SlideShare a Scribd company logo
Improved Medical Education in Basic
Sciences
for Better Medical Practicing
ImproveMEd
A vérerek véráramának és reaktivitásának mérése a bőr
mikrocirkulációjában a lézer Doppler (LDF) módszerével
Ana Stupin
Az utóbbi évtizedekben számos funkcionális módszert fejlesztettek ki a human endothelium
fiziológiai funkcióinak vizsgálatára és mérésére (Flammer & Luscher, 2010; Ludmer és mtsai,
1986)
Intenzív tudományos kutatás a vaszkuláris fiziológia és a patofiziológia területén
Ezeket a módszereket még nem alkalmazták hasznos diagnosztikai eszközként a mindennapi
klinikai gyakorlatban
Az endoteliális funkció tanulmányozására irányuló valamennyi megközelítés célja, hogy
betekintést adjon a vaszkuláris / endoteliális funkciókba különböző helyeken (érrendszeri
medencékben) és különböző típusú erekben (vezetőképes, rezisztens vérerek, mikrocirkuláció)
Korai invazív módszerek (pl. Intracoronáris acetil-kolin infúzió), a kevésbé invazív / nem invazív
recenter módszerek, és a perifériás keringés vizsgálatára irányulnak, mint a szisztémás keringés
helyettesítője (Linder és mtsai., 1990, Panza és munkatársai, 1990; Celermajer és mtsai., 1992)
Elérhetősége miatt a bőr tökéletes hely az emberi mikrocirkuláció működésének vizsgálatára
(Roustit & Cracowski, 2012)
A nyitott kérdés az, hogy a bőr mikrovaszkuláris funkciója reprezentatív-e, és más szervek
mikrovaszkuláris funkciójának megfelelő mutatója
Az alábbi három betegség esetben a bőr a mikrovaszkuláris funkció intenzív vizsgálatának
helyévé vált az egészségben és a betegségben, beleértve a magas vérnyomást is (Antonios et al.,
1999; Feihl et al., 2006), elhízás (Levy et al., 2006), cukorbetegség (Chang et al. 1997,
Yamamoto-Suganuma és Aso, 2009), öregedés, vesebetegség (Kruger et al., 2006)
A bőr mikrocirkulációjának gyakori vizsgálata a lézer Doppler (LD) használják.
Az LD-technika alapja az, hogy a bőr mikrocirkulációjában az áramlási sebesség a lézersugárnak a
mikrocirkulációs eritrocitából való elutasítása alapján változik, ami megváltoztatja a
hullámhosszát (Doppler hatása) (Stern, 1975)
A számítógépes program meghatározza az áramlási sebességet - a bőr fluxus indexe előtt, és
nem a mikroflowban levő közvetlen áramlási sebességet -
Az eredményeket tetszőleges egységekben (perfúziós egységek, PU, ​​1 PU = 10 mV) vagy CVC-ben
(perfúziós index osztva artériás nyomás, mV / mmHg) fejezzük ki (147)
Az LD-áramlásmérő (LDF) egy ponton és így kis térfogatban, de nagy mintavételi frekvenciával
méri a véráramlást
1. ábra. Lézer Doppler áramlásmérés (LDF).
Amikor a lézerfény a mozgó tárgyakról, például eritrocitákból
tükröződik, a frekvencia megváltozik. A frekvencia változásának
sebessége a mozgó objektum sebességétől függ (azaz minél
nagyobb a véráramlás sebessége, annál nagyobb a
frekvenciaváltozás, és annál nagyobb az áramlás értéke). A
bőrszövet megvilágítására használt lézerfény a bőrön és az
eritrocitákon szóródik. A szonda által összegyűjtött szétszórt fény
olyan komponenst tartalmaz, amelyet nem változott meg, és a
módosított frekvencia fénykomponensét sem változtatja meg. A
két fénykomponens közötti különbséget a Doppler-eltolás
frekvenciája (amplitúdója) egy fényérzékelő határozza meg. A
fotoszenzorból származó áram az analóg és a digitális
átalakításokon áthalad a Flux és a Conc értékek megadásához,
amelyek a mozgás sebességét és a vér gyöngy koncentrációját
jelzik.Izvor: Manual Version: moorVMS-LDF User Manual (Issue 10 English), Revision Date: 2017-05-25.
©2017 Moor Instruments Limited, Millwey, Axminster, Devon, EX13 5HU, UK.
Gyakran említik, hogy az LDF módszert - a bőr perfúziójának és a véráramlás mérésének
regionális pontosságából eredő térbeli változékonyságot mutat egy ponton (Roustit et al., 2010)
Ez a probléma úgy küszöbölhető ki, hogy a lézer szondát mindig a bőrön azonos (jelölt) foltra kell
helyezi, különösen akkor, ha a módszert ismétlődő mérésekben használják.
A lézer Doppler jel és a mikrovaszkuláris áramlás közötti lineáris kapcsolat 0 és 300 ml / perc
között volt 100 g szövetre vonatkoztatva (Ahn et al., 1987).
Az LDF nem ad pontos áramlási sebességet (azaz ml / perc) !!!
Az LDF a leggyakrabban a mikrovaszkuláris reaktivitás becslésére szolgál válaszul a különböző
ingerekre (érrendszeri okklúzió, vazoaktív gyógyszerek, hőmérsékleti kihívások stb.).
A bőr mikrocirkulációjában a vaszkuláris reaktivitás leggyakrabban használt vizsgálatai
(Cracowski et al., 2006):
• az okklúzió utáni reaktív hyperaemia (PORH)
• vasoaktív gyógyszerek iontoforézise
• a bőrön való hőmérséklet-változás - felmelegedés vagy hűtés
1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A poszt-okklúziós reaktív hiperémia (PORH) a véredény rövid távú elzáródása által okozott
(mikro) érrendszeri véráram növekedése.
A mikrovaszkuláris reaktivitás becslésére általánosan használt vizsgálat (Cracowski et al., 2006)
A PORH kialakulását közvetítő mechanizmusok a bőr mikrocirkulációjában:
• az érzékszervi idegek aktivitása a neurális axon reflexen keresztül (Larkin & Williams, 1993),
• endotélfüggő vazodilatátorok előállítása
• EDHF (Lorenzo & Minson, 2007),
• a prosztaglandinok szerepe még nem teljesen tisztázott (Dalle-Ave et al., 2004; Medow et al., 2007).
• A COX gátlása feltárja a PORH potenciális függőségét a NO-ra az emberi bőr mikrocirkulációjában (Medow et
al., 2007).
Ezt a módszert általában a mikrovaszkuláris reaktivitás értékelésére és tesztelésére használják,
nem pedig a mikrovaszkuláris endoteliális funkció értékelésének közvetlen vizsgálataként
(Roustit & Cracowski, 2012).
1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A PORH elemzés során számszerűsített paraméterek:
Peak hyperemia
• nyers adatokként vagy alapáram-függvényként fejezhető ki
• a görbe alatti terület,
• csúcsáram mínusz alapáram, vagy.  t
• a csúcs és az alapáram közötti relatív változás százalékban kifejezve [(csúcsáramlási sebesség) / bazális áramlás] x
100
• a csúcs perfúzió összehasonlítható az ún. 42 ° C-on vagy annál magasabb hőmérsékletű
melegítéssel érhető maximális vazodilatáció (Charkoudian, 2003)
A perfúzió csúcsáig tartó idő (csúcsidő)
• jelentőségét a mikrovaszkuláris reaktivitás markerként még nem határozták meg
1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
2. ábra: A PORH elemzése során számszerűsített paraméterek
(Roustit & Blaise, 2010; Roustit & Cracowski, 2012)
1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A PORH napközi reprodukálhatósága
• változó, ha a PORH-t az LDF egy ponton méri
• attól függ, hogy a bőrt melyik helyen helyezzük el, az adatot hogyan értelmezik, és mekkora a bőr
alaphőmérsékletét.
A PORH reprodukálhatóságát vizsgáló vizsgálatok közül a leggyakrabban az alkar gyapjúoldali oldalát
használták (az eredmények következetlenek)
• A reprodukálhatóság kiváló (6% -tól 22% -ig CV-ig), amikor a felvétel helyét pontosan jelezzük, és a szondát minden nap
ugyanazon a helyen helyezzük el (Yvonne-Tee et al. 2005)
• a jó reprodukálhatóságig (kb. 20% CV), amikor a szondát közel azonos helyen helyezték el, de teljesebb pontossággal
(Agarwal et al., 2010)
• a reprodukálhatóság gyenge, ha a szonda telepítési helyét napról-napra véletlenszerűen választottuk (CV> 40%) (Roustit et
al., 2010)
A szonda pontosan ugyanazon a helyen való elhelyezése a kulcsfontosságú tényező, amely javítja a
PORH naponta történő reprodukálhatóságát (kiváló)
1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
Bőr és környezet hőmérséklete
A PORH felvétele során figyelembe kell venni a bőr és a környezeti hőmérséklet homogenizálását
is (szoba).
A hőmérséklet a bőr mikrocirkulációjában a bazális áramlási sebesség szabályozásában
kulcsszerepet játszik (Roustit et al., 2010a)
A PORH mérések elfogadható megismételhetősége (reprodukálhatósága), ha a bőr hőmérséklete
a vizsgálat alatt 33 ° C-on tartott (Roustit et al., 2010)
1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A vaszkuláris elzáródás időtartama
Különböző vizsgálatokban kifejezett nagy a heterogenitás a mérések tervezésében - különösen
az érrendszeri elzáródás időtartamában (1-15 perc) (Yvonne-Tee et al., 2008)
A brachialis artéria áramlás által közvetített dilatációs (FMD) áramlásának analógiája miatt a
leggyakrabban használt vaszkuláris elzáródás 5 perc volt.
Általában a vaszkuláris okklúzió rövidebb periódusait is használják
A hosszabb érrendszeri elzáródás hozzájárul az ischaemia metabolitok (pl. Adenozin)
felhalmozódásához, amelyek potenciálisan hozzájárulhatnak a hiperémiás véráramláshoz.
1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A mandzsetta nyomása, amely érrendszeri elzáródást okoz
A különböző vizsgálatokban a mérések tervezésekor a kifejezett heterogenitás részben a
mandzsettára kifejetett eltérő nyomásnak is köszönhető,, amely okklúziót okoz (160-220 mmHg)
(Keymel et al., 2010)
A leggyakrabban használt mandzsetta nyomás 30-50 mmHg-nál nagyobb, mint a PORH által
mért szisztolés artériás nyomás.
1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
Absztrakt
Az LDF-rel mért PORH egy széles körben alkalmazott vizsgálat, amely általános (teljes) indexet ad
a mikrovaszkuláris funkciókról, - a neurális axonális reflexekről, a COX-függő útvonalakról és az
EDHF hatások kombinációjáról
A vizsgálat során ügyelni kell arra, hogy elkerüljék a módszertani torzítást vagy a mérési hibát
(elzáródás időtartama, alaphőmérséklet és adagolási pont)
Annak ellenére, hogy a PORH az LDF-szel együtt jó és széles körben alkalmazható
mikrovaszkuláris reaktivitásértékelő eszköz, ez a módszer még mindig szabványosítást igényel
2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
Az iontoforézis a vasoaktív anyagok (töltött molekulák) nem-invazív transzdermális
adagolásának módszere, kis teljesítményű elektromos árammal
A módszer alkalmazása számos módszertani tényezőtől függ (Kalia et al 2004):
• az alkalmazandó oldat koncentrációja és pH-ja,
• az alkalmazott áramok erőssége,
• iontoforézis és
• a bőrfelület tulajdonságai (bőrvastagság, haj hajjal vagy anélkül)
2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
LDF-sel kombinálva (Cracowski et al., 2006; Turner et al., 2008)
iontoforézis-acetil-kolin (ACh) - teszt a bőr mikrocirkulációjának endotheli-függő
vazodilatációjának értékelésére
nátrium-nitro-pussid (SNP) - teszt a bőr mikrocirkulációjának endothelium-független
értágulásának értékelésére
Az ACh alkalmazás domináns endotélfüggő dilatációt okoz:
• COX-függő metabolitok (bár az eredmények még mindig nem egyértelműek) (Durand et al., 2004; Holowatz et al.,
2005)
• A NO nem jár jelentős mértékben (Noon et al., 1998)
kevésbé jelentős endothelium-független dilatáció
• neurális axon reflex (Berghoff et al., 2002)
2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
Az iontoforézissel kapcsolatos módszertani kérdések:
ugyanaz az áram nemspecifikus vazodilatációt okozhat, amely zavarhatja a beadott gyógyszer
vazodilatációs hatását
Amely függ :
• elektromos töltéstől,
• (hasonló töltések esetén az ismételt alkalmazások több specifikus vazodilatációt okoznak, mint a folyamatos
ionoforézis) (Durand et al., 2002)
• az alkalmazott vazodilatátorok feloldására és hígítására használt részecskékről (pl. csapvíz, desztillált víz,
ionmentesített víz, sóoldat);
• a desztillált víz kifejezettebb, nem specifikus vasodilatációt okoz a villamos energiából, mint a sóoldat
• Az ACh vagy SNP iontoforézis hasonló vazodilatációt okoz a bőr mikrocirkulációjában, függetlenül attól, hogy az ACh vagy az SNP desztillált vízben
vagy fiziológiai oldatban oldódik-e (Farrell et al., 2002).
2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
Az iontoforézissel kapcsolatos módszertani kérdések:
b) a természetes bőrrezisztencia befolyásolhatja a vasoaktív anyag bejuttatását is
• ajánlatos csökkenteni a bőr ellenállását az alkalmazás helyén
• az epidermisz felületi rétegének enyhe eltávolítása ragasztószalaggal vagy alkohollal (Turner et al.,
2008)
c) a térbeli változékonyság befolyásolja az ACh vagy SNP-függő vazodilatáció reprodukálhatóságát
• győződjön meg arról, hogy az ismétlődő méréseknél az alkalmazási hely megegyezik (Agarwal et al.
2010, Blaise et al., 2010)
d) a vazodilatáció az iontoforézis helyétől függ
• pl. az SNP által indukált dilatációt nem lehetett indukálni bárhol, hanem csak az ujj dorsalis oldalán
(Roustit et al., 2009)
2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
Absztrakt
Az ACh és az SNP ionoforézisét széles körben alkalmazzák a bőr mikrocirkulációjának endotél-
függő és független vazodilatációjának értékelésére
Az eredmények értelmezésekor figyelembe kell venni az ezekben a válaszokban szereplő
mechanizmusok összetettségét
Az ionoforézissel végzett vizsgálatokat gondosan meg kell tervezni, hogy csökkentsük a jelenlegi
nemspecifikus dilatációt:
• kis teljesítményű árammal
• a vazoaktív anyagok oldódási és hígító közegeként sóoldatot (a desztillált víz helyett) kell használni
• A bőrfelületen, ahol iontoforézist végeznek, alkohollal meg kell tisztítani a természetes bőrrezisztencia
csökkentése céljából, amennyire csak lehetséges
3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
A helyi termikus hiperémia (LTH) a bőr perifériás mikrovaszkuláris reakciója a helyi felmelegedésre
Az LTH által közvetített mechanizmusok (Cracowski et al., 2006):
• neurális axon reflex i
• o NO-függő endoteliális vasodilatáció
Az LTH-t jellemezték (Minson és mtsai., 2001):
• Kezdeti csúcs hyperemia (az első 5 percben) - Az érzékszervi idegtől függ
• fennmaradó fennsík - többnyire a NO-tól függ
3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
Plato szakasz 20-30 perccel a fűtés megkezdése után jelenik meg (Minson, 2010), és
amikor a fűtési időszak meghosszabbodik, a "eltávolítás" (azaz a perfúzió lassú
visszaállítása az alap alapáramlási vonalhoz) előfordulása figyelhető meg.
3. ábra. Helyi termikus hiperémia (LTH). (Roustit & Cracowski, 2012)
3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
Az LTH két független fázisának köszönhetően az adatelemzés során különböző paramétereket
lehet számszerűsíteni
Az LTH értelmezés leggyakrabban használt paraméterei:
• csúcs perfúzió (axon reflextől függő vazodilatáció) és
• platina perfúzió (NO-tól függő vazodilatáció).
Az adatok kifejezhetők:
• "sor" formájában perfúziós egységként vagy a
• CVC, amely perfúziót jelent a bazális mellékfolyadékhoz vagy perfúzióhoz viszonyítva a maximális vazodilatációhoz
képest
Érdekes, hogy az endothel funkció általános mutatójaként a teljes mérés görbe alatti területet
(AUC) gyakran használják, annak ellenére, hogy ezáltal elrejti az axonális reflexek hatását ebben
a vazodilatációban (Kruger et al., 2006)
3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
Az LDF-ben rögzített LTH reprodukálhatósága a lézeres szonda helyétől függ (Roustit et al., 2010)
elfogadható napközbeni reprodukálhatóság, ha az LTH-t az ujjakon mérik
Alacsony a reprodukálhatóság, ha az alkaron mérjük az LTH-t (Roustit & Cracowski, 2012 ref 114)
Egyes szerzők sokkal jobb reprodukálhatóságról beszélnek az alkaron, ha az ún. integratív
szondát használnak
3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
Heterogenitás az LTH-t használó tanulmányok tervezésében:
• a helyi felmelegedés más hőmérséklete (42-43 ° C) (Johnson et al., 2010)
• egy másik típusú eszköz, amelyet a bőr melegítésére használnak (Roustit & Cracowski, 2012)
Az egészséges személyek a helyi felmelegedés 44 ° C-on jól tolerálták, míg a csökkent
mikrovaszkuláris funkciójú betegek (pl. Szisztémás szklerózis) fájdalomról vagy fulladásérzetről
panaszkodtak a felmelegedés helyén.
4. Helyi hűtés
A helyi hűtés olyan hőmérséklet-inger, amelyet gyakran használnak az LDF-rel együt
Különböző hűtési módszerek:
• kéz vagy ujj hideg vízbe merítése (Maver & Strucl, 2000),
• fagyasztó patronok tekercselése (Cankar & Finderle, 2003) vagy
• szén-dioxid használata (Lutolf et al., 1993)
Egyszerűsége miatt a leggyakrabban használt hűtési módszer a hideg vízbe merítés mind
egészséges, mind beteg emberek esetében (Foerster et al., 2007)
4. Helyi hűtés
A helyi bőrhűtés stimulálja (Johnson & Kellogg, 2010):
• A kezdeti vazokonstrikció (a norepinefrintől függően),
• majd az átmeneti vazodilatáció,
• és végső soron meghosszabbodott vazokonstrikció (a norepinefrintől függően és a NO rendszer gátlása)
4. ábra. Helyi hűtés. (Roustit & Cracowski, 2012)
4. Helyi hűtés
A módszer legjobb reprodukálhatósága:
• amikor a hűtési protokoll 30 percig tart 15 ° C-on (Roustit et al., 2010c)
Post-Occlusive reaktív hiperémia (PORH) rögzítése lézer
Doppler (LDF) segítségével
Példa az Orvostudományi Kar és a Klinikai Központ fiziológiai és Sportélettani Intézetéből
Használt eszköz és szoftver: moorVMS-LDF Monitor és moorVMS-PC v4.0, Moor Instruments
Limited, Millwey, Axminster, Devon, EX13 5US, UK
1. Mérési beállítások
1. Mérési beállítások
2. Mentés / betöltés, fájlok mentése
2. Mentés / betöltés, fájlok mentése
3. Jelölők
4. Érdeklődési területek (eng. Region of Interest, ROI)
4. Érdeklődési területek (eng. Region of Interest, ROI)
4. Érdeklődési területek (eng. Region of Interest, ROI)
5. A PORH protokoll rögzítése
A mérést szobahőmérsékleten (23,5 ± 0,5 ° C) végezzük.
• Mérés előtt az alanynak 30 perces akklimatizálódáson kell keresztülmennie a helyiségben,
ahol a mérést úgy végezzük, hogy elkerüljük a véráramlás változásait, amelyek az adatgyűjtés
során felmerülő hőmérsékletváltozások miatt jelentkezhetnek
• A mérések során az alanyok fekvő helyzetben voltak
• A készülék szondája a vizsgázó alkarjára van rögzítve, 13-15 cm-rel a csukló fölött (a látható
vénák elkerülése érdekében) az eszköz gyártójának által biztosított ragasztótartóval.
• Az alkar helyén, amelyen az eszköz 5 és 10 közötti perfúziós egység (PU) áramlást mutat, úgy
van elrendezve, hogy a mérések egységesek legyenek
5. A PORH protokoll rögzítése
Ha ismétlődő vizsgálatokat végzünk egyes alanyoknál, akkor az eszköz szondájának helyét meg
kell jelölni, hogy elkerülhető legyen az alkar véráramának heterogenitása következtében
bekövetkező változások.
Annak érdekében, hogy elkerülhető legyen a felvételben megjelenő zavarások, az alany keze
olyan párnába kerül, megy megakadáloyzza a mozgását,, mivel a készülék rendkívül érzékeny a
legkisebb mozgásra.
Ugyanezen okból kifolyólag a válaszadót tájékoztatni kell arról, hogy szigorúan mozdulatlan
maradjon az arthropathia elkerülése érdekében.
5. A PORH protokoll rögzítése
• A mérés a bázisáramlás 5 perces rögzítésével kezdődik
• Ezután a felkar fölötti mandzsetta 30-50 mmHg-ra emelkedik a vizsgázó szisztolés nyomása felett,
hogy megállítsa az áramlást a brachialis artériában
• Az első okklúzió 1 percig tart
• Ezután kiengedjük a levegőt a mandzsettából, és követjük a monitoron megjelenő reaktív
hipermeasokat
• A befejezés után 10 percnyi bázisáramlás folytatódik
• Ezután egy második elzáródás következik be 2 percig
• A mandzsetta kiengedésé után a második elzáródás után 10 perc bazális áramlás folytatódik
• Ezután egy harmadik elzáródást hajtunk végre, mely 3 percig tart
• A harmadik elzáródás után 10 perc a bázisáramlás folytatódik.
• Ezzel a mérés befejeződik.
5. A PORH protokoll rögzítése
5. ábra. Sematikus protokollok.
Eszéki Orvostudományi Kar Sportélettani
intézet.
6. Adatelemzés
• A véráramlás változása tetszőleges egységben (PU) fejeződik ki.
• Annak érdekében, hogy meghatározzuk az áramlás relatív változását a poszt-okklúziós
hiperémia során, az adatokat a 'görbe alatti terület (AUC) alatt fejezzük ki a bazális áramlás,
az elzáródás és a reperfúzió során.
6. ábra: A bőr mikrocirkulációjának áramlási mérése LDF
módszerrel.
(Forrás: Cavy A, Cosic A, Jukic I, Jelakovic B, Lombard JH,
Phillips SA, Seric V, Mihaljevic I, Drenjancevic I. A ciklo-
oxigenáz-1 szerepe a magas sótartalmú étrend-indukált
mikrovaszkuláris diszfunkcióban az emberekben. J Physiol.,
2015. december 15., 593 (24): 5313-24. Doi: 10.1113 /
JP271631.
6. Adatelemzés
6. Adatelemzés
6. Adatelemzés
• Ugyanez az eljárás megismétlődik az elzáródás (1 perc) és a reperfúzió (1 perc)
esetén.
6. Adatelemzés
• Ugyanez az eljárás megismétlődik az elzáródás (1 perc) és a reperfúzió (1 perc)
esetén.
6. Adatelemzés
• Mivel az áramlás nem éri el a nulla értéket, még akkor is, ha a perfúzió hiányzik, az áramlási
értékeket százalékos formában fejezzük ki egy bizonyos összehasonlítóhoz (ebben az esetben a
bazális áramláshoz) viszonyítva.
• Meghatároztuk az áramlás sebességét az elzáródás és a reperfúzió során az alapáramhoz
viszonyítva
• A végeredmény az áramlás változásának százalékában kifejezve az elzáródás és a reperfúzió
viszonyában az alapáramhoz viszonyítva (R-O)
• Ugyanezt az eljárást megismételjük 2 perc PORH és 3 perc PORH esetén, 2 perces PORH jelzéssel,
ami ROI-t jelez 2 percig, és 3 perc PORH ROI-t 3 percig
7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
8. Irodalomjegyzék
Agarwal SC, Allen J, Murray A, Purcell IF. Comparative
reproducibility of dermal microvascular blood flow changes in
response to acetylcholine iontophoresis, hyperthermia and
reactive hyperaemia. Physiol Meas 31: 1–11, 2010.
Ahn H, Johansson K, Lundgren O, Nilsson GE. In vivo evaluation of
signal processors for laser Doppler tissue flowmeters. Med Biol
Eng Comput 25:207–211, 1987.
Antonios TF, Singer DR, Markandu ND, Mortimer PS, MacGregor
GA. Structural skin capillary rarefaction in essential hypertension.
Hypertension 33: 998–1001, 1999.
Berghoff M, Kathpal M, Kilo S, Hilz MJ, Freeman R. Vascular and
neural mechanisms of ACh-mediated vasodilation in the forearm
cutaneous microcirculation. J Appl Physiol 92: 780–788, 2002.
Blaise S, Hellmann M, Roustit M, Isnard S, Cracowski JL. Oral
sildenafil increases skin hyperaemia induced by iontophoresis of
sodium nitroprusside in healthy volunteers. Br J Pharmacol 160:
1128–1134, 2010.
Cankar K, Finderle Z. Gender differences in cutaneous vascular
and autonomic nervous response to local cooling. Clin Auton Res
13: 214–220, 2003.
Celermajer DS, Sorensen KE, Gooch VM, Spiegelhalter DJ, Miller
OI, Sullivan ID, Lloyd JK, Deanfield JE Non-invasive detection of
endothelial dysfunction in children and adults at risk of
atherosclerosis. Lancet. 1992; 340:1111–1115.
Chang CH, Tsai RK, Wu WC, Kuo SL, Yu HS. Use of dynamic
capillaroscopy for studying cutaneous microcirculation in patients
with diabetes mellitus. Microvasc Res 53: 121–127, 1997.
Charkoudian N. Skin blood flow in adult human thermoregulation:
how it works, when it does not, and why. Mayo Clin Proc 78: 603–
612, 2003.
Cracowski JL, Minson CT, Salvat-Melis M, Halliwill JR.
Methodological issues in the assessment of skin microvascular
endothelial function in humans. Trends Pharmacol Sci 27: 503–
508, 2006.
Dalle-Ave A, Kubli S, Golay S, Delachaux A, Liaudet L, Waeber B,
Feihl F. Acetylcholine-induced vasodilation and reactive
hyperemia are not affected by acute cyclo-oxygenase inhibition in
human skin. Microcirculation 11: 327–336, 2004.
Drexler H. Endothelial dysfunction: clinical implications. Prog
Cardiovasc Dis 1997; 39:287-324.
Durand S, Fromy B, Bouye P, Saumet JL, Abraham P. Current-
induced vasodilation during water iontophoresis (5 min, 0.10 mA)
is delayed from current onset and involves aspirin sensitive
mechanisms. J Vasc Res 39: 59–71, 2002.
Durand S, Tartas M, Bouye P, Koitka A, Saumet JL, Abraham P.
Prostaglandins participate in the late phase of the vascular
response to acetylcholine iontophoresis in humans. J Physiol 561:
811–819, 2004.
Feihl F, Liaudet L, Waeber B, Levy BI. Hypertension: a disease of
the microcirculation? Hypertension 48: 1012–1017, 2006.
Ferrell WR, Ramsay JE, Brooks N, Lockhart JC, Dickson S, McNeece
GM, Greer IA, Sattar N. Elimination of electrically induced
iontophoretic artefacts: implications for non-invasive assessment
of peripheral microvascular function. J Vasc Res 39: 447–455,
2002.
Flammer AJ, Anderson T, Celermajer DS, Creager MA, Deanfield J,
Ganz P, Hamburg NM, Lüscher TF, Shechter M, Taddei S, Vita JA,
Lerman A. The assessment of endothelial function: from research
into clinical practice. Circulation. 2012 Aug 7;126(6):753-67. doi:
10.1161/CIRCULATIONAHA
Flammer AJ, Luscher TF. Three decades of endothelium research:
from the detection of nitric oxide to the everyday implementation
of endothelial function measurements in cardiovascular diseases.
Swiss Med Wkly. 2010; 140:w13122.
Foerster J, Kuerth A, Niederstrasser E, Krautwald E, Pauli R, Paulat
R, Eweleit M, Riemekasten G, Worm M. A coldresponse index for
the assessment of Raynaud’s phenomenon. J Dermatol Sci 45:
113–120, 2007.
Holowatz LA, Thompson CS, Minson CT, Kenney WL. Mechanisms
of acetylcholine-mediated vasodilatation in young and aged
human skin. J Physiol 563:965–973, 2005.
Johnson JM, Kellogg DL Jr. Local thermal control of the human
cutaneous circulation. J Appl Physiol 109: 1229–1238, 2010.
Kalia YN, Naik A, Garrison J, Guy RH. Iontophoretic drug delivery.
Adv Drug Deliv Rev 56: 619–658, 2004.
Kruger A, Stewart J, Sahityani R, O’Riordan E, Thompson C, Adler
S, Garrick R, Vallance P, Goligorsky MS. Laser Doppler flowmetry
detection of endothelial dysfunction in end-stage renal disease
patients: correlation with cardiovascular risk. Kidney Int 70: 157–
164, 2006.
Larkin SW, Williams TJ. Evidence for sensory nerve involvement in
cutaneous reactive hyperemia in humans. Circ Res 73: 147–154,
1993.
8. Irodalomjegyzék
Levy BI, Schiffrin EL, Mourad JJ, Agostini D, Vicaut E, Safar ME,
Struijker-Boudier HA. Impaired tissue perfusion: a pathology
common to hypertension, obesity, and diabetes mellitus.
Circulation 118: 968–976, 2008.
Linder L, Kiowski W, Bühler FR, Lüscher TF. Indirect evidence for
release of endothelium-derived relaxing factor in human forearm
circulation in vivo: blunted response in essential hypertension.
Circulation. 1990; 81:1762–1767.
Lorenzo S, Minson CT. Human cutaneous reactive hyperaemia:
role of BKCa channels and sensory nerves. J Physiol 585:295–303,
2007.
Ludmer PL, Selwyn AP, Shook TL, Wayne RR, Mudge GH,
Alexander RW, Ganz. Paradoxical vasoconstriction induced by
acetylcholine in atherosclerotic coronary arteries. N Engl J Med.
1986 Oct 23;315(17):1046-51.
Lutolf O, Chen D, Zehnder T, Mahler F. Influence of local finger
cooling on laser Doppler flux and nailfold capillary blood flow
velocity in normal subjects and in patients with Raynaud’s
phenomenon. Microvasc Res 46: 374–382, 1993.
Manual Version: moorVMS-LDF User Manual (Issue 10 English),
Revision Date: 2017-05-25. ©2017 Moor Instruments Limited,
Millwey, Axminster, Devon, EX13 5HU, UK.
Maver J, Strucl M. Microvascular reactivity in normotensive
subjects with a familial predisposition to hypertension. Microvasc
Res 60: 241–248, 2000.
Medow MS, Taneja I, Stewart JM. Cyclooxygenase and nitric oxide
synthase dependence of cutaneous reactive hyperemia in
humans. Am J Physiol Heart Circ Physiol 293: H425–H432, 2007.
Minson CT, Berry LT, Joyner MJ. Nitric oxide and neurally
mediated regulation of skin blood flow during local heating. J Appl
Physiol 91: 1619–1626, 2001.
Noon JP, Walker BR, Hand MF, Webb DJ. Studies with
iontophoretic administration of drugs to human dermal vessels in
vivo: cholinergic vasodilatation is mediated by dilator prostanoids
rather than nitric oxide. Br J Clin Pharmacol 45: 545–550, 1998.
Panza JA, Quyyumi AA, Brush JE Jr, Epstein SE. Abnormal
endothelium-dependent vascular relaxation in patients with
essential hypertension. N Engl J Med. 1990 Jul 5;323(1):22-7
Roustit M, Blaise S, Cracowski JL. Sodium nitroprusside
iontophoresis on the finger pad does not consistently increase
skin blood flow in healthy controls and patients with systemic
sclerosis. Microvasc Res 77: 260–264, 2009.
Roustit M, Blaise S, Millet C, Cracowski JL. Reproducibility and
methodological issues of skin post-occlusive and thermal
hyperemia assessed by single-point laser Doppler flowmetry.
Microvasc Res 79:102–108, 2010.
Roustit M, Cracowski JL. Non-invasive assessment of skin
microvascular function in humans: an insight into methods.
Microcirculation. 2012 Jan;19(1):47-64. doi: 10.1111/j.1549-
8719.2011.00129.x.
Roustit M, Maggi F, Isnard S, Hellmann M, Bakken B, Cracowski JL.
Reproducibility of a local cooling test to assess microvascular
function in human skin. Microvasc Res 79: 34–39, 2010c.
Roustit M, Millet C, Blaise S, Dufournet B, Cracowski JL. Excellent
reproducibility of laser speckle contrast imaging to assess skin
microvascular reactivity. Microvasc Res 80: 505–511, 2010a.
Stern MD. In vivo evaluation of microcirculation by coherent light
scattering. Nature 254: 56–58, 1975.
Turner J, Belch JJ, Khan F. Current concepts in assessment of
microvascular endothelial function using laser Doppler imaging
and iontophoresis. Trends Cardiovasc Med 18: 109–116, 2008.
Wong BJ, Wilkins BW, Holowatz LA, Minson CT. Nitric oxide
synthase inhibition does not alter the reactive hyperemic
response in the cutaneous circulation. J Appl Physiol 95: 504–510,
Yamamoto-Suganuma R, Aso Y. Relationship between post-
occlusive forearm skin reactive hyperaemia and vascular disease
in patients with Type 2 diabetes – a novel index for detecting
micro- and macrovascular dysfunction using laser Doppler
flowmetry. Diabet Med 26: 83–88, 2009.
Yvonne-Tee GB, Rasool AH, Halim AS, Rahman AR. Reproducibility
of different laser Doppler fluximetry parameters of postocclusive
reactive hyperemia in human forearm skin. J Pharmacol Toxicol
Methods 52: 286–292, 2005.
Yvonne-Tee GB, Rasool AH, Halim AS, Wong AR, Rahman AR.
Method optimization on the use of postocclusive hyperemia
model to assess microvascular function. Clin Hemorheol Microcirc
38:119–133, 2008.

More Related Content

More from improvemed

Isolated blood vessels
Isolated blood vesselsIsolated blood vessels
Isolated blood vessels
improvemed
 
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
improvemed
 
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONSNotes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
improvemed
 
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposesNotes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
improvemed
 
Notes for
Notes for Notes for
Notes for
improvemed
 
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresis
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresisNotes for The principle and performance of capillary electrophoresis
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresis
improvemed
 
Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...
Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...
Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...
improvemed
 
Notes for Cell Culture Basic Techniques
Notes for Cell Culture Basic TechniquesNotes for Cell Culture Basic Techniques
Notes for Cell Culture Basic Techniques
improvemed
 
Big datasets
Big datasetsBig datasets
Big datasets
improvemed
 
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasetsSystems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
improvemed
 
Systems biology for medical students/Systems medicine
Systems biology for medical students/Systems medicineSystems biology for medical students/Systems medicine
Systems biology for medical students/Systems medicine
improvemed
 
Use cases
Use casesUse cases
Use cases
improvemed
 
Basic course for computer based methods
Basic course for computer based methodsBasic course for computer based methods
Basic course for computer based methods
improvemed
 
Medicine as data science
Medicine as data scienceMedicine as data science
Medicine as data science
improvemed
 
Basic Immunology 21 26
Basic Immunology 21 26Basic Immunology 21 26
Basic Immunology 21 26
improvemed
 
Basic Immunology 11-20
Basic Immunology 11-20Basic Immunology 11-20
Basic Immunology 11-20
improvemed
 
Basic immunology 1 10
Basic immunology 1 10Basic immunology 1 10
Basic immunology 1 10
improvemed
 
Primjeri upotrebe
Primjeri upotrebePrimjeri upotrebe
Primjeri upotrebe
improvemed
 
Osnovni tečaj računalnih metoda
Osnovni tečaj računalnih metoda  Osnovni tečaj računalnih metoda
Osnovni tečaj računalnih metoda
improvemed
 
Medicina kao znanost podataka
Medicina kao znanost podatakaMedicina kao znanost podataka
Medicina kao znanost podataka
improvemed
 

More from improvemed (20)

Isolated blood vessels
Isolated blood vesselsIsolated blood vessels
Isolated blood vessels
 
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
 
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONSNotes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
 
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposesNotes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
 
Notes for
Notes for Notes for
Notes for
 
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresis
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresisNotes for The principle and performance of capillary electrophoresis
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresis
 
Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...
Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...
Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...
 
Notes for Cell Culture Basic Techniques
Notes for Cell Culture Basic TechniquesNotes for Cell Culture Basic Techniques
Notes for Cell Culture Basic Techniques
 
Big datasets
Big datasetsBig datasets
Big datasets
 
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasetsSystems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
 
Systems biology for medical students/Systems medicine
Systems biology for medical students/Systems medicineSystems biology for medical students/Systems medicine
Systems biology for medical students/Systems medicine
 
Use cases
Use casesUse cases
Use cases
 
Basic course for computer based methods
Basic course for computer based methodsBasic course for computer based methods
Basic course for computer based methods
 
Medicine as data science
Medicine as data scienceMedicine as data science
Medicine as data science
 
Basic Immunology 21 26
Basic Immunology 21 26Basic Immunology 21 26
Basic Immunology 21 26
 
Basic Immunology 11-20
Basic Immunology 11-20Basic Immunology 11-20
Basic Immunology 11-20
 
Basic immunology 1 10
Basic immunology 1 10Basic immunology 1 10
Basic immunology 1 10
 
Primjeri upotrebe
Primjeri upotrebePrimjeri upotrebe
Primjeri upotrebe
 
Osnovni tečaj računalnih metoda
Osnovni tečaj računalnih metoda  Osnovni tečaj računalnih metoda
Osnovni tečaj računalnih metoda
 
Medicina kao znanost podataka
Medicina kao znanost podatakaMedicina kao znanost podataka
Medicina kao znanost podataka
 

A vérerek véráramának és reaktivitásának mérése a bőr mikrocirkulációjában a lézer Doppler (LDF) módszerével

  • 1. Improved Medical Education in Basic Sciences for Better Medical Practicing ImproveMEd
  • 2. A vérerek véráramának és reaktivitásának mérése a bőr mikrocirkulációjában a lézer Doppler (LDF) módszerével Ana Stupin
  • 3. Az utóbbi évtizedekben számos funkcionális módszert fejlesztettek ki a human endothelium fiziológiai funkcióinak vizsgálatára és mérésére (Flammer & Luscher, 2010; Ludmer és mtsai, 1986) Intenzív tudományos kutatás a vaszkuláris fiziológia és a patofiziológia területén Ezeket a módszereket még nem alkalmazták hasznos diagnosztikai eszközként a mindennapi klinikai gyakorlatban Az endoteliális funkció tanulmányozására irányuló valamennyi megközelítés célja, hogy betekintést adjon a vaszkuláris / endoteliális funkciókba különböző helyeken (érrendszeri medencékben) és különböző típusú erekben (vezetőképes, rezisztens vérerek, mikrocirkuláció) Korai invazív módszerek (pl. Intracoronáris acetil-kolin infúzió), a kevésbé invazív / nem invazív recenter módszerek, és a perifériás keringés vizsgálatára irányulnak, mint a szisztémás keringés helyettesítője (Linder és mtsai., 1990, Panza és munkatársai, 1990; Celermajer és mtsai., 1992)
  • 4. Elérhetősége miatt a bőr tökéletes hely az emberi mikrocirkuláció működésének vizsgálatára (Roustit & Cracowski, 2012) A nyitott kérdés az, hogy a bőr mikrovaszkuláris funkciója reprezentatív-e, és más szervek mikrovaszkuláris funkciójának megfelelő mutatója Az alábbi három betegség esetben a bőr a mikrovaszkuláris funkció intenzív vizsgálatának helyévé vált az egészségben és a betegségben, beleértve a magas vérnyomást is (Antonios et al., 1999; Feihl et al., 2006), elhízás (Levy et al., 2006), cukorbetegség (Chang et al. 1997, Yamamoto-Suganuma és Aso, 2009), öregedés, vesebetegség (Kruger et al., 2006)
  • 5. A bőr mikrocirkulációjának gyakori vizsgálata a lézer Doppler (LD) használják. Az LD-technika alapja az, hogy a bőr mikrocirkulációjában az áramlási sebesség a lézersugárnak a mikrocirkulációs eritrocitából való elutasítása alapján változik, ami megváltoztatja a hullámhosszát (Doppler hatása) (Stern, 1975) A számítógépes program meghatározza az áramlási sebességet - a bőr fluxus indexe előtt, és nem a mikroflowban levő közvetlen áramlási sebességet - Az eredményeket tetszőleges egységekben (perfúziós egységek, PU, ​​1 PU = 10 mV) vagy CVC-ben (perfúziós index osztva artériás nyomás, mV / mmHg) fejezzük ki (147) Az LD-áramlásmérő (LDF) egy ponton és így kis térfogatban, de nagy mintavételi frekvenciával méri a véráramlást
  • 6. 1. ábra. Lézer Doppler áramlásmérés (LDF). Amikor a lézerfény a mozgó tárgyakról, például eritrocitákból tükröződik, a frekvencia megváltozik. A frekvencia változásának sebessége a mozgó objektum sebességétől függ (azaz minél nagyobb a véráramlás sebessége, annál nagyobb a frekvenciaváltozás, és annál nagyobb az áramlás értéke). A bőrszövet megvilágítására használt lézerfény a bőrön és az eritrocitákon szóródik. A szonda által összegyűjtött szétszórt fény olyan komponenst tartalmaz, amelyet nem változott meg, és a módosított frekvencia fénykomponensét sem változtatja meg. A két fénykomponens közötti különbséget a Doppler-eltolás frekvenciája (amplitúdója) egy fényérzékelő határozza meg. A fotoszenzorból származó áram az analóg és a digitális átalakításokon áthalad a Flux és a Conc értékek megadásához, amelyek a mozgás sebességét és a vér gyöngy koncentrációját jelzik.Izvor: Manual Version: moorVMS-LDF User Manual (Issue 10 English), Revision Date: 2017-05-25. ©2017 Moor Instruments Limited, Millwey, Axminster, Devon, EX13 5HU, UK.
  • 7. Gyakran említik, hogy az LDF módszert - a bőr perfúziójának és a véráramlás mérésének regionális pontosságából eredő térbeli változékonyságot mutat egy ponton (Roustit et al., 2010) Ez a probléma úgy küszöbölhető ki, hogy a lézer szondát mindig a bőrön azonos (jelölt) foltra kell helyezi, különösen akkor, ha a módszert ismétlődő mérésekben használják. A lézer Doppler jel és a mikrovaszkuláris áramlás közötti lineáris kapcsolat 0 és 300 ml / perc között volt 100 g szövetre vonatkoztatva (Ahn et al., 1987). Az LDF nem ad pontos áramlási sebességet (azaz ml / perc) !!!
  • 8. Az LDF a leggyakrabban a mikrovaszkuláris reaktivitás becslésére szolgál válaszul a különböző ingerekre (érrendszeri okklúzió, vazoaktív gyógyszerek, hőmérsékleti kihívások stb.). A bőr mikrocirkulációjában a vaszkuláris reaktivitás leggyakrabban használt vizsgálatai (Cracowski et al., 2006): • az okklúzió utáni reaktív hyperaemia (PORH) • vasoaktív gyógyszerek iontoforézise • a bőrön való hőmérséklet-változás - felmelegedés vagy hűtés
  • 9. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH) A poszt-okklúziós reaktív hiperémia (PORH) a véredény rövid távú elzáródása által okozott (mikro) érrendszeri véráram növekedése. A mikrovaszkuláris reaktivitás becslésére általánosan használt vizsgálat (Cracowski et al., 2006) A PORH kialakulását közvetítő mechanizmusok a bőr mikrocirkulációjában: • az érzékszervi idegek aktivitása a neurális axon reflexen keresztül (Larkin & Williams, 1993), • endotélfüggő vazodilatátorok előállítása • EDHF (Lorenzo & Minson, 2007), • a prosztaglandinok szerepe még nem teljesen tisztázott (Dalle-Ave et al., 2004; Medow et al., 2007). • A COX gátlása feltárja a PORH potenciális függőségét a NO-ra az emberi bőr mikrocirkulációjában (Medow et al., 2007). Ezt a módszert általában a mikrovaszkuláris reaktivitás értékelésére és tesztelésére használják, nem pedig a mikrovaszkuláris endoteliális funkció értékelésének közvetlen vizsgálataként (Roustit & Cracowski, 2012).
  • 10. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH) A PORH elemzés során számszerűsített paraméterek: Peak hyperemia • nyers adatokként vagy alapáram-függvényként fejezhető ki • a görbe alatti terület, • csúcsáram mínusz alapáram, vagy. t • a csúcs és az alapáram közötti relatív változás százalékban kifejezve [(csúcsáramlási sebesség) / bazális áramlás] x 100 • a csúcs perfúzió összehasonlítható az ún. 42 ° C-on vagy annál magasabb hőmérsékletű melegítéssel érhető maximális vazodilatáció (Charkoudian, 2003) A perfúzió csúcsáig tartó idő (csúcsidő) • jelentőségét a mikrovaszkuláris reaktivitás markerként még nem határozták meg
  • 11. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH) 2. ábra: A PORH elemzése során számszerűsített paraméterek (Roustit & Blaise, 2010; Roustit & Cracowski, 2012)
  • 12. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH) A PORH napközi reprodukálhatósága • változó, ha a PORH-t az LDF egy ponton méri • attól függ, hogy a bőrt melyik helyen helyezzük el, az adatot hogyan értelmezik, és mekkora a bőr alaphőmérsékletét. A PORH reprodukálhatóságát vizsgáló vizsgálatok közül a leggyakrabban az alkar gyapjúoldali oldalát használták (az eredmények következetlenek) • A reprodukálhatóság kiváló (6% -tól 22% -ig CV-ig), amikor a felvétel helyét pontosan jelezzük, és a szondát minden nap ugyanazon a helyen helyezzük el (Yvonne-Tee et al. 2005) • a jó reprodukálhatóságig (kb. 20% CV), amikor a szondát közel azonos helyen helyezték el, de teljesebb pontossággal (Agarwal et al., 2010) • a reprodukálhatóság gyenge, ha a szonda telepítési helyét napról-napra véletlenszerűen választottuk (CV> 40%) (Roustit et al., 2010) A szonda pontosan ugyanazon a helyen való elhelyezése a kulcsfontosságú tényező, amely javítja a PORH naponta történő reprodukálhatóságát (kiváló)
  • 13. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH) Bőr és környezet hőmérséklete A PORH felvétele során figyelembe kell venni a bőr és a környezeti hőmérséklet homogenizálását is (szoba). A hőmérséklet a bőr mikrocirkulációjában a bazális áramlási sebesség szabályozásában kulcsszerepet játszik (Roustit et al., 2010a) A PORH mérések elfogadható megismételhetősége (reprodukálhatósága), ha a bőr hőmérséklete a vizsgálat alatt 33 ° C-on tartott (Roustit et al., 2010)
  • 14. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH) A vaszkuláris elzáródás időtartama Különböző vizsgálatokban kifejezett nagy a heterogenitás a mérések tervezésében - különösen az érrendszeri elzáródás időtartamában (1-15 perc) (Yvonne-Tee et al., 2008) A brachialis artéria áramlás által közvetített dilatációs (FMD) áramlásának analógiája miatt a leggyakrabban használt vaszkuláris elzáródás 5 perc volt. Általában a vaszkuláris okklúzió rövidebb periódusait is használják A hosszabb érrendszeri elzáródás hozzájárul az ischaemia metabolitok (pl. Adenozin) felhalmozódásához, amelyek potenciálisan hozzájárulhatnak a hiperémiás véráramláshoz.
  • 15. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH) A mandzsetta nyomása, amely érrendszeri elzáródást okoz A különböző vizsgálatokban a mérések tervezésekor a kifejezett heterogenitás részben a mandzsettára kifejetett eltérő nyomásnak is köszönhető,, amely okklúziót okoz (160-220 mmHg) (Keymel et al., 2010) A leggyakrabban használt mandzsetta nyomás 30-50 mmHg-nál nagyobb, mint a PORH által mért szisztolés artériás nyomás.
  • 16. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH) Absztrakt Az LDF-rel mért PORH egy széles körben alkalmazott vizsgálat, amely általános (teljes) indexet ad a mikrovaszkuláris funkciókról, - a neurális axonális reflexekről, a COX-függő útvonalakról és az EDHF hatások kombinációjáról A vizsgálat során ügyelni kell arra, hogy elkerüljék a módszertani torzítást vagy a mérési hibát (elzáródás időtartama, alaphőmérséklet és adagolási pont) Annak ellenére, hogy a PORH az LDF-szel együtt jó és széles körben alkalmazható mikrovaszkuláris reaktivitásértékelő eszköz, ez a módszer még mindig szabványosítást igényel
  • 17. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP) Az iontoforézis a vasoaktív anyagok (töltött molekulák) nem-invazív transzdermális adagolásának módszere, kis teljesítményű elektromos árammal A módszer alkalmazása számos módszertani tényezőtől függ (Kalia et al 2004): • az alkalmazandó oldat koncentrációja és pH-ja, • az alkalmazott áramok erőssége, • iontoforézis és • a bőrfelület tulajdonságai (bőrvastagság, haj hajjal vagy anélkül)
  • 18. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP) LDF-sel kombinálva (Cracowski et al., 2006; Turner et al., 2008) iontoforézis-acetil-kolin (ACh) - teszt a bőr mikrocirkulációjának endotheli-függő vazodilatációjának értékelésére nátrium-nitro-pussid (SNP) - teszt a bőr mikrocirkulációjának endothelium-független értágulásának értékelésére Az ACh alkalmazás domináns endotélfüggő dilatációt okoz: • COX-függő metabolitok (bár az eredmények még mindig nem egyértelműek) (Durand et al., 2004; Holowatz et al., 2005) • A NO nem jár jelentős mértékben (Noon et al., 1998) kevésbé jelentős endothelium-független dilatáció • neurális axon reflex (Berghoff et al., 2002)
  • 19. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP) Az iontoforézissel kapcsolatos módszertani kérdések: ugyanaz az áram nemspecifikus vazodilatációt okozhat, amely zavarhatja a beadott gyógyszer vazodilatációs hatását Amely függ : • elektromos töltéstől, • (hasonló töltések esetén az ismételt alkalmazások több specifikus vazodilatációt okoznak, mint a folyamatos ionoforézis) (Durand et al., 2002) • az alkalmazott vazodilatátorok feloldására és hígítására használt részecskékről (pl. csapvíz, desztillált víz, ionmentesített víz, sóoldat); • a desztillált víz kifejezettebb, nem specifikus vasodilatációt okoz a villamos energiából, mint a sóoldat • Az ACh vagy SNP iontoforézis hasonló vazodilatációt okoz a bőr mikrocirkulációjában, függetlenül attól, hogy az ACh vagy az SNP desztillált vízben vagy fiziológiai oldatban oldódik-e (Farrell et al., 2002).
  • 20. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP) Az iontoforézissel kapcsolatos módszertani kérdések: b) a természetes bőrrezisztencia befolyásolhatja a vasoaktív anyag bejuttatását is • ajánlatos csökkenteni a bőr ellenállását az alkalmazás helyén • az epidermisz felületi rétegének enyhe eltávolítása ragasztószalaggal vagy alkohollal (Turner et al., 2008) c) a térbeli változékonyság befolyásolja az ACh vagy SNP-függő vazodilatáció reprodukálhatóságát • győződjön meg arról, hogy az ismétlődő méréseknél az alkalmazási hely megegyezik (Agarwal et al. 2010, Blaise et al., 2010) d) a vazodilatáció az iontoforézis helyétől függ • pl. az SNP által indukált dilatációt nem lehetett indukálni bárhol, hanem csak az ujj dorsalis oldalán (Roustit et al., 2009)
  • 21. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP) Absztrakt Az ACh és az SNP ionoforézisét széles körben alkalmazzák a bőr mikrocirkulációjának endotél- függő és független vazodilatációjának értékelésére Az eredmények értelmezésekor figyelembe kell venni az ezekben a válaszokban szereplő mechanizmusok összetettségét Az ionoforézissel végzett vizsgálatokat gondosan meg kell tervezni, hogy csökkentsük a jelenlegi nemspecifikus dilatációt: • kis teljesítményű árammal • a vazoaktív anyagok oldódási és hígító közegeként sóoldatot (a desztillált víz helyett) kell használni • A bőrfelületen, ahol iontoforézist végeznek, alkohollal meg kell tisztítani a természetes bőrrezisztencia csökkentése céljából, amennyire csak lehetséges
  • 22. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH) A helyi termikus hiperémia (LTH) a bőr perifériás mikrovaszkuláris reakciója a helyi felmelegedésre Az LTH által közvetített mechanizmusok (Cracowski et al., 2006): • neurális axon reflex i • o NO-függő endoteliális vasodilatáció Az LTH-t jellemezték (Minson és mtsai., 2001): • Kezdeti csúcs hyperemia (az első 5 percben) - Az érzékszervi idegtől függ • fennmaradó fennsík - többnyire a NO-tól függ
  • 23. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH) Plato szakasz 20-30 perccel a fűtés megkezdése után jelenik meg (Minson, 2010), és amikor a fűtési időszak meghosszabbodik, a "eltávolítás" (azaz a perfúzió lassú visszaállítása az alap alapáramlási vonalhoz) előfordulása figyelhető meg. 3. ábra. Helyi termikus hiperémia (LTH). (Roustit & Cracowski, 2012)
  • 24. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH) Az LTH két független fázisának köszönhetően az adatelemzés során különböző paramétereket lehet számszerűsíteni Az LTH értelmezés leggyakrabban használt paraméterei: • csúcs perfúzió (axon reflextől függő vazodilatáció) és • platina perfúzió (NO-tól függő vazodilatáció). Az adatok kifejezhetők: • "sor" formájában perfúziós egységként vagy a • CVC, amely perfúziót jelent a bazális mellékfolyadékhoz vagy perfúzióhoz viszonyítva a maximális vazodilatációhoz képest Érdekes, hogy az endothel funkció általános mutatójaként a teljes mérés görbe alatti területet (AUC) gyakran használják, annak ellenére, hogy ezáltal elrejti az axonális reflexek hatását ebben a vazodilatációban (Kruger et al., 2006)
  • 25. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH) Az LDF-ben rögzített LTH reprodukálhatósága a lézeres szonda helyétől függ (Roustit et al., 2010) elfogadható napközbeni reprodukálhatóság, ha az LTH-t az ujjakon mérik Alacsony a reprodukálhatóság, ha az alkaron mérjük az LTH-t (Roustit & Cracowski, 2012 ref 114) Egyes szerzők sokkal jobb reprodukálhatóságról beszélnek az alkaron, ha az ún. integratív szondát használnak
  • 26. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH) Heterogenitás az LTH-t használó tanulmányok tervezésében: • a helyi felmelegedés más hőmérséklete (42-43 ° C) (Johnson et al., 2010) • egy másik típusú eszköz, amelyet a bőr melegítésére használnak (Roustit & Cracowski, 2012) Az egészséges személyek a helyi felmelegedés 44 ° C-on jól tolerálták, míg a csökkent mikrovaszkuláris funkciójú betegek (pl. Szisztémás szklerózis) fájdalomról vagy fulladásérzetről panaszkodtak a felmelegedés helyén.
  • 27. 4. Helyi hűtés A helyi hűtés olyan hőmérséklet-inger, amelyet gyakran használnak az LDF-rel együt Különböző hűtési módszerek: • kéz vagy ujj hideg vízbe merítése (Maver & Strucl, 2000), • fagyasztó patronok tekercselése (Cankar & Finderle, 2003) vagy • szén-dioxid használata (Lutolf et al., 1993) Egyszerűsége miatt a leggyakrabban használt hűtési módszer a hideg vízbe merítés mind egészséges, mind beteg emberek esetében (Foerster et al., 2007)
  • 28. 4. Helyi hűtés A helyi bőrhűtés stimulálja (Johnson & Kellogg, 2010): • A kezdeti vazokonstrikció (a norepinefrintől függően), • majd az átmeneti vazodilatáció, • és végső soron meghosszabbodott vazokonstrikció (a norepinefrintől függően és a NO rendszer gátlása) 4. ábra. Helyi hűtés. (Roustit & Cracowski, 2012)
  • 29. 4. Helyi hűtés A módszer legjobb reprodukálhatósága: • amikor a hűtési protokoll 30 percig tart 15 ° C-on (Roustit et al., 2010c)
  • 30. Post-Occlusive reaktív hiperémia (PORH) rögzítése lézer Doppler (LDF) segítségével Példa az Orvostudományi Kar és a Klinikai Központ fiziológiai és Sportélettani Intézetéből Használt eszköz és szoftver: moorVMS-LDF Monitor és moorVMS-PC v4.0, Moor Instruments Limited, Millwey, Axminster, Devon, EX13 5US, UK
  • 33. 2. Mentés / betöltés, fájlok mentése
  • 34. 2. Mentés / betöltés, fájlok mentése
  • 36. 4. Érdeklődési területek (eng. Region of Interest, ROI)
  • 37. 4. Érdeklődési területek (eng. Region of Interest, ROI)
  • 38. 4. Érdeklődési területek (eng. Region of Interest, ROI)
  • 39. 5. A PORH protokoll rögzítése A mérést szobahőmérsékleten (23,5 ± 0,5 ° C) végezzük. • Mérés előtt az alanynak 30 perces akklimatizálódáson kell keresztülmennie a helyiségben, ahol a mérést úgy végezzük, hogy elkerüljük a véráramlás változásait, amelyek az adatgyűjtés során felmerülő hőmérsékletváltozások miatt jelentkezhetnek • A mérések során az alanyok fekvő helyzetben voltak • A készülék szondája a vizsgázó alkarjára van rögzítve, 13-15 cm-rel a csukló fölött (a látható vénák elkerülése érdekében) az eszköz gyártójának által biztosított ragasztótartóval. • Az alkar helyén, amelyen az eszköz 5 és 10 közötti perfúziós egység (PU) áramlást mutat, úgy van elrendezve, hogy a mérések egységesek legyenek
  • 40. 5. A PORH protokoll rögzítése Ha ismétlődő vizsgálatokat végzünk egyes alanyoknál, akkor az eszköz szondájának helyét meg kell jelölni, hogy elkerülhető legyen az alkar véráramának heterogenitása következtében bekövetkező változások. Annak érdekében, hogy elkerülhető legyen a felvételben megjelenő zavarások, az alany keze olyan párnába kerül, megy megakadáloyzza a mozgását,, mivel a készülék rendkívül érzékeny a legkisebb mozgásra. Ugyanezen okból kifolyólag a válaszadót tájékoztatni kell arról, hogy szigorúan mozdulatlan maradjon az arthropathia elkerülése érdekében.
  • 41. 5. A PORH protokoll rögzítése • A mérés a bázisáramlás 5 perces rögzítésével kezdődik • Ezután a felkar fölötti mandzsetta 30-50 mmHg-ra emelkedik a vizsgázó szisztolés nyomása felett, hogy megállítsa az áramlást a brachialis artériában • Az első okklúzió 1 percig tart • Ezután kiengedjük a levegőt a mandzsettából, és követjük a monitoron megjelenő reaktív hipermeasokat • A befejezés után 10 percnyi bázisáramlás folytatódik • Ezután egy második elzáródás következik be 2 percig • A mandzsetta kiengedésé után a második elzáródás után 10 perc bazális áramlás folytatódik • Ezután egy harmadik elzáródást hajtunk végre, mely 3 percig tart • A harmadik elzáródás után 10 perc a bázisáramlás folytatódik. • Ezzel a mérés befejeződik.
  • 42. 5. A PORH protokoll rögzítése 5. ábra. Sematikus protokollok. Eszéki Orvostudományi Kar Sportélettani intézet.
  • 43. 6. Adatelemzés • A véráramlás változása tetszőleges egységben (PU) fejeződik ki. • Annak érdekében, hogy meghatározzuk az áramlás relatív változását a poszt-okklúziós hiperémia során, az adatokat a 'görbe alatti terület (AUC) alatt fejezzük ki a bazális áramlás, az elzáródás és a reperfúzió során. 6. ábra: A bőr mikrocirkulációjának áramlási mérése LDF módszerrel. (Forrás: Cavy A, Cosic A, Jukic I, Jelakovic B, Lombard JH, Phillips SA, Seric V, Mihaljevic I, Drenjancevic I. A ciklo- oxigenáz-1 szerepe a magas sótartalmú étrend-indukált mikrovaszkuláris diszfunkcióban az emberekben. J Physiol., 2015. december 15., 593 (24): 5313-24. Doi: 10.1113 / JP271631.
  • 46. 6. Adatelemzés • Ugyanez az eljárás megismétlődik az elzáródás (1 perc) és a reperfúzió (1 perc) esetén.
  • 47. 6. Adatelemzés • Ugyanez az eljárás megismétlődik az elzáródás (1 perc) és a reperfúzió (1 perc) esetén.
  • 48. 6. Adatelemzés • Mivel az áramlás nem éri el a nulla értéket, még akkor is, ha a perfúzió hiányzik, az áramlási értékeket százalékos formában fejezzük ki egy bizonyos összehasonlítóhoz (ebben az esetben a bazális áramláshoz) viszonyítva. • Meghatároztuk az áramlás sebességét az elzáródás és a reperfúzió során az alapáramhoz viszonyítva • A végeredmény az áramlás változásának százalékában kifejezve az elzáródás és a reperfúzió viszonyában az alapáramhoz viszonyítva (R-O) • Ugyanezt az eljárást megismételjük 2 perc PORH és 3 perc PORH esetén, 2 perces PORH jelzéssel, ami ROI-t jelez 2 percig, és 3 perc PORH ROI-t 3 percig
  • 49. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
  • 50. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
  • 51. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
  • 52. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
  • 53. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
  • 54. 8. Irodalomjegyzék Agarwal SC, Allen J, Murray A, Purcell IF. Comparative reproducibility of dermal microvascular blood flow changes in response to acetylcholine iontophoresis, hyperthermia and reactive hyperaemia. Physiol Meas 31: 1–11, 2010. Ahn H, Johansson K, Lundgren O, Nilsson GE. In vivo evaluation of signal processors for laser Doppler tissue flowmeters. Med Biol Eng Comput 25:207–211, 1987. Antonios TF, Singer DR, Markandu ND, Mortimer PS, MacGregor GA. Structural skin capillary rarefaction in essential hypertension. Hypertension 33: 998–1001, 1999. Berghoff M, Kathpal M, Kilo S, Hilz MJ, Freeman R. Vascular and neural mechanisms of ACh-mediated vasodilation in the forearm cutaneous microcirculation. J Appl Physiol 92: 780–788, 2002. Blaise S, Hellmann M, Roustit M, Isnard S, Cracowski JL. Oral sildenafil increases skin hyperaemia induced by iontophoresis of sodium nitroprusside in healthy volunteers. Br J Pharmacol 160: 1128–1134, 2010. Cankar K, Finderle Z. Gender differences in cutaneous vascular and autonomic nervous response to local cooling. Clin Auton Res 13: 214–220, 2003. Celermajer DS, Sorensen KE, Gooch VM, Spiegelhalter DJ, Miller OI, Sullivan ID, Lloyd JK, Deanfield JE Non-invasive detection of endothelial dysfunction in children and adults at risk of atherosclerosis. Lancet. 1992; 340:1111–1115. Chang CH, Tsai RK, Wu WC, Kuo SL, Yu HS. Use of dynamic capillaroscopy for studying cutaneous microcirculation in patients with diabetes mellitus. Microvasc Res 53: 121–127, 1997. Charkoudian N. Skin blood flow in adult human thermoregulation: how it works, when it does not, and why. Mayo Clin Proc 78: 603– 612, 2003. Cracowski JL, Minson CT, Salvat-Melis M, Halliwill JR. Methodological issues in the assessment of skin microvascular endothelial function in humans. Trends Pharmacol Sci 27: 503– 508, 2006. Dalle-Ave A, Kubli S, Golay S, Delachaux A, Liaudet L, Waeber B, Feihl F. Acetylcholine-induced vasodilation and reactive hyperemia are not affected by acute cyclo-oxygenase inhibition in human skin. Microcirculation 11: 327–336, 2004. Drexler H. Endothelial dysfunction: clinical implications. Prog Cardiovasc Dis 1997; 39:287-324. Durand S, Fromy B, Bouye P, Saumet JL, Abraham P. Current- induced vasodilation during water iontophoresis (5 min, 0.10 mA) is delayed from current onset and involves aspirin sensitive mechanisms. J Vasc Res 39: 59–71, 2002. Durand S, Tartas M, Bouye P, Koitka A, Saumet JL, Abraham P. Prostaglandins participate in the late phase of the vascular response to acetylcholine iontophoresis in humans. J Physiol 561: 811–819, 2004. Feihl F, Liaudet L, Waeber B, Levy BI. Hypertension: a disease of the microcirculation? Hypertension 48: 1012–1017, 2006. Ferrell WR, Ramsay JE, Brooks N, Lockhart JC, Dickson S, McNeece GM, Greer IA, Sattar N. Elimination of electrically induced iontophoretic artefacts: implications for non-invasive assessment of peripheral microvascular function. J Vasc Res 39: 447–455, 2002. Flammer AJ, Anderson T, Celermajer DS, Creager MA, Deanfield J, Ganz P, Hamburg NM, Lüscher TF, Shechter M, Taddei S, Vita JA, Lerman A. The assessment of endothelial function: from research into clinical practice. Circulation. 2012 Aug 7;126(6):753-67. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA Flammer AJ, Luscher TF. Three decades of endothelium research: from the detection of nitric oxide to the everyday implementation of endothelial function measurements in cardiovascular diseases. Swiss Med Wkly. 2010; 140:w13122. Foerster J, Kuerth A, Niederstrasser E, Krautwald E, Pauli R, Paulat R, Eweleit M, Riemekasten G, Worm M. A coldresponse index for the assessment of Raynaud’s phenomenon. J Dermatol Sci 45: 113–120, 2007. Holowatz LA, Thompson CS, Minson CT, Kenney WL. Mechanisms of acetylcholine-mediated vasodilatation in young and aged human skin. J Physiol 563:965–973, 2005. Johnson JM, Kellogg DL Jr. Local thermal control of the human cutaneous circulation. J Appl Physiol 109: 1229–1238, 2010. Kalia YN, Naik A, Garrison J, Guy RH. Iontophoretic drug delivery. Adv Drug Deliv Rev 56: 619–658, 2004. Kruger A, Stewart J, Sahityani R, O’Riordan E, Thompson C, Adler S, Garrick R, Vallance P, Goligorsky MS. Laser Doppler flowmetry detection of endothelial dysfunction in end-stage renal disease patients: correlation with cardiovascular risk. Kidney Int 70: 157– 164, 2006. Larkin SW, Williams TJ. Evidence for sensory nerve involvement in cutaneous reactive hyperemia in humans. Circ Res 73: 147–154, 1993.
  • 55. 8. Irodalomjegyzék Levy BI, Schiffrin EL, Mourad JJ, Agostini D, Vicaut E, Safar ME, Struijker-Boudier HA. Impaired tissue perfusion: a pathology common to hypertension, obesity, and diabetes mellitus. Circulation 118: 968–976, 2008. Linder L, Kiowski W, Bühler FR, Lüscher TF. Indirect evidence for release of endothelium-derived relaxing factor in human forearm circulation in vivo: blunted response in essential hypertension. Circulation. 1990; 81:1762–1767. Lorenzo S, Minson CT. Human cutaneous reactive hyperaemia: role of BKCa channels and sensory nerves. J Physiol 585:295–303, 2007. Ludmer PL, Selwyn AP, Shook TL, Wayne RR, Mudge GH, Alexander RW, Ganz. Paradoxical vasoconstriction induced by acetylcholine in atherosclerotic coronary arteries. N Engl J Med. 1986 Oct 23;315(17):1046-51. Lutolf O, Chen D, Zehnder T, Mahler F. Influence of local finger cooling on laser Doppler flux and nailfold capillary blood flow velocity in normal subjects and in patients with Raynaud’s phenomenon. Microvasc Res 46: 374–382, 1993. Manual Version: moorVMS-LDF User Manual (Issue 10 English), Revision Date: 2017-05-25. ©2017 Moor Instruments Limited, Millwey, Axminster, Devon, EX13 5HU, UK. Maver J, Strucl M. Microvascular reactivity in normotensive subjects with a familial predisposition to hypertension. Microvasc Res 60: 241–248, 2000. Medow MS, Taneja I, Stewart JM. Cyclooxygenase and nitric oxide synthase dependence of cutaneous reactive hyperemia in humans. Am J Physiol Heart Circ Physiol 293: H425–H432, 2007. Minson CT, Berry LT, Joyner MJ. Nitric oxide and neurally mediated regulation of skin blood flow during local heating. J Appl Physiol 91: 1619–1626, 2001. Noon JP, Walker BR, Hand MF, Webb DJ. Studies with iontophoretic administration of drugs to human dermal vessels in vivo: cholinergic vasodilatation is mediated by dilator prostanoids rather than nitric oxide. Br J Clin Pharmacol 45: 545–550, 1998. Panza JA, Quyyumi AA, Brush JE Jr, Epstein SE. Abnormal endothelium-dependent vascular relaxation in patients with essential hypertension. N Engl J Med. 1990 Jul 5;323(1):22-7 Roustit M, Blaise S, Cracowski JL. Sodium nitroprusside iontophoresis on the finger pad does not consistently increase skin blood flow in healthy controls and patients with systemic sclerosis. Microvasc Res 77: 260–264, 2009. Roustit M, Blaise S, Millet C, Cracowski JL. Reproducibility and methodological issues of skin post-occlusive and thermal hyperemia assessed by single-point laser Doppler flowmetry. Microvasc Res 79:102–108, 2010. Roustit M, Cracowski JL. Non-invasive assessment of skin microvascular function in humans: an insight into methods. Microcirculation. 2012 Jan;19(1):47-64. doi: 10.1111/j.1549- 8719.2011.00129.x. Roustit M, Maggi F, Isnard S, Hellmann M, Bakken B, Cracowski JL. Reproducibility of a local cooling test to assess microvascular function in human skin. Microvasc Res 79: 34–39, 2010c. Roustit M, Millet C, Blaise S, Dufournet B, Cracowski JL. Excellent reproducibility of laser speckle contrast imaging to assess skin microvascular reactivity. Microvasc Res 80: 505–511, 2010a. Stern MD. In vivo evaluation of microcirculation by coherent light scattering. Nature 254: 56–58, 1975. Turner J, Belch JJ, Khan F. Current concepts in assessment of microvascular endothelial function using laser Doppler imaging and iontophoresis. Trends Cardiovasc Med 18: 109–116, 2008. Wong BJ, Wilkins BW, Holowatz LA, Minson CT. Nitric oxide synthase inhibition does not alter the reactive hyperemic response in the cutaneous circulation. J Appl Physiol 95: 504–510, Yamamoto-Suganuma R, Aso Y. Relationship between post- occlusive forearm skin reactive hyperaemia and vascular disease in patients with Type 2 diabetes – a novel index for detecting micro- and macrovascular dysfunction using laser Doppler flowmetry. Diabet Med 26: 83–88, 2009. Yvonne-Tee GB, Rasool AH, Halim AS, Rahman AR. Reproducibility of different laser Doppler fluximetry parameters of postocclusive reactive hyperemia in human forearm skin. J Pharmacol Toxicol Methods 52: 286–292, 2005. Yvonne-Tee GB, Rasool AH, Halim AS, Wong AR, Rahman AR. Method optimization on the use of postocclusive hyperemia model to assess microvascular function. Clin Hemorheol Microcirc 38:119–133, 2008.