2. ELISA
Enzyme-Linked • Sadece HIV enfeksiyonu tanısında
Immunosorbant kullanılmaz. Diğer
Assay virüs ve parazit enfeksiyonlarında da
kullanılır.
• ELİSA yöntemi 1960 lı yıllarda
radioimmunoassay yöntemlerine
alternatif olarak bulunmuştur.
• Antijen-antikor ilişkisi
• ELISA enzimlerin kovalent olarak
bağlandığı antikorları kullanır.
ELISA Antikor
Yapısı
3. Neden
ELISA ?
• Yüksek duyarlılığa sahiptirler.
• ELISA tanı laboratuvarlarında az
zamanda çok sayıda örnekle çalışma
imkanı sağlamasıdır.
• ELISA’da enzimin katalitik özellikleri
ve antikorun spesifitesi değişmez.
• Peroksidaz, alkalen fosfataz, ß-
galaktosidaz gibi enzimleri içerir.
5. 1) Direkt
ELISA Yüksek molekül ağırlıklı
antijenin miktar tayini
için uygundur.
Bu yöntemde antijen iki
tabaka antikor arasinda
‘’tuzağa’’ düşürülür. Bu
nedenle bu yönteme
sandviç ELISA’da denilir.
6.
7. 2) İndirekt
ELISA
İnsan serumundaki
antikorları saptamak
için de indirekt bir
ELISA uygulanır.
(HIV’de bu yöntem
kullanılır. )
8.
9. Direkt
yöntemin
avantajı ve İnkübasyon basamağının az olması ve
dezavantajı tek bir antiviral antikor ile
gerçekleştirilmesidir.
Ancak her bir antiviral antikorun bir
enzimle bağlanması gerekliliği, her
antijen için işaretli bir antikor
ihtiyacını ortaya çıkartmaktadır.
11. ELISA
testinin her • 1- Solid fazın kaplamasında
evresi için antijen veya antikor optimum
konsantrasyonda olmalıdır.
belirtilen
optimum
şartlar
gereklidir.
• 2- İnkübasyon süresi ve
sıcaklığı optimum olmalıdır.
• 3-En uygun substrat
seçilmelidir.
12.
13. Echinococcus
granulosus Taramalarda veya
epidemiyolojik
çalısmalarda en
yararlı testtir. ELISA
testinde
ekinokok antijeni
saptanması
ana prensiptir ve çok az
antijen
varlığında pozitif olur.
Pozitiflik
oranı % 90 civarındadır.
Tedavi
sonrası testin negatife
dönmesi
için, yıllara gereksinim
14. Entomoeba Tanıda kullanılan ELISA kitinin
histolytica (Cellabs, Entamoeba Celisa Path,
Brookvale, NSW Avustralya) duyarlılığı
ile Giardia ve özgüllüğü %93-100 arasında
değişmektedir.
Giardianin için (Ridascreen, R-Biopharm
AG, Darmstadt, Almanya) %100 olduğu
belirtilmiştir.
15. Cryptosporidiu • Cryptosporidium ELISA
kitinin (r-biopharm,
m spp Germany) bu çalışmada
sensitivitesi %85, spesifitesi
%100, negatif prediktif
değeri %97,4, pozitif prediktif
değeri %100 olarak
saptanmıştır.
16. Trichinella Laboratuvar yapımı ELISA IgG’nin
duyarlılığı %100 olarak bulunurken,
birinci ve ikinci kitlerin duyarlılıkları
sırasıyla %75 ve %48 olarak
saptanmıştır. Her üç testin özgüllükleri
ise sırasıyla; %93.7,
87.5% ve 100% olarak belirlenmiştir.
17. KAYNAKLAR
1)MİCHAEL T.MADİGAN, JOHN M.MARTİNKO, Brock Of
Microorganisms
2)http://tr.wikipedia.org/wiki/ELISA
3)http://tr.scribd.com/doc/57523589/elisa
4)Türkiye Parazitoloji Dergisi
5)YALOWR, BERSONS(1960)
‘’Immunoassayofendogenousplasmainsulininman’’
Editor's Notes
Repeat FLASH animation to solidify what they just did.