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Esgli2014 Rapid testing in the monitoring of Legionella in complex environmental matrices

  • 1. Rapid testing in the monitoring of Legionella in complex environmental matrices G. Rodríguez Thursday 18 SeptemberThursday 18 September
  • 2. Background flora gives to inconclusive results by culture based techniques Inhibitors gives to inconclusive results by PCR based techniquesresults by PCR based techniques Technical approach: Immuno- magnetic method (IMM)
  • 3. The capture of IMM focus on cell envelop integrity
  • 4. IMM utilizes magnetic immunobeads to capture Legionella achieving its purification & concentration at the same time.
  • 5. Laboratories evaluated the IMM by comparison with culture and qPCR or/and qPCR
  • 6. Culture but not IMM lost viable Legionella when microbiota was added Water Matrix Legionella (103)+ + Microbiota I (>107) Microbiota II (>107) or
  • 7. IMM signal was reduced by the effect of biocides on Legionella
  • 8. Immunomagnetic separation could be useful to reduce inconclusive results by PCR (ongoing studies)
  • 9. Not growth based methods detected more positive results than culture method.
  • 10. Action and alert levels for IMM were comparable to those derived from the culture (coincidence 94%) (*) There is not an accepted correspondence between PCR and culture
  • 11. Purification of Legionella allowed to deliver even more profitable information The proportion of no conclusive results decreased by eliminating or minimizing interfering agents over detection
  • 12. Minutes Hours IMM IDEAL Time IMM could be a complementary tool for the intended use of prevention. Days Weeks Low High Likelihood of detecting Legionella WORST Culture qPCR Time to result
  • 13. Summary: Legionella-binding magnetic beads were useful for rapid testing in environmental samples Enhances consistency of the results by minimizing the background flora/ inhibitors Focus on viability because captureFocus on viability because capture event depends on the integrity of cell envelop Reduces time to result Cost effective and simple to use