1. UNIVERZA V LJUBLJANI
BIOTEHNIŠKA FAKULTETA
Urška DOLINAR
PROTIBAKTERIJSKA AKTIVNOST
VODNIH IZVLEČKOV IZBRANIH
ANTARKTIČNIH MORSKIH SPUŽEV
MAGISTRSKO DELO
Mentorica: Kristina Sepčić
Ljubljana, 2013

2. SPUŽVE
Vir številnih bioaktivnih učinkovin:
- protibakterijske
- protiglivne
- protivnetne Potencialni terapevtiki!
- protitumorske
- protivirusne
- protimalarijske
- imunosupresivne
- nevrosupresivne
- protivegetativne
- inhibitorji različnih encimov

3. Morski naravni produkti odobreni s strani FDA
Klinični status Ime naravne spojine Tržno ime Organizem Biološka aktivnost Farmacevtska družba
FDA odobrena Citarabin (Ara-C) Cytosar-U® spužva protitumorska Bedford Laboratories
FDA odobrena Vidarabin (Ara-A) Vira-A® spužva protivirusna
Monarch
Pharmaceuticals Inc.
FDA odobrena Zikonotid Prialt® polž analgetik Azupharma
FDA odobrena
Eribulinijev mesilat
(E7389)
Halaven® spužva protitumorska Eisai Inc.
FDA odobrena
Etil ester omega-3-
masne kisline
Lovaza® riba
zniževanje
trigliceridov v krvi
GlaxoSmithKline
FDA odobrena Trabektedin (ET-743) Yondelis® plaščar protitumorska Pharmamar
FDA odobrena
Brentuksimab vedotin
(SGN-35)
Adcetris® polž protitumorska Seattle Genetics

4. Morski naravni produkti odobreni s strani FDA
Klinični status Ime naravne spojine Tržno ime Organizem Biološka aktivnost Farmacevtska družba
FDA odobrena Citarabin (Ara-C) Cytosar-U® spužva protitumorska Bedford Laboratories
FDA odobrena Vidarabin (Ara-A) Vira-A® spužva protivirusna
Monarch
Pharmaceuticals Inc.
FDA odobrena Zikonotid Prialt® polž analgetik Azupharma
FDA odobrena
Eribulinijev
mesilat (E7389)
Halaven® spužva protitumorska Eisai Inc.
FDA odobrena
Etil ester omega-3-
masne kisline
Lovaza® riba
zniževanje
trigliceridov v krvi
GlaxoSmithKline
FDA odobrena Trabektedin (ET-743) Yondelis® plaščar protitumorska Pharmamar
FDA odobrena
Brentuksimab vedotin
(SGN-35)
Adcetris® polž protitumorska Seattle Genetics

5. ANTIBIOTIK
• delovanje
Slika 1: Tarče delovanja antibiotikov

6. ODPORNOST
• naravna in pridobljena odpornost
• mehanizmi
Slika 2: Mehanizmi odpornosti proti antibiotikom pri bakterijah
• problem vse večjega števila odpornih bakterijskih vrst

7. NAMEN DELA
– testiranje protibakterijske aktivnosti vodnih
izvlečkov antarktičnih spužev na širokem naboru
bakterij
– primerjava rezultatov z že objavljenimi podatki o
protibakterijski učinkovitosti izvlečkov testiranih
spužev
– primerjava rezultatov z rezultati protibakterijske
aktivnosti etanolnih izvlečkov istih spužev (mag.
delo Gašper Strugar)

8. HIPOTEZA
• Polarne spužve imajo v primerjavi s tropskimi manj
bioaktivnih učinkovin in manjšo protibakterijsko
aktivnost.

9. MATERIALI IN
METODE

10. MATERIAL
• izvlečki spužev (sveži in kuhani)
• bakterijski sevi: Gram
-
, Gram
+
, nepatogeni in proti antibiotikom
odporni
• pozitivna kontrola: antibiotiki: Amp, Tc, Rif, Cm, Kn
• negativna kontrola: destilirana voda
METODA
• difuzijski test na agarju
• cona inhibicije v mm in MIK v (mg/ml)

11. REZULTATI

12. • Protibakterijska aktivnost 16/33 vodnih izvlečkov: 11 inhibicija
rasti, 5 omejitev rasti.
• Najbolj aktiven izvleček Hemigellius bidens: 8/11 bakterijskih
vrst
• Razlika v protibakterijski aktivnosti kuhanih in svežih izvlečkov
spužve Hemigellius bidens
Slika 3: Razlika v občutljivosti bakterije Enterobacter sp. na kuhan in svež vodni izvleček
spužve Hemigellius bidens

13. • Protibakterijska aktivnost 16/33 vodnih izvlečkov: 11 inhibicija
rasti, 5 omejitev rasti.
• Najbolj aktiven izvleček Hemigellius bidens: 8/11 bakterijskih
vrst
• Razlika v protibakterijski aktivnosti kuhanih in svežih izvlečkov
spužve Hemigellius bidens
Slika 3: Razlika v občutljivosti bakterije Enterobacter sp. na kuhan in svež vodni izvleček
spužve Hemigellius bidens

14. • Protibakterijska aktivnost 16/33 vodnih izvlečkov: 11 inhibicija
rasti, 5 omejitev rasti.
• Najbolj aktiven izvleček Hemigellius bidens: 8/11 bakterijskih
vrst
• Razlika v protibakterijski aktivnosti kuhanih in svežih izvlečkov
spužve Hemigellius bidens
Slika 3: Razlika v občutljivosti bakterije Enterobacter sp. na kuhan in svež vodni izvleček
spužve Hemigellius bidens

15. • Večja protibakterijska aktivnost izvlečkov proti Gram
+
bakterijam.
Slika 4: Cona inhibicije rasti Bacillus subtilis, oz. protibakterijska aktivnost
izvlečka spužve Latrunculia cf. lendenfeldi

16. Že objavljeni podatki o protibakterijskih učinkovinah iz
antarktičnih spužev, testiranih v tej nalogi

17. SKLEPI

18. • Razlika v protibakterijski aktivnosti kuhanega in svežega
izvlečka spužve Hemigellius bidens: aktivna učinkovina je
temperaturno občutljiva molekula.
• Za nadaljnje biokemijske raziskave sta primerni spužvi
Hemigellius bidens in Latrunculia cf. lendenfeldi.
• Večja protibakterijska aktivnost etanolnih izvlečkov
istoimenskih spužev v primerjavi z vodnimi, je verjetno
posledica boljše topnosti aktivne snovi v etanolu kot v vodi, ali
pa prisotnosti protibakterijskih snovi, ki se raztapljajo samo v
organskih topilih.
• Spužve iz tropskih morij kažejo širši spekter bioloških
aktivnosti in proizvedejo več sekundarnih metabolitov kot
antarktične spužve.

19. • Razlika v protibakterijski aktivnosti kuhanega in svežega
izvlečka spužve Hemigellius bidens: aktivna učinkovina je
temperaturno občutljiva molekula.
• Za nadaljnje biokemijske raziskave sta primerni spužvi
Hemigellius bidens in Latrunculia cf. lendenfeldi.
• Večja protibakterijska aktivnost etanolnih izvlečkov
istoimenskih spužev v primerjavi z vodnimi, je verjetno
posledica boljše topnosti aktivne snovi v etanolu kot v vodi, ali
pa prisotnosti protibakterijskih snovi, ki se raztapljajo samo v
organskih topilih.
• Spužve iz tropskih morij kažejo širši spekter bioloških
aktivnosti in proizvedejo več sekundarnih metabolitov kot
antarktične spužve.

20. • Razlika v protibakterijski aktivnosti kuhanega in svežega
izvlečka spužve Hemigellius bidens: aktivna učinkovina je
temperaturno občutljiva molekula.
• Za nadaljnje biokemijske raziskave sta primerni spužvi
Hemigellius bidens in Latrunculia cf. lendenfeldi.
• Večja protibakterijska aktivnost etanolnih izvlečkov
istoimenskih spužev v primerjavi z vodnimi, je verjetno
posledica boljše topnosti aktivne snovi v etanolu kot v vodi, ali
pa prisotnosti protibakterijskih snovi, ki se raztapljajo samo v
organskih topilih.
• Spužve iz tropskih morij kažejo širši spekter bioloških
aktivnosti in proizvedejo več sekundarnih metabolitov kot
antarktične spužve.

21. • Razlika v protibakterijski aktivnosti kuhanega in svežega
izvlečka spužve Hemigellius bidens: aktivna učinkovina je
temperaturno občutljiva molekula.
• Za nadaljnje biokemijske raziskave sta primerni spužvi
Hemigellius bidens in Latrunculia cf. lendenfeldi.
• Večja protibakterijska aktivnost etanolnih izvlečkov
istoimenskih spužev v primerjavi z vodnimi, je verjetno
posledica boljše topnosti aktivne snovi v etanolu kot v vodi, ali
pa prisotnosti protibakterijskih snovi, ki se raztapljajo samo v
organskih topilih.
• Spužve iz tropskih morij kažejo širši spekter bioloških
aktivnosti in proizvedejo več sekundarnih metabolitov kot
antarktične spužve.

22. Hvala za Vašo
pozornost !