tuberculosis, diagnóstico y tratamiento

2. VII CONGRESO DE ESTUDIANTES DE
TECNOLOGIA MEDICA
“EL ROL DEL TECNÓLOGO MEDICO EN EL DIAGNÓSTICO CLÍNICO Y LA
INVESTIGACIÓN CIENTÍFICA”
ACTUALIZACION EN EL
DIAGNOSTICO DE LA
TUBERCULOSIS
Mgter. Alexander Aguilar Bósquez

3.  La tuberculosis (TB) es una infección causada por
bacterias de crecimiento lento que crecen mejor en las
áreas del cuerpo que tienen mucha sangre y oxígeno.
 La mayoría de las veces se encuentra en los pulmones.
A esto se le llama TB pulmonar, pero la TB también
puede propagarse a otras partes del cuerpo, lo que se
llama TB extrapulmonar.
 El tratamiento suele tener éxito, aunque el proceso es
largo.
 El tratamiento para la TB suele durar alrededor de 6 a
9 meses. Pero algunas infecciones de TB requieren
hasta 2 años.
GENERALIDADES

4. LA DETECCIÓN SE BASA EN LA BÚSQUEDA DE CASOS PRESUNTIVOS DE
TUBERCULOSIS
Tos y expectoración, por 15
días o más de evolución
Fatiga, pérdida de apetito
y pérdida de peso. Estos
síntomas evolucionan
gradualmente a lo largo de
varias semanas.
Debilidad y Pérdida de
Peso
El paciente puede presentar
disnea debido a la lesión del
parénquima pulmonar, el
desarrollo de un neumotórax
espontáneo o de tuberculosis
pleural con derrame.
Fiebre mayor de 38 ° y
sudoracion nocturna
CASO PRESUNTIVO DE TUBERCULOSIS PULMONAR
Sintomático Respiratorio

5. Estrategia Mundial para la Tuberculosis
Asamblea Mundial de la Salud, Ginebra-2014
Acabar con la
epidemia mundial
de TB.
Objetivo:
 Reducir las muertes por
TB en un 95%.
 Reducir los nuevos casos
en un 90% entre 2015 y
2035.
 Garantizar que ninguna
familia tenga que hacer
frente a costos
catastróficos debido a la
TB.
Metas:
Se ha logrado:
Avanzar en PROCESOS
DIAGNÓSTICOS, sobre
todo moleculares, para
acelerar el diagnóstico y
respuesta al médico
tratante sobre la condición
clínica del paciente.

6. ORGANIZACIÓN DE RED DE
LABORATORIOS
LABORATORIOS NIVEL I LABORATORIOS NIVEL II
Laboratorios clínicos de los
centros de salud, policlínicas,
hospitales generales o privados,
hospitales rurales Y Unidades
recolectoras de muestras
LABORATORIOS NIVEL III
LCRSP/
ICGES
Laboratorios clínicos de los
hospitales regionales y
hospitales privados, que
cumplan con los niveles de
bioseguridad recomendados
para realizar pruebas de TB

7. ORGANIZACION DE LA RED DE LABORATORIOS
Policlinicas
Hospitales Generales
y privados
Centros de Salud
Hospitales Rurales y
unidades recolectoras de
muestras
Nivel: Laboratorios de Nivel I
Lo forman
Funciones
Realizar las Bk y/o
PDMR
Reportar resultados de
la Bk y/o PDMR, los
positivos (Bk) o
detectados
(PDMR)
Participar en visitas de
supervisión directa
Coordinar con el nivel
2 o regional, el envío
de muestras

8. ORGANIZACION DE RED DE LABORATORIOS
Funciones
NIVEL: LABORATORIO NIVEL II
Hospitales Regionales
Hospitales Privados
 Efectuar PDRM
 Capacitar personal
 Coordinar envíos
 Participar de reuniones
 Recopilar y consolidar las estadísticas cuantitativas y
cualitativas
 Prestar asesoramiento
 Mantener registro de la información estadística
 Entregar informes epidemiológicos de los casos
positivos
 Participar en un sistema de gestión de la calidad.

9. ORGANIZACION DE RED DE LABORATORIOS
Nivel:
Laboratorio Nivel III
LCRSP/ ICGES
Responsable de:
La vigilancia de los casos de TB a
nivel nacional y la vigilancia
continua de la resistencia a los
fármacos antituberculosos de
primera y segunda línea.
Proyecciones
• Coomperacion MNSA-CSS
• Cumplimiento de la Estrategia “FIN
DE LA TB”
• Investigación de M. tuberculosis, M.
bovis, Micobacterias No
Tuberculosas y Lepra.
Sección de
Micobacteriología
Supervisa la Red de
Laboratorios de
Diagnósticos de TB.

10. ORGANIZACION DE RED DE LABORATORIOS
NIVEL: LABORATORIO NIVEL III
Todas las funciones del nivel intermedio.
 Pruebas confirmatorias de PSD (fenotípicas y genotípicas) de primera y segunda
línea.
 Pruebas de identificación de las micobacterias.
 Actualización de manuales sobre los métodos bacteriológicos para el diagnóstico
de la TB.
 Formulación y difusión de las normas para la supervisión de laboratorio y
garantía de la calidad.

11. ORGANIZACION DE RED DE LABORATORIOS
 Realizar el control de calidad de los laboratorios de la red, mediante el envío de
paneles y las visitas de supervisión directa.
 Recopilar, analizar y evaluar la información estadística cuantitativa y cualitativa de
las actividades realizadas por los laboratorios que forman parte de la RLTB.
 Estudiar, validar y transferir nuevas técnicas diagnósticas.
 Efectuar los estudios correspondientes a las muestras o cepas recolectadas, que
otros laboratorios del país no puedan realizar de manera permanente o transitoria.
NIVEL: LABORATORIO NIVEL III

12. NIVELES DE GESTIÓN DE RED NACIONAL DE LABORATORIOS
DE TB
Tumors infographics
Do’s & don’ts

16. TBC-EN EL MUNDO
Incidencia de tuberculosis (por cada 100.000 personas
para el año 2022 es de 21.8).
Aun no se cuenta con el reporte anual de epidemiologia
2023
TBC-EN PANAMA

17. TIPOS DE MUESTRA PARA TBC
ESPUTO
LAVADO
BRONQUEOALVEOLAR
LAVADO GASTRICO,
Biopsia o tejido.
ORINA, Pus y
aspirado espesos,
SANGRE
Líquido pleural,
peritoneal, ascítico y
otros
LIQUIDO
CEFALORAQUIDEO
LA MUESTA

19. NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE TB
• Cumplir con las normas de calidad y
bioseguridad establecidas del laboratorio.
• Aceptar la responsabilidad de realizar su
trabajo correctamente para garantizarla
seguridad propia y de sus compañeros.
• Utilizar el EPP correctamente.
• Aceptar el compromiso de practicar un
modo de vida sano

20. Organización típica del trabajo en CBS clase II: desde las zonas limpias
hacia las sucias.

22. LA MUESTRA
• Proveniente del árbol bronquial, recogida
después de un esfuerzo de tos y no la
que se obtiene exclusivamente de la
faringe o por aspiración de secreciones
nasales o de saliva.
• La muestra debe ser mucosa o
mucopurulenta.
• Deben recolectar la muestra al aire libre
o lejos de otras personas y no en locales
con poca ventilación como baños
sanitarios o consultorios médicos.

23. OBSERVACIONES CLINICAS DEL PACIENTE
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24. ALGORITMO PARA PACIENTES CON
TBC

26. Algoritmo para
pacientes con signos
y síntomas de TB
según evaluación de
riesgo

28. Pruebas de Laboratorio para diagnosticos
01
GENEXPERT-RINFAMPICINA
02
04
07
06
TINCION DE BAAR
CULTIVOS
-Manuales
-Automatizados
03 DETECCION EN
INMUNOCROMATOGRAFIA
MP-24
Sencibilidad Manual
Hibridacion Reversa
IGRAS
05
Pruebas
Point on Care
Prueba de Lam

30. La técnica se basa en la propiedad
alcohol-ácido resistente que tienen las
micobacterias de unir en su pared
fucsina fenicada o auramina y
retenerlas frente a la acción de
decolorantes como la mezcla de ácido y
alcohol. Esta característica se debe al
alto contenido en lípidos,
particularmente a los ácidos micólicos,
que poseen las micobacterias en la
pared celular

31. Dignostico Laboratorial
Tincion de BAAR
(Bacilo Alcohol Acido
Resistente)
Coloración de Ziehl
Neelsen

32. Tinción de BAAR (Bacilo Alcohol Acido Resistente)
Coloración de KINYOUN

33. Causas de error en la baciloscopía con
respecto al extendido.
1. No tomar la porción mucopurulenta de la
muestra al realizar el frotis.
2. Tomar poca cantidad de muestra para
hacer el extendido.
3. Preparar demasiados frotis a la vez: el
máximo recomendado es de 12.
4. Reutilizar laminillas de baciloscopías
positivas (éstas deben ser descartadas).
5. Muestras contaminadas por el manejo
inadecuado de aplicadores de madera.
6. Área de trabajo insuficiente.
7. Mezclar laminillas.

34. Negativo
Positivo

35. Cultivo en Medio: Lowestein- Jensen
La realización del cultivo es
fundamental para el aislamiento
de la bacteria, que permitirá, si
fuera necesario, estudios de
resistencia a fármacos y/o
estudios de tipificación genética
Medio: Lowestein- Jensen
La técnica de cultivo es más
sensible que la microscopia
para el diagnóstico
Muestra: Esputo y
muestras extra
pulmonares.
Puede evidenciar un
mínimo de 10 a 100 BAAR
presentes en una
muestra.
Produce resultados
tardíamente, pero es
más sensible que la Bk.

36. Generalidades sobre los cultivos
● Incrementa la confirmación del
diagnóstico de TB en
aproximadamente 15- 20% del total de
casos y en 20-30% de los casos de TB
pulmonar (la Bk detecta el 70-80% y el
cultivo 20-30% el restante).
● Las micobacterias son
microorganismos exigentes que
necesitan medios enriquecidos
especiales, son aerobios, la
temperatura óptima para su
crecimiento y desarrollo está entre 35
y 37°C, con un pH de 6.7 a 6.9.).

37. Generalidades sobre los
Cultivos
 La técnica de cultivo es más sensible que la
microscopia para el diagnóstico, ya que permite
detectar 10 bacterias/ml de muestra
concentrada.
 Se cultivan las muestras en un medio con un
caldo de cultivo líquido y esto permite detectar
antes a los microorganismos.
 Algunos de estos medios de cultivo requieren
de una instrumentación específica y
automatizada para poder detectar las
micobacterias, mientras que otros pueden
interpretarse manualmente.

40. INDICACIONES PARA TOMAR UNA MUESTRA DE CULTIVO
INDICACIONES
RADIOLOGICOS
HISTORIAS
CLINICAS
Hisopado laríngeo y otras para
el diagnóstico pulmonar.
Paciente VIH
positivo
Pérdida de
seguimiento
A QUIEN SE LE DEBE HACER
UN CULTIVO
Pacientes que resulten con
diagnóstico micobacteriológico
positivo (Bk y/o PDMR).
Esputo
PACIENTES CON MAYOR
PRIORIDAD
Diagnóstico de TB infantil.
Personas que
presenten signos
clínicos
Muestras especiales como
jugo gástrico, lavados
bronquiales, endotraqueal
Trabajadores de salud, trabajadores de
centros penitenciarios y privados de
libertad SR con PDMR no detectadas
Muestras de tejidos o líquidos
para diagnóstico de la TB
extrapulmonar

41. Identificación del Complejo M. tuberculosis
Proteína predominante,
MPT64
Únicamente se
encontró en el caldo
de cultivo de cepas
del C.MTB.
Tipo de Muestra
Cepas puras de
microbactérias
aisladas en médios
sólidos o líquido
Importancia Clínica
Caracterización
bioquímica, inmunológica y
biomolecular del C.MTB
Descripcion
Detección del Antígeno MPT64
a través de la metodología de
Inmunocromatografía lateral.
Inmunocromatografía
de C.MTB
(Ag MPT64 Rapid Test)

42. INTERPRETACION DE RESULTADOS

43. Tipificación por Hibridación Reversa: Genotype CM
El ensayo Genotype
Mycobacterium CM está
basado en la tecnología
DNA STRIP.
PROCEDIMIENTO EN 3 PASOS
 Extracción de DNA procedente de cultivo
(medio sólido/líquido).
 Amplificación multiplex con primers
marcados con biotina.
 Hibridación reversa.
La Desnaturalización
Las tiras de membrana están recubiertas con sondas
específicas complementarias a los ácidos nucleicos
amplificados. Después de la desnaturalización, las cadenas
simples de amplicones se unen a las sondas (hibridación).

44. Interpretación de resultados de la tipificación por
Hibridación Reversa: Genotype CM

45. GENEXPERT-RINFAMPICINA
De origen exclusivamente
broncopulmonar, es decir:
esputo, aspirado o lavado
broncoalveolar y esputo
inducido.
Tipos de muestras
para GeneXpert
El GeneXpert MTB/RIF es
un examen de biología
molecular que permite un
diagnóstico bacteriológico
rápido y ofrece la
posibilidad de conocer la
susceptibilidad a la
rifampicina de las cepas en
estudio en menos de dos
horas.
¿Tipo de prueba en GeneXpert?

46. ● Es una plataforma de PCR en tiempo real automatizada, integrada y
semicuantitativa.
● Esta prueba identifica CMTBC y detecta las mutaciones más
frecuentes en el Gen rpob asociadas a resistencia a RIF.
● Es una prueba directa de muestras en pacientes SR
● 2 horas para su resultado.
● Esta prueba debe usarse junto con el cultivo de micobacterias.
● Solo evalúa una región del Gen, no detecta las mutaciones fuera de
este.
● No discrimina entre bacilos vivos o muertos.
● Con ambos cartuchos se obtiene mayor sensibilidad, pero sigue siendo
menor que la del cultivo.

47. Tipo, volumen, almacenamiento y transporte
de muestras para Xpert MTB/RIF

48. Detección de infección latente
Especificidad
Los ensayos tienen mayor
especificidad que la PPD, tienen
menos reactividad cruzada con
BCG que la PPD y se
correlacionan bien con la
exposición a C.MTB.
Como se logra
Los antígenos estimulan la
liberación de interferón-gamma
(IFN-γ) de las células T CD (4) +,
que luego se cuantifica mediante
el ensayo.
Objetivo
El objetivo es la liberación
antigénica de 6 (ESAT-6) y la
proteína de filtrado de cultivo 10
(CFP 10).
Que es!
Los IGRA son otra prueba de
laboratorio basada en la respuesta
inmune utilizada para indicar la
exposición a C.MTB.
IGRA

49. PRUEBAS PARA DETECCIÓN DE INFECCIÓN LATENTE
SISTEMA QFT
• El sistema QFT utiliza tubos
especializados de recolección de
sangre completa.
• La incubación de la sangre se
produce en los tubos durante 16 a
24 horas.
• El plasma se cosecha y se analiza la
presencia de IFN-γ producido en
respuesta a los antígenos
peptídicos.

50. Sistema QFT
Resultados Importancia clínica
QFT es una prueba indirecta
para la infección por C.MTB
(incluida la enfermedad) y
está diseñada para usarse
junto con la evaluación de
riesgos, la radiografía y otras
evaluaciones médicas y de
diagnóstico.

51. SISTEMA QFT
• La detección de interferón-γ (IFN-γ) mediante un ensayo inmunoabsorbente
ligado a enzimas (ELISA) se utiliza para identificar respuestas in vitro a
aquellos antígenos peptídicos que están asociados con la infección por
C.MTB.

52. PRUEBA T-Spot TB
Metodologia
Inmunospot enzimático (ELISPOT) para enumerar las células T
sensibilizadas por C.MTB mediante la captura de interferón gamma (IFN-γ)
en las proximidades de las células T de las que fue secretada
Respuesta
Inmune
La respuesta inmune a la infección con C.MTB está mediada
principalmente por la activación de células T.
Importancia
Clinica
La prueba T-SPOT.TB es un ensayo de diagnóstico in vitro que mide las
células T cebadas con antígenos de M. tuberculosis. Basado en la
tecnología T-SPOT, fue desarrollado para diagnosticar tanto la infección de
TB latente como la enfermedad de TB en humanos.
Resultados
• El resultado de la prueba es Positivo si (Panel A - Nulo) y/o (Panel B -
Nulo) ≥ 8 puntos.
• El resultado de la prueba es Negativo si tanto (Panel A - Nulo) como
(Panel B - Nulo) ≤ 4 puntos. Esto incluye valores menores que cero.

53. CREES QUE ES IMPOSIBLE !!!
“Cree en ti mismo y en lo que
eres.
Se consciente de que hay algo
en tu interior que es más
grande que cualquier
obstáculo”
Anónimo