Fiksacija tkiva i organa u edukacijske i znanstvene svrhe

1. Improved Medical Education in Basic
Sciences
for Better Medical Practicing
ImproveMEd
Fiksacija tkiva i organa u edukacijske i
znanstvene svrhe

2. • Ciljevi fiksacije
• Sredstva za fiksaciju
• Postupak fiksacije

3. 1. Cilj fiksacije
 očuvanje organa, tkiva i stanica u što prirodnijem obliku - „life-like state“
Fiksativi

4.  očuvanje i zaštita kadavera doniranih u znanstvene i edukativne svrhe
m. deltoideus inferior hyoid muscles

5.  zaustavljanje AUTOLIZE i PUTREFAKCIJE
enzim
molekula
razgradnja
enzim ostaje nepromijenjen

6. fiksativ

7. • Neizbježne posljedice „cross links” povezivanja su tvrdoća tkiva ili organa koji
prolaze kroz proces fiksacije

8. 2. Sredstva za fiksaciju
 ALDEHIDI
 OKSIDIRAJUĆI AGENSI
 FIKSATIVI NA BAZI ALKOHOLA
 FIKSATIVI NA BAZI METALA

9. FIKSACIJA
Fizikalni proces Kemijski proces

10. C
O
H H
FORMALDEHID

11. FORMALIN
Formaldehid 37 – 40% Voda 60 – 63%

12. Formaldehid
H2O
Voda
Metilen-glikol

14. Formaldehid
u vodi
Metilen
glikol
Polioksi
metilen
glikol
Metilen
glikol
(dehidracija &
depolimerizacija)

15. OH

16. CO2+H2O
Metanol Formaldehid Mravlja kiselina
Alkohol
dehidrogenaza
Formaldehid
dehidrogenaza

17. Kada bi postojao idealan fiksativ trebao bi imati određena svojstva:
 Da ne očvršćuje tkivo, organe ili tijelo
 Da omogućuje savršeno bojanje tkiva za analize
 Da ne bude toksičan za ljude i životinje
 Da mu cijena bude prihvatljiva
 Idealan fiksativ NE postoji

18. 3. Postupak fiksacije
 Uporaba samo formaldehida kao fiksativa ne daje dobre rezultate dugoročno
 Kombinacija formaldehida s drugim agensima
 Specijalizirani protokoli za fiksaciju KADAVERA ili samo izoliranog ORGANA

19. KAISERLINGOV PROTOKOL
• Za očuvanje pojedinih izoliranih organa u svrhu nastave
• Prednost ovog protokola je očuvanje približne boje tkiva

20. Priprema otopina:
 Kaiserling I: 85g kalijeva acetata, 45g kalijeva nitrata, 4800mL formalina (3 - 4%)
 Kaiserling II: etilni alkohol, 80 – 95%
 Kaiserling III: 200g kalijeva acetata, 300mL glicerina, 900mL vodovodne vode

22. PROTOKOL PO PRETORIUSU
 Standardizirana formula za fiksacija kadavera u svrhu nastave
 Prednost ovog protokola je trajnost kadavera i vrlo niska cijena provođenja fiksacije
 Nedostatak - smećkasto obojenje tkiva

23.  Priprema fiksativa:
• 96% etanol
• Formalin (3 – 4%) 500 mL
• Vovododna voda 750 mL
• 80% tekući fenol 3,5 L
Postupak injiciranja fiksativa:
• injiciranje pod tlakom od 1 do 1.5 kPa u tijelo
(kroz femoralnu arteriju) oko 5 L formalina

24. kadaver 60 kg → 25 L fiksativa → fiksacija traje 3. - 5. godina

26.  Održavanje kadavera
• Prekrivanje tkaninom umočenom u humektant te čuvanje u hladnoj prostoriji
 Priprema humektanta:
• Glicerin – 250 mL
• 80 % tekući fenol – 250 mL
• Vodovodna voda – do 1 L

27. HVALA NA POZORNOSTI!