2. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
APLIKASI SPEKTROSKOPI UV-VIS
• Analisis Kualitatif
Memprediksi jenis/golongan senyawa
• Analisis Kuantitatif
Menentukan kandungan senyawa dalam sampel
~ Arie BS ~
3. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
Woodward-Fieser Rules for Dienes
Homoannular Heteroannular
(cisoid) (transoid)
λ=214 nm
Parent λ=253 nm
=217 (acyclic)
Increments for:
Double bond extending conjugation 30 30
Alkyl substituent or ring residue 5 5
Exocyclic double bond 5 5
Polar groupings:
-OC(O)CH3 0 0
-OR 6 6
-Cl, -Br 5 5
-NR2 60 60
-SR 30 30
~ Arie BS ~
4. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
CONTOH
Transoid: 217 nm
Alkyl groups or ring residues: 3x5= 15 nm
Calculated: 232 nm
Observed: 234 nm
Cisoid: 253 nm
Alkyl groups or ring residues: 2x5= 10 nm
Calculated: 263 nm
Observed: 256 nm
~ Arie BS ~
5. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
CONTOH
Transoid: 214 nm
Alkyl groups or ring residues: 3x5= 15 nm
Exocyclic double bond: 5 nm
Calculated: 234 nm
Observed: 235 nm
Cisoid: 253 nm
Alkyl groups or ring residues: 4x5= 20 nm
Exocyclic double bond: 5 nm
Calculated: 278 nm
Observed: 275 nm
~ Arie BS ~
6. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
Woodward's Rules for Conjugated Carbonyl Compounds
Base values:
X=R
Six-membered ring or acyclic parent enone λ=215 nm
Five-membered ring parent enone λ=202 nm
Acyclic dienone λ=245 nm
X=H λ=208 nm
X = OH, OR λ=193 nm
~ Arie BS ~
7. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
Woodward's Rules for Conjugated Carbonyl Compounds
Increments for:
Double bond extending conjugation 30
Exocyclic double bond 5
Endocyclic double bond in a 5- or 7-membered ring for
5
X = OH, OR
Homocyclic diene component 39
Alkyl substituent or ring residue α 10
β 12
γ or higher 18
~ Arie BS ~
9. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
Woodward's Rules for Conjugated Carbonyl Compounds
Solvent λ max shift (nm)
Water +8
chloroform -1
ether -7
cyclohexane - 11
dioxane -5
hexane - 11
~ Arie BS ~
10. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
CONTOH
Acyclic enone: 215 nm
α-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
β-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 24 nm
Calculated: 249 nm
Observed: 249 nm
Five-membered ring parent
202 nm
enone:
β-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 24 nm
Exocyclic double bond: 5 nm
Calculated: 231 nm
Observed: 226 nm
~ Arie BS ~
11. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
CONTOH Six-membered ring or alicyclic
202 nm
parent enone:
Extended conjugation: 30 nm
Homocyclic diene component: 39 nm
δ-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 18 nm
Calculated: 302 nm
Observed: 300 nm
Five-membered ring parent enone: 202 nm
α-Br: 25 nm
β-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 24 nm
Exocyclic double bond: 5 nm
Calculated: 256 nm
Observed: 251 nm
~ Arie BS ~
12. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
CONTOH
Carboxylic acid: 193 nm
α-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
β-Alkyl groups or ring residues: 12 nm
Calculated: 215 nm
Observed: 217 nm
Ester: 193 nm
α-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
β-Alkyl groups or ring residues: 12 nm
Endocyclic double bond in 7-membered ring: 5 nm
Calculated: 220 nm
Observed: 222 nm
~ Arie BS ~
13. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kualitatif
CONTOH
Aldehyde: 208 nm
α-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
β-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 24 nm
Calculated: 242 nm
Observed: 242 nm
Aldehyde: 208 nm
Extended conjugation: 30 nm
Homodiene component: 39 nm
α-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
δ-Alkyl groups or ring residues: 18 nm
Calculated: 304 nm
Observed: 302 nm
~ Arie BS ~
14. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kuantitatif
• Biasanya dilakukan pada larutan berair
• Spektroskopi UV-Vis untuk analisis kuantitatif bercirikan:
1. Dapat diaplikasikan untuk berbagai senyawa, baik organik
maupun anorganik.
2. Mempunyai sensititivitas yang baik: 10-4 hingga 10-5 M
3. Selektif
4. Mempunyai akurasi yang baik
5. Mudah dalam pengumpulan data
~ Arie BS ~
15. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kuantitatif
PROSEDUR:
1. Pemilihan panjang gelombang maksimum (λ maks)
Dilakukan dengan scanning dari 200 – 800 nm.
Pengukuran dilakukan pada λmaks karena:
a. Memiliki sensitivitas terbesar (∆A/∆c terbesar)
b. Pada puncak, kurva absorpsi flat (rata) sehingga Hukum Lambert-
Beer menjadi lebih valid.
Variabel yang mempengaruhi spektra absorpsi:
a)Solven
b)pH
c) Temperature
d)Matriks sample matrix (mis: konsentrasi elektrolit dan
spesies yang dapat berinterferensi)
~ Arie BS ~
16. Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
UV-VIS untuk Analisis Kuantitatif
PROSEDUR:
1. Pembuatan kurva kalibrasi
Dapat digunakan kurva kalibrasi eksternal, standar
internal, maupun addisi standar
• siapkan seri larutan baku (minimal 5 buah)
• ukur setiap larutan baku pada λmaks
• lakukan pengukuran terhadap blanko
• buat hubungan antara absorbansi vs konsentrasi
• siapkan sampel (jika perlu lakukan pengenceran)
sehingga absorbansi sampel masuk dalam rentang
kurva kalibrasi
~ Arie BS ~
