک‬)‫است‬ ‫موجود‬ ‫سیستم‬ ‫در‬.‫ک‬ ‫اضافه‬ ‫با‬ ‫توان‬‫می‬ ‫را‬ ‫ثابت‬ ‫منابع‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫برخی‬‫یک‬ ‫ردن‬
‫و‬ ‫ها‬‫نمونه‬ ‫به‬ ‫داخلی‬ ‫استاندارد‬‫ت‬‫قسیم‬‫مرب‬ ‫مقادیر‬ ‫همین‬ ‫بر‬ ‫آنالیت‬ ‫هر‬ ‫به‬ ‫مربوط‬ ‫پیک‬ ‫زیر‬ ‫سطح‬ ‫یا‬ ‫پیک‬ ‫ارتفاع‬‫و‬‫استاندارد‬ ‫به‬ ‫ط‬
‫کرد‬ ‫حذف‬ ،‫داخلی‬.‫به‬ ‫باید‬ ‫داخلی‬ ‫استاندارد‬ ‫انتخاب‬ ‫در‬‫های‬‫شباهت‬‫بودن‬ ‫نزدیک‬ ،‫انتخابی‬ ‫جزء‬ ‫با‬ ‫آنالیت‬ ‫ساختاری‬‫زمان‬
‫و‬ ‫نمونه‬ ‫پیک‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫پیک‬ ‫بازداری‬...‫کرد‬ ‫توجه‬ ،.‫داخلی‬ ‫استاندارد‬ ‫یک‬ ‫انتخاب‬ ‫با‬‫من‬‫اسب‬‫از‬ ‫را‬ ‫خطا‬ ‫توان‬‫می‬1‫تا‬2‫درصد‬
‫به‬5.0‫تا‬1‫داد‬ ‫کاهش‬ ‫درصد‬.
•
‫نتیجه‬‫گیری‬:
•‫اندازه‬ ،‫جداسازی‬ ‫جهت‬ ‫مناسب‬ ‫روشی‬ ،‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬‫است‬ ‫مواد‬ ‫نوع‬ ‫تعیین‬ ‫و‬ ،‫گیری‬.‫تک‬ ‫این‬‫با‬ ‫نیک‬
‫و‬ ‫دیگر‬ ‫های‬‫روش‬ ‫با‬ ‫تلفیق‬‫اش‬‫کارسازهای‬‫د‬ ‫مختلف‬ ‫علوم‬ ‫در‬ ‫زیادی‬ ‫کاربردهای‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬‫طیف‬ ‫مانند‬ ‫ای‬‫پیشرفته‬‫ار‬‫د‬.
‫تعیین‬ ‫و‬ ‫آشکارساز‬ ‫انتخاب‬ ،‫ثابت‬ ‫و‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫انتخاب‬‫سرعت‬‫تنظ‬ ‫در‬ ‫اساسی‬ ‫موارد‬ ‫جمله‬ ‫از‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫جریان‬‫یک‬ ‫یمات‬
‫مناسب‬ ‫روش‬HPLC‫است‬.
‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫دستگاه‬
REFERENCE
•SKOOG D.A.PRINCIPLE OF IN STRUMENTAL ANALYSIS
3ND EDITION,USA:SAUNDERS COIIEGEPUBLISHING(1985)
ROUESSAC,F,ROUESSAC,A.CHEMICAL ANAIYSIS MODERN INSTRUMENTATION
METHODS AND TECHNIQUES 2NDEDITION,ENGIAND,JOHN JOHN WILEY&SONS
LTD,(2007)
‫اسگوگ‬-‫هالر‬-‫نیمن‬-‫دستگاهی‬ ‫تجزیه‬ ‫اصول‬"‫ترجمه‬:‫عبدالرضاسالجقه‬-‫اول‬ ‫چاپ‬-‫تهران‬-‫نشردانشگاهی‬ ‫مرکز‬-‫اول‬ ‫جلد‬1382
‫سواالت‬
.1‫دهید‬ ‫توضیح‬ ‫را‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬.
.2‫دستگاه‬ ‫مختلف‬ ‫های‬ ‫وقسمت‬ ‫اجزا‬HPLC‫ببرید‬ ‫نام‬ ‫را‬.
.3‫دهید‬ ‫توضیح‬ ‫را‬ ‫انالیزکمی‬.
.4‫را‬ ‫خوب‬ ‫اشکارساز‬ ‫یک‬ ‫های‬ ‫ویژگی‬ ‫و‬ ‫شود‬ ‫می‬ ‫انتخاب‬ ‫اساسی‬ ‫اشکارسازبرچه‬‫ببرید‬ ‫نام‬.
‫الکترون‬ ‫یک‬ ‫جرم‬ ‫کمتراز‬ ‫غمهایتان‬ ‫امیدوارم‬
‫و‬
‫انرژی‬ ‫ب‬ ‫زمین‬ ‫جرم‬ ‫کل‬ ‫تبدیل‬ ‫از‬ ‫بیشتر‬ ‫شادیهایتان‬
‫باشد‬ ‫نور‬ ‫سرعت‬ ‫بیشتراز‬ ‫پیشرفتتان‬ ‫سرعت‬
‫و‬
‫نگذارد‬ ‫رویتان‬ ‫راپیش‬ ‫اسانسور‬ ‫درون‬ ‫مسایل‬ ‫هرگز‬ ‫زندگی‬
‫خوش‬ ‫روز‬

More Related Content

Similar to Chromatography

فرمول محاسبه طول مهاری میلگرد
فرمول محاسبه طول مهاری میلگردفرمول محاسبه طول مهاری میلگرد
فرمول محاسبه طول مهاری میلگردbahareq
 
نگار پژوه :: سینماتیک و دینامیک ربات موازی با استفاده از تئوری پیچش و کار مجازی
نگار پژوه :: سینماتیک و دینامیک ربات موازی با استفاده از تئوری پیچش و کار مجازینگار پژوه :: سینماتیک و دینامیک ربات موازی با استفاده از تئوری پیچش و کار مجازی
نگار پژوه :: سینماتیک و دینامیک ربات موازی با استفاده از تئوری پیچش و کار مجازیMojtaba Hasanlu
 
Mems Accelerometer Techniques
Mems  Accelerometer TechniquesMems  Accelerometer Techniques
Mems Accelerometer TechniquesSaman Kasiry
 
گزارش کار آزمایشگاه اندازه گیری
گزارش کار آزمایشگاه اندازه گیریگزارش کار آزمایشگاه اندازه گیری
گزارش کار آزمایشگاه اندازه گیریtahereh sharafi
 
بررسی تکنولوژی 퐂퐎_ퟐ−퐂퐚퐩퐭퐮퐫퐞 با استفاده از ممبران در نیروگاه های با سوخت گاز ط...
بررسی تکنولوژی 퐂퐎_ퟐ−퐂퐚퐩퐭퐮퐫퐞 با استفاده از ممبران در نیروگاه های با سوخت گاز ط...بررسی تکنولوژی 퐂퐎_ퟐ−퐂퐚퐩퐭퐮퐫퐞 با استفاده از ممبران در نیروگاه های با سوخت گاز ط...
بررسی تکنولوژی 퐂퐎_ퟐ−퐂퐚퐩퐭퐮퐫퐞 با استفاده از ممبران در نیروگاه های با سوخت گاز ط...Muhammad Jordakani
 

Similar to Chromatography (7)

Mamography
MamographyMamography
Mamography
 
فرمول محاسبه طول مهاری میلگرد
فرمول محاسبه طول مهاری میلگردفرمول محاسبه طول مهاری میلگرد
فرمول محاسبه طول مهاری میلگرد
 
نگار پژوه :: سینماتیک و دینامیک ربات موازی با استفاده از تئوری پیچش و کار مجازی
نگار پژوه :: سینماتیک و دینامیک ربات موازی با استفاده از تئوری پیچش و کار مجازینگار پژوه :: سینماتیک و دینامیک ربات موازی با استفاده از تئوری پیچش و کار مجازی
نگار پژوه :: سینماتیک و دینامیک ربات موازی با استفاده از تئوری پیچش و کار مجازی
 
Mems Accelerometer Techniques
Mems  Accelerometer TechniquesMems  Accelerometer Techniques
Mems Accelerometer Techniques
 
Mems
MemsMems
Mems
 
گزارش کار آزمایشگاه اندازه گیری
گزارش کار آزمایشگاه اندازه گیریگزارش کار آزمایشگاه اندازه گیری
گزارش کار آزمایشگاه اندازه گیری
 
بررسی تکنولوژی 퐂퐎_ퟐ−퐂퐚퐩퐭퐮퐫퐞 با استفاده از ممبران در نیروگاه های با سوخت گاز ط...
بررسی تکنولوژی 퐂퐎_ퟐ−퐂퐚퐩퐭퐮퐫퐞 با استفاده از ممبران در نیروگاه های با سوخت گاز ط...بررسی تکنولوژی 퐂퐎_ퟐ−퐂퐚퐩퐭퐮퐫퐞 با استفاده از ممبران در نیروگاه های با سوخت گاز ط...
بررسی تکنولوژی 퐂퐎_ퟐ−퐂퐚퐩퐭퐮퐫퐞 با استفاده از ممبران در نیروگاه های با سوخت گاز ط...
 

More from ahmadamanpour

More from ahmadamanpour (6)

Modern Building material
Modern Building materialModern Building material
Modern Building material
 
QD
QDQD
QD
 
X-ray
X-rayX-ray
X-ray
 
Atomic absorption spectroscopy
Atomic absorption spectroscopyAtomic absorption spectroscopy
Atomic absorption spectroscopy
 
Metal-organic compound
Metal-organic compoundMetal-organic compound
Metal-organic compound
 
Nmr
NmrNmr
Nmr
 

Chromatography

  • 3. ‫فهرست‬ .1‫کروماتوگرافی‬ ‫ی‬ ‫وتاریخچه‬ ‫مقدمه‬ .2‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫روش‬ ‫بر‬ ‫مروری‬ .3‫متحرک‬ ‫وفاز‬ ‫فازساکن‬ .4‫دستگاه‬ ‫مختلف‬ ‫های‬ ‫اجزاوقسمت‬HPLC .5‫کروماتوگرام‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫اطالعات‬ .6‫انالیزکمی‬ .7‫داخلی‬ ‫استاندارد‬
  • 4. ‫مقدمه‬‫تاریخچه‬ ‫و‬‫کروماتوگرافی‬ •‫روش‬ ،‫جداسازی‬ ‫روش‬ ‫پرکاربردترین‬ ‫و‬ ‫مهمترین‬ ‫شک‬ ‫بدون‬"‫کروماتوگرافی‬"‫است‬.‫کروماتوگرافی‬ (CHROMATOGRAPHY)‫یک‬ ‫بوسیله‬ ،‫شناس‬‫گیاه‬‫روسی‬‫بیستم‬ ‫قرن‬ ‫اوایل‬ ‫در‬ ،‫تسوت‬ ‫نام‬ ‫به‬(1903)‫شد‬ ‫کشف‬.‫او‬ ‫کلروفیل‬ ‫مانند‬ ‫گیاهی‬ ‫مختلف‬ ‫های‬‫رنگدانه‬ ‫جداسازی‬ ‫برای‬ ‫تکنیک‬ ‫این‬ ‫از‬‫و‬ ‫ها‬‫ها‬‫گزانتوفیل‬‫کرد‬ ‫استفاده‬. •‫میشوند‬ ‫بندی‬ ‫دسته‬ ‫کلی‬ ‫مفهوم‬ ‫دو‬ ‫ی‬ ‫برپایه‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫های‬ ‫روش‬:‫فیز‬ ‫مفاهیم‬ ‫براساس‬ ‫جداسازی‬ ‫اول‬ ‫درروش‬‫یکی‬ ‫م‬ ‫سطحی‬ ‫وکروماتوگرافی‬ ‫ستونی‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫گروه‬ ‫دو‬ ‫وشامل‬ ‫گرفته‬ ‫صورت‬‫باشد‬ ‫ی‬. •‫اساس‬‫فاز‬ ،‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫نوع‬ ،‫است‬ ‫تر‬‫مرسوم‬ ‫که‬ ‫دوم‬ ‫بندی‬‫دسته‬ ‫در‬ ‫گذاری‬‫نام‬‫ب‬ ‫شده‬ ‫ایجاد‬ ‫تعادل‬ ‫نوع‬ ‫همچنین‬ ‫و‬ ‫ساکن‬‫دو‬ ‫ین‬ ‫است‬ ‫فاز‬.‫شامل‬ ‫دسته‬ ‫این‬‫دو‬‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫کلی‬ ‫گروه‬(‫باشد‬‫می‬ ‫مایع‬ ،‫متحرک‬ ‫فاز‬)‫گاز‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫و‬‫ی‬(‫فاز‬ ‫با‬ ‫گاز‬ ‫متحرک‬)‫ا‬‫ست‬.
  • 5.
  • 8. ‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫روش‬ ‫بر‬ ‫مروری‬(HPLC) ‫کروماتوگرافی‬‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬(HPLC)‫جداسازی‬ ‫های‬‫تکنیک‬ ‫جمله‬ ‫از‬(SEPARATION)‫علوم‬ ‫از‬ ‫بسیاری‬ ‫در‬ ‫مرسوم‬ ‫است‬.‫به‬ ‫ابتدا‬‫انجام‬ ‫منظور‬ ‫به‬ ‫وآزمایشگاهی‬ ‫دستگاهی‬ ‫پارامترهای‬ ‫دقیق‬ ‫انتخاب‬ ‫نحوه‬‫پارامترهایی‬‫انتخاب‬ ‫قبیل‬ ‫از‬‫و‬ ‫ستون‬ ‫نوع‬ ‫آشکار‬ ‫انتخاب‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫بستگی‬ ‫آنالیت‬ ‫قطبیت‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫انتخاب‬‫ها‬‫ویژگی‬ ‫و‬ ‫ساختار‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫مناسب‬ ‫ساز‬‫نمونه‬ ‫شیمیایی‬ ‫ی‬ ‫کروماتوگرام‬ ‫کیفی‬ ‫و‬ ‫کمی‬ ‫آنالیز‬ ‫نحوه‬ ‫به‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫دارد؛‬ ‫بستگی‬‫اشار‬‫میشود‬ ‫ه‬.
  • 9. ‫کروماتوگرافی‬ ‫در‬ ‫کلیدی‬ ‫مفاهیم‬ ‫آنالیت‬ ‫مقداری‬ ‫تفاوت‬ ‫پایه‬ ‫بر‬ ‫جداسازی‬ ،‫کروماتوگرافی‬ ‫های‬‫روش‬ ‫درتمامی‬(‫جداسازی‬ ‫مورد‬ ‫ماده‬)‫ساکن‬ ‫فاز‬ ‫دو‬ ‫در‬ (Stationary Phase)‫و‬ ‫متحرک‬(Mobile Phase)‫شود‬‫می‬ ‫انجام‬.‫با‬ ‫را‬ ‫آن‬ ‫که‬ ‫گردد‬‫می‬ ‫تعادلی‬ ‫تشکیل‬ ‫به‬ ‫منجر‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ،‫مقدار‬ ‫تفاوت‬ ‫این‬ ‫توزیع‬ ‫ثابت‬ ‫نام‬ ‫به‬ ‫پارامتری‬(K) ‫کنند‬‫می‬ ‫بیان‬.‫رابطه‬ ‫این‬ ‫در‬Cm‫و‬Cs‫است‬ ‫ساکن‬ ‫فاز‬ ‫و‬ ‫فازمتحرک‬ ‫در‬ ‫آنالیت‬ ‫مولی‬ ‫غلظت‬ ‫دهنده‬‫نشان‬ ‫ترتیب‬ ‫به‬.
  • 10. •‫متفاوتی‬ ‫شیمیایی‬ ‫و‬ ‫فیزیکی‬ ‫های‬‫پدیده‬ ‫که‬ ‫دهند‬‫می‬ ‫نشان‬ ‫تحقیقات‬ ‫نتایج‬‫پ‬ ‫همچنین‬ ‫و‬ ‫جداسازی‬ ‫سرعت‬ ‫روی‬ ‫بر‬‫دیده‬ ‫باند‬ ‫هنای‬ ‫دارند‬ ‫تاثیر‬ ‫آنالیت‬ ‫هر‬ ‫برای‬ ‫شده‬.‫پردازند‬‫می‬ ‫عوامل‬ ‫این‬ ‫محاسبه‬ ‫و‬ ‫توجیه‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫موجود‬ ‫های‬‫تئوری‬ ‫بین‬ ‫از‬‫تئوری‬ ، ‫فرضی‬ ‫های‬‫بشقابک‬(PLATES)‫دارد‬ ‫بیشتری‬ ‫کاربرد‬.‫های‬‫الیه‬ ‫سری‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫هرستون‬ ‫که‬ ‫شود‬‫می‬ ‫فرض‬ ‫تئوری‬ ‫این‬ ‫در‬ ،‫اند‬‫گرفته‬ ‫قرار‬ ‫متوالی‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫که‬ ،‫هم‬ ‫از‬ ‫مجزا‬ ‫کامال‬ ‫و‬ ‫افقی‬ ،‫باریک‬‫است‬ ‫شده‬ ‫تشکیل‬.‫ب‬ ،‫ها‬‫الیه‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫یک‬ ‫هر‬ ‫به‬‫شقابک‬ ‫شود‬‫می‬ ‫گفته‬.‫سا‬ ‫و‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫بین‬ ‫تعادلی‬ ‫در‬ ‫آنالیت‬ ،‫ها‬‫بشقابک‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫کدام‬ ‫هر‬ ‫در‬‫ب‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫قرار‬ ‫کن‬‫بین‬ ‫انتقال‬ ‫ا‬ ‫پذیرد‬‫می‬ ‫صورت‬ ‫جداسازی‬ ‫عمل‬ ‫ها‬‫بشقابک‬.‫عبارت‬ ‫به‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫درستون‬ ‫موجود‬ ‫های‬‫بشقابک‬ ‫تعداد‬ ‫به‬ ‫ستون‬ ‫هر‬ ‫کارایی‬‫دی‬،‫گر‬ ‫دارد‬ ‫بستگی‬ ‫ستون‬ ‫در‬ ‫شده‬ ‫ایجاد‬ ‫های‬‫تعادل‬ ‫تعداد‬ ‫به‬.‫های‬‫بشقابک‬ ‫تعداد‬ ،‫ستون‬ ‫کارایی‬ ‫بررسی‬ ‫برای‬ ‫بنابراین‬‫فرض‬(N)‫را‬ ‫کنند‬‫می‬ ‫زیرمحاسبه‬ ‫رابطه‬ ‫از‬
  • 11. •‫رابطه‬ ‫این‬ ‫در‬H‫و‬ ‫بشقابک‬ ‫هر‬ ‫ارتفاع‬ ‫دهنده‬‫نشان‬L‫نمایش‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫ستون‬ ‫طول‬‫گذار‬‫می‬‫د‬ •،‫کارایی‬ ‫محاسبه‬ ‫منظور‬ ‫به‬ ‫دیگری‬ ‫مختلف‬ ‫تعاریف‬ ‫و‬ ‫پارامترها‬ ‫مباحث‬ ‫این‬‫اندازه‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫آزمایشگاهی‬ ‫شرایط‬‫گیری‬ ‫دارند‬ ‫وجود‬ ‫آنالیت‬ ‫کمی‬.
  • 12. ‫کروماتوگرافی‬‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬ •‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬ ،‫جداسازی‬ ‫های‬‫تکنیک‬ ‫میان‬ ‫از‬(HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY -HPLC)‫رشد‬ ‫بیشترین‬ ،‫خرید‬ ‫صرف‬ ‫دالر‬ ‫ها‬‫میلیون‬ ‫سالیانه‬ ‫و‬ ‫است‬ ‫داشته‬ ‫را‬ ‫کارایی‬‫و‬ ‫های‬‫دستگاه‬ ‫فروش‬HPLC‫شود‬‫می‬ ‫دنیا‬ ‫در‬.‫حساسیت‬ ‫به‬ ‫توان‬‫می‬ ‫را‬ ‫رشد‬ ‫این‬ ‫علت‬‫ب‬‫اال‬‫ب‬ ‫صحت‬ ‫با‬ ‫کمی‬ ‫مقدار‬ ‫تعیین‬ ،،‫اال‬ ‫با‬ ‫که‬ ‫دما‬ ‫به‬ ‫حساس‬ ‫و‬ ‫غیرفرار‬ ‫های‬‫نمونه‬ ‫آنالیز‬ ‫قابلیت‬‫تکنیک‬‫گاز‬ ‫کروماتوگرافی‬‫ی‬(GC(‫پذیر‬‫امکان‬،‫نیستند‬‫ن‬‫سبت‬‫داد‬.
  • 13. ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫و‬ ‫ساکن‬ ‫فاز‬ •‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫کلی‬ ‫قاعده‬ ‫یک‬ ‫متحرک‬ ‫و‬ ‫ساکن‬ ‫های‬‫فاز‬ ‫قطبیت‬ ‫مورد‬ ‫در‬.‫ن‬ ‫باید‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫و‬ ‫شونده‬‫حل‬ ‫قطبیت‬ ،‫قاعده‬ ‫این‬ ‫طبق‬‫به‬ ‫زدیک‬ ‫با‬ ‫ولی‬ ،‫باشد‬ ‫هم‬‫فاز‬‫باشد‬ ‫داشته‬ ‫اختالف‬ ‫ساکن‬.‫است‬ ‫زیر‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫ترکیبات‬ ‫در‬ ‫عاملی‬ ‫های‬‫گروه‬ ‫قطبیت‬ ‫ترتیب‬: •‫هیدروکربن‬<‫اترها‬<‫استرها‬<‫ها‬‫کتون‬<‫آلدئیدها‬<‫آمیدها‬<‫ها‬‫آمین‬<‫ها‬‫الکل‬ •‫خصوصیات‬‫در‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬HPLC‫است‬ ‫آمده‬ ‫زیر‬ ‫در‬: ‫د‬‫رصد‬‫باال‬ ‫خلوص‬(،‫باال‬ ‫بسیار‬ ‫خلوص‬ ‫درصد‬ ‫با‬ ‫هایی‬‫حالل‬HPLC GRADE‫دارد‬ ‫نیز‬ ‫باالیی‬ ‫قیمت‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫موجود‬ ‫بازار‬ ‫در‬ ،( •‫ستون‬ ‫دمای‬ ‫از‬ ‫باالتر‬ ‫جوش‬ ‫نقطه‬(‫گرمکن‬ ‫با‬ ‫که‬ ‫مواردی‬ ‫در‬ ‫خصوص‬ ‫به‬(OVEN)‫شود‬‫می‬ ‫کار‬( ‫کم‬ ‫پذیری‬‫واکنش‬(INERTNESS) ‫قابل‬‫یت‬‫آشکارساز‬ ‫با‬ ‫تطابق‬
  • 14. ‫اجزاء‬‫دستگاه‬ ‫مختلف‬ ‫های‬‫قسمت‬ ‫و‬HPLC •‫حالل‬ ‫خازن‬:‫است‬ ‫شده‬ ‫ریخته‬ ‫ستون‬ ‫شستشودهنده‬ ‫های‬‫حالل‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫آنها‬ ‫در‬ ‫که‬. ‫موتور‬‫پمپ‬ ‫یا‬:‫نیا‬ ،‫ستون‬ ‫طویل‬ ‫نسبتا‬ ‫فضای‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫همچنین‬ ‫و‬ ‫حالل‬ ‫انتقال‬ ‫منظور‬ ‫به‬‫سیس‬ ‫در‬ ‫فشاری‬ ‫ایجاد‬ ‫به‬ ‫ز‬‫که‬ ‫است‬ ‫تم‬ ‫آن‬ ‫ایجاد‬ ‫برای‬‫حداقل‬‫ا‬‫ز‬‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬ ‫موتور‬ ‫یا‬ ‫پمپ‬ ‫یک‬.‫حالل‬(‫متحرک‬ ‫فاز‬)‫ثابت‬ ‫جریان‬ ‫و‬ ‫سرعت‬ ‫با‬ ‫پمپ‬ ‫توسط‬‫روی‬ ‫بر‬ ‫ی‬ ‫شود‬‫می‬ ‫داده‬ ‫حرکت‬ ‫ساکن‬ ‫فاز‬.‫فشار‬‫سیستم‬‫به‬‫اندازه‬(‫سایز‬)‫گرانروی‬ ،‫ستون‬ ‫در‬ ‫موجود‬ ‫ذرات‬(VISCOSITY)‫سرعت‬ ‫و‬ ‫دارد‬ ‫بستگی‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫جریان‬.‫میزان‬ ،‫جداسازی‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بسته‬‫سرعت‬‫گردد‬‫می‬ ‫تعیین‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫جریان‬.‫موار‬ ‫در‬‫با‬ ‫که‬ ‫دی‬ ‫صورت‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫خود‬ ،‫شده‬ ‫جدا‬ ‫گونه‬ ‫هر‬ ،‫هستیم‬ ‫مواجه‬ ‫ها‬‫آنالیت‬ ‫از‬ ‫تعددی‬‫در‬ ‫پیک‬ ‫یک‬
  • 17. ‫دهد‬‫می‬ ‫نشان‬ ‫نهایی‬ ‫کروماتوگرام‬.‫جد‬ ‫و‬ ‫یافته‬ ‫افزایش‬ ‫ها‬‫پیک‬ ‫بین‬ ‫فاصله‬ ،‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫کمتر‬ ‫جریان‬ ‫سرعت‬ ‫در‬‫اساز‬‫بهتری‬ ‫ی‬ ‫داشت‬ ‫خواهیم‬.‫مرسوم‬ ‫قطر‬ ‫با‬ ‫هایی‬‫ستون‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫شود‬‫می‬ ‫گفته‬ ‫معموال‬(‫از‬ ‫کمتر‬5MM (‫از‬ ‫باالتر‬ ‫نباید‬ ‫جریان‬ ‫سرعت‬2/5 ML/MIN‫شود‬‫می‬ ‫آن‬ ‫مفید‬ ‫عمر‬ ‫کاهش‬ ‫و‬ ‫ستون‬ ‫به‬ ‫زدن‬ ‫صدمه‬ ‫باعث‬ ‫که‬ ‫چرا‬ ‫باشد‬. •‫به‬‫تواند‬‫می‬ ‫خالص‬ ‫حالل‬ ‫یک‬ ‫ازای‬ ‫در‬ ‫ها‬‫حالل‬ ‫از‬ ‫مخلوطی‬ ،‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫عنوان‬‫شود‬ ‫گرفته‬ ‫کار‬‫به‬.‫م‬ ‫فاز‬ ‫اجزاء‬ ‫نسبت‬‫تحرک‬ ‫تزریق‬ ‫یک‬ ‫طی‬ ‫در‬‫ممکن‬‫ایزوکراتیک‬ ‫روش‬ ‫آن‬ ‫به‬ ‫صورت‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫باشد‬ ‫ثابت‬ ‫است‬(ISOCRATIC)‫شود‬‫می‬ ‫گفته‬.‫در‬ ‫گرادیانت‬ ‫روش‬ ‫آن‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫دیگر‬ ‫حالتی‬(GRADIENT)‫گفته‬‫ک‬ ‫ای‬‫برنامه‬ ‫طبق‬ ،‫زمان‬ ‫پیشرفت‬ ‫با‬ ‫و‬ ‫تزریق‬ ‫یک‬ ‫طی‬ ،‫شود‬‫می‬‫ه‬ ‫حالل‬ ‫چند‬ ‫یا‬ ‫دو‬ ‫از‬ ‫متفاوتی‬ ‫درصد‬ ،‫است‬ ‫شده‬ ‫تعریف‬ ‫سیستم‬ ‫برای‬ ‫قبل‬ ‫از‬‫مخلوط‬‫شده‬‫پمپ‬ ‫توسط‬ ‫سیستم‬ ‫در‬ ‫و‬‫جریان‬ ‫یابد‬‫می‬.
  • 18. ‫کننده‬‫تزریق‬: (INJECTOR) •‫انجا‬ ‫خودکار‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫دستی‬ ‫شکل‬ ‫دو‬ ‫به‬ ،‫دستگاه‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بسته‬ ،‫نمونه‬ ‫تزریق‬‫گیرد‬‫می‬ ‫م‬.‫ظ‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ،‫خودکار‬ ‫روش‬ ‫در‬‫روف‬ ‫گیرد‬‫می‬ ‫قرار‬ ‫دستگاه‬ ‫در‬ ‫شده‬ ‫تعبیه‬ ‫محل‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫ریخته‬ ‫مخصوصی‬.‫را‬ ‫تزریق‬ ‫دستور‬ ‫اپراتور‬ ‫اینکه‬ ‫از‬ ‫پس‬(‫طریق‬ ‫از‬ ‫افزار‬‫نرم‬)‫شود‬‫می‬ ‫منتقل‬ ‫سیستم‬ ‫به‬ ‫سرنگ‬ ‫یک‬ ‫توسط‬ ‫نمونه‬ ،‫دهد‬‫می‬.‫های‬‫ظرفیت‬ ‫با‬ ‫هایی‬‫سرنگ‬ ‫از‬ ،‫دستی‬ ‫روش‬ ‫در‬‫مختلف‬ ‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬ ‫نمونه‬ ‫تزریق‬ ‫برای‬.‫شده‬ ‫تزریق‬ ‫نمونه‬ ‫حجم‬(‫روش‬ ‫دو‬ ‫هر‬ ‫در‬)‫بردار‬‫نمونه‬ ‫حلقه‬ ‫حجم‬ ‫به‬ ،(LOOP)‫بستگی‬ ‫حد‬ ‫در‬ ً‫ال‬‫معمو‬ ‫آن‬ ‫مقدار‬ ‫و‬ ‫دارد‬5‫تا‬500‫است‬ ‫میکرولیتر‬.‫ب‬ ‫سیستم‬ ‫شدن‬ ‫ازآماده‬ ‫پس‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫حلقه‬ ‫این‬ ‫وارد‬ ‫ابتدا‬ ‫نمونه‬‫ه‬ ‫شود‬‫می‬ ‫ستون‬ ‫وارد‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫همراه‬.
  • 19. ‫ستون‬ •‫ستون‬‫پیش‬ ‫نام‬ ‫به‬ ‫قسمتی‬ ‫وارد‬ ‫ابتدا‬ ‫نمونه‬ ،‫تزریق‬ ‫از‬ ‫پس‬(PRE-COLUMN)‫محافظ‬ ‫ستون‬ ‫یا‬(GUARD COLUMN)‫شود‬‫می‬.‫است‬ ‫اصلی‬ ‫ستون‬ ‫از‬ ‫محافظت‬ ،‫ستون‬ ‫این‬ ‫نقش‬.‫است‬ ‫متر‬‫سانتی‬ ‫حد‬ ‫در‬ ‫معموال‬ ‫ستون‬ ‫این‬ ‫طول‬‫و‬ ‫است‬ ‫زنگ‬ ‫ضد‬ ‫فوالد‬ ‫از‬ ‫آن‬ ‫جنس‬.‫پرکننده‬ ‫ماده‬(PACKING)‫اصلی‬ ‫ستون‬ ‫پرکننده‬ ‫ماده‬ ‫مشابه‬ ‫جنسی‬ ‫از‬ ‫محافظ‬ ‫ستون‬ ‫است‬.‫ذر‬ ‫با‬ ‫که‬ ‫ای‬‫ماده‬ ‫اگر‬ ‫که‬ ‫دارد‬ ‫را‬ ‫مزیت‬ ‫این‬ ‫پرکننده‬ ‫نوع‬ ‫بودن‬ ‫جنس‬ ‫هم‬‫موج‬ ‫نمونه‬ ‫در‬ ‫شود‬ ‫واکنش‬ ‫وارد‬ ‫ستون‬ ‫ات‬‫ود‬ ‫آس‬ ‫دچار‬ ‫را‬ ‫اصلی‬ ‫وستون‬ ‫افتاده‬ ‫دام‬ ‫به‬ ‫محافظ‬ ‫ستون‬ ‫در‬ ‫ابتدا‬ ‫در‬ ،‫باشد‬‫کند‬‫نمی‬ ‫یب‬.‫دستگ‬ ‫اصلی‬ ‫های‬‫ستون‬ ‫طول‬‫معموال‬ ‫اه‬ ‫حدود‬30-10‫پوست‬ ‫فرم‬ ‫دو‬ ‫از‬ ‫یکی‬ ‫به‬ ‫که‬ ‫موادی‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫ستون‬ ‫درون‬ ‫و‬ ‫بوده‬ ‫متر‬‫سانتی‬‫ک‬ ‫پر‬ ،‫است‬ ‫متخلخل‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫دار‬‫ه‬‫اند‬‫رده‬. ‫مت‬ ،‫دارد‬ ‫فراوانی‬ ‫تاثیر‬ ‫جداسازی‬ ‫کیفیت‬ ‫بر‬ ‫که‬ ‫پرکننده‬ ‫مواد‬ ‫این‬ ‫سایز‬‫حد‬ ‫در‬ ‫معموال‬ ‫و‬ ‫بوده‬ ‫فاوت‬3‫تا‬5‫است‬ ‫میکرومتر‬.
  • 20. •‫باشد‬ ‫غیرقطبی‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫قطبی‬ ‫تواند‬‫می‬ ‫ستون‬.‫به‬ ‫توان‬‫می‬ ‫غیرقطبی‬ ‫های‬‫ستون‬ ‫ترین‬‫مرسوم‬ ‫از‬C18‫سیالن‬ ‫اکتادسیل‬ ،(ODS)‫اشاره‬ ‫کرد‬.‫ها‬‫ستون‬ ‫جنس‬‫از‬‫ضدزنگ‬ ‫فوالد‬(STAINLESS STEEL)‫است‬.،‫قطبیت‬ ‫تفاوت‬ ‫براساس‬ ،‫ستون‬ ‫به‬ ‫نمونه‬ ‫ورود‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫نام‬ ‫با‬ ‫متفاوتی‬ ‫های‬‫زمان‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫مختلف‬ ‫اجزاء‬‫زم‬‫ان‬‫بازداری‬(RETENTION TIME)‫برای‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫جدا‬ ‫یکدیگر‬ ‫از‬ ‫آشکارساز‬ ‫سمت‬ ‫به‬ ‫ماده‬ ‫نوع‬ ‫تشخیص‬(DETECTOR)‫شوند‬‫می‬ ‫هدایت‬. •‫در‬‫دهیم‬ ‫شستشو‬ ‫را‬ ‫ستون‬ ‫باید‬ ‫کار‬ ‫اتمام‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫نهایت‬.‫ت‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫متفاوتی‬ ‫حالل‬ ،‫ستون‬ ‫نوع‬ ‫به‬ ‫بسته‬ ،‫شستشو‬ ‫برای‬‫خاص‬ ‫رتیب‬ ‫کنیم‬‫می‬ ‫انتخاب‬.‫برای‬‫مثال‬‫قط‬ ‫حالل‬ ‫یک‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫ستون‬ ‫ابتدا‬ ،‫کار‬ ‫اتمام‬ ‫از‬ ‫پس‬ ‫غیرقطبی‬ ‫های‬‫ستون‬ ‫در‬‫بی‬(‫آب‬ ‫معموال‬)‫و‬‫با‬ ‫سپس‬ ‫غیرقطبی‬ ‫حالل‬ ‫یک‬(‫متانول‬ ‫معموال‬)‫شستشو‬‫دهند‬‫می‬.
  • 21. ‫آشکارساز‬(DETECTOR) •‫شود‬‫می‬ ‫انتخاب‬ ‫آنالیت‬ ‫نوع‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫آشکارساز‬.‫باش‬ ‫زیر‬ ‫های‬‫ویژگی‬ ‫دارای‬ ‫باید‬ ‫خوب‬ ‫آشکارساز‬ ‫یک‬ ‫کل‬ ‫طور‬ ‫به‬‫د‬: • >‫باال‬ ‫حساسیت‬ • >‫بودن‬ ‫غیرتخریبی‬(NONDESTRUCTIVE):‫نکند‬ ‫تخریب‬ ‫را‬ ‫نمونه‬ ،‫شناسایی‬ ‫روند‬ ‫طول‬ ‫در‬. • >‫وسیع‬ ‫دامنه‬ ‫در‬ ‫غلظت‬ ‫به‬ ‫خطی‬ ‫پاسخ‬(‫محاسبات‬ ‫در‬ ‫سهولت‬ ‫برای‬(
  • 22. ‫شود‬‫می‬ ‫اشاره‬ ‫مرسوم‬ ‫ازآشکارسازهای‬ ‫تعدادی‬ ‫به‬ ‫درادامه‬: •‫الف‬-‫سنج‬‫طیف‬ ،‫آشکارساز‬ ‫انواع‬ ‫پرکاربردترین‬ ‫از‬UV-VIS‫باشند‬ ‫داشته‬ ‫جذب‬ ‫ناحیه‬ ‫این‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫اجسامی‬ ‫برای‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫گیرد‬‫می‬ ‫قرار‬ ‫استفاده‬ ‫مورد‬.‫نوری‬ ‫منبع‬ ‫با‬ ‫نمونه‬ ‫جذب‬ ‫میزان‬ ‫تفاوت‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬ ‫آشکارساز‬ ‫این‬ ‫در‬‫ن‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫اولیه‬‫با‬ ‫هایت‬ ‫شود‬‫می‬ ‫گیری‬‫اندازه‬ ‫نمونه‬ ‫غلظت‬ ،‫المبرت‬ ‫بیر‬ ‫قانون‬ ‫از‬ ‫استفاده‬.‫ا‬ ‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬ ‫آشکارساز‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫که‬ ‫مواردی‬ ‫در‬‫نتخاب‬ ‫بگیرد‬ ‫قرار‬ ‫نظر‬ ‫مد‬ ‫بایست‬‫می‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫مواردی‬ ‫از‬ ‫یکی‬ ‫مناسب‬ ‫موج‬ ‫طول‬.‫موج‬ ‫های‬‫مزاحم‬ ‫نباید‬ ،‫انتخابی‬ ‫موج‬ ‫طول‬ ‫در‬‫ود‬ ‫باشند‬ ‫داشته‬ ‫جذب‬ ‫حالل‬ ‫همچنین‬ ‫و‬ ‫نمونه‬ ‫در‬. •‫ب‬-‫شکست‬ ‫ضریب‬ ‫آشکارساز‬:‫سی‬ ‫شکست‬ ‫ضریب‬ ‫در‬ ‫که‬ ‫است‬ ‫تغییراتی‬ ‫مبنای‬ ‫بر‬ ‫آشکارساز‬ ‫این‬ ‫کار‬ ‫اساس‬‫ست‬‫به‬ ‫حالل‬ ‫م‬ ‫همراه‬ ‫حالل‬ ‫سیستم‬ ‫و‬ ‫تنهایی‬‫با‬‫شود‬‫می‬ ‫ایجاد‬ ،‫نمونه‬.‫دلی‬ ‫همین‬ ‫به‬ ‫و‬ ‫بوده‬ ‫وابسته‬ ‫حرارت‬ ‫به‬ ‫آشکارساز‬ ‫این‬ ‫پاسخ‬‫به‬ ‫معموال‬ ‫ل‬ ‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬ ‫ازآن‬ ‫ندرت‬.
  • 23.
  • 24. •‫ج‬-‫آشکارساز‬ ‫از‬ ‫تر‬‫حساس‬ ،‫فلورسانس‬ ‫آشکارساز‬UV/VIS‫فلورسانس‬ ‫خاصیت‬ ‫که‬ ‫موجودند‬ ‫کمی‬ ‫ترکیبات‬ ‫ولی‬ ‫است‬ ‫کاربرد‬ ‫درنتیجه‬ ‫باشند؛‬ ‫داشته‬‫ا‬‫ین‬‫است‬ ‫محدود‬ ‫نیز‬ ‫آشکارساز‬. •‫د‬-‫اح‬ ‫و‬ ‫اکسید‬ ‫های‬‫واکنش‬ ‫برپایه‬ ‫آن‬ ‫عملکرد‬ ‫که‬ ،‫الکتروشیمیایی‬ ‫آشکارساز‬‫آمپرومت‬ ‫های‬‫روش‬ ‫شامل‬ ‫و‬ ‫باشد‬‫می‬ ‫یا‬‫ری‬ (AMPEROMETRY)‫پالروگرافی‬ ،(POLAROGRAPHY)‫سنجی‬‫کلون‬ ،(COULOMETRY)‫سنجی‬‫هدایت‬ ‫و‬ (CONDUCTOMETRY)‫است‬.
  • 25. •‫ا‬‫شکارساز‬‫جرمی‬ ‫سنج‬‫طیف‬(MS):‫ا‬ ‫مورد‬ ‫وسیعی‬ ‫طور‬ ‫به‬ ‫دارد‬ ‫که‬ ‫زیادی‬ ‫مزایای‬ ‫دلیل‬ ‫به‬ ‫امروزه‬ ‫مورد‬ ‫این‬‫قرار‬ ‫ستفاده‬ ‫گیرد‬‫می‬.‫جمله‬ ‫این‬ ‫از‬‫میت‬‫وان‬‫تشخیص‬ ‫حد‬ ‫به‬(LOD)‫انتخابگری‬ ‫و‬ ‫حساسیت‬ ،‫پایین‬ ‫بسیار‬(SELECTIVITY)‫و‬ ،‫باال‬ ‫شیمیایی‬ ‫های‬‫مزاحم‬ ‫حضور‬ ‫در‬ ‫نمونه‬ ‫بررسی‬ ‫امکان‬‫ا‬‫شاره‬‫کرد‬.‫در‬،‫کرد‬ ‫استفاده‬ ‫نتوان‬ ‫موارد‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫کدام‬ ‫هیچ‬ ‫از‬ ‫صورتیکه‬ ‫سازی‬‫مشتق‬ ‫از‬(‫نمونه‬ ‫روی‬ ‫شیمیایی‬ ‫تغییرات‬ ‫ایجاد‬)‫یک‬ ‫هر‬ ‫در‬ ‫فعال‬ ‫نمونه‬ ‫ایجاد‬ ‫جهت‬‫ا‬‫ز‬‫ش‬ ‫ذکر‬ ‫آشکارسازهای‬ ‫این‬‫ده‬ ‫شود‬‫می‬ ‫استفاده‬.‫دستگاه‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫نمایی‬ ‫زیر‬ ‫شکل‬HPLC‫است‬ ‫کشیده‬ ‫تصویر‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫مختلف‬ ‫اجزاء‬ ‫همراه‬ ‫به‬ ‫را‬.
  • 26.
  • 27. ‫اطالعات‬‫کروماتوگرام‬ ‫یک‬ ‫از‬ ‫حاصل‬ ‫یک‬‫نمونه‬‫کروماتوگرام‬‫در‬‫شکل‬2‫نشان‬‫داده‬‫شده‬‫است‬‫که‬‫در‬‫آن‬‫سه‬‫نوع‬‫قند‬‫از‬ ‫یکدیگر‬‫جدا‬‫اند‬‫شده‬.‫اطالعات‬،‫کمی‬‫نیمه‬‫کمی‬‫و‬‫کیفی‬‫از‬‫ولتاموگرا‬‫م‬‫قاب‬‫ل‬ ‫استخراج‬‫است‬.
  • 28. ‫کاربردهای‬‫کیفی‬ •‫شود‬‫می‬ ‫انجام‬ ‫ترکیبات‬ ‫نوع‬ ‫شناسایی‬ ‫و‬ ‫تشخیص‬ ‫برای‬ ،‫کیفی‬ ‫آنالیز‬.‫بازداری‬ ‫زمان‬ ‫که‬‫آنجایی‬ ‫از‬(RETENTION TIME)‫و‬ ‫سیستم‬ ‫یک‬ ‫در‬ ‫ماده‬ ‫هر‬ ‫برای‬‫شرایط‬‫تعیی‬ ‫جهت‬ ‫آن‬ ‫از‬ ‫توان‬‫می‬ ،‫باشد‬‫می‬ ‫مشخص‬ ‫و‬ ‫ثابت‬ ‫آزمایشگاهی‬ ‫خاص‬‫ن‬ ‫کرد‬ ‫استفاده‬ ‫آنالیت‬ ‫نوع‬.‫با‬ ‫را‬ ‫آنالیت‬ ‫کروماتوگرام‬ ‫منظور‬ ‫این‬ ‫به‬‫کروماتوگرام‬‫آنال‬ ‫آن‬ ‫استاندارد‬ ‫از‬ ‫آمده‬ ‫دست‬‫به‬‫مقایسه‬ ‫یت‬ ‫کنند‬‫می‬.‫تعی‬ ‫را‬ ‫ماده‬ ‫نوع‬ ‫قطعیت‬ ‫با‬ ‫توان‬‫می‬ ‫بازداری‬ ‫زمان‬ ‫بودن‬ ‫یکسان‬ ‫صورت‬ ‫در‬‫کرد‬ ‫ین‬.‫ذکر‬‫اس‬ ‫الزم‬ ‫نکته‬ ‫این‬‫این‬ ‫که‬ ‫ت‬ ‫کام‬ ‫دستگاهی‬ ‫و‬ ‫آزمایشگاهی‬ ‫شرایط‬ ‫در‬ ‫تنها‬ ‫کروماتوگرام‬ ‫دو‬ ‫این‬ ‫مقایسه‬‫است‬ ‫معتبر‬ ‫یکسان‬ ً‫ال‬
  • 29. ‫آنالیز‬‫کمی‬: •‫ترک‬ ‫پیک‬ ‫ارتفاع‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫پیک‬ ‫زیر‬ ‫سطح‬ ،‫آنالیت‬ ‫مقدار‬ ‫کمی‬ ‫تعیین‬ ‫منظور‬‫به‬‫مق‬ ‫استاندارد‬ ‫نمونه‬ ‫با‬ ‫را‬ ‫مجهول‬ ‫یب‬‫کنند‬‫می‬ ‫ایسه‬.‫در‬ ‫ها‬‫پیک‬ ‫که‬ ‫مواردی‬‫ب‬‫اریک‬‫برخو‬ ‫بیشتری‬ ‫سرعت‬ ‫و‬ ‫صحت‬ ‫از‬ ‫پیک‬ ‫ارتفاع‬ ‫گیری‬‫اندازه‬ ،‫باشند‬ ‫متقارن‬ ‫و‬‫است‬ ‫ردار‬.‫چند‬ ‫هر‬ ‫سطح‬ ‫و‬ ‫ارتفاع‬ ‫توان‬‫می‬ ‫راحتی‬‫به‬ ‫امروزه‬ ‫که‬‫زیر‬‫باالی‬ ‫صحت‬ ‫و‬ ‫دقت‬ ‫با‬ ‫الکترونیک‬ ‫های‬‫دستگاه‬ ‫کمک‬ ‫به‬ ‫را‬ ‫پیک‬‫محاسبه‬ ‫ی‬ ‫کرد‬.‫در‬ ‫که‬ ‫دارد‬ ‫وجود‬ ‫مجهول‬ ‫مقدار‬ ‫محاسبه‬ ‫جهت‬ ‫مختلفی‬ ‫های‬‫روش‬‫اد‬‫امه‬‫شود‬‫می‬ ‫اشاره‬ ‫ها‬‫روش‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫برخی‬ ‫به‬:
  • 30. ‫روش‬‫خارجی‬ ‫استاندارد‬:(EXTERNAL STANDARD) •‫استاندارد‬ ‫از‬ ‫مختلف‬ ‫های‬‫غلظت‬ ‫با‬ ‫هایی‬‫محلول‬ ،‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬(‫نظر‬ ‫مورد‬ ‫آنالیت‬ ‫استاندارد‬)‫اس‬ ‫بر‬ ‫سپس‬ ‫و‬ ‫شده‬ ‫ساخته‬‫اس‬ ‫پیک‬ ‫زیر‬ ‫سطح‬ ‫یا‬ ‫ارتفاع‬‫بدست‬‫کالیبراسیون‬ ‫منحنی‬ ،‫استانداردها‬ ‫این‬ ‫کروماتوگرام‬ ‫از‬ ‫آمده‬(‫و‬ ‫ارتفاع‬ ‫منحنی‬‫زیر‬ ‫سطح‬ ‫یا‬ ‫غلظت‬ ‫حسب‬ ‫بر‬ ،‫پیک‬)‫شود‬‫می‬ ‫رسم‬.‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬‫معادله‬‫نمون‬ ‫پیک‬ ‫زیر‬ ‫سطح‬ ‫یا‬ ‫و‬ ‫ارتفاع‬ ‫مقدار‬ ،‫آمده‬ ‫بدست‬ ‫خط‬،‫مجهول‬ ‫ه‬ ‫شود‬‫می‬ ‫محاسبه‬ ‫آنالیت‬ ‫دقیق‬ ‫مقدار‬.
  • 31. ‫استاندارد‬ ‫افزایش‬ ‫روش‬:(STANDARD ADDITION) •‫حا‬ ‫که‬ ‫ظرف‬ ‫چند‬ ‫به‬ ‫سپس‬ ،‫شود‬‫می‬ ‫آنالیز‬ ،‫مجهول‬ ‫ماده‬ ‫ابتدا‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫در‬‫های‬‫حجم‬ ،‫است‬ ‫نمونه‬ ‫از‬ ‫یکسانی‬ ‫مقدار‬ ‫وی‬ ‫اضافه‬ ‫استاندارد‬ ‫از‬ ‫مشخصی‬‫شود‬‫می‬‫س‬ ‫یا‬ ‫ارتفاع‬ ‫نهایت‬ ‫در‬ ‫و‬ ‫آنالیز‬ ‫را‬ ‫مرحله‬ ‫هر‬ ‫به‬ ‫مربوط‬ ‫کروماتوگرام‬ ‫و‬‫زی‬ ‫طح‬‫پیک‬ ‫ر‬ ‫رسم‬ ‫شده‬ ‫اضافه‬ ‫استاندارد‬ ‫حجم‬ ‫اساس‬ ‫بر‬ ‫را‬ ‫ها‬‫نمونه‬‫کنند‬‫می‬.‫ن‬ ‫غلظت‬ ‫توان‬‫می‬ ‫موجود‬ ‫روابط‬ ‫از‬ ‫استفاده‬ ‫با‬ ‫نهایت‬ ‫در‬‫را‬ ‫مونه‬ ‫کرد‬ ‫محاسبه‬.،‫شود‬‫می‬ ‫ها‬‫نمونه‬ ‫ماتریس‬ ‫و‬ ‫بافت‬ ‫حفظ‬ ‫سبب‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫استفاده‬‫در‬‫مزاح‬ ‫احتمال‬ ‫روش‬ ‫این‬ ‫با‬ ‫نتیجه‬‫مت‬ ‫بافت‬(MATRIX INTERFERENCE)‫شود‬‫می‬ ‫برده‬ ‫بین‬ ‫از‬ ‫نمونه‬.
  • 32. ‫استاندارد‬‫داخلی‬: (INTERNAL STANDARD) •‫خطا‬ ‫نوع‬ ‫دو‬(‫تصادفی‬ ‫و‬ ‫سیستماتیک‬)‫است‬ ‫موجود‬ ‫سیستم‬ ‫در‬.‫ک‬ ‫اضافه‬ ‫با‬ ‫توان‬‫می‬ ‫را‬ ‫ثابت‬ ‫منابع‬ ‫این‬ ‫از‬ ‫برخی‬‫یک‬ ‫ردن‬ ‫و‬ ‫ها‬‫نمونه‬ ‫به‬ ‫داخلی‬ ‫استاندارد‬‫ت‬‫قسیم‬‫مرب‬ ‫مقادیر‬ ‫همین‬ ‫بر‬ ‫آنالیت‬ ‫هر‬ ‫به‬ ‫مربوط‬ ‫پیک‬ ‫زیر‬ ‫سطح‬ ‫یا‬ ‫پیک‬ ‫ارتفاع‬‫و‬‫استاندارد‬ ‫به‬ ‫ط‬ ‫کرد‬ ‫حذف‬ ،‫داخلی‬.‫به‬ ‫باید‬ ‫داخلی‬ ‫استاندارد‬ ‫انتخاب‬ ‫در‬‫های‬‫شباهت‬‫بودن‬ ‫نزدیک‬ ،‫انتخابی‬ ‫جزء‬ ‫با‬ ‫آنالیت‬ ‫ساختاری‬‫زمان‬ ‫و‬ ‫نمونه‬ ‫پیک‬ ‫به‬ ‫آن‬ ‫پیک‬ ‫بازداری‬...‫کرد‬ ‫توجه‬ ،.‫داخلی‬ ‫استاندارد‬ ‫یک‬ ‫انتخاب‬ ‫با‬‫من‬‫اسب‬‫از‬ ‫را‬ ‫خطا‬ ‫توان‬‫می‬1‫تا‬2‫درصد‬ ‫به‬5.0‫تا‬1‫داد‬ ‫کاهش‬ ‫درصد‬. •
  • 33. ‫نتیجه‬‫گیری‬: •‫اندازه‬ ،‫جداسازی‬ ‫جهت‬ ‫مناسب‬ ‫روشی‬ ،‫باال‬ ‫کارایی‬ ‫با‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬‫است‬ ‫مواد‬ ‫نوع‬ ‫تعیین‬ ‫و‬ ،‫گیری‬.‫تک‬ ‫این‬‫با‬ ‫نیک‬ ‫و‬ ‫دیگر‬ ‫های‬‫روش‬ ‫با‬ ‫تلفیق‬‫اش‬‫کارسازهای‬‫د‬ ‫مختلف‬ ‫علوم‬ ‫در‬ ‫زیادی‬ ‫کاربردهای‬ ‫جرمی‬ ‫سنج‬‫طیف‬ ‫مانند‬ ‫ای‬‫پیشرفته‬‫ار‬‫د‬. ‫تعیین‬ ‫و‬ ‫آشکارساز‬ ‫انتخاب‬ ،‫ثابت‬ ‫و‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫انتخاب‬‫سرعت‬‫تنظ‬ ‫در‬ ‫اساسی‬ ‫موارد‬ ‫جمله‬ ‫از‬ ‫متحرک‬ ‫فاز‬ ‫جریان‬‫یک‬ ‫یمات‬ ‫مناسب‬ ‫روش‬HPLC‫است‬.
  • 35.
  • 36.
  • 37. REFERENCE •SKOOG D.A.PRINCIPLE OF IN STRUMENTAL ANALYSIS 3ND EDITION,USA:SAUNDERS COIIEGEPUBLISHING(1985) ROUESSAC,F,ROUESSAC,A.CHEMICAL ANAIYSIS MODERN INSTRUMENTATION METHODS AND TECHNIQUES 2NDEDITION,ENGIAND,JOHN JOHN WILEY&SONS LTD,(2007) ‫اسگوگ‬-‫هالر‬-‫نیمن‬-‫دستگاهی‬ ‫تجزیه‬ ‫اصول‬"‫ترجمه‬:‫عبدالرضاسالجقه‬-‫اول‬ ‫چاپ‬-‫تهران‬-‫نشردانشگاهی‬ ‫مرکز‬-‫اول‬ ‫جلد‬1382
  • 38. ‫سواالت‬ .1‫دهید‬ ‫توضیح‬ ‫را‬ ‫مایع‬ ‫کروماتوگرافی‬. .2‫دستگاه‬ ‫مختلف‬ ‫های‬ ‫وقسمت‬ ‫اجزا‬HPLC‫ببرید‬ ‫نام‬ ‫را‬. .3‫دهید‬ ‫توضیح‬ ‫را‬ ‫انالیزکمی‬. .4‫را‬ ‫خوب‬ ‫اشکارساز‬ ‫یک‬ ‫های‬ ‫ویژگی‬ ‫و‬ ‫شود‬ ‫می‬ ‫انتخاب‬ ‫اساسی‬ ‫اشکارسازبرچه‬‫ببرید‬ ‫نام‬.
  • 39. ‫الکترون‬ ‫یک‬ ‫جرم‬ ‫کمتراز‬ ‫غمهایتان‬ ‫امیدوارم‬ ‫و‬ ‫انرژی‬ ‫ب‬ ‫زمین‬ ‫جرم‬ ‫کل‬ ‫تبدیل‬ ‫از‬ ‫بیشتر‬ ‫شادیهایتان‬ ‫باشد‬ ‫نور‬ ‫سرعت‬ ‫بیشتراز‬ ‫پیشرفتتان‬ ‫سرعت‬ ‫و‬ ‫نگذارد‬ ‫رویتان‬ ‫راپیش‬ ‫اسانسور‬ ‫درون‬ ‫مسایل‬ ‫هرگز‬ ‫زندگی‬ ‫خوش‬ ‫روز‬