abad.pdf1. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
University of Isfahan
Biology Science and Technology
Department of Cell and Molecular Biology
and Microbiology
Farzaneh Forouharfar
2. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
عنوان
:
اندازه
اجسام ابعاد گیری
میکروسکوپی
نوری میکروسکوپ در
3. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
آزمایش این در بررسی مورد اهداف
:
١
.
وردى ُوبلیجر
Calibration)
)
زطوی هیىرٍهشر
(Eye Piec Micrometer)
هیىرٍسىَح هخلف ّبی ثسرگٌوبیی در
٢
.
اثؼبد سؼییي
(
ػرض ٍ طَل
)
ّبِیبخش
٣
.
ّبسلَل یب ّباًذاهه لطر گیریُاًذاز
٤
.
آى وبرثرد ٍ دیذ هیذاى سطح سؼییي
5. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
ُاًذاز
یّبسلَل
یه
ثبفز
هطخص
در
ّبیًَِگ
هخشلف
هشفبٍر
اسز
ٍ
در
ثذى
یه
هَخَد
ُزًذ
در
ّبیثبفز
هخشلف
ُاًذاز
ّبسلَل
یىسبى
ًیسز
.
ٍلشی
یه
سلَل
ِث
ُاًذاز
طجیؼی
خَد
،رسذهی
یبرضذ
آى
هشَلف
ضَدهی
ٍ
یب
سمسین
گرددهی
.
گبّی
اٍلبر
هوىي
اسز
سلَل
ایي
رًٍذ
طجیؼی
ر
اطی
ًىٌذ
ٍ
دزبر
حبلز
دیىریغَل
ٍ
یب
رضذ
ووشر
از
حذ
طجیؼی
ضَد
ِو
حبلشی
غیر
طجیؼی
ثبضذهی
.
ثٌبثرایي
گبّی
در
هطبلؼبر
هیىرٍسىَدی
ّبسلَل
ٍ
ّبیارگبًل
ّبیًَِگ
هخشلف
،خبًَری
گیبّی
ٍ
سبیر
هَخَدار
ُزًذ
ًیبز
ِث
سؼییي
دلیك
اثؼبد
سلَلی
یب
اًذاهىی
هیجبضذ
.
ثرای
سؼییي
ُاًذاز
ٍالؼی
ًًَِو
در
زیر
هیىرٍسىَح
ِث
یه
رٍش
اسشبًذارد
ػول
هیطَد
.
6. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
رایح
سریي
رٍش
گیریُاًذاز
در
هیىرٍسىَح
ًَری
ُاسشفبد
از
ّبیػذسی
زطوی
خبصی
ِث
ًبم
هیىرٍهشر
زطوی
یب
Eyepiecemicrometer
یب
اوَلر
هذرج
ثبضذهی
.
در
درٍى
ایي
،ػذسی
خطی
ٍخَد
دارد
ِو
ِث
صذ
لسوز
هسبٍی
سمسین
اسزُضذ
.
ثرای
ُاًذاز
گیری
اثؼبد
ًًَِو
ّبی
هیىرٍسىَدی
سمسیوبر
ایي
هیىرٍهشر
سَاًذًوی
دارای
همیبس
هطخص
ٍ
ثبثشی
ثبضذ
.
چرا؟
زَى
ثسرگٌوبیی
هیىرٍسىَح
ثب
ُاسشفبد
از
ّبیػذسی
ضیئی
هخشلف
سغییر
،وٌذهی
ثٌبثرایي
لجل
از
وبرثردىِث
ایي
هیىرٍهشر
خْز
گیریُاًذاز
اثؼبد
ًًَِو
،هیىرٍسىَدی
الزم
اسز
همیبس
درخبر
آى
ثرای
ّبیثسرگٌوبیی
هخشلف
سؼییي
ضَد
.
ِث
سؼییي
ِفبصل
ّر
ِدرخ
از
هیىرٍهشر
زطوی
یب
اوَلر
هذرج
وبلیجراسیَى
هی
گَیٌذ
.
7. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
براي
ايي
هٌظَر
از
ٍِسیل
ديگري
ِب
ًام
الم
هذرج
يا
(StageMicrometer)
ُاستفاد
شَدهي
.
ايي
هیكرٍهتر
يك
الم
ايِشیش
است
ِك
قسوت
هركسي
آى
ِك
با
ٓداير
رًگيُسیا
هشخص
ٍ
در
آى
يك
يِفاصل
1
هیلیوتري
ِب
100
قسوت
هساٍي
تقسین
ُشذ
است
.
بٌابرايي
ِفاصل
بیي
ٍد
خط
در
الم
،هذرج
1/100
هیلیوتر
است
ٍ
چَى
ّر
هیلیوتر
هعادل
1000
هیكرٍى
هیباشذ
ٍ
در
هیكرٍسكَپ
ابعاد
را
هیكرٍهتري
بیاى
هیكٌین
ِفاصل
بیي
ّر
ِدرج
يا
ٍد
خط
هتَالي
از
الم
هذرج
هعادل
10
هیكرٍى
است
.
13. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
با
بكاربردى
ايي
ٍد
ٍِسیل
ِب
طريقي
ِك
رٍش
كار
شرح
ُداد
ُشذ
،است
در
ابتذا
بطَر
دقیق
با
ُاستفاد
از
درجات
هٌطبق
ُشذ
ازالم
هذرج
ٍ
هیكرٍهتر
چشوي
عذد
ُكالیبر
هیكرٍهتر
چشوي
براي
ّر
بسرگٌوايي
ِهحاسب
سپس
با
ضرب
كردى
عذد
ُكالیبر
در
درجات
هٌطبق
ُشذ
هیكرٍهتر
چشوي
بر
رٍي
جسن
ابعاد
آى
ِهحاسب
هي
شَد
.
24. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
نیا مورد وسایل و مواد
ز
1
.
لوگل
2
.
پیاز
3
.
مدرج الم
4
.
مدرج چشمی عدسی
5
.
نوری میکروسکوپ
.6
والمل الم
25. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
روش
كار
1
.
ثرای
سؼییي
همیبس
درخبر
اوَلر
زطوی
یب
اوَلر
هذرج
در
ٍالغ
ُوبلیجر
وردى
ایي
ػذسی
در
ّبیثسرگٌوبیی
،هخشلف
ػذسی
زطوی
هؼوَلی
هیىرٍسىَح
را
خبرج
ُورد
ٍ
ِث
طَر
صحیح
در
خبی
هٌبسجی
لرار
دّیذ
سب
آسیت
ًجیٌذ
ٍ
اوَلر
هذرج
را
خبیگسیي
وٌیذ
.
2
.
الم
هذرج
را
رٍی
ِصفح
هیىرٍسىَح
لرار
دّیذ
ٍ
اثشذا
در
ثسرگٌوبیی
4
ٍ
سذس
در
ثسرگٌوبیی
10
ٍ
ثب
ثسشي
ًسجی
دیبفراگن
ٍ
ون
وردى
هیساى
ًَر
ٍرٍدی
هیىرٍسىَح
وٌشراسز
هٌبست
را
سٌظین
ٍ
ثخص
هذرج
الم
را
دیذا
وٌیذ
.
3
.
ثب
حروز
سذریدی
الم
هذرج
ٍ
زرخص
اوَلر
هذرج
ّر
ٍد
ثٌذیِدرخ
را
طَری
ثر
ّن
هٌطجك
وٌیذ
ِو
از
سوز
زخ
هیذاى
دیذ
اٍلیي
یِدرخ
الم
هذرج
ًبدلیم
در
راسشبی
اٍلیي
یِدرخ
اوَلر
هذرج
ثبضذ
ٍ
ایي
ٍد
ِدرخ
را
ثب
ّبیدیر
سٌظین
ًالوبه
ِث
ّن
ًسدیه
وٌیذ
.
28. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
4
.
دس
از
اًطجبق
در
ثسرگٌوبیی
10
از
لسوز
راسز
هیذاى
دیذ
آى
ٍد
ِدرخ
از
الم
ٍ
اوَلر
را
ِو
ًبدلیم
ثب
ّن
اًطجبق
دارًذ
ٍ
همبثل
ّن
ّسشٌذ
را
ُضورد
ٍ
سذس
حسبة
وٌیذ
ِو
یه
ِدرخ
از
اوَلر
هذرج
هؼبدل
زٌذ
هیىرٍى
ثبضذهی
.
دلز
ضَد
ِو
ّر
سؼذاد
ِدرخ
ِو
از
الم
ُضورد
ضَد
ثبیسشی
در
10
هیىرٍى
ضرة
وٌیذ
سب
ُاًذاز
آى
را
ثر
حست
هیىرٍى
ِث
آٍریذدسز
ٍ
ایي
ُاًذاز
را
هؼبدل
سؼذاد
ایِدرخ
از
اوَلر
ِو
ضوردیذ
لرار
دّیذ
ٍ
در
سٌبست
1
ِدرخ
از
اوَلر
حسبة
وٌیذ
.
ػذد
ُآهذدسزِث
هؼبدل
ثب
ػذد
ُوبلیجر
اوَلر
هذرج
در
ثسرگٌوبیی
10
ثبضذهی
.
29. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
ثرای
هثبل
ثب
ِسَخ
ِث
ضىل
اگر
ِدرخ
100
اوَلر
هذرج
رٍی
یِدرخ
99
الم
هذرج
لرار
گرفز
خَاّین
داضز
:
100
ِدرخ
اوَلر
هذرج
هؼبدل
99
ِدرخ
الم
هذرج
ضرثذر
10
هیىرٍى
یؼٌی
990
هیىرٍى
هیجبضذ
1
ِدرخ
اوَلر
هذرج
زمذر
اسز؟
100/1=99*10/x
x=9.9
ثر
اسبس
ِهحبسج
فَق
ػذد
ُوبلیجر
ثسرگٌوبیی
10
یؼٌی
ِفبصل
یه
ِدرخ
از
اوَلر
در
ثسرگٌوبیی
10
هؼبدل
9.9
هیىرٍى
ثبضذهی
.
30. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
5
.
ثب
سغییر
ثسرگٌوبیی
از
10
ِث
40
ػذد
ُوبلیجر
را
ثرای
ثسرگٌوبیی
40
آٍریذدسزِث
ٍ
ِولی
هَارد
فَق
را
رػبیز
وٌیذ
.
ثب
ِسَخ
ِث
سصَیر
ِدرخ
95
اوَلر
هذرج
دلیمب
ثر
ِدرخ
20
الم
هذرج
هٌطجك
اسز
.
دس
95
ِدرخ
هؼبدل
200
هیىرٍهشر
در
ثسرگٌوبیی
40
هیجبضذ
.
1
ِدرخ
هؼبدل
زمذر
اسز؟
ِو
ثب
یه
سٌبست
ُسبد
ػذد
2.1
ثرای
ػذد
وبلیجراسیَى
لٌس
40
ثذسز
هی
آیذ
.
33. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
6
.
لٌس ُكالیبر اعذاد
10
ٍ
40
ابعاد ِهحاسب در تا كٌیذ يادداشت را
ّايبسرگٌوايي در ًًَِو
10
ٍ
40
كٌیذ ُاستفاد اًْا از
.
7
.
از گرفتي استريپ با ٍ ًُوَد خارج ،هیكرٍسكَپ از را هذرج الم
را ُبشر الم ،لَگل تَسط آهیسيرًگ ٍ پیاز خارجي يا داخلي ُبشر
دّیذ قرار هیكرٍسكَپ ِصفح رٍي ٍ كٌیذ ِتْی
.
سلول ابعاد گیریاندازه
درجات انطباق و پیاز بشرة های
هاسلول برابعاد مدرج اکولر
34. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
8
.
اثشذا
در
ثسرگٌوبیی
10
طَل
ّبیسلَل
دیبز
را
ِهحبسج
وٌیذ
.
ِث
ایي
هٌظَر
حذٍد
10
سلَل
در
ّبیهیذاى
دیذ
هخشلف
ِث
طَر
سصبدفی
اًشخبة
ٍ
ثب
زرخبًذى
اوَلر
،هذرج
درخبر
اى
را
ثر
ثسرگشریي
طَل
ٍ
ثسرگشریي
ػرض
سلَل
هٌطجك
ٍ
یبدداضز
وٌیذ
.
سذس
هیبًگیي
ِگرفش
ٍ
در
ػذد
ُوبلیجر
لٌس
10
ضرة
وٌیذ
.
ثذیي
سرسیت
هیبًگیي
طَل
ٍ
ػرض
ّبیسلَل
ُثطر
دیبز
ِث
دسز
آیذهی
.
ًبحشو
یبدداضز
وٌیذ
ِو
از
ُثطر
خبرخی
ًًَِو
ثرداری
وردیذ
یب
از
ُثطر
داخلی
سب
در
دبیبى
آزهبیص
ثشَاًیذ
اػذاد
ٍ
ًشبیح
خَد
را
ثب
ّبیٍُگر
دیگر
ِهمبیس
وٌیذ
.
35. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
٩
.
دس
از
آهیسیرًگ
ُثطر
ثب
لَگل
ِّسش
ِث
رًگ
طالیی
-
زرد
در
آیذهی
.
در
ثسرگٌوبیی
40
هیبًگیي
لطر
ِّسش
را
ِهحبسج
وٌیذ
.
(
ثرای
ایي
هٌظَر
١٠
ِّسش
را
اًشخبة
وٌیذ
.
)
ٍ
ایي
ثبر
هیبًگیي
درخبر
هٌطجك
ثر
لطر
ِّسش
را
در
ػذد
ُوبلیجر
لٌس
40
ضرة
وٌیذ
.
ِث
ّویي
سرسیت
ضوب
لبدر
خَاّیذ
ثَد
لطر
ّبیسلَل
ورٍی
هبًٌذ
ّبیگلجَل
لرهس
یب
ّبیگلجَل
سفیذ
را
ِهحبسج
وٌیذ
.
ثب
ِهمبیس
اػذاد
ُآهذدسزِث
ثب
لطر
طجیؼی
ّبسلَل
ثرخی
از
ّبیثیوبری
خًَی
ًبضی
از
سغییر
ُاًذاز
ّبیسلَل
خًَی
را
سَاًیذهی
هطخص
وٌیذ
.
47. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
اکولر و الم دیگر کاربردهای
ابعاد گیری اندازه در مدرج
52. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
آن كاربرد و دید میدان سطح گیریاندازه
یىی
از
هَارد
هْن
ُاسشفبد
از
الم
هذرج
گیریُاًذاز
هسبحز
هیذاى
دیذ
هیىرٍسىَح
در
ّبیثسرگٌوبیی
هخشلف
،اسز
ِو
ثب
سؼییي
لطر
هیذاى
،دیذ
یؼٌی
ضوبرش
سؼذاد
درخبر
الم
هذرج
هٌطجك
ثر
لطر
ُدایر
دیذ
در
ّر
ثسرگٌوبیی
ٍ
ِهحبسج
ضؼبع
هیذاى
دیذ
ٍ
هسبحز
ُدایر
ِث
دسز
آیذهی
.
53. مولکولی و سلولی آزمایشگاه
-
فر فروهر فرزانه
دید میدان سطح تعیین استفاده مهم موارد
سؼییي
یب
ضوبرش
سؼذاد
ٍ
فراٍاًی
سبخشبرّبی
ُژٍی
در
ٍاحذ
سطح
هثل
فراٍاًی
،ًِرٍز
غبر،ورن
ایًِرٍز
Crypt
یب
فلس
ٍ
ُغیر
را
در
ٍاحذ
سطح
ثب
ایي
رٍش
سَاىهی
ِهحبسج
ورد
.
دس
ثب
یه
سٌبست
ُسبد
دس
از
ضوبرش
سؼذاد
سبخشبر
هَرد
ًظر
سؼذاد
را
در
ٍاحذ
سطح
ًًَِو
ِالجش
ثر
حست
ًَع
ٍاحذ
ِخَاسش
ُضذ
ًالهث
در
1
هشرسبًشی
هرثغ
یب
1
هشرهیلی
هرثغ
ٍ
ُغیر
سَاىهی
ِث
آٍرددسز
.
هجحث
ُاًذاز
گیری
سطح
هیذاى
دیذ
هیىرٍسىَح
ٍوبرثرد
آى
هرثَط
ِث
هجبحث
ایي
ِخلس
ًوی
ثبضذ
.