Microscopia especular

MICROSCOPIA ESPECULAR
Maria Inês Rodrigues
HOSPITAL ESPÍRITO SANTO, ÉVORA

Quarta-feira, 16 de Outubro de 13

RMAL
TÉLIO NO
ENDO

ÇÃO
INTRODU
IN

DICAÇÕES

DE

OS
IOS ÓPTIC
PRINCÍP
ÓP
MICROSC
TIPOS DE
DETER

POLIMEG

IOS


L

AT I S M O

FI
PLEOMOR

SMO

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ÕES CLÍN
APLICAÇ

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TEL
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CELU
RFOLOGIA
MO

LIA
E ENDOTE
N S I DA D

IAL

SAGE
OME MES
TA K E H

S

Introdução


Introdução

É uma técnica de imagem querática
não invasiva que permite observar e
registar a função e estrutura do
endotélio querático.


Introdução


Permite uma magniﬁcação 100x
superior à biomicroscopia
convencional.


Introdução


convencional.


Todos os microscópios especulares
clínicos se baseiam no microscópio
desenhado por Maurice, em 1968.

Introdução


Todos os microscópios especulares
clínicos se baseiam no microscópio
desenhado por Maurice, em 1968.

convencional.

Existem múltiplos aparelhos
distintos, cada um com a sua
calibração e magniﬁcação próprias.


Indicações


Indicações

Avaliar córneas
patológicas,
nomeadamente córnea
guttata, irregularidades
da Descemet,
endoteliopatia por uso
de lentes de contacto e
distroﬁas posteriores.


Indicações

Avaliar córneas
patológicas,
da Descemet,


Avaliar a reserva
funcional
endotelial
previamente a
qualquer cirurgia
intra-ocular.

Indicações

Avaliar córneas
patológicas,
da Descemet,


Avaliar a reserva
funcional
endotelial
previamente a
qualquer cirurgia
intra-ocular.

Avaliação de
córneas de
dadores
previamente a
queratoplastia
penetrante.

A
ESPECUL
PIA
ICROSCO
M
OS
IOS ÓPTIC
PRÍNCIP


R

A
ESPECUL
PIA
ICROSCO
M
OS
IOS ÓPTIC
PRÍNCIP

LUZ


R

A
ESPECUL
PIA
ICROSCO
M
OS
IOS ÓPTIC
PRÍNCIP

LUZ

Ao atingir uma superfície pode
ser reﬂectida, absorvida ou
transmitida.


R

A
ESPECUL
PIA
ICROSCO
M
OS
IOS ÓPTIC
PRÍNCIP

LUZ

transmitida.

CÓRNEA


R

A
ESPECUL
PIA
ICROSCO
M
OS
IOS ÓPTIC
PRÍNCIP

LUZ

transmitida.

CÓRNEA

Apresenta múltiplas interfaces
com índices refractivos diferentes.


R

A
ESPECUL
PIA
ICROSCO
M
OS
IOS ÓPTIC
PRÍNCIP

LUZ

transmitida.

CÓRNEA



REFLEXÃO

R

A
ESPECUL
PIA
ICROSCO
M

R

OS
IOS ÓPTIC
PRÍNCIP

LUZ

transmitida.

CÓRNEA



REFLEXÃO

Quando o ângulo de reﬂexão da luz é
igual ao ângulo de incidência ocorre
reﬂexão especular da luz, ou seja,
como se fosse um espelho.

A
ESPECUL
PIA
ICROSCO
M

R

OS
IOS ÓPTIC
PRÍNCIP

LUZ

transmitida.

CÓRNEA



REFLEXÃO

REGISTO

A
ESPECUL
PIA
ICROSCO
M

R

OS
IOS ÓPTIC
PRÍNCIP

LUZ

transmitida.

CÓRNEA



REFLEXÃO

REGISTO

A luz reﬂectida especularmente é
capturada pelo microscópio e
transformada numa imagem.

Princípios ópticos


Tipos de microscópios


CONTACTO


CONTACTO

NÃO CONTACTO


CONTACTO

NÃO CONTACTO


Consiste num microscópio com uma lente que
aplana a córnea, reduzindo assim a sua curvatura e
aumentando a área de reﬂexo especular.

CONTACTO

NÃO CONTACTO


Utilizam tecnologia de focagem de imagem
automatizada. A córnea não sofre aplanação.

CONTACTO

NÃO CONTACTO

Utilizam tecnologia de focagem de imagem
automatizada. A córnea não sofre aplanação.

Ambos utilizam sistemas computorizados de captura de
imagem e análise da morfologia da célula endotelial.



C O N TA C T


O

TA C T
NÃO CON
C O N TA C T


O

O

TA C T
NÃO CON
C O N TA C T

O

◆

Keeler Instruments
model SP-580

◆

HAI Labs
model CL-1000xyz

◆

TOMEY Corp.
model EM-1000


O

TA C T
NÃO CON
C O N TA C T

O

O

◆

Keeler Instruments
model SP-580

◆

Bio Optics Inc.
model LMS-12000

◆

HAI Labs
model CL-1000xyz

◆

Topcon
model SP-series

◆

TOMEY Corp.
model EM-1000

◆

Konan
model ROBO SP-series

◆

Nidek
model CM-530


Determinação da densidade endotelial


Método de comparação: comparação com um padrão em favo de mel prédeterminado


Método de moldura: contagem das células numa moldura deﬁnida.


Método de canto: localiza a intersecção de bordos celulares e transfere a imagem
para um polígono em formato digital de forma a calcular a área celular.


Método de canto: localiza a intersecção de bordos celulares e transfere a imagem
para um polígono em formato digital de forma a calcular a área celular.
Método do centro: determina área celular de uma célula e das suas adjecentes
(center-to-center)



*



*
*

*

*
*



*

*
*

*

*
*


*

*
*

*
*

*

*

Morfologia normal da célula endotelial



- Células com 6 lados, hexagonais, regulares.




Alterada por:
- doença
- trauma
- toxicidade química
- lentes de contacto




Alterada por:

Aumento da área celular

- doença

Diminuição da densidade
celular

- trauma
- toxicidade química
- lentes de contacto


Alteração da morfologia
celular

Endotélio normal


Endotélio normal

Densidade endotelial (CD): nº células/mm2


Endotélio normal


Área celular média (AVE) +- SD (μm2)


Endotélio normal


Forma (6A): percentagem de células hexagonais


Endotélio normal


Forma (6A): percentagem de células hexagonais
Coeﬁciente de variação (CV)


Densidade endotelial



Contagem endotelial de córnea normal:
350.000



350.000
Densidade endotelial normal à nascença:
3000-4000 células/mm2



350.000
Densidade endotelial normal do adulto:
2400 células/mm2



350.000
Densidade endotelial normal do adulto:
2400 células/mm2
Densidade endotelial normal do idoso:
2000 células/mm2


Polimegatismo


Polimegatismo

Sinal de disfunção endotelial precoce.


Polimegatismo

Variação anormal no tamanho das células
endoteliais.


Polimegatismo

endoteliais.
Contagem endotelial (CD) diminuída.


Polimegatismo

endoteliais.
Coeﬁciente de variação (CV) superior a 40
(normal 27-28)


Pleomorfismo


Pleomorfismo

Outro sinal de disfunção endotelial precoce.


Pleomorfismo

Variação anormal na forma das células
endoteliais.


Pleomorfismo

endoteliais.


Pleomorfismo

endoteliais.
Indicador da forma (6A) inferior a 50.


Pleomorfismo e Polimegatismo


- Células com 6 lados,
hexagonais, regulares.


- A, células alongadas.


- B, células com bordos
arredondados.


arredondados.
- C e D, células redondas.


arredondados.
- E, células quadradas.


arredondados.
- E, células quadradas.
- F, células triangulares.


Densidade endotelial normal com pleomorfismo e polimegatismo



Contagem endotelial normal mas
grande variabilidade no tamanho e
forma celulares.



Contagem endotelial normal mas
grande variabilidade no tamanho e
forma celulares.

Contagem celular sem variáveis da
forma celular pode ser enganadora.


Aplicações clínicas


A densidade endotelial decresce com a idade.


Com contagens entre 400 e 800 células/mm2 veriﬁca-se edema querático
ocorre.


ocorre.
Veriﬁcam-se uma diminuição da contagem endotelial até 30% em cirurgias no
segmento anterior.


ocorre.
Veriﬁcam-se uma diminuição da contagem endotelial até 30% em cirurgias no
segmento anterior.
Para uma cirurgia de segmento anterior segura a contagem endotelial deve ser no
mínimo 1200-1500 células/mm2.


Aplicações clínicas - Anomalias várias


- A, excrescências
isoladas (córnea guttata).


- A, excrescências
- B, excrescências
conﬂuentes.


- A, excrescências
- B, excrescências
conﬂuentes.
- C e D, estruturas intracelulares brilhantes.


- A, excrescências
- B, excrescências
conﬂuentes.
- E, depósitos endoteliais
pigmentados.


- A, excrescências
- B, excrescências
conﬂuentes.
- E, depósitos endoteliais
pigmentados.
- F, G e H, estruturas
intra-celulares escuras.

Aplicações clínicas - Córnea gutatta


Envelhecimento


Envelhecimento
Doença de Fuchs


Envelhecimento
Doença de Fuchs
Inﬂamação


Aplicações clínicas - Implante de LIO CA


Aplicações clínicas - uso prolongado de lentes de contacto


MIC

UL
IA ESPEC
ROSCOP

AGE
ME MESS
TA K E H O


AR

S

MIC

UL
IA ESPEC
ROSCOP

AGE
ME MESS
TA K E H O

ENDOTÉLIO


AR

S

MIC

UL
IA ESPEC
ROSCOP

AGE
ME MESS
TA K E H O

ENDOTÉLIO

Análise do reﬂexo especular


AR

S

MIC

UL
IA ESPEC
ROSCOP

AGE
ME MESS
TA K E H O

ENDOTÉLIO


PLEOMORFISMO


AR

S

MIC

UL
IA ESPEC
ROSCOP

AGE
ME MESS
TA K E H O

ENDOTÉLIO


PLEOMORFISMO

Percentagem das células com 6
lados inferior a 50%


AR

S

MIC

UL
IA ESPEC
ROSCOP

AGE
ME MESS
TA K E H O

ENDOTÉLIO


PLEOMORFISMO



AR

S

DENSIDADE

MIC

UL
IA ESPEC
ROSCOP

AGE
ME MESS
TA K E H O

ENDOTÉLIO


PLEOMORFISMO



AR

S

DENSIDADE

Normal 2500 células/mm2 (adulto)

MIC

UL
IA ESPEC
ROSCOP

AGE
ME MESS
TA K E H O

ENDOTÉLIO


PLEOMORFISMO



AR

S

DENSIDADE


POLIMEGATISMO

MIC

UL
IA ESPEC
ROSCOP

AGE
ME MESS
TA K E H O

ENDOTÉLIO


PLEOMORFISMO



AR

S

DENSIDADE


POLIMEGATISMO

Coeﬁciente variação > 0.40

OBRIGAD

A

EM
FIM-DE-S
BOM

ANA

Maria Inês Rodrigues
mariainesrodrigues@gmail.com


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