Este documento trata sobre hongos oportunistas y micosis. Brevemente describe que los hongos son organismos eucariotas heterótrofos con pared celular de quitina. Explica que factores como tratamientos inmunosupresores facilitan las infecciones por hongos oportunistas como Candida, Cryptococcus, Aspergillus y Pneumocystis en pacientes inmunocomprometidos. Finalmente, resume los métodos de diagnóstico de micosis como tinción directa de muestras y cultivo.

1. Prof. Jesus A. Nuñez P. MSc. Biólogo
Santa Ana de Coro, junio2014
Universidad Nacional Experimental
Francisco de Miranda
Área: Ciencias de la Salud
Unidad Curricular: Microbiología II
Micología

2. Grupo diverso de organismos unicelulares o pluricelulares
Eucariotas
Heterótrofos
Alimentación por absorción directa de nutrientes
Pared celular compuesta por quitina
Junto con bacterias, causantes de la putrefacción
y descomposición de materia orgánica
Género CryptococcusGenero Candida, Aspergillus Pneumocystis
Phylum Ascomicota, Basidiomicota, ZigomicotaPhylum Ascomicota, Basidiomicota, Zigomicota
Género Rhizopus
GENERALIDAD
ES

3. Avance en medicina
Trasplante de medula ósea y de órgano solido
 Agentes quimioterapicos para cáncer
Uso generalizado de antimicrobianos
Utilización de inmunosupresores
Maniobras diagnósticas invasoras
Alimentación parenteral
AUMENTO en la prevalencia de las infecciones fúngicas.
Manual de Procedimientos en Microbiología Clínica. Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica .Editores:
Emilia Cercenado y Rafael Cantón. 2006
INTRODUCCIÓN
Relacionado fundamentalmente con el INCREMENTO
de pacientes inmunocomprometidos SUSCEPTIBLES
A CONTRAER INFECCIONES OPORTUNISTAS.

4. Infecciones oportunistasInfecciones oportunistas
Micosis oportunistas
Afecciones producidas por hongos
Saprófitos o comensales del hombre
Forman parte de la flora normal de piel, mucosas, tracto digestivo o respiratorio
Micótica ambiental (suelo, agua, aire)

5. Factores predisponentes
 Alteraciones Número/función de leucocitos
 Alteraciones CD4/CD8
 Tratamiento antibióticos, corticoides
 Inmunodeficiencias primarias
 Quimioterapia
 Radioterapia
 Síndrome de malnutrición crónica
 Trasplante de médula/órganos sólidos
 Tratamiento esteroideo/citotóxico
prolongado
 Cirugía abdominal extensa – Quemaduras
 Persistencia de catéteres endovasculares
 Hospitalización prolongada
 Nutrición parenteral
EN ADULTOS
Facilitan la ruta
de infección
RECIÉN NACIDOS
Bajo peso
Sistema Inmunitario/Estructura
epitelial inmadura
 Cirugía abdominal extensa – Quemaduras
 Persistencia de catéteres endovasculares
 Hospitalización prolongada
 Nutrición parenteral

6. MICOSIS
OPORTUNISTA
S
Muestras
seriadas
Biopsias
LCR
Orina
hemocultivos
lisis-centrifugación
Examen directo
fresco /tinciones
Solo tiene valor si
se observan elementos
fúngicos
Escarificaciones
DIAGNÓSTICO
1. Hallazgo repetido del mismo hongo
2. Confirmación reiterada de su presencia en los cultivos
3. Factores predisponentes que faciliten la agresión del hongo
4. Cuadro clínico compatible con el diagnóstico presentado
Criterios para el diagnostico
Manual de procedimientos y técnicas de laboratorio para la identificación de los principales hongos oportunistas causantes de micosis humanas. Serie de normas
técnicas n.º 44. 2007

7. Biología
Molecular
Caracterización genotípica
Mecanismos de resistencia a los antifúngicos
Espectrometría de masas
Determina la especie de hongos productores
de IFIs en pocas horas.
Procedimientos que combinan técnicas
moleculares /espectrometría de
Masas permiten identificar el hongo sin
necesidad de cultivo previo (PCR).
Anticuerpos antimicelio, manano, glucano y
quitina, β-1,3-D-glucano /antimanano, enolasa
(Eno1p), proteína de estrés térmico (Hsp90p),
proteinasa aspártica (Sap).
Métodos de interés
Procedimientos en Microbiología Clínica. Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. Capitulo 45. Métodos
microbiológicos para el diagnóstico, manejo y estudio de la infección fúngica invasora . Editores: Emilia Cercenado y Rafael Cantón.2012

8. Candida
Cryptococcus
Aspergillus
Pneumocystis
Mucorales
Géneros representativos clásicos
Procedimientos en Microbiología Clínica Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. Editores:
Emilia Cercenado y Rafael Cantón. 2006
Saprófitos de suelo, agua, aire y vegetales
Abundan en restos de materia orgánica en descomposición
Considerados inocuos, CONTAMINANTES DE LABORATORIO
Su aislamiento per se NO IMPLICA diagnóstico seguro de enfermedad
DISMINUCIÓN DE DEFENSAS DEL HOSPEDADOR, provee condiciones
favorables de desarrollo microbiano

9. CANDIDIASISCANDIDIASIS
AgenteAgente
etiológicoetiológico

10. Aprovecha la situación debilitada del
huésped para transformarse en patógenos y
pueden provocar infecciones muy graves
Candida
Reproducción asexual por conidios
Capacidad de formar
pseudomicelio
Epidemiología
Levadura comensal de piel, mucosas,
tracto respiratorio alto, digestivo
y genito – urinario.
Redondeadas u ovaladas de 3-7 µm
de diámetro
Presente en personas con alteración en
defensas inmunológicas.
Tratamientos con inmunosupresores,
tumoraciones malignas.
Trastornos de las barreras naturales (piel y
mucosas)
Causantes del 7,45% de las micosis
25% de las micosis superficiales
75 y 88% de las infecciones fúngicas
nosocomiales
Grupo étnico

11. Dimorfismo
Adhesión a mucosas y a tejidos
Producción de exoenzimas hidrolíticas
Cambio fenotípico
Forma biopelículas
Participación de los receptores tipo Toll (tlrs) y efecto de la inmunosenescencia en la Respuesta inmunitaria frente a candida Albicans.
Murciano C. Universitat de valència. 2009
Factores de virulencia del género Candida
Respuesta inmunitaria
Barreras físicasBarreras físicas BioquímicasBioquímicas MicrobiológicasMicrobiológicas
Epitelios Piel/Revestimiento de
mucosas.
Quimiotaxis Microorganismos no patógenos
PH/Acidos grasos Opsonización Competencia por nutrientes
Esfingosinas Interacción con el complemento Producción de antimicrobianos
Proteínas con acción
antifúngica (mucinas, β-
defensinas)
Provocar secreción de
histamina
Impiden colonizar Hongos

12. Factores predisponentes para el desarrollo de
enfermedad candidiásica
Tratamiento con antibióticos
Alteraciones de la biota microbiana
Alteraciones metabólicas
Alteraciones nutricionales
Uso de prótesis, catéteres
Alteraciones inmunológicas
Tratamientos corticoides y con drogas
inmunosupresoras

13. Manifestaciones clínicasManifestaciones clínicas
Genitales
Cutánea
Mucosa gástrica
Tracto respiratorio
Material para el diagnóstico: raspado de uñas, lesiones cutáneas y mucosas. Esputo, lavado bronquial,
materia fecal, orina, sangre, Biopsias.
Examen microscópico directo: azul de lactofenol o hidróxido de potasio, coloraciones de Gram y Giemsa.
Mucocutánea
Onicomicosis

14. C. albicans
Formación de tubo germinal
Clamidosporas
identifica C. albicansToma muestra NaOH-KOH
10-20 %
Observación al microscopio levaduras
en ocasiones con brotes, pseudohifas
Agar Sabouraud
colonias planas, color claro, húmedas
Pruebas bioquímicas como asimilación
y fermentación de azúcares
Otros métodosOtros métodos
La inmunoproteómica en el descubrimiento de biomarcadores de tercera generación. El ejemplo de las candidiasis invasivas. Pitarch, a. Gil, c. Nombela, c. Departamento de
microbiología II. Facultad de farmacia, universidad complutense de Madrid
Local/Superficial
Sistémicas/Invasivas

15. Criptococosis
 Infección oportunista.
 En personas inmunodeficientes /inmunosupresión, la
infección pulmonar puede diseminarse en forma
general, estableciéndose en el SNC y en otros órganos.
 La infección en el hombre ocurre a través del aparato
respiratorio, y es asintomática o está acompañada de
signos pulmonares inespecíficos.
 No es contagiosa

16. Criptococosis
Agentes etiológicos
Especies del
Género
Cryptococcus
Cryptococcus gattii
(serotipos B y C)
Cryptococcus
neoformans
C. neoformans var.
grubii (serotipo A)
C. neoformans var.
neoformans
(serotipo D)
Fernández CM. Cryptococcus neoformans En: Microbiología y Parasitología Médica. Llop A, Valdés-Dapena M, Zuazo Jl. Ciudad de La Habana:Ed. ECIMED; 2000. p.
517-21.
Micosis sistémica de distribución
mundial
Hongo levaduriforme encapsulado
Distribución mundial
Regiones tropicales y subtropicales

17. Fernández O, fernández C, ariosa MC, fernández J. Caracterización de un grupo de pacientes con criptococosis del sistema nervioso central. Rev neurol 2003;36: 316-21.
Paneque r. Valdivia, J. Aguiar A. Castillo, I. Martínez, M. Delgado, E. Criptococosis en pacientes con trasplante renal. Centro de investigaciones médico quirúrgicas. Rev cubana med
trop 2007;59(2):169-72
Teleomorfo
SexualSexual
Producción de basidiosporas (propágulos
sexuales).
Anamorfo
o Mitospórico
AsexualAsexual
Producción de células levaduriformes gemantes (propágulos asexuales)
Desarrollan cápsula (levaduras madre y blastoconidios) de
polisacáridos
Componentes capsulares determina algún serotipo: A, B, C ó D.
Las levaduras son redondas (4-6 µm de diámetro)
Formadoras de
pseudomicelio
C. neoformans var. grubii (serotipo A)
C. neoformans var. neoformans
(Serotipo D)
C. neoformans var. gattii (Serotipo B y
C),
Filobasidiella neoformans var. neoformans para los
serotipos A y D y Filobasidiella neoformans var.
bacillispora para los serotipos B y C

18. C. Neoformans var. neoformans / gurbii C. gattii
Amplia distribución mundial.
Sin predilección de grupo etáreo, racial u
ocupacional.
Presente en pacientes inmunocomprometidos
(SIDA) producidas por la variedad neoformans.
Su reservorio principal son las deyecciones de
palomas y otras aves.
 C. neoformans var. grubii predominan en
lugares de clima templado.
Frecuentes en áreas tropicales y subtropicales
Aislado de varias especies Eucaliptos Australia,
Terminalia catappa en Colombia y Moquilea
tomentosa en Brasil.
Se considera endémico en Latinoamérica,
mayor prevalencia en el norte y nordeste del
Brasil. África, Sur de EUA (California), Australia y
Canadá
8va causa de meningitis .
Presentes en inmunocompetentes
Epidemiolog
ía
Fernández O, fernández C, ariosa MC, fernández J. Caracterización de un grupo de pacientes con criptococosis del sistema nervioso central. Rev neurol 2003;36:
316-21.
Paneque r. Valdivia, J. Aguiar A. Castillo, I. Martínez, M. Delgado, E. Criptococosis en pacientes con trasplante renal. Centro de investigaciones médico quirúrgicas.

19. Factores de virulencia del géneroFactores de virulencia del género CryptococcusCryptococcus
1. Presencia de cápsula polisacarída (Glucuronoxilomanano GXM)
 Protege contra fagocitosis
 Inhibe producción de linfocinas
 Provoca respuestas celular y humoral muy débiles.
 Enlaza e inmoviliza parcialmente a los anticuerpos dirigidos contra
la pared celular y la cápsula del hongo.
2. Fenoloxidasa (síntesis melanina)
 Actúa como escudo que protege al hongo contra anticuerpos,
agentes oxidantes y la anfotericina B.

20. Enfermedades
predisponentes SIDA, leucemia, linfoma, enfermedades del colágeno, corticoterapia, embarazo.
 Primoinfección asintomática en casi del 100%
Meningoencefalitis
Lesiones Pulmonares
Cutánea
OseaVisceral

21. Diagnóstico1. Tinciones
LCR, orina u otras muestras líquidas.
Sensibilidad 25-50% en meningitis, pacientes con sida puede ser mayor.
Mucicarmin colorea la cápsula de rojo rosáceo.
Histopatología, metenamina-plata o ácido peryódico de Schiff (PAS), identifica C.
neoformans por tamaño y gemación.
Cápsula Cryptococcus sp en rojo y células gigantes
de tipo cuerpo extraño (tinción de mucicarmin, 400x).
2. Cultivo e identificación
LCR en el caso de meningitis, y a partir de otras muestras en otro tipo de infecciones.
Agar Sabouraud sin cicloheximida.
Identificación por asimilación y fermentación de azúcares.
Microscan Yeast Identification Panel (Microscan-Dade), Vitek AMS-Yeast Biochemical Card (bioMérieux),
RapID Yeast Plus (Innovative Diagnostic System)
3. Detección del antígeno capsular
Util en las muestras de suero, LCR, orina, respiratorias.
Alta sensibilidad y especificidad
4. Diagnóstico molecular
Refieren buena sensibilidad y especificidad en muestras
pulmonares y de LCR.
Martín-mazuelos, E. Valverde-conde, A. Criptococosis: diagnóstico microbiológico y estudio de la sensibilidad in vitro servicio de microbiología. Hospital universitario de valme. Sevilla
Javaloyas, M. Montserrat, A. Isern, I. Bastida, M. Meningoencefalitis por Cryptococcus neoformans. Vol. 129. Núm. 02. 09 Junio 2007
Muestras: LCR, exudados,
esputo, orina y suero.

22. A infecciones invasoras del pulmón u otros órganos
profundos
Aspergilosis broncopulmonar alérgica
Ampliamente distribuido
en la naturaleza
Cuadros alérgicos
Aspergilosis
Aspergillus fumigatus 85-90%
Aspergillus flavus 5-10%
Aspergillus niger 3-7%
Aspergillus terrus 2-3%
Aspergillus nidulas 1%.
conidias se diseminan
por el aire
Procedimientos en Microbiología Clínica Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y
Microbiología Clínica Editores: Emilia Cercenado y Rafael Cantón. 2012.
Agentes etiológicos

23.  Crecimiento a 37ºC
 Enzimas proteolíticas (elastasa, restrictocina,
fumigatoxina)
 Antigenos con actividad proteasa
 Gliotoxina, inhibidor de la fagocitosis
 Fosfolipidos inhiben la activación del complemento
Pulmonar
Extra Pulmonar
Localización
No invasiva
Invasiva
Alérgica
Aspergiloma
Aspergilosis Pulmonar Invasiva
(API)
Aspergilosis Necrotizante Crónica
(ANC)
SNC
Cutánea
Ótica
Genitourinaria
Oftálmica
FACTORES DE VIRULENCIA

24. Onicomicosis
Manifestaciones clínicasManifestaciones clínicas
Otomicosis
Aspergilomas
Aspergilosis pulmonar invasiva
Otras manifestaciones sistémicas de Aspergillus incluyen la endocarditis, aneurismas micóticos, infección de prótesis vasculares, osteomielitis,
endoftalmitis y afectación de órganos como el cerebro, estómago, hígado, bazo y riñones. Hasta el 30% de las Aspergilosis invasivas son
diseminadas.
Abscesos cerebrales múltiples por Aspergillus
spp. en paciente con trasplante hepático.
Biopsia cutánea. Tinción de PAS (360×480). Hifas de
Aspergillus spp. Con invasión vascular y trombosis.

25. La principal defensa del hospedero es la
fagocitosis por los macrófagos y neutrófilos
A S P E R G I L O S I S
Condiciones predisponentes
Presencia de cavidades pulmonares
NeutropeniaDiabetes
Enfermedad granulomatosa crónica
Tratamiento prolongado con corticoides
Enfisema bronco-pulmonar

26. Diagnóstico
Visualizar micelios en la muestra
Aislamiento e identificación en
muestras seriadas
La histopatología diagnóstico de
certeza

27. Mucormicosis
Procedimientos en Microbiología Clínica. Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. Capitulo 45. Métodos
microbiológicos para el diagnóstico, manejo y estudio de la infección fúngica invasora . Editores: Emilia Cercenado y Rafael Cantón.2012
Infección causada por hongos del orden Mucorales
Agentes etiológicos pertenecen al Phylum Zygomycota
Poseen filamentos gruesos de hasta 30 µm de diámetro
Son hialinos y muy pocos septos o carecen de ellos
 Reproducción asexual por medio de esporas o sexual mediante cigosporas
Se adquieren por vía respiratoria
Aerobios pero pueden sobrevivir en condiciones microaerofílicas
Se desarrollan bien a temperaturas de 30 a 40ºC
Mucorales:
 Rhizopus
 Lichtheimia (ex-Absidia)
 Mucor
 Rhizomucor
Géneros representativos
Entomophthorales:
 Conidiobolus y Basidiobolus
En Hospederos inmunocompetentes

28. ACIDOSIS
Cetoacidosis diabética, diarrea, uremia, intoxicación con ácido acetilsalicílico,
síndrome urémico hemolítico.
DISRRUPCION DE LA BARRERA MUCOCUTANEA
Traumatismos, quemaduras, adicción endovenosa, sitios de inserción de
catéteres, sitios de inyección
Aumento del hierro sérico libre, Hemodiálisis, ausencia o déficit de transferrina.
Falla fagocitosis lisis o disminución del numero de fagocitos
Neutropénicos, oncohematológicos, trasplantados, uso de corticoides a altas dosis
Factores predisponentes
OTROS
Javier Afeltra. Micosis Oportunistas I. Departamento de Inmunología , Parasitología y Microbiología Facultad de Medicina UBA. javierafeltra@intramed.net.ar
2012

29. Inhalación esporos
Inoculación directa
Ingestión
Vías de ingreso
Diseminación hematógena
desde cualquier sitio primario
de infección
Tropismo por vasos sanguíneos, Diseminación hematógena,
Tromboembolias
Patogenia
Tomado de: Javier Afeltra. Micosis Oportunistas I. Departamento de Inmunología , Parasitología y Microbiología Facultad de Medicina UBA.
javierafeltra@intramed.net.ar

30. FORMAS CLÍNICAS
 Invasión nariz, paladar, faringe
 Senos para nasales
 Tejido periorbitario y craneal
 Progresa en horas o días
 Alta mortalidad
RINOCEREBRAL
Pacientes con enfermedad
oncohematológica
Clínica variada
Evolución severa, brusca,
progresiva y mortal.
PULMONAR
Inoculación directa de esporas
Politraumatismos
Quemaduras extensas
CUTÁNEA

31. DIAGNÓSTICO
EXÁMENES EN FRESCO Y
ESTUDIOS HISTOPATOLÓGICOS
Muestras biopsias, Secreciones nasales
Demostrar la presencia de las hifas cenocíticas
hialinas invadiendo los tejidos
Tomado de: Javier Afeltra. Micosis Oportunistas I. Departamento de Inmunología , Parasitología y Microbiología
Facultad de Medicina UBA. javierafeltra@intramed.net.ar 2012
Micelio de los mucorales es muy lábil y
pierde viabilidad con facilidad.
Examen directo con KOH 15% del exudado
de un paciente con mucormicosis (400X).
Biopsia teñida con hematoxilina-eosina

32. PNEUMOCISTOSIS
Pneumocystis jirovecii
Patógeno oportunista
Atípico, extracelular, ubicuo, unicelular, no cultivable
Carencia de ergosterol en membrana- resistencia natural a
anfotericina B
Causante de neumonía en pacientes inmunodeprimidos
infectados por el VIH o en los receptores de transplante de
órgano sólido
La colonización por P. jirovecii es frecuente en pacientes con infección por el VIH
Enfermedad pulmonar crónica
Fibrosis quística (FQ)
Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC)
Enfermedades pulmonares intersticiales
Factores predisponentes
Esteves F, Gaspar J, Marques T, Leite R, Antunes F, Mansinho K, et al. Identification of relevant single-nucleotide polymorphisms in
Pneumocystis jirovecii: relationship with clinical data. Clin Microbiol Infect. 2010;16:878-84.

33. Manifestaciones clínicas
Neumocistosis extrapulmonar, es poco frecuente y se caracteriza por fiebre, anorexia,
pérdida de peso, hepatoesplenomegalia, intesticiopatía pulmonar y lesiones papulosas o
nodulares en la piel
Asintomática Infantil y adulta inmunocompetente y representa la mayor parte de las
infecciones
Neumocistosis infantil Afecta a niños desnutridos y hacinados
Formas respiratorias esporádicas en inmunodeficientes más común en la clínica y
la observada en los pacientes VIH positivos

34. Determinación sérica de 1-3 -D-glucano, el principal componente de la pared
celular de muchos hongos
DIAGNÓSTICO
Lavados broncoalveolares (LBA)
Esputo inducido
Biopsia pulmonar y transbronquial
Diagnóstico microscópico
Métodos de tinción
hematoxilina y eosina, metenanima
de plata de Grocott-Gomori, giemsa,
azul de toluidina O, Gram Weigert y
blanco de calcoflúorna
Inmunoflorescencia directa
PCR
Observación de las formas tróficas
o quísticas

35. Patologías de origen fúngico que se presentan en hospederos
con diversos grados de inmunodeficiencias.
Enfermedades de base severas
Terapias prolongadas
Factores predisponentes al desarrollo de infecciones fúngicas
Importante causa de morbi-mortalidad.
Generadas por
Inhalación
Penetración traumática a través de mucosas y piel
Alimentos contaminados
Transmisión a través del personal de salud y elementos médicos
Fuentes de infección endógenas y exógenas
Manual de procedimientos y técnicas De laboratorio para la Identificación de los principales Hongos oportunistas causantes De micosis humanas. Lima, 2007
Mecanismos de defensa específicos e inespecíficos del hospedero ineficaces
Infecciones oportunistas
Fallan los mecanismos celulares de defensa en los neutrófilos
Sistémicas o diseminadas