IZOLIRANE KRVNE ŽILE presentation

1. IZOLIRANE KRVNE ŽILE
Ivana Jukić

2. DIJELOVI SUSTAVA I PRINCIP RADA
• proučavanje strukture i funkcije izoliranih krvnih žila malih promjera (> 60 μm) - srednje moždane
arterije štakora
• miogeni odgovor / protokom potaknuta dilatacija
• različiti farmakološki / fiziološki podražaji
• ugrađeni sustav grijanja
• otvori za superfuziju, brzo pražnjenje i punjenje (dodavanje lijekova / oksidacija)
• čišćenje i uredno održavanje
• Danish Myo Technology (DMT) (Danska) / MyoVIEW
• FlowMeter - 161FM
• protoka između 15-1500 μL/min

3. Slika 1. Dijelovi sustava za izolirane krvne žile (Pressure Myograph System, DMT Model 111P)

4. PRIPREMA PSS OTOPINE
PSS OTOPINA
• Za pripremu 0,5 L :
• Destilirana voda: 450 mL
• Salt Stock otopina: 25 mL
• Buffer Stock otopina: 25 mL
• Glukoza: 0,5 g
• NaH2PO4: 0,07 g
Ca-free PSS OTOPINA
• Za pripremu 0,5 L:
• Destilirana voda: 450 mL
• Salt Stock Ca-free otopina: 25 mL
• Buffer Stock Ca-free otopina: 25 mL
• Glukoza: 0,5 g
• NaH2PO4: 0,07 g
pH 7.35 – 7.45

5. IZOLACIJA SREDNJE MOŽDANE ARTERIJE
• anestezija
• ketamin 75 mg/kg i midazolam 0,5 mg/kg
• dekapitacija
• izolacija arterija
• PSS (37C)
• kontinuirana oksigenacija sustava
• 21% O2, 5% CO2 i balans N2
• inkubacija krvne žile
• 60 min / ∆80 mmHg

6. EKSPERIMENTALNI PROTOKOL
• Bazične vrijednosti
• tlačni gradijenti Δ10, Δ20, Δ40, Δ60 i 100 mmHg
• prisutnost / odsutnost inhibitora
• L-NAME
• INDOMETACIN
• MSPPOH
• TEMPOL
• Ach / SNP
• Ca2+- free PSS otopina

7. STATISTIČKA OBRADA I PRIKAZ PODATAKA
• za obradu podataka moramo koristiti two-way ANOVA repeated measures
Slika 2. Bazični odgovor otporničkih arteriola potkožnog (SAT) i visceralnog
(VAT) masnog tkiva na protokom potaknutu dilataciju (FID), usporedba između 2
grupe