1. วิธีการทํางานเรื่อง : วิธีใช้งานกล้องจุลทรรศน์ Ci-L
ต่อเข้ากับชุดไฟ Intensilight พร้อมโปรแกรมวิเคราะห์
ภาพ NIS-D
รหัสเอกสาร WI-Mi-08:01
วันเริ่มใช้ 9 พฤษภาคม
2566
ฉบับที่ 2 แก้ไขครั้งที่ 1
หน้า 1/3
ผู้จัดทํา ดร.ทัศนีย์ ฤกษ์สุทธิรัตน์ ผู้ทบทวน
(ตําแหน่ง)
ดร.ภัทรนา แซ่จิว (ผู้ช่วยวิจัย)
ตําแหน่ง นักวิจัย ผู้อนุมัติ (ตําแหน่ง) ดร.ธิดารัตน์ รุจิรวรรธน์ (ผู้ช่วยวิจัย
(ผู้ชํานาญการ) / หัวหน้าหน่วยจุล
ชีววิทยา)
วันที่ 9 พฤษภาคม 2566 วันที่ 9 พฤษภาคม 2566
1. อุปกรณ์ / สิ่งที่เกี่ยวข้อง :
1.1 กล้องจุลทรรศน์รุ่น Ci Series
1.2 คอมพิวเตอร์เก็บข้อมูล
1.3 แหล่งกําเนิดแสง Mercury lamp
2. วิธีการทํางาน
วิธีใช้งานกล้องจุลทรรศน์ Ci-L ต่อเข้ากับชุดไฟ Intensilight พร้อมโปรแกรมวิเคราะห์ภาพ NIS-D
R
e
s
e
a
r
c
h
C
e
n
t
e
r
F
a
c
u
l
t
y
o
f
M
e
d
i
c
i
n
e
,
R
a
m
a
t
h
i
b
o
d
i
H
o
s
p
i
t
a
l
M
a
h
i
d
o
l
U
n
i
v
e
r
s
i
t
y
2. WI-Mi-08:01 ฉบับที่ 2 หน้า 2/3
วิธีการใช้งาน
2.1 เปดสวิทซไฟหลักที่ปุมเปดปดดานขวาของตัวกลอง (แสง LED ดานหนาของตัวเครื่องจะปรากฏขึ้น)
2.2 การใชเทคนิค Bright field
a. ปรับความสวางของหลอดไฟที่ปุมเรงหรี่ดานซายของตัวเครื่อง
b. ปรับเลือกทางเดินแสงใหเขาสูเลนสตา 100%
c. ปรับระดับความสูงของเลนสรวมแสงใหอยูในระดับที่เกือบสูงสุด
d. ใชเลนสวัตถุที่กำลังขยายคา เชน 4X และ 10X
e. เปด Field diaphragm ใหกวางประมาณ 80-90% และ Aperture diaphragm ใหมีขนาดเหมาะตามเลนสวัตถุที่ใชงานอยู
คือประมาณ 80% ของ N.A.ของเลนสวัตถุ
f. นำตัวอยางที่ตองการศึกษาวางบนสเตท (ให Coverglass อยูดานบน) เลื่อนหาพื้นที่ที่ตองการดู
g. ปรับวงแหวนชดเชยสายตา (Diopter) ตามแตคาสายตาของแตละบุคคล และปรับความหางของเลนสตาใหเหมาะสม (ใหเห็น
เปนวงกลมเพียงวงเดียว)
h. โฟกัสตัวอยางใหชัดเจน
i. ปรับเลือกกำลังขยายของเลนสวัตถุใหสูงขึ้นตามที่ตองการ
j. สำหรับการใชหัวเลนส 100X oil ไมอนุญาตใหใช slide ที่ไมมี cover slip เพื่อปองกันการเกิดความสกปรกที่หลุดมาจาก
ตัวสไลด
2.3 การใชเทคนิค Fluorescence
a. โฟกัสและหาพื้นที่ดวยเทคนิค Bright field
b. ปรับความสวางของหลอดไฟที่ปุมเรงหรี่ (ขอ 2a) ใหมืดที่สุดและปดสวิทซไฟหลัก (ขอ1)
c. ปดชัตเตอรที่ตัวกลอง; C = ชัตเตอรปดจะไมมีแสงออกมา
d. หมุนปุมฟวเตอรคิวบเลือกฟลเตอรชนิดที่ตองการ
e. ดันกานเปด Field diaphragm ที่บริเวณดานขางของ Epi-fluorescence
f. เปดสวิทซไฟของแหลงกำเนิดแสงฟลูออเรสเซนต
g. เปดชัตเตอรที่ตัวกลองและแหลงกำเนิดแสงฟลูออเรสเซนต; O = ชัตเตอรเปดจะมีแสงออกมา
R
e
s
e
a
r
c
h
C
e
n
t
e
r
F
a
c
u
l
t
y
o
f
M
e
d
i
c
i
n
e
,
R
a
m
a
t
h
i
b
o
d
i
H
o
s
p
i
t
a
l
M
a
h
i
d
o
l
U
n
i
v
e
r
s
i
t
y
3. WI-Mi-08:01 ฉบับที่ 2 หน้า 3/3
h. ปรับเลือก ND ฟลเตอรที่ Epi-fluorescence; ดันกานเขาไปในตัวกลอง = ใชฟลเตอรนั้นๆ > ภาพจะมืดลง, ดึงกานออกจาก
ตัวกลอง = ไมใชฟลเตอรนั้นๆ > ภาพจะสวาง
i. ปรับเลือก ND ฟลเตอรที่แหลงกำเนิดแสงฟลูออเรสเซนต; 1”= 100% สวางที่สุด, 2”= 50% สวางลดลงครึ่งหนึ่ง
j. โฟกัสภาพและเลื่อนหาพื้นที่ตัวอยางตามตองการ เหมือนการใชงานตามปกติ
k. สำหรับการใชหัวเลนส 100X oil ไมอนุญาตใหใช slide ที่ไมมี cover slip เพื่อปองกันการเกิดความสกปรกที่หลุดมาจาก
ตัวสไลด
2.4 การใชงานชุดถายภาพ
a. เปิดสวิทซ์ไฟที่ตัวกล้อง ถ่ายภาพ DS-Ri2
b. เปิดคอมพิวเตอร์และโปรแกรมวิเคราะห์ภาพ NIS-D
2.5 เมื่อใช้งานเสร็จแล้วให้เปิดสวิทซ์
a. แหล่งกําเนิดแสงฟลูออเรสเซนต์
b. สวิทซ์ไฟหลักของกล้องจุลทรรศน์
c. เครื่องคอมพิวเตอร์
d. ตัวกล้องถ่ายภาพ DS-Ri2
**หมายเหตุ: ข้อมูลเพิ่มเติม https://minicore-rarc.blogspot.com/2018/05/upright-fluorescence-microscope.html
R
e
s
e
a
r
c
h
C
e
n
t
e
r
F
a
c
u
l
t
y
o
f
M
e
d
i
c
i
n
e
,
R
a
m
a
t
h
i
b
o
d
i
H
o
s
p
i
t
a
l
M
a
h
i
d
o
l
U
n
i
v
e
r
s
i
t
y
