This document describes various in vitro models and methods that can be used to study hepatotoxicity, including hepatocyte cell cultures, assays to measure cell viability and metabolic activity (trypan blue dye exclusion test, MTT assay), staining to visualize lipid accumulation (Oil Red O), and techniques to examine gene and protein expression changes (RT-PCR, western blotting). Specifically, it discusses using these methods to establish models of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) by treating hepatocyte cultures with fatty acids like palmitic and oleic acid, and models of drug-induced hepatotoxicity by treating with acetaminophen or amiodarone. Key readouts include lipid accumulation, apoptosis levels
This document summarizes various liver diseases and their etiologies. It discusses alcoholic liver disease, drug-induced liver injury, viral hepatitis infections from hepatitis B, C, and D viruses, autoimmune disorders like autoimmune hepatitis and primary biliary cirrhosis, genetic disorders, non-alcoholic fatty liver disease, cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. The liver's important functions are outlined. Causes, pathogenesis, clinical features, diagnosis, and treatment approaches are described for each disease.
An introduction to experimental epidemiology improvemed
This document provides an overview of experimental epidemiology methods. It discusses the key features and types of experimental epidemiology studies, including controlled field trials and community trials. Controlled field trials involve dividing healthy subjects into an exposed group that receives an active substance (like a vaccine) and an unexposed control group that receives a placebo. Community trials involve entire exposed and unexposed communities. Randomized controlled trials, which assign individual subjects randomly to intervention or control groups, are described as the most common experimental method but are covered in more depth separately. Overall, the document outlines the design and purpose of various experimental epidemiology study types.
Genotyping methods of nosocomial infections pathogenimprovemed
Nosocomial infections afflict around 2 million patients in the US each year, resulting in around 88,000 deaths and $4.5 billion in excess healthcare costs. Understanding the distribution and relatedness of pathogens that cause these infections is important for designing effective control methods. Historically, phenotypic characterization was used, but increasingly molecular or genotyping techniques are being used, including pulsed-field gel electrophoresis, multilocus sequence typing, and polymerase chain reaction-based methods. Studies have shown that integrating molecular typing into infection control programs can significantly reduce infection rates and healthcare costs.
Use of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseasesimprovemed
MALDI-TOF MS has revolutionized clinical microbiology by drastically improving the time needed to identify bacterial cultures from over 24 hours to just a few minutes. Whereas the entire process from sampling to results previously took 2-3 days or more, new methods like MALDI-TOF MS and molecular technology have reduced this to just a few hours or one day. MALDI-TOF MS is a powerful, cost-effective, and easy to implement technique that provides rapid and reliable identification of bacteria and yeast from clinical samples at the genus and species level through analysis of their protein mass spectral signatures.
1. Molecular microbiology methods like PCR and hybridization have revolutionized clinical diagnostics by enabling fast and direct detection of pathogens from clinical samples.
2. PCR in particular has become a mainstay technique, allowing amplification of specific DNA sequences from small amounts of input DNA. Variations like real-time PCR, multiplex PCR, and broad-range PCR further expanded diagnostic capabilities.
3. Emerging technologies like DNA microarrays promise even greater multiplexing, with the ability to simultaneously genotype large genomic regions or measure expression of many genes, positioning them as promising future molecular diagnostic tools.
This document provides information about setting up and conducting experiments with isolated organs and tissue rings, including:
1. Describing the mechanical setup for a four-channel system bath for isolated organs.
2. Explaining the preparation of Krebs-Hanseleit solution and common drugs used.
3. Outlining typical experiment protocols, including stabilizing tissues, pre-contraction testing, and assessing endothelial function.
4. Noting that each experiment begins by preparing Krebs-Hanseleit solution and activating the system before surgery and setting rings in wells.
This document describes various in vitro models and methods that can be used to study hepatotoxicity, including hepatocyte cell cultures, assays to measure cell viability and metabolic activity (trypan blue dye exclusion test, MTT assay), staining to visualize lipid accumulation (Oil Red O), and techniques to examine gene and protein expression changes (RT-PCR, western blotting). Specifically, it discusses using these methods to establish models of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) by treating hepatocyte cultures with fatty acids like palmitic and oleic acid, and models of drug-induced hepatotoxicity by treating with acetaminophen or amiodarone. Key readouts include lipid accumulation, apoptosis levels
This document summarizes various liver diseases and their etiologies. It discusses alcoholic liver disease, drug-induced liver injury, viral hepatitis infections from hepatitis B, C, and D viruses, autoimmune disorders like autoimmune hepatitis and primary biliary cirrhosis, genetic disorders, non-alcoholic fatty liver disease, cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. The liver's important functions are outlined. Causes, pathogenesis, clinical features, diagnosis, and treatment approaches are described for each disease.
An introduction to experimental epidemiology improvemed
This document provides an overview of experimental epidemiology methods. It discusses the key features and types of experimental epidemiology studies, including controlled field trials and community trials. Controlled field trials involve dividing healthy subjects into an exposed group that receives an active substance (like a vaccine) and an unexposed control group that receives a placebo. Community trials involve entire exposed and unexposed communities. Randomized controlled trials, which assign individual subjects randomly to intervention or control groups, are described as the most common experimental method but are covered in more depth separately. Overall, the document outlines the design and purpose of various experimental epidemiology study types.
Genotyping methods of nosocomial infections pathogenimprovemed
Nosocomial infections afflict around 2 million patients in the US each year, resulting in around 88,000 deaths and $4.5 billion in excess healthcare costs. Understanding the distribution and relatedness of pathogens that cause these infections is important for designing effective control methods. Historically, phenotypic characterization was used, but increasingly molecular or genotyping techniques are being used, including pulsed-field gel electrophoresis, multilocus sequence typing, and polymerase chain reaction-based methods. Studies have shown that integrating molecular typing into infection control programs can significantly reduce infection rates and healthcare costs.
Use of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseasesimprovemed
MALDI-TOF MS has revolutionized clinical microbiology by drastically improving the time needed to identify bacterial cultures from over 24 hours to just a few minutes. Whereas the entire process from sampling to results previously took 2-3 days or more, new methods like MALDI-TOF MS and molecular technology have reduced this to just a few hours or one day. MALDI-TOF MS is a powerful, cost-effective, and easy to implement technique that provides rapid and reliable identification of bacteria and yeast from clinical samples at the genus and species level through analysis of their protein mass spectral signatures.
1. Molecular microbiology methods like PCR and hybridization have revolutionized clinical diagnostics by enabling fast and direct detection of pathogens from clinical samples.
2. PCR in particular has become a mainstay technique, allowing amplification of specific DNA sequences from small amounts of input DNA. Variations like real-time PCR, multiplex PCR, and broad-range PCR further expanded diagnostic capabilities.
3. Emerging technologies like DNA microarrays promise even greater multiplexing, with the ability to simultaneously genotype large genomic regions or measure expression of many genes, positioning them as promising future molecular diagnostic tools.
This document provides information about setting up and conducting experiments with isolated organs and tissue rings, including:
1. Describing the mechanical setup for a four-channel system bath for isolated organs.
2. Explaining the preparation of Krebs-Hanseleit solution and common drugs used.
3. Outlining typical experiment protocols, including stabilizing tissues, pre-contraction testing, and assessing endothelial function.
4. Noting that each experiment begins by preparing Krebs-Hanseleit solution and activating the system before surgery and setting rings in wells.
This document describes the components, work principles, and experimental protocols for using a pressure myograph system to study isolated blood vessels. The system allows measuring vessel diameter in response to drugs and stimuli while maintaining constant temperature. Experiments involve isolating small arteries from rats and attaching them to glass micropipettes in a chamber filled with physiological salt solution. Vessel diameter is recorded under varying pressures and drug exposures to study endothelial function and vasoactive mechanisms. Statistical analysis of diameter changes under different conditions uses repeated measures ANOVA to compare responses between experimental groups.
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...improvemed
This document describes the laser Doppler flowmetry (LDF) method for measuring blood flow in the microcirculation of skin. Specifically, it discusses post-occlusive reactive hyperemia (PORH) testing using LDF to assess microvascular reactivity by inducing a brief occlusion of blood vessels. It also covers iontophoresis of acetylcholine and sodium nitroprusside combined with LDF to evaluate endothelium-dependent and independent vasodilation respectively. Standardization of methods like occlusion duration and probe placement is important for reproducibility. LDF provides a general index of microvascular function rather than direct flow measurements.
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONSimprovemed
This document provides an overview of histological staining techniques. It discusses how histological preparations are stained using interactions between dyes, solvents, and tissue components. Different staining methods result in different colors that highlight various structures. A classic example is hematoxylin and eosin staining, where hematoxylin stains acidic components blue and eosin stains basic components pink. Specialized staining techniques also exist, such as immunohistochemistry. Proper staining selection depends on the tissue and research goals. Histological preparations are then analyzed under a microscope to study cell and tissue morphology.
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposesimprovemed
Fixation of tissues and organs is done to preserve them for scientific and educational purposes. Various chemical fixatives are used including formaldehyde, alcohols, and acids. Formaldehyde cross-links proteins to harden the tissue while maintaining the original structure. Several fixation protocols are used for different purposes, balancing preservation of color and long-term durability. Key steps include diffusion or injection of fixatives, followed by storage in preservative solutions. Proper fixation and storage are necessary to prevent degradation over time.
The document summarizes the process of preparing tissue samples for histological analysis, including fixation, dehydration, infiltration/embedding, sectioning, staining, and examination. Key steps involve fixing tissues to prevent degradation, dehydrating using increasing alcohol concentrations, infiltrating with paraffin wax or resin for structural support during sectioning, precisely cutting thin sections, mounting them to glass slides, staining, and examining under a microscope. The quality of prepared samples depends on carefully following each step of the preparation process.
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresisimprovemed
This document provides an overview of capillary electrophoresis (CE). It begins by introducing CE and its advantages over other separation techniques. It then describes the basic theory behind CE, including electrophoretic mobility, electroosmotic flow, and how samples migrate through the capillary when an electric field is applied. The document details the key components of a CE instrument and various CE separation techniques such as capillary zone electrophoresis, micellar electrokinetic chromatography, and capillary isoelectric focusing. It focuses on the principles and applications of CE.
Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...improvemed
This document provides an overview of liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS). It describes the basic components and functioning of an LC-MS system, including the liquid chromatograph and mass spectrometer connected by an interface. The document discusses various ionization sources like electrospray ionization and atmospheric pressure chemical ionization, as well as mass analyzers like quadrupoles and time-of-flight analyzers. It also covers detectors used in LC-MS like electron multipliers and photomultipliers. Overall, the document serves as a technical introduction to the principles and components of LC-MS.
This document provides an overview of basic cell culture techniques. It discusses the history of cell culture, defining primary and secondary cell cultures. It describes different types of cell lines and how cells grow as monolayers or in suspension. The document outlines the key equipment needed for a cell culture laboratory, including biosafety cabinets, CO2 incubators, centrifuges, microscopes, and supplies. It emphasizes the importance of aseptic technique to prevent microbial contamination when working with cell cultures.
This document discusses systems biology and its goals of understanding how biological molecules interact and systems function as a whole. It covers:
1) Systems biology uses large datasets from "omics" experiments and computational models to understand complex biological interactions beyond individual molecules.
2) Pioneering work used microarrays to measure thousands of genes in serum-stimulated cells, finding over 500 changed in proliferation.
3) The field aims to discover emergent system properties and functions not evident from separate parts, like switches that change cell behavior.
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasetsimprovemed
This document discusses experimental methods used in systems biology to generate large datasets, including microarrays, sequencing-based methods, mass spectrometry, and liquid chromatography. It explains that systems biology studies must be quantitative and enable computational modeling. Key methods covered are microarrays, RNA-seq, ChIP-seq, whole-genome sequencing, whole-exome sequencing, proteomics using mass spectrometry, and combining liquid chromatography with mass spectrometry for lipidomics, metabolomics and glycomics. Sources of variation are also discussed for genomic and proteomic studies.
Systems biology for medical students/Systems medicineimprovemed
Systems biology takes a holistic approach to studying biological systems by considering all the interactions within a system and how they generate complex behaviors. Lecture 1 introduces key concepts in systems biology like how increasing levels of biological organization give rise to new system properties like robustness. Lecture 2 discusses experimental methods like genomics, proteomics, and metabolomics that generate large data sets for systems analysis. Lecture 3 covers mathematical and statistical tools for analyzing these data sets, such as using differential equations to model signaling networks. Lecture 4 provides examples of medical applications of systems biology in finding diagnostic markers, personalizing therapy, and predicting disease interactions from human disease networks, with the future of medicine taking a more predictive, preventive, and personalized approach
The document discusses several use cases for applying data mining and machine learning techniques in healthcare and biomedical research. Three examples are:
1) Early diagnosis of cancers like lung cancer and breast cancer through predictive modeling of patient data to detect cancers at earlier stages when survival rates are higher.
2) Predicting patient responses to drug therapies for cancers like breast cancer by combining different types of molecular profiling data using techniques like support vector machines and random forests.
3) Using imaging data and temporal analysis of metrics like medication purchases to better understand and predict chronic diseases like diabetes and associated health complications.
The document discusses various data mining methods. It describes data mining as seeking patterns within large databases. Common data mining methods mentioned include clustering, regression, rule extraction, and data visualization. Machine learning algorithms often used for health data include logistic regression, support vector machines, decision trees, and neural networks. The document also discusses newer techniques like graph-based data mining, topological data mining, and data visualization for exploring complex data.
This document discusses biomedical informatics and the increasing role of data in medicine. It notes that medicine is becoming a more data-intensive field due to growing sources of electronic health data. Biomedical data is often large in volume, diverse, complex, weakly structured, noisy, and inconsistent. Extracting knowledge from this "big data" through techniques like data mining, machine learning, and integrating human-computer interaction can provide insights to improve healthcare outcomes. Key applications include personalized and predictive medicine through patient stratification and risk analysis. However, overcoming obstacles like heterogeneous and non-standardized data is challenging.
This document discusses hypersensitivity reactions and autoimmune diseases. It describes the four types of hypersensitivity reactions according to the Gell and Coombs classification: Type I (immediate), Type II (cytotoxic), Type III (immune complex-mediated), and Type IV (delayed type hypersensitivity). It provides details on the mechanisms and examples of each type. The document then discusses immunological tolerance, including central and peripheral tolerance. It explains how a breakdown in tolerance can lead to autoimmune diseases and provides examples like Graves' disease, myasthenia gravis, hemolytic anemia, and systemic lupus erythematosus.
The document discusses lymphocyte development and antigen receptor gene rearrangement. It covers the following key points:
1. Lymphocyte development involves commitment to the B or T cell lineage, proliferation of progenitors, rearrangement of antigen receptor genes, selection checkpoints, and differentiation into distinct subpopulations.
2. B cells undergo gene rearrangement and development in the bone marrow before migrating to peripheral lymphoid organs. T cells develop through similar processes in the thymus.
3. During development, gene rearrangement generates diversity in antigen receptor genes, and selection checkpoints ensure that only lymphocytes with functional receptors will mature and enter the peripheral immune system.
This document provides an overview of basic immunology concepts. It begins with definitions of key immunology terms like immunity, immunology, antigen, and discusses the historical figures Edward Jenner and Louis Pasteur who were pioneers in vaccination. It then discusses the components of the immune system including organs like the bone marrow, thymus, lymph nodes, and spleen. It provides information on cells of the immune system like antigen presenting cells, T and B lymphocytes, and effector cells. It also discusses molecular components of antigen recognition including antibodies, T cell receptors, B cell receptors, and the major histocompatibility complex.
This document describes the components, work principles, and experimental protocols for using a pressure myograph system to study isolated blood vessels. The system allows measuring vessel diameter in response to drugs and stimuli while maintaining constant temperature. Experiments involve isolating small arteries from rats and attaching them to glass micropipettes in a chamber filled with physiological salt solution. Vessel diameter is recorded under varying pressures and drug exposures to study endothelial function and vasoactive mechanisms. Statistical analysis of diameter changes under different conditions uses repeated measures ANOVA to compare responses between experimental groups.
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...improvemed
This document describes the laser Doppler flowmetry (LDF) method for measuring blood flow in the microcirculation of skin. Specifically, it discusses post-occlusive reactive hyperemia (PORH) testing using LDF to assess microvascular reactivity by inducing a brief occlusion of blood vessels. It also covers iontophoresis of acetylcholine and sodium nitroprusside combined with LDF to evaluate endothelium-dependent and independent vasodilation respectively. Standardization of methods like occlusion duration and probe placement is important for reproducibility. LDF provides a general index of microvascular function rather than direct flow measurements.
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONSimprovemed
This document provides an overview of histological staining techniques. It discusses how histological preparations are stained using interactions between dyes, solvents, and tissue components. Different staining methods result in different colors that highlight various structures. A classic example is hematoxylin and eosin staining, where hematoxylin stains acidic components blue and eosin stains basic components pink. Specialized staining techniques also exist, such as immunohistochemistry. Proper staining selection depends on the tissue and research goals. Histological preparations are then analyzed under a microscope to study cell and tissue morphology.
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposesimprovemed
Fixation of tissues and organs is done to preserve them for scientific and educational purposes. Various chemical fixatives are used including formaldehyde, alcohols, and acids. Formaldehyde cross-links proteins to harden the tissue while maintaining the original structure. Several fixation protocols are used for different purposes, balancing preservation of color and long-term durability. Key steps include diffusion or injection of fixatives, followed by storage in preservative solutions. Proper fixation and storage are necessary to prevent degradation over time.
The document summarizes the process of preparing tissue samples for histological analysis, including fixation, dehydration, infiltration/embedding, sectioning, staining, and examination. Key steps involve fixing tissues to prevent degradation, dehydrating using increasing alcohol concentrations, infiltrating with paraffin wax or resin for structural support during sectioning, precisely cutting thin sections, mounting them to glass slides, staining, and examining under a microscope. The quality of prepared samples depends on carefully following each step of the preparation process.
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresisimprovemed
This document provides an overview of capillary electrophoresis (CE). It begins by introducing CE and its advantages over other separation techniques. It then describes the basic theory behind CE, including electrophoretic mobility, electroosmotic flow, and how samples migrate through the capillary when an electric field is applied. The document details the key components of a CE instrument and various CE separation techniques such as capillary zone electrophoresis, micellar electrokinetic chromatography, and capillary isoelectric focusing. It focuses on the principles and applications of CE.
Notes for The principle and performance of liquid chromatography–mass spectro...improvemed
This document provides an overview of liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS). It describes the basic components and functioning of an LC-MS system, including the liquid chromatograph and mass spectrometer connected by an interface. The document discusses various ionization sources like electrospray ionization and atmospheric pressure chemical ionization, as well as mass analyzers like quadrupoles and time-of-flight analyzers. It also covers detectors used in LC-MS like electron multipliers and photomultipliers. Overall, the document serves as a technical introduction to the principles and components of LC-MS.
This document provides an overview of basic cell culture techniques. It discusses the history of cell culture, defining primary and secondary cell cultures. It describes different types of cell lines and how cells grow as monolayers or in suspension. The document outlines the key equipment needed for a cell culture laboratory, including biosafety cabinets, CO2 incubators, centrifuges, microscopes, and supplies. It emphasizes the importance of aseptic technique to prevent microbial contamination when working with cell cultures.
This document discusses systems biology and its goals of understanding how biological molecules interact and systems function as a whole. It covers:
1) Systems biology uses large datasets from "omics" experiments and computational models to understand complex biological interactions beyond individual molecules.
2) Pioneering work used microarrays to measure thousands of genes in serum-stimulated cells, finding over 500 changed in proliferation.
3) The field aims to discover emergent system properties and functions not evident from separate parts, like switches that change cell behavior.
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasetsimprovemed
This document discusses experimental methods used in systems biology to generate large datasets, including microarrays, sequencing-based methods, mass spectrometry, and liquid chromatography. It explains that systems biology studies must be quantitative and enable computational modeling. Key methods covered are microarrays, RNA-seq, ChIP-seq, whole-genome sequencing, whole-exome sequencing, proteomics using mass spectrometry, and combining liquid chromatography with mass spectrometry for lipidomics, metabolomics and glycomics. Sources of variation are also discussed for genomic and proteomic studies.
Systems biology for medical students/Systems medicineimprovemed
Systems biology takes a holistic approach to studying biological systems by considering all the interactions within a system and how they generate complex behaviors. Lecture 1 introduces key concepts in systems biology like how increasing levels of biological organization give rise to new system properties like robustness. Lecture 2 discusses experimental methods like genomics, proteomics, and metabolomics that generate large data sets for systems analysis. Lecture 3 covers mathematical and statistical tools for analyzing these data sets, such as using differential equations to model signaling networks. Lecture 4 provides examples of medical applications of systems biology in finding diagnostic markers, personalizing therapy, and predicting disease interactions from human disease networks, with the future of medicine taking a more predictive, preventive, and personalized approach
The document discusses several use cases for applying data mining and machine learning techniques in healthcare and biomedical research. Three examples are:
1) Early diagnosis of cancers like lung cancer and breast cancer through predictive modeling of patient data to detect cancers at earlier stages when survival rates are higher.
2) Predicting patient responses to drug therapies for cancers like breast cancer by combining different types of molecular profiling data using techniques like support vector machines and random forests.
3) Using imaging data and temporal analysis of metrics like medication purchases to better understand and predict chronic diseases like diabetes and associated health complications.
The document discusses various data mining methods. It describes data mining as seeking patterns within large databases. Common data mining methods mentioned include clustering, regression, rule extraction, and data visualization. Machine learning algorithms often used for health data include logistic regression, support vector machines, decision trees, and neural networks. The document also discusses newer techniques like graph-based data mining, topological data mining, and data visualization for exploring complex data.
This document discusses biomedical informatics and the increasing role of data in medicine. It notes that medicine is becoming a more data-intensive field due to growing sources of electronic health data. Biomedical data is often large in volume, diverse, complex, weakly structured, noisy, and inconsistent. Extracting knowledge from this "big data" through techniques like data mining, machine learning, and integrating human-computer interaction can provide insights to improve healthcare outcomes. Key applications include personalized and predictive medicine through patient stratification and risk analysis. However, overcoming obstacles like heterogeneous and non-standardized data is challenging.
This document discusses hypersensitivity reactions and autoimmune diseases. It describes the four types of hypersensitivity reactions according to the Gell and Coombs classification: Type I (immediate), Type II (cytotoxic), Type III (immune complex-mediated), and Type IV (delayed type hypersensitivity). It provides details on the mechanisms and examples of each type. The document then discusses immunological tolerance, including central and peripheral tolerance. It explains how a breakdown in tolerance can lead to autoimmune diseases and provides examples like Graves' disease, myasthenia gravis, hemolytic anemia, and systemic lupus erythematosus.
The document discusses lymphocyte development and antigen receptor gene rearrangement. It covers the following key points:
1. Lymphocyte development involves commitment to the B or T cell lineage, proliferation of progenitors, rearrangement of antigen receptor genes, selection checkpoints, and differentiation into distinct subpopulations.
2. B cells undergo gene rearrangement and development in the bone marrow before migrating to peripheral lymphoid organs. T cells develop through similar processes in the thymus.
3. During development, gene rearrangement generates diversity in antigen receptor genes, and selection checkpoints ensure that only lymphocytes with functional receptors will mature and enter the peripheral immune system.
This document provides an overview of basic immunology concepts. It begins with definitions of key immunology terms like immunity, immunology, antigen, and discusses the historical figures Edward Jenner and Louis Pasteur who were pioneers in vaccination. It then discusses the components of the immune system including organs like the bone marrow, thymus, lymph nodes, and spleen. It provides information on cells of the immune system like antigen presenting cells, T and B lymphocytes, and effector cells. It also discusses molecular components of antigen recognition including antibodies, T cell receptors, B cell receptors, and the major histocompatibility complex.
2. A vérerek véráramának és reaktivitásának mérése a bőr
mikrocirkulációjában a lézer Doppler (LDF) módszerével
Ana Stupin
3. Az utóbbi évtizedekben számos funkcionális módszert fejlesztettek ki a human endothelium
fiziológiai funkcióinak vizsgálatára és mérésére (Flammer & Luscher, 2010; Ludmer és mtsai,
1986)
Intenzív tudományos kutatás a vaszkuláris fiziológia és a patofiziológia területén
Ezeket a módszereket még nem alkalmazták hasznos diagnosztikai eszközként a mindennapi
klinikai gyakorlatban
Az endoteliális funkció tanulmányozására irányuló valamennyi megközelítés célja, hogy
betekintést adjon a vaszkuláris / endoteliális funkciókba különböző helyeken (érrendszeri
medencékben) és különböző típusú erekben (vezetőképes, rezisztens vérerek, mikrocirkuláció)
Korai invazív módszerek (pl. Intracoronáris acetil-kolin infúzió), a kevésbé invazív / nem invazív
recenter módszerek, és a perifériás keringés vizsgálatára irányulnak, mint a szisztémás keringés
helyettesítője (Linder és mtsai., 1990, Panza és munkatársai, 1990; Celermajer és mtsai., 1992)
4. Elérhetősége miatt a bőr tökéletes hely az emberi mikrocirkuláció működésének vizsgálatára
(Roustit & Cracowski, 2012)
A nyitott kérdés az, hogy a bőr mikrovaszkuláris funkciója reprezentatív-e, és más szervek
mikrovaszkuláris funkciójának megfelelő mutatója
Az alábbi három betegség esetben a bőr a mikrovaszkuláris funkció intenzív vizsgálatának
helyévé vált az egészségben és a betegségben, beleértve a magas vérnyomást is (Antonios et al.,
1999; Feihl et al., 2006), elhízás (Levy et al., 2006), cukorbetegség (Chang et al. 1997,
Yamamoto-Suganuma és Aso, 2009), öregedés, vesebetegség (Kruger et al., 2006)
5. A bőr mikrocirkulációjának gyakori vizsgálata a lézer Doppler (LD) használják.
Az LD-technika alapja az, hogy a bőr mikrocirkulációjában az áramlási sebesség a lézersugárnak a
mikrocirkulációs eritrocitából való elutasítása alapján változik, ami megváltoztatja a
hullámhosszát (Doppler hatása) (Stern, 1975)
A számítógépes program meghatározza az áramlási sebességet - a bőr fluxus indexe előtt, és
nem a mikroflowban levő közvetlen áramlási sebességet -
Az eredményeket tetszőleges egységekben (perfúziós egységek, PU, 1 PU = 10 mV) vagy CVC-ben
(perfúziós index osztva artériás nyomás, mV / mmHg) fejezzük ki (147)
Az LD-áramlásmérő (LDF) egy ponton és így kis térfogatban, de nagy mintavételi frekvenciával
méri a véráramlást
7. Gyakran említik, hogy az LDF módszert - a bőr perfúziójának és a véráramlás mérésének
regionális pontosságából eredő térbeli változékonyságot mutat egy ponton (Roustit et al., 2010)
Ez a probléma úgy küszöbölhető ki, hogy a lézer szondát mindig a bőrön azonos (jelölt) foltra kell
helyezi, különösen akkor, ha a módszert ismétlődő mérésekben használják.
A lézer Doppler jel és a mikrovaszkuláris áramlás közötti lineáris kapcsolat 0 és 300 ml / perc
között volt 100 g szövetre vonatkoztatva (Ahn et al., 1987).
Az LDF nem ad pontos áramlási sebességet (azaz ml / perc) !!!
8. Az LDF a leggyakrabban a mikrovaszkuláris reaktivitás becslésére szolgál válaszul a különböző
ingerekre (érrendszeri okklúzió, vazoaktív gyógyszerek, hőmérsékleti kihívások stb.).
A bőr mikrocirkulációjában a vaszkuláris reaktivitás leggyakrabban használt vizsgálatai
(Cracowski et al., 2006):
• az okklúzió utáni reaktív hyperaemia (PORH)
• vasoaktív gyógyszerek iontoforézise
• a bőrön való hőmérséklet-változás - felmelegedés vagy hűtés
9. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A poszt-okklúziós reaktív hiperémia (PORH) a véredény rövid távú elzáródása által okozott
(mikro) érrendszeri véráram növekedése.
A mikrovaszkuláris reaktivitás becslésére általánosan használt vizsgálat (Cracowski et al., 2006)
A PORH kialakulását közvetítő mechanizmusok a bőr mikrocirkulációjában:
• az érzékszervi idegek aktivitása a neurális axon reflexen keresztül (Larkin & Williams, 1993),
• endotélfüggő vazodilatátorok előállítása
• EDHF (Lorenzo & Minson, 2007),
• a prosztaglandinok szerepe még nem teljesen tisztázott (Dalle-Ave et al., 2004; Medow et al., 2007).
• A COX gátlása feltárja a PORH potenciális függőségét a NO-ra az emberi bőr mikrocirkulációjában (Medow et
al., 2007).
Ezt a módszert általában a mikrovaszkuláris reaktivitás értékelésére és tesztelésére használják,
nem pedig a mikrovaszkuláris endoteliális funkció értékelésének közvetlen vizsgálataként
(Roustit & Cracowski, 2012).
10. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A PORH elemzés során számszerűsített paraméterek:
Peak hyperemia
• nyers adatokként vagy alapáram-függvényként fejezhető ki
• a görbe alatti terület,
• csúcsáram mínusz alapáram, vagy. t
• a csúcs és az alapáram közötti relatív változás százalékban kifejezve [(csúcsáramlási sebesség) / bazális áramlás] x
100
• a csúcs perfúzió összehasonlítható az ún. 42 ° C-on vagy annál magasabb hőmérsékletű
melegítéssel érhető maximális vazodilatáció (Charkoudian, 2003)
A perfúzió csúcsáig tartó idő (csúcsidő)
• jelentőségét a mikrovaszkuláris reaktivitás markerként még nem határozták meg
12. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A PORH napközi reprodukálhatósága
• változó, ha a PORH-t az LDF egy ponton méri
• attól függ, hogy a bőrt melyik helyen helyezzük el, az adatot hogyan értelmezik, és mekkora a bőr
alaphőmérsékletét.
A PORH reprodukálhatóságát vizsgáló vizsgálatok közül a leggyakrabban az alkar gyapjúoldali oldalát
használták (az eredmények következetlenek)
• A reprodukálhatóság kiváló (6% -tól 22% -ig CV-ig), amikor a felvétel helyét pontosan jelezzük, és a szondát minden nap
ugyanazon a helyen helyezzük el (Yvonne-Tee et al. 2005)
• a jó reprodukálhatóságig (kb. 20% CV), amikor a szondát közel azonos helyen helyezték el, de teljesebb pontossággal
(Agarwal et al., 2010)
• a reprodukálhatóság gyenge, ha a szonda telepítési helyét napról-napra véletlenszerűen választottuk (CV> 40%) (Roustit et
al., 2010)
A szonda pontosan ugyanazon a helyen való elhelyezése a kulcsfontosságú tényező, amely javítja a
PORH naponta történő reprodukálhatóságát (kiváló)
13. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
Bőr és környezet hőmérséklete
A PORH felvétele során figyelembe kell venni a bőr és a környezeti hőmérséklet homogenizálását
is (szoba).
A hőmérséklet a bőr mikrocirkulációjában a bazális áramlási sebesség szabályozásában
kulcsszerepet játszik (Roustit et al., 2010a)
A PORH mérések elfogadható megismételhetősége (reprodukálhatósága), ha a bőr hőmérséklete
a vizsgálat alatt 33 ° C-on tartott (Roustit et al., 2010)
14. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A vaszkuláris elzáródás időtartama
Különböző vizsgálatokban kifejezett nagy a heterogenitás a mérések tervezésében - különösen
az érrendszeri elzáródás időtartamában (1-15 perc) (Yvonne-Tee et al., 2008)
A brachialis artéria áramlás által közvetített dilatációs (FMD) áramlásának analógiája miatt a
leggyakrabban használt vaszkuláris elzáródás 5 perc volt.
Általában a vaszkuláris okklúzió rövidebb periódusait is használják
A hosszabb érrendszeri elzáródás hozzájárul az ischaemia metabolitok (pl. Adenozin)
felhalmozódásához, amelyek potenciálisan hozzájárulhatnak a hiperémiás véráramláshoz.
15. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
A mandzsetta nyomása, amely érrendszeri elzáródást okoz
A különböző vizsgálatokban a mérések tervezésekor a kifejezett heterogenitás részben a
mandzsettára kifejetett eltérő nyomásnak is köszönhető,, amely okklúziót okoz (160-220 mmHg)
(Keymel et al., 2010)
A leggyakrabban használt mandzsetta nyomás 30-50 mmHg-nál nagyobb, mint a PORH által
mért szisztolés artériás nyomás.
16. 1. Post-okklúziós reaktív hyperaemia (PORH)
Absztrakt
Az LDF-rel mért PORH egy széles körben alkalmazott vizsgálat, amely általános (teljes) indexet ad
a mikrovaszkuláris funkciókról, - a neurális axonális reflexekről, a COX-függő útvonalakról és az
EDHF hatások kombinációjáról
A vizsgálat során ügyelni kell arra, hogy elkerüljék a módszertani torzítást vagy a mérési hibát
(elzáródás időtartama, alaphőmérséklet és adagolási pont)
Annak ellenére, hogy a PORH az LDF-szel együtt jó és széles körben alkalmazható
mikrovaszkuláris reaktivitásértékelő eszköz, ez a módszer még mindig szabványosítást igényel
17. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
Az iontoforézis a vasoaktív anyagok (töltött molekulák) nem-invazív transzdermális
adagolásának módszere, kis teljesítményű elektromos árammal
A módszer alkalmazása számos módszertani tényezőtől függ (Kalia et al 2004):
• az alkalmazandó oldat koncentrációja és pH-ja,
• az alkalmazott áramok erőssége,
• iontoforézis és
• a bőrfelület tulajdonságai (bőrvastagság, haj hajjal vagy anélkül)
18. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
LDF-sel kombinálva (Cracowski et al., 2006; Turner et al., 2008)
iontoforézis-acetil-kolin (ACh) - teszt a bőr mikrocirkulációjának endotheli-függő
vazodilatációjának értékelésére
nátrium-nitro-pussid (SNP) - teszt a bőr mikrocirkulációjának endothelium-független
értágulásának értékelésére
Az ACh alkalmazás domináns endotélfüggő dilatációt okoz:
• COX-függő metabolitok (bár az eredmények még mindig nem egyértelműek) (Durand et al., 2004; Holowatz et al.,
2005)
• A NO nem jár jelentős mértékben (Noon et al., 1998)
kevésbé jelentős endothelium-független dilatáció
• neurális axon reflex (Berghoff et al., 2002)
19. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
Az iontoforézissel kapcsolatos módszertani kérdések:
ugyanaz az áram nemspecifikus vazodilatációt okozhat, amely zavarhatja a beadott gyógyszer
vazodilatációs hatását
Amely függ :
• elektromos töltéstől,
• (hasonló töltések esetén az ismételt alkalmazások több specifikus vazodilatációt okoznak, mint a folyamatos
ionoforézis) (Durand et al., 2002)
• az alkalmazott vazodilatátorok feloldására és hígítására használt részecskékről (pl. csapvíz, desztillált víz,
ionmentesített víz, sóoldat);
• a desztillált víz kifejezettebb, nem specifikus vasodilatációt okoz a villamos energiából, mint a sóoldat
• Az ACh vagy SNP iontoforézis hasonló vazodilatációt okoz a bőr mikrocirkulációjában, függetlenül attól, hogy az ACh vagy az SNP desztillált vízben
vagy fiziológiai oldatban oldódik-e (Farrell et al., 2002).
20. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
Az iontoforézissel kapcsolatos módszertani kérdések:
b) a természetes bőrrezisztencia befolyásolhatja a vasoaktív anyag bejuttatását is
• ajánlatos csökkenteni a bőr ellenállását az alkalmazás helyén
• az epidermisz felületi rétegének enyhe eltávolítása ragasztószalaggal vagy alkohollal (Turner et al.,
2008)
c) a térbeli változékonyság befolyásolja az ACh vagy SNP-függő vazodilatáció reprodukálhatóságát
• győződjön meg arról, hogy az ismétlődő méréseknél az alkalmazási hely megegyezik (Agarwal et al.
2010, Blaise et al., 2010)
d) a vazodilatáció az iontoforézis helyétől függ
• pl. az SNP által indukált dilatációt nem lehetett indukálni bárhol, hanem csak az ujj dorsalis oldalán
(Roustit et al., 2009)
21. 2. Iontoforézis acetil-kolin (ACh) és nátrium-nitroprusid (SNP)
Absztrakt
Az ACh és az SNP ionoforézisét széles körben alkalmazzák a bőr mikrocirkulációjának endotél-
függő és független vazodilatációjának értékelésére
Az eredmények értelmezésekor figyelembe kell venni az ezekben a válaszokban szereplő
mechanizmusok összetettségét
Az ionoforézissel végzett vizsgálatokat gondosan meg kell tervezni, hogy csökkentsük a jelenlegi
nemspecifikus dilatációt:
• kis teljesítményű árammal
• a vazoaktív anyagok oldódási és hígító közegeként sóoldatot (a desztillált víz helyett) kell használni
• A bőrfelületen, ahol iontoforézist végeznek, alkohollal meg kell tisztítani a természetes bőrrezisztencia
csökkentése céljából, amennyire csak lehetséges
22. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
A helyi termikus hiperémia (LTH) a bőr perifériás mikrovaszkuláris reakciója a helyi felmelegedésre
Az LTH által közvetített mechanizmusok (Cracowski et al., 2006):
• neurális axon reflex i
• o NO-függő endoteliális vasodilatáció
Az LTH-t jellemezték (Minson és mtsai., 2001):
• Kezdeti csúcs hyperemia (az első 5 percben) - Az érzékszervi idegtől függ
• fennmaradó fennsík - többnyire a NO-tól függ
23. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
Plato szakasz 20-30 perccel a fűtés megkezdése után jelenik meg (Minson, 2010), és
amikor a fűtési időszak meghosszabbodik, a "eltávolítás" (azaz a perfúzió lassú
visszaállítása az alap alapáramlási vonalhoz) előfordulása figyelhető meg.
3. ábra. Helyi termikus hiperémia (LTH). (Roustit & Cracowski, 2012)
24. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
Az LTH két független fázisának köszönhetően az adatelemzés során különböző paramétereket
lehet számszerűsíteni
Az LTH értelmezés leggyakrabban használt paraméterei:
• csúcs perfúzió (axon reflextől függő vazodilatáció) és
• platina perfúzió (NO-tól függő vazodilatáció).
Az adatok kifejezhetők:
• "sor" formájában perfúziós egységként vagy a
• CVC, amely perfúziót jelent a bazális mellékfolyadékhoz vagy perfúzióhoz viszonyítva a maximális vazodilatációhoz
képest
Érdekes, hogy az endothel funkció általános mutatójaként a teljes mérés görbe alatti területet
(AUC) gyakran használják, annak ellenére, hogy ezáltal elrejti az axonális reflexek hatását ebben
a vazodilatációban (Kruger et al., 2006)
25. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
Az LDF-ben rögzített LTH reprodukálhatósága a lézeres szonda helyétől függ (Roustit et al., 2010)
elfogadható napközbeni reprodukálhatóság, ha az LTH-t az ujjakon mérik
Alacsony a reprodukálhatóság, ha az alkaron mérjük az LTH-t (Roustit & Cracowski, 2012 ref 114)
Egyes szerzők sokkal jobb reprodukálhatóságról beszélnek az alkaron, ha az ún. integratív
szondát használnak
26. 3. Helyi termikus hiperémia (LTH)
Heterogenitás az LTH-t használó tanulmányok tervezésében:
• a helyi felmelegedés más hőmérséklete (42-43 ° C) (Johnson et al., 2010)
• egy másik típusú eszköz, amelyet a bőr melegítésére használnak (Roustit & Cracowski, 2012)
Az egészséges személyek a helyi felmelegedés 44 ° C-on jól tolerálták, míg a csökkent
mikrovaszkuláris funkciójú betegek (pl. Szisztémás szklerózis) fájdalomról vagy fulladásérzetről
panaszkodtak a felmelegedés helyén.
27. 4. Helyi hűtés
A helyi hűtés olyan hőmérséklet-inger, amelyet gyakran használnak az LDF-rel együt
Különböző hűtési módszerek:
• kéz vagy ujj hideg vízbe merítése (Maver & Strucl, 2000),
• fagyasztó patronok tekercselése (Cankar & Finderle, 2003) vagy
• szén-dioxid használata (Lutolf et al., 1993)
Egyszerűsége miatt a leggyakrabban használt hűtési módszer a hideg vízbe merítés mind
egészséges, mind beteg emberek esetében (Foerster et al., 2007)
28. 4. Helyi hűtés
A helyi bőrhűtés stimulálja (Johnson & Kellogg, 2010):
• A kezdeti vazokonstrikció (a norepinefrintől függően),
• majd az átmeneti vazodilatáció,
• és végső soron meghosszabbodott vazokonstrikció (a norepinefrintől függően és a NO rendszer gátlása)
4. ábra. Helyi hűtés. (Roustit & Cracowski, 2012)
29. 4. Helyi hűtés
A módszer legjobb reprodukálhatósága:
• amikor a hűtési protokoll 30 percig tart 15 ° C-on (Roustit et al., 2010c)
30. Post-Occlusive reaktív hiperémia (PORH) rögzítése lézer
Doppler (LDF) segítségével
Példa az Orvostudományi Kar és a Klinikai Központ fiziológiai és Sportélettani Intézetéből
Használt eszköz és szoftver: moorVMS-LDF Monitor és moorVMS-PC v4.0, Moor Instruments
Limited, Millwey, Axminster, Devon, EX13 5US, UK
39. 5. A PORH protokoll rögzítése
A mérést szobahőmérsékleten (23,5 ± 0,5 ° C) végezzük.
• Mérés előtt az alanynak 30 perces akklimatizálódáson kell keresztülmennie a helyiségben,
ahol a mérést úgy végezzük, hogy elkerüljük a véráramlás változásait, amelyek az adatgyűjtés
során felmerülő hőmérsékletváltozások miatt jelentkezhetnek
• A mérések során az alanyok fekvő helyzetben voltak
• A készülék szondája a vizsgázó alkarjára van rögzítve, 13-15 cm-rel a csukló fölött (a látható
vénák elkerülése érdekében) az eszköz gyártójának által biztosított ragasztótartóval.
• Az alkar helyén, amelyen az eszköz 5 és 10 közötti perfúziós egység (PU) áramlást mutat, úgy
van elrendezve, hogy a mérések egységesek legyenek
40. 5. A PORH protokoll rögzítése
Ha ismétlődő vizsgálatokat végzünk egyes alanyoknál, akkor az eszköz szondájának helyét meg
kell jelölni, hogy elkerülhető legyen az alkar véráramának heterogenitása következtében
bekövetkező változások.
Annak érdekében, hogy elkerülhető legyen a felvételben megjelenő zavarások, az alany keze
olyan párnába kerül, megy megakadáloyzza a mozgását,, mivel a készülék rendkívül érzékeny a
legkisebb mozgásra.
Ugyanezen okból kifolyólag a válaszadót tájékoztatni kell arról, hogy szigorúan mozdulatlan
maradjon az arthropathia elkerülése érdekében.
41. 5. A PORH protokoll rögzítése
• A mérés a bázisáramlás 5 perces rögzítésével kezdődik
• Ezután a felkar fölötti mandzsetta 30-50 mmHg-ra emelkedik a vizsgázó szisztolés nyomása felett,
hogy megállítsa az áramlást a brachialis artériában
• Az első okklúzió 1 percig tart
• Ezután kiengedjük a levegőt a mandzsettából, és követjük a monitoron megjelenő reaktív
hipermeasokat
• A befejezés után 10 percnyi bázisáramlás folytatódik
• Ezután egy második elzáródás következik be 2 percig
• A mandzsetta kiengedésé után a második elzáródás után 10 perc bazális áramlás folytatódik
• Ezután egy harmadik elzáródást hajtunk végre, mely 3 percig tart
• A harmadik elzáródás után 10 perc a bázisáramlás folytatódik.
• Ezzel a mérés befejeződik.
42. 5. A PORH protokoll rögzítése
5. ábra. Sematikus protokollok.
Eszéki Orvostudományi Kar Sportélettani
intézet.
43. 6. Adatelemzés
• A véráramlás változása tetszőleges egységben (PU) fejeződik ki.
• Annak érdekében, hogy meghatározzuk az áramlás relatív változását a poszt-okklúziós
hiperémia során, az adatokat a 'görbe alatti terület (AUC) alatt fejezzük ki a bazális áramlás,
az elzáródás és a reperfúzió során.
6. ábra: A bőr mikrocirkulációjának áramlási mérése LDF
módszerrel.
(Forrás: Cavy A, Cosic A, Jukic I, Jelakovic B, Lombard JH,
Phillips SA, Seric V, Mihaljevic I, Drenjancevic I. A ciklo-
oxigenáz-1 szerepe a magas sótartalmú étrend-indukált
mikrovaszkuláris diszfunkcióban az emberekben. J Physiol.,
2015. december 15., 593 (24): 5313-24. Doi: 10.1113 /
JP271631.
46. 6. Adatelemzés
• Ugyanez az eljárás megismétlődik az elzáródás (1 perc) és a reperfúzió (1 perc)
esetén.
47. 6. Adatelemzés
• Ugyanez az eljárás megismétlődik az elzáródás (1 perc) és a reperfúzió (1 perc)
esetén.
48. 6. Adatelemzés
• Mivel az áramlás nem éri el a nulla értéket, még akkor is, ha a perfúzió hiányzik, az áramlási
értékeket százalékos formában fejezzük ki egy bizonyos összehasonlítóhoz (ebben az esetben a
bazális áramláshoz) viszonyítva.
• Meghatároztuk az áramlás sebességét az elzáródás és a reperfúzió során az alapáramhoz
viszonyítva
• A végeredmény az áramlás változásának százalékában kifejezve az elzáródás és a reperfúzió
viszonyában az alapáramhoz viszonyítva (R-O)
• Ugyanezt az eljárást megismételjük 2 perc PORH és 3 perc PORH esetén, 2 perces PORH jelzéssel,
ami ROI-t jelez 2 percig, és 3 perc PORH ROI-t 3 percig
49. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
50. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
51. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
52. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
53. 7. Az Eszéki Josip Juraj Strossmayer Egyetem Orvostudományi Karának
klinikai fiziológiai és fiziológiai laboratóriumának tapasztalatai
54. 8. Irodalomjegyzék
Agarwal SC, Allen J, Murray A, Purcell IF. Comparative
reproducibility of dermal microvascular blood flow changes in
response to acetylcholine iontophoresis, hyperthermia and
reactive hyperaemia. Physiol Meas 31: 1–11, 2010.
Ahn H, Johansson K, Lundgren O, Nilsson GE. In vivo evaluation of
signal processors for laser Doppler tissue flowmeters. Med Biol
Eng Comput 25:207–211, 1987.
Antonios TF, Singer DR, Markandu ND, Mortimer PS, MacGregor
GA. Structural skin capillary rarefaction in essential hypertension.
Hypertension 33: 998–1001, 1999.
Berghoff M, Kathpal M, Kilo S, Hilz MJ, Freeman R. Vascular and
neural mechanisms of ACh-mediated vasodilation in the forearm
cutaneous microcirculation. J Appl Physiol 92: 780–788, 2002.
Blaise S, Hellmann M, Roustit M, Isnard S, Cracowski JL. Oral
sildenafil increases skin hyperaemia induced by iontophoresis of
sodium nitroprusside in healthy volunteers. Br J Pharmacol 160:
1128–1134, 2010.
Cankar K, Finderle Z. Gender differences in cutaneous vascular
and autonomic nervous response to local cooling. Clin Auton Res
13: 214–220, 2003.
Celermajer DS, Sorensen KE, Gooch VM, Spiegelhalter DJ, Miller
OI, Sullivan ID, Lloyd JK, Deanfield JE Non-invasive detection of
endothelial dysfunction in children and adults at risk of
atherosclerosis. Lancet. 1992; 340:1111–1115.
Chang CH, Tsai RK, Wu WC, Kuo SL, Yu HS. Use of dynamic
capillaroscopy for studying cutaneous microcirculation in patients
with diabetes mellitus. Microvasc Res 53: 121–127, 1997.
Charkoudian N. Skin blood flow in adult human thermoregulation:
how it works, when it does not, and why. Mayo Clin Proc 78: 603–
612, 2003.
Cracowski JL, Minson CT, Salvat-Melis M, Halliwill JR.
Methodological issues in the assessment of skin microvascular
endothelial function in humans. Trends Pharmacol Sci 27: 503–
508, 2006.
Dalle-Ave A, Kubli S, Golay S, Delachaux A, Liaudet L, Waeber B,
Feihl F. Acetylcholine-induced vasodilation and reactive
hyperemia are not affected by acute cyclo-oxygenase inhibition in
human skin. Microcirculation 11: 327–336, 2004.
Drexler H. Endothelial dysfunction: clinical implications. Prog
Cardiovasc Dis 1997; 39:287-324.
Durand S, Fromy B, Bouye P, Saumet JL, Abraham P. Current-
induced vasodilation during water iontophoresis (5 min, 0.10 mA)
is delayed from current onset and involves aspirin sensitive
mechanisms. J Vasc Res 39: 59–71, 2002.
Durand S, Tartas M, Bouye P, Koitka A, Saumet JL, Abraham P.
Prostaglandins participate in the late phase of the vascular
response to acetylcholine iontophoresis in humans. J Physiol 561:
811–819, 2004.
Feihl F, Liaudet L, Waeber B, Levy BI. Hypertension: a disease of
the microcirculation? Hypertension 48: 1012–1017, 2006.
Ferrell WR, Ramsay JE, Brooks N, Lockhart JC, Dickson S, McNeece
GM, Greer IA, Sattar N. Elimination of electrically induced
iontophoretic artefacts: implications for non-invasive assessment
of peripheral microvascular function. J Vasc Res 39: 447–455,
2002.
Flammer AJ, Anderson T, Celermajer DS, Creager MA, Deanfield J,
Ganz P, Hamburg NM, Lüscher TF, Shechter M, Taddei S, Vita JA,
Lerman A. The assessment of endothelial function: from research
into clinical practice. Circulation. 2012 Aug 7;126(6):753-67. doi:
10.1161/CIRCULATIONAHA
Flammer AJ, Luscher TF. Three decades of endothelium research:
from the detection of nitric oxide to the everyday implementation
of endothelial function measurements in cardiovascular diseases.
Swiss Med Wkly. 2010; 140:w13122.
Foerster J, Kuerth A, Niederstrasser E, Krautwald E, Pauli R, Paulat
R, Eweleit M, Riemekasten G, Worm M. A coldresponse index for
the assessment of Raynaud’s phenomenon. J Dermatol Sci 45:
113–120, 2007.
Holowatz LA, Thompson CS, Minson CT, Kenney WL. Mechanisms
of acetylcholine-mediated vasodilatation in young and aged
human skin. J Physiol 563:965–973, 2005.
Johnson JM, Kellogg DL Jr. Local thermal control of the human
cutaneous circulation. J Appl Physiol 109: 1229–1238, 2010.
Kalia YN, Naik A, Garrison J, Guy RH. Iontophoretic drug delivery.
Adv Drug Deliv Rev 56: 619–658, 2004.
Kruger A, Stewart J, Sahityani R, O’Riordan E, Thompson C, Adler
S, Garrick R, Vallance P, Goligorsky MS. Laser Doppler flowmetry
detection of endothelial dysfunction in end-stage renal disease
patients: correlation with cardiovascular risk. Kidney Int 70: 157–
164, 2006.
Larkin SW, Williams TJ. Evidence for sensory nerve involvement in
cutaneous reactive hyperemia in humans. Circ Res 73: 147–154,
1993.