实验 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
- 2. 根据朗伯－比耳定律：根据朗伯－比耳定律： A=εbcA=εbc ，当入射光波长，当入射光波长 λλ 及光程及光程 bb 一定一定
时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度 AA 与该物质的浓度与该物质的浓度 cc 成成
正比。只要绘出以吸光度正比。只要绘出以吸光度 AA 为纵坐标，浓度为纵坐标，浓度 cc 为横坐标的标准曲线为横坐标的标准曲线
，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未
知样的含量。知样的含量。
用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法
，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点
。。
实验原理实验原理
- 3. 2+
N N
3 Fe2++
N N
N
N N
N
Fe
在在 pH=2pH=2 ～～ 99 的溶液中，的溶液中， FeFe2+2+
与邻二氮菲与邻二氮菲 (phen)(phen) 生成稳定的桔生成稳定的桔
红色配合物红色配合物 Fe(phen)Fe(phen)33
2+2+
：：
此配合物的此配合物的 lgKlgK 稳稳 =21.3=21.3 ，摩尔吸光系数，摩尔吸光系数 εε510510 = 1.1×10= 1.1×1044
L·molL·mol-1-1
·cm·cm-1-1
，而，而
FeFe3+3+
能与邻二氮菲生成能与邻二氮菲生成 3 1∶3 1∶ 配合物，呈淡蓝色，配合物，呈淡蓝色， lgKlgK 稳稳 =14.1=14.1 。所以在。所以在
加入显色剂之前，应用盐酸羟胺加入显色剂之前，应用盐酸羟胺 (NH(NH22OH·HCl)OH·HCl) 将将 FeFe3+3+
还原为还原为 FeFe2+2+
，其，其
反应式如下：反应式如下：
2Fe2Fe3+3+
+2NH+2NH22OH·HCl→2FeOH·HCl→2Fe2+2+
+N+N22+H+H22O+4HO+4H++
+2Cl+2Cl--
测定时控制溶液的酸度为测定时控制溶液的酸度为 pH≈5pH≈5 较为适宜。用邻二氮菲可测定试样中较为适宜。用邻二氮菲可测定试样中
- 5. TU-1901TU-1901 紫外紫外 -- 可见分光光度计，可见分光光度计， 1 cm1 cm 吸收池，吸收池， 10 mL10 mL 吸量管，吸量管， 5050
mLmL 比色管（或容量瓶）比色管（或容量瓶）
仪器和试剂仪器和试剂
仪器仪器
- 6. 1.0×101.0×10-3-3
mol·Lmol·L-1-1
铁标准溶液：准确称量铁标准溶液：准确称量 0.4822 g NH0.4822 g NH44Fe(SO)Fe(SO)44·12H·12H22OO
于烧杯中，加入于烧杯中，加入 80 mL 6 mol·L80 mL 6 mol·L-1-1
HClHCl 和少量水，溶解后转移至和少量水，溶解后转移至 1 L1 L 容容
量瓶中，以水稀释至标线，摇匀。量瓶中，以水稀释至标线，摇匀。
100μg·mL100μg·mL-1-1
铁标准溶液铁标准溶液 :: 准确称量准确称量 0.8634 g NH0.8634 g NH44Fe(SO)Fe(SO)44·12H·12H22OO 于于
烧杯中，加入烧杯中，加入 80 mL 6 mol·L80 mL 6 mol·L-1-1
HClHCl 和少量水，溶解后转移至和少量水，溶解后转移至 1 L1 L 容量容量
瓶中，以水稀释至标线，摇匀。瓶中，以水稀释至标线，摇匀。
0.15%0.15% 邻二氮菲水溶液，邻二氮菲水溶液， 10%10% 盐酸羟胺溶液（新配），盐酸羟胺溶液（新配）， 1 mol·L1 mol·L-1-1
乙酸钠溶液，乙酸钠溶液， 1 mol·L1 mol·L-1-1
NaOHNaOH 溶液，溶液， 6 mol·L6 mol·L-1-1
HClHCl （工业盐酸试样）（工业盐酸试样）
试剂试剂
- 8. 1.1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择吸收曲线的绘制和测量波长的选择 ：：
用吸量管吸取用吸量管吸取 2.00 mL1.0×102.00 mL1.0×10-3-3
mol.Lmol.L-1-1
标准溶液，注入标准溶液，注入 50mL50mL 比色比色
管中，加入管中，加入 1.00mL 10%1.00mL 10% 盐酸羟胺溶液，摇匀，加入盐酸羟胺溶液，摇匀，加入 2.00 mL0.15%2.00 mL0.15% 邻邻
二氮菲溶液，二氮菲溶液， 5.0 mL NaAc5.0 mL NaAc 溶液，以水稀释至刻度。在光度计上用溶液，以水稀释至刻度。在光度计上用 11
cmcm 比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，在比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，在 440-560 nm440-560 nm 间，每隔间，每隔 1010
nmnm 测量一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收测量一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收
曲线，选择测量的适宜波长。曲线，选择测量的适宜波长。
实验步骤实验步骤
- 9. 2.2. 工业盐酸中铁含量的测定工业盐酸中铁含量的测定 ：：
(1)(1) 标 准 曲 线 的 制 作标 准 曲 线 的 制 作 :: 在在 55 支支 50 mL50 mL 比 色 管 中 ， 分 别 加 入比 色 管 中 ， 分 别 加 入
0.200.20 、、 0.400.40 、、 0.600.60 、、 0.800.80 、、 1.00 mL 100 g/mL1.00 mL 100 g/mL 铁标准溶液，再加入铁标准溶液，再加入
1.00 mL10%1.00 mL10% 盐 酸 羟 胺 溶 液 ，盐 酸 羟 胺 溶 液 ， 2.00 mL0.15%2.00 mL0.15% 邻 二 氮 菲 溶 液 和邻 二 氮 菲 溶 液 和 5.0 mL5.0 mL
NaAcNaAc 溶液，以水稀释至刻度，摇匀。溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
(2)(2) 试样测定试样测定 :: 准确吸取准确吸取 2.0 mL2.0 mL 工业盐酸三份，按标准曲线的操作步工业盐酸三份，按标准曲线的操作步
骤，测定其吸光度。骤，测定其吸光度。
