1. 22 液相色谱技术 Chromatography

4. 慢 中等 快 色谱分离 Temporal course 淋洗液

20. 分子筛凝胶色谱原理

25. 凝胶粒径：软 gel 粒径较大，在 50-150  m 之间；硬 gel 较小，在 5-50  m 之间。粒径越小， HETP 越小，分离效率越高。 床体积 (bed volume) ： 1g 干燥 gel 溶胀后所占有的体积。如， Sephadex G50 的床体积为 9-11 cm 3 /g 干胶。 空隙体积 (void volume) ：凝胶之间的空隙体积，即 V 0 。 空隙体积一般用平均分子量在 2000KD 水溶性蓝葡聚糖 (blue dextran) 测定 。

34. 原理 (ion exchanger chromatography, IEC) 1 st 荷电溶质在离子交换剂上的分配系数 m I - 离子强度； A 和 B 为常数 , 均为 pH 的函数，在物理意义上， B 为溶质的静电荷数与交换剂的离子价数之比 ( 对于 pro, 一般大于 10) 。 m  - 离子强度无限大时的溶质分配系数 , 为静电作用外的非特异性吸附引起的溶质在交换剂上分配。 2 nd 意义： 对于 pro. 和 aa 调节 I value 调节 |pH – pI| value

37. Mini Q PC 3.2/3: Glutathione synthetase SDS-PAGE Starting material Peak 2

38. 操作 1 st 恒定洗脱 (Sephadex 常用 ) 缺点：洗脱体积大 , 溶质洗脱不尽

39. 2 nd 线性梯度洗脱 (linear gradient elution) 线性梯度洗脱的优缺点 优点：流动相 I/pH 连续变化，不易出现干扰峰，操作范围广； 缺点：需要特殊的浓度梯度设备，如 梯度混合器 。

40. 3 rd 阶梯洗脱法 (stepwise elution) 优点 ：无须特殊设备，操作简单； 缺点 ：流动相浓度不断变化，易出现干扰峰，容易出现多组分洗脱峰重叠的现象。

41. 线性洗脱时间 定义： GH dI/dV- 离子强度梯度 (mol/l) ， F- 流动相流量 (l/s). 利用 GH 和 I p 关系图及上述方程，可算 t r

42. 分离度和柱效 1 st 分离度 意义 ： 4 因素可控制 2 nd 柱效 意义： I+dI I m i 富集效应

53. Influence of Particle Size on the Separation effect 30µm 15µm 5µm

54. Source RPC

56. 亲和色谱 （ Affinity chromatography ） 载体活化、配基连接、吸附、洗脱

62. 亲和作用体系 凝集素 -- 糖、糖蛋白、细胞表面受体 酶、蛋白质 -- 过渡金属离子（ Cu 2+ ,Zn 2+ ) 酶 -- 辅酶 免疫球蛋白 --A 蛋白、 G 蛋白 群特异性 核酸 -- 互补碱基链段 荷尔蒙 -- 受体蛋白 抗原 -- 单克隆抗体 酶 -- 底物、产物、抑制剂 高特异性 亲和体系 特异性

65. 亲和层析 - 操作过程

78. 22.5 色谱系统 高通量液相色谱系统 分析型色谱系统

79. AKTA explorer 100 色谱系统

80. AKTA explorer 100 色谱系统工作流程

82. HPLC

83. HPLC

85. 多肽的分离纯化

86. 蛋白的纯化

89. G Protein Receptor Kinase Purification Technique Ppt HIC AIEX CIEX AC Purification factor 7 20 2408 18647 Porcine cerebella homogenate RESOURCE Q Ammonium sulfate precipitation Butyl Sepharose Fast Flow RESOURCE s HiTrap Heparin

90. Rec  -Mannosidase Purification from Pichia Technique Purification factor 63 622 719 UF GF AIEX HIC Phenyl Sepharose HP Q Sepharose FF Superdex 200 pg Ultrafiltration

91. DNA Binding Protein Purification Technique DNA-1 Sepharose CIEX AC AC AC CIEX Purification factor 5 8 4943 9 2447 HeLa cell nuclear extracts SP Sepharose High Performance Heparin Sepharose Fast Flow DNA-2 Sepharose Mono S