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GUIA TP MICOLOGÍA
Microbiología 2015
Lorewiwiwiiwi
Macroscopía
Hongo aterciopelado
Fusarium spp
Macroscopía
Hongo algodonoso
Mucoral
Orden: Mucorales
Rhizopus
Macroscopía
Hongo cremoso, húmedo,
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Macroscopía
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Acremonium
Macroscopía
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Candida sp.
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Microscopía gral
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Hifas septadas
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Microscopía gral
Fragmoconidios/
poroconidios
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Levaduras
Ceroso Mucoso Cremoso
Levaduras
Mucoso
Levaduras
Candidas
C. glabrata C.albicans C. dubliniensis C.krusei -ceroso
Levaduras
Candidas
OJO El cromagar NO se utiliza para diferenciar C.
albicans de C.dubliniensis: se ve “más oscura que
albicans” pero si no tenemos la albicans..como
comparar? debe distinguirse por sí solo.
Pruebas para diferenciarlas:
-cultivo en NaCl 6,5% (solo crece albicans)
-cultivo en temperaturas sobre 40°C (solo crece
albicans)
Candida en cromagar
P y S = muestras problema
Ca= positivo para
C.albicans
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Levaduras
Candida krusei
aspecto ceroso
algo rugoso
se torna color lavanda con el tiempo
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Cuando es fresco,
tiene aspecto mucoso,
pegajoso, blanquecino-amarillo
Con el tiempo se ve
más seco y denso
Levaduras
Cryptococcus neoformans
+ tinta china
+ 40x
Levaduras
Cryptococcus neoformans
+ tinta china
+ 40x
Se visualizan sus cápsulas
SIEMPRE REALIZAR EN LCR
Levaduras
Microcultivo
Base con dos portas cruzados sobre una placa con toalla nova humedecida con agua.
En el porta se colocan dos cubos pequeños de agar corn meal y tween 80: medios pobres que someten a estrés la cepa
de modo que desarrolla su morfología completa.
Con asa se toma un poco del cultivo original y se trazan son diagonales sobre los agares. Se tapa con un cubre.
La versión simple es realizar lo mismo directo sobre una placa común de estos agares.
Levaduras
Técnica de microcultivo
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cubrir con cubreobjetos
Levaduras
Técnica de microcultivo
Candida albicans
Levaduras
Técnica de microcultivo
Candida parasilopsis
Levaduras
Técnica de microcultivo
Candida tropicalis
Levaduras
Técnica de microcultivo
Candida glabrata SOLO LEVADURAS en blastoconidio, sin pseudohifas u otro
Levaduras
Técnica de disco difusión (antifungigrama)
1) Tomar asadas de cultivo hasta llegar a 0,5
Mc Farland (tener referencia o usar nefelómetro)
en un tubo de suero/agua destilada (3-5mL)
2) Humectar la tórula en la solución
3) Pasar la tórula cubriendo todo el agar Muellen Hinton
4) Rotar 3 veces en 60°
5) Depositar discos con antifúngicos
6) Toma entre 24 y 48 h
Levaduras
Técnica de microdilución
Rojo = positivo crecimiento
Azul = negativo
Morado= detiene el crecimiento,no lo mata
CIM= Concentración inhibitoria mínima.
CIM de fungistático: primer pocillo morado
CIM de fungicida: primer pocillo azul
Levaduras
Técnica de microdilución
Letras o filas: c/u = un antifungico
Numeros: grado de concentración
Columna 12: siempre es anfotericina B
( se lee hacia abajo)
Ej: el CIM de E es 6 o 7
A
B
C
D
E
F
G
H
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Concentración
Levaduras
API
Suspensión 2 mc Farland en agua
15 gotas a botella de tubo API
3 gotas por casilla
Levaduras
Tubo germinativo
Cultivo de asada de colonia en 5 ml de suero. Por 3 a 4 horas. 37 C.
1 gota, se lee al MO
Positiva en C. albicans y C.dubliniensis.
Dermatofitos
Rugoso
Dermatofitos
Trichophyton: afectan piel, pelo y uñas
Epidermophyton: afectan piel y uñas
Microsporum: afectan piel y pelo
Agar DTM
Agar lactrimel: potencia los pigmentos
KOH: disgrega la keratina
Dermatofitos
Algunos cultivos
no T.rubrum T rubrum T.rubrum en DTM
si es dermatofito se
vuelve rojo
Epidermophyton floccosum
macroconidias como raqueta,
+++
NO tiene microconidias
Puede tener clamidosporas
Dermatofitos
Trichophyton rubrum
Dermatofitos
Microconidias: +++, como lagrimas, intercaladas o sinpoidales
Macroconidias: +, como salchichas alargadas
Trichophyton mentagrophytes
(o mentagrophytes var.
interdigitalis o sólo
interdigitalis)
Nótese hifa rizada y conidias
redondeadas
Dermatofitos
Microsporum canis
Dermatofitos
Microsporum canis
Macroconidias:
>6 septos paredes lisas y gruesas
forma alargada. Extremo curvo.
Microconidias muy escasas.
Dermatofitos
Microsporum gypseum
Dermatofitos
Macroconidias <6 septos
paredes delgadas y gruesas
Microconidias escasas como lagrimas
Microsporum gypseum
Dermatofitos
HONGOS FILAMENTOSOS
HIALINOS
Penicillium
Filamentosos hialinos
Penicillium (en Fusarium)
verde petróleo
suele tener borde blanco
Filamentosos hialinos
Penicillium
esporas en tapa
Filament hialino
Paecilomyces
color musgo
muchas esporas
Filament hialino
Fusarium
Filament hialino
Acremonium
Filament hialino
Acremonium
Filament hialino
Aspergillus flavus
aspecto de
moho
Filament hialino
Aspergillus niger
aspecto de
esponja, negro
reverso blanco
Filament hialino
Aspergillus
fumigatus
Filament hialino
Comparación
Filament hialino
A fumigatus Penicillium (aparentemente era fumigatus)
Penicillium si o
si
Aspergillus terreus
Filament hialino
Aspergillus terreus
Filament hialino
Microscopía gral de un
Aspergillus
conidióforo
fiálide
vesícula
aspergilar
conidios
(fialoconidias)
Aspergillus fumigatus
color azulado
columnar
la mitad de la vesícula con
conidias
Filament hialino al MO
Aspergillus fumigatus
+azul de algodon 40x (todas)
Filament hialino al MO
Aspergillus
fumigatus
Filament hialino al MO
Aspergillus
fumigatus
Filament hialino al MO
Aspergillus niger
SIN tinción
Nótese como es entre 3 a 4
veces más grande que los
otros al mismo aumento .
Conidias en 360 grados.
Color oscuro
Filament hialino
Aspergillus niger
SIN tinción
Filament hialino
Aspergillus flavus
+ azul
Conidias de color
verdoso-azul
Columnar
Doble fialide
Filament hialino
Aspergillus flavus
+ azul
Filament hialino
Aspergillus terreus
+lactofenol azul
columnar, largo
conidias amarillas
Filament hialino
Aspergillus terreus +lactofenol azul
Filament hialino
Penicillium
forma de huesos de la mano
o brocoli
conidioforo
septado.
fiálides largas.
SIN vesicula
Filament hialino
Penicillium
forma de huesos de la mano
o brocoli
Filament hialino
Fusarium
macroconidias ~?
Filament hialino
Fusarium
macro y microconidias
hifas septadas
Filament hialino
Fusarium
Microconidias en
falsa cabeza
Filament hialino
Fusarium
microcultivo
Acremonium es similar
pero con microconidias
mas pequeñas
Filament hialino
Paecilomyces
Fialides largas
Liso o rugoso
conidios hacia afuera
similar a penicillum
pero más largo
Filament hialino
Scopulariopsis
Conidios en cadenas
Forma como “chomp”
Filament hialino
Scopulariopsis
Conidios en cadenas
Forma como “chomp”
Filament hialino
Scedosporium
se ve como
hifas delgadas y finas
con conidios como
gotas
Filament hialino
Scedosporium
se ve como
hifas delgadas y finas
con conidios como
gotas
Filament hialino
HONGOS DEMATIÁCEOS
Alternaria
Aspecto oscuro y cremoso
con partes duras
Dematiáceos
Alternaria
fragmoconidio con
septos transversales
y horizontales
(los jóvenes tienen
menos septos)
Dematiáceos
Alternaria
fragmoconidio con
septos transversales
y horizontales
(los jóvenes tienen
menos septos)
Dematiáceos
Bipolaris
Colonia oscura, densa
filamentosa
Dematiáceos
Bipolaris
conidias alargadas, ovaladas
con círculos dentro en fila
Tiene un brillo o color algo
“aceitoso”, reflejan luz
Dematiáceos
Curvularia
conidias en forma curva, con
3 secciones, donde la sección
media es la más gruesa.
es como un croissant o boomerang.
Su aspecto en cultivo es similar
a Bipolaris
Dematiáceos
MUCORALES
(ORDEN MUCORALES)
Mucor
esporangióforo ramificado
NO tiene apófisis
NO tiene rizoides
esporangio redondo
SI puede tener clamidosporas
Mucorales
Mucor
esporangióforo ramificado
NO tiene apófisis
NO tiene rizoides
esporangio redondo
SI puede tener clamidosporas
Mucorales
Rhizopus
Mucorales
esporangióforo no ramificado
apófisis discreta
tiene rizoides adyacentes
esporangio redondo
Lichtheimia
Mucorales
esporangióforo ramificado
apófisis marcada
tiene rizoides alternados
Lichtheimia
Mucorales
esporangióforo ramificado
apófisis marcada
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