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HAMAP  (High-quality Automated and Manual Annotation of microbial Proteomes)  (ttp://www.expasy.ch/sprot/hamap/ ) Escherichia coli ECOLI Batterio  G- Salmonella typhimurium  SALTY Batterio  G- Thermos termophilus  THET Batterio  G- Bacillus subtilis  BACSU Batterio  G+   Staphylococcus aureus  STAAN Batterio   G+ Pyrococcus furiosus PYRFU Archea-estremofilo Methanococcus jannaschii METJA Archea-estremofilo Archaeoglobus fulgidus ARCFU Archaea  Globulo rosso umano ERITRO
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Il server Phobius è in grado di prevedere la topologia delle sequenze amminoacidiche  costituenti una proteina e di  definire le porzioni transmembrana.  L’architettura del software Phobius è basata  sull’ HMM (Hidden Markov Models)
[object Object],organismo Seq.TM ECOLI 2775   SALTY 1322   THET 2189   BACSU 5586   STAAN 6027   PYRFU 3647   METJA 5740   ARCFU 2473   ERITRO 405
conteggio aminoacidi A  R  N  D  C  Q  E  G  H  I  L  K  M  F  P  S  T  W  Y  V 187 15  42  17  8  17  9  183 10  315 364 23  47  64  163 128 99  41  98  187 conteggio dimeri  LI  56 LL  55 IL  50 LA  43 IG  40 GL  39 II  38 AI  35 IA  34 FL  32 VL  31 conteggio trimeri  IGL 13 LIL 12 LLL 10 LLA 9 VIG 9 FLL 8 GLA 8 IAG 8
Analisi composizionale TMP ARCFU BACSU ECOLI METJA PYRFU abun sigma abun sigma abun sigma abun sigma abun sigma                     13,2593 2,8662 11,0384 2,8833 12,3541 2,6995 8,4810 2,9413 9,9437 2,4693 0,9339 0,7370 0,7346 0,6201 0,9733 0,6660 0,8207 0,7692 0,9956 0,7944 1,2859 0,8099 1,3606 0,8884 1,3714 0,8187 1,7518 1,0495 1,4256 0,9744 0,5975 0,6010 0,5126 0,5218 0,5248 0,5387 0,9369 0,7851 0,6850 0,6768 0,6228 0,5889 1,0819 0,8149 1,4883 0,9320 1,0992 0,8310 0,2301 0,3668 0,7598 0,6157 1,0237 0,7015 1,0397 0,7109 0,5614 0,5453 0,7334 0,6632 0,7393 0,6995 0,5649 0,5491 0,5325 0,5374 1,0160 1,0033 0,9447 0,8878 7,2639 2,3814 8,3949 2,5103 8,7367 2,4724 8,1275 2,6671 8,3237 2,4224 0,6124 0,5708 0,7064 0,6576 0,6710 0,6933 0,5593 0,5087 0,5493 0,6029 11,9560 2,4991 13,6947 2,8188 11,0783 2,6230 18,1128 3,2251 13,9256 2,7669 18,1391 3,2240 17,4876 2,8067 18,8206 3,4664 17,3565 2,8239 19,1524 3,0296 0,6517 0,6048 0,6488 0,6086 0,4908 0,4881 1,5132 1,2760 1,1148 0,8493 3,0154 1,3177 3,6791 1,4888 4,2505 1,5512 2,9038 1,3521 2,9836 1,4635 2,7710 1,1718 2,4789 1,1998 2,6418 1,1955 2,3118 1,2177 2,8111 1,2442 9,5124 2,3984 9,8087 2,3830 7,9071 2,2990 9,2901 2,5222 8,9888 2,2416 6,0930 1,9005 5,9642 1,7879 5,3208 1,6727 5,7818 1,8371 6,0557 2,0133 4,5196 1,4284 4,7990 1,6415 4,7619 1,5318 4,1167 1,6573 4,8055 1,5220 1,6731 1,2083 1,8876 1,1713 2,8773 1,5159 1,2156 0,9568 1,6952 1,0417 4,4956 1,6105 3,7852 1,5902 3,0600 1,4540 5,0398 1,7628 4,6698 1,7601 11,0981 2,3806 10,3483 2,1675 11,0991 2,5149 9,0042 2,2889 9,9663 2,2426 A R N D C Q E G H I L K M F P S T W Y V
Analisi composizionale TMP GEOM< arcfu bacsu ecoli metja pyrfu salty staan thet eritro Simil PYRFU Simil THET Simil ERITRO ARCFU 0 1,528 1,550 2,515 1,109 2,484 1,804 4,358 0,423 2,25 7,23 2,03 BACSU 1,528 0 1,261 2,193 1,482 2,235 1,015 2,843 1,678 2,82 6,96 2,85 ECOLI 1,550 1,261 0 4,069 2,293 0,968 2,292 3,408 1,937 3,30 6,15 2,67 METJA 2,515 2,193 4,069 0 1,798 3,012 1,565 6,524 2,501 3,04 6,52 3,91 PYRFU 1,109 1,482 2,293 1,798 0 2,521 2,345 4,525 2,224 0,00 6,66 3,06 SALTY 2,484 2,235 0,968 3,012 2,521 0 2,844 3,896 1,447 3,66 5,95 2,44 STAAN 1,804 1,015 2,292 1,565 2,345 2,844 0 4,505 1,538 2,88 6,73 2,46 THET 4,358 2,843 3,408 6,524 4,525 3,896 4,505 0 3,730 6,66 0,00 6,54 ERITRO 1,721 1,678 1,937 2,501 2,224 1,447 1,538 3,730 0 3,06 6,54 0,00
ARCFU ERITRO PYRFU BACSU STAAN METJA  ECOLI SALTY  THET Analisi composizionale TMP
Analisi composizionale TMP ARCFU METJA ECOLI SALTY PYRFU BACSU THET8 ERITRO STAAN
 
Analisi composizionale TMP 'A' 'R' 'N' 'D' 'C' 'Q' 'E' 'G' 'H' 'I' 'L' ARCFU BACSU ECOLI METJA INLKALAALAKKIL 28,57 0,00 7,14 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 14,29 28,57 0,80 0,55 0,87 0,83 GIGKYLHSAKKFGKAWVGEIMNS  8,70 0,00 4,35 0,00 0,00 0,00 4,35 17,39 4,35 8,70 4,35 0,31 0,47 0,24 0,27 KWKLFKKIPKFLHSAKKF  5,56 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5,56 5,56 11,11 0,59 0,54 0,42 0,40 RGLRRLGRKIAHGVKKYGPTVLRIIRIAG  6,90 20,69 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 17,24 3,45 13,79 10,34 0,50 0,15 0,46 0,48 KNLRRIIRKIIHIIKKYG 0,00 16,67 5,56 0,00 0,00 0,00 0,00 5,56 5,56 33,33 5,56 0,74 0,88 0,96 0,61 KNLRRIIRKGIHIIKKYG  0,00 16,67 5,56 0,00 0,00 0,00 0,00 11,11 5,56 27,78 5,56 0,79 0,85 0,90 0,60 KNLRRITRKIIHIIKKYG  0,00 16,67 5,56 0,00 0,00 0,00 0,00 5,56 5,56 27,78 5,56 0,63 0,67 0,73 0,55 VGALAVVVWLFLWLW  13,33 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 6,67 0,00 0,00 26,67 0,12 0,65 0,52 0,66 VGALAVVVWLYLWLW  13,33 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 6,67 0,00 0,00 26,67 0,12 0,66 0,58 0,64
Analisi composizionale TMP
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  • 8.
  • 9.
  • 10. conteggio aminoacidi A R N D C Q E G H I L K M F P S T W Y V 187 15 42 17 8 17 9 183 10 315 364 23 47 64 163 128 99 41 98 187 conteggio dimeri LI 56 LL 55 IL 50 LA 43 IG 40 GL 39 II 38 AI 35 IA 34 FL 32 VL 31 conteggio trimeri IGL 13 LIL 12 LLL 10 LLA 9 VIG 9 FLL 8 GLA 8 IAG 8
  • 11. Analisi composizionale TMP ARCFU BACSU ECOLI METJA PYRFU abun sigma abun sigma abun sigma abun sigma abun sigma                     13,2593 2,8662 11,0384 2,8833 12,3541 2,6995 8,4810 2,9413 9,9437 2,4693 0,9339 0,7370 0,7346 0,6201 0,9733 0,6660 0,8207 0,7692 0,9956 0,7944 1,2859 0,8099 1,3606 0,8884 1,3714 0,8187 1,7518 1,0495 1,4256 0,9744 0,5975 0,6010 0,5126 0,5218 0,5248 0,5387 0,9369 0,7851 0,6850 0,6768 0,6228 0,5889 1,0819 0,8149 1,4883 0,9320 1,0992 0,8310 0,2301 0,3668 0,7598 0,6157 1,0237 0,7015 1,0397 0,7109 0,5614 0,5453 0,7334 0,6632 0,7393 0,6995 0,5649 0,5491 0,5325 0,5374 1,0160 1,0033 0,9447 0,8878 7,2639 2,3814 8,3949 2,5103 8,7367 2,4724 8,1275 2,6671 8,3237 2,4224 0,6124 0,5708 0,7064 0,6576 0,6710 0,6933 0,5593 0,5087 0,5493 0,6029 11,9560 2,4991 13,6947 2,8188 11,0783 2,6230 18,1128 3,2251 13,9256 2,7669 18,1391 3,2240 17,4876 2,8067 18,8206 3,4664 17,3565 2,8239 19,1524 3,0296 0,6517 0,6048 0,6488 0,6086 0,4908 0,4881 1,5132 1,2760 1,1148 0,8493 3,0154 1,3177 3,6791 1,4888 4,2505 1,5512 2,9038 1,3521 2,9836 1,4635 2,7710 1,1718 2,4789 1,1998 2,6418 1,1955 2,3118 1,2177 2,8111 1,2442 9,5124 2,3984 9,8087 2,3830 7,9071 2,2990 9,2901 2,5222 8,9888 2,2416 6,0930 1,9005 5,9642 1,7879 5,3208 1,6727 5,7818 1,8371 6,0557 2,0133 4,5196 1,4284 4,7990 1,6415 4,7619 1,5318 4,1167 1,6573 4,8055 1,5220 1,6731 1,2083 1,8876 1,1713 2,8773 1,5159 1,2156 0,9568 1,6952 1,0417 4,4956 1,6105 3,7852 1,5902 3,0600 1,4540 5,0398 1,7628 4,6698 1,7601 11,0981 2,3806 10,3483 2,1675 11,0991 2,5149 9,0042 2,2889 9,9663 2,2426 A R N D C Q E G H I L K M F P S T W Y V
  • 12. Analisi composizionale TMP GEOM< arcfu bacsu ecoli metja pyrfu salty staan thet eritro Simil PYRFU Simil THET Simil ERITRO ARCFU 0 1,528 1,550 2,515 1,109 2,484 1,804 4,358 0,423 2,25 7,23 2,03 BACSU 1,528 0 1,261 2,193 1,482 2,235 1,015 2,843 1,678 2,82 6,96 2,85 ECOLI 1,550 1,261 0 4,069 2,293 0,968 2,292 3,408 1,937 3,30 6,15 2,67 METJA 2,515 2,193 4,069 0 1,798 3,012 1,565 6,524 2,501 3,04 6,52 3,91 PYRFU 1,109 1,482 2,293 1,798 0 2,521 2,345 4,525 2,224 0,00 6,66 3,06 SALTY 2,484 2,235 0,968 3,012 2,521 0 2,844 3,896 1,447 3,66 5,95 2,44 STAAN 1,804 1,015 2,292 1,565 2,345 2,844 0 4,505 1,538 2,88 6,73 2,46 THET 4,358 2,843 3,408 6,524 4,525 3,896 4,505 0 3,730 6,66 0,00 6,54 ERITRO 1,721 1,678 1,937 2,501 2,224 1,447 1,538 3,730 0 3,06 6,54 0,00
  • 13. ARCFU ERITRO PYRFU BACSU STAAN METJA ECOLI SALTY THET Analisi composizionale TMP
  • 14. Analisi composizionale TMP ARCFU METJA ECOLI SALTY PYRFU BACSU THET8 ERITRO STAAN
  • 15.  
  • 16. Analisi composizionale TMP 'A' 'R' 'N' 'D' 'C' 'Q' 'E' 'G' 'H' 'I' 'L' ARCFU BACSU ECOLI METJA INLKALAALAKKIL 28,57 0,00 7,14 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 14,29 28,57 0,80 0,55 0,87 0,83 GIGKYLHSAKKFGKAWVGEIMNS 8,70 0,00 4,35 0,00 0,00 0,00 4,35 17,39 4,35 8,70 4,35 0,31 0,47 0,24 0,27 KWKLFKKIPKFLHSAKKF 5,56 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5,56 5,56 11,11 0,59 0,54 0,42 0,40 RGLRRLGRKIAHGVKKYGPTVLRIIRIAG 6,90 20,69 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 17,24 3,45 13,79 10,34 0,50 0,15 0,46 0,48 KNLRRIIRKIIHIIKKYG 0,00 16,67 5,56 0,00 0,00 0,00 0,00 5,56 5,56 33,33 5,56 0,74 0,88 0,96 0,61 KNLRRIIRKGIHIIKKYG 0,00 16,67 5,56 0,00 0,00 0,00 0,00 11,11 5,56 27,78 5,56 0,79 0,85 0,90 0,60 KNLRRITRKIIHIIKKYG 0,00 16,67 5,56 0,00 0,00 0,00 0,00 5,56 5,56 27,78 5,56 0,63 0,67 0,73 0,55 VGALAVVVWLFLWLW 13,33 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 6,67 0,00 0,00 26,67 0,12 0,65 0,52 0,66 VGALAVVVWLYLWLW 13,33 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 6,67 0,00 0,00 26,67 0,12 0,66 0,58 0,64
  • 18.
  • 19.  

Editor's Notes

  1. L’obiettivo principale di questo lavoro di dottorato è la progettazione di nuovi farmaci (peptidi o peptidomimetici) con attività antimicrobica e/o antifungina.
  2. Da un punto di vista computazionale risulterebbe estremamente complesso simulare modelli di membrane a causa dell’eterogeneità dei lipidi che le costituiscono. Si è pensato per questo di intraprendere lo studio delle proteine di membrana.
  3. Da un punto di vista computazionale risulterebbe estremamente complesso simulare modelli di membrane a causa dell’eterogeneità dei lipidi che le costituiscono. Si è pensato per questo di intraprendere lo studio delle proteine di membrana.
  4. VANTAGGI Da un punto di vista computazionale risulterebbe estremamente complesso simulare modelli di membrane a causa dell’eterogeneità dei lipidi che le costituiscono. Si è pensato per questo di intraprendere lo studio delle proteine di membrana….
  5. Per poter isolare le sequenze proteiche transmembrana relative ai seguenti organismi batterici e archeobatterici abbiamo dovuto disporre dell’intero proteoma degli stessi. Per proteoma si intende la totalità delle proteine espresse e modificate dopo l’espressione da un genoma durante l’arco dell’intera vita di una cellula o di un tessuto. Nella serie d’eventi regolatori che da un gene portano ad una proteina attiva, il proteoma rappresenta il prodotto finale del genoma. I dati ottenuti dall&apos;analisi del proteoma, in particolare i dati di spettrometria di massa, sono inseriti in banche dati che in alcuni casi , come quello dell’ HAMAP , sono pubbliche. I proteomi completi relativi a questi microrganismi sono stati scaricati dalla banca dati HAMAP (ttp://www.expasy.ch/sprot/hamap/ )