2. HISTORIA
La primera transferencia de
un embrión bovino se
informó en 1946, y la
primera cría de la
transferencia de embriones
en 1951.
La aplicación de la
transferencia de embriones
en Norteamérica se
desarrolló en los principios
de la década de 1970 con la
introducción de razas
europeas de doble
propósito.
La primera técnica de
recolección de embriones
bovinos usada hace
aproximadamente dos
décadas, fue quirúrgica. La
misma requería anestesia
general, inducida por medio de
barbitúricos y mantenida por
medio de inhalación
La primera transferencia no
quirúrgica con éxito en bovinos fue
lograda por MUTTER y col. en 1964,
La posibilidad de colocar en la
especie bovina la sonda a través del
cérvix abrió nuevas posibilidades a
la recolección de embriones,
simplificando el procedimiento y
disminuyendo el trauma uterino
3. VENTAJAS
Evaluación eficiente de la capacidad
fertilizante de espermatozoides y
ovocitos.
Difusión del uso de semen valioso y
escaso.
Prolongación de la vida reproductiva
de animales genéticamente valiosos,
inmaduros o muy viejos. Creación de
bancos de gametos provenientes de
animales seleccionados por excelencia
productiva y/o adaptabilidad.
Determinación y selección del sexo de
embriones.
Control de enfermedades de la esfera
reproductiva.
Aplicación de la transferencia de
embriones en especies exóticas y en
peligro de extinción”
Permite obtener descendientes de
hembras de elevada calidad genética
que deban ser sacrificadas por
padecer enfermedades, infertilidad,
por su avanzada edad o durante los
programas de erradicación de
enfermedades infecciosas
(tuberculosis, brucelosis, leucosis).
Permite el aprovechamiento de
animales con determinadas formas de
infertilidad: machos con
oligospermias severas, hembras con
alteraciones estructurales o
funcionales del tracto genital
4. DESVENTAJAS
Bajo rendimiento, el
porcentaje de ovocitos
capaces de transformarse en
embriones transferibles se
encuentra estancado entre el
30 y 40%.
Los embriones producidos in
vitro son de menor calidad
que los obtenidos in vivo.
Reducción del potencial de
desarrollo pre y
postimplantacional,
ocasionando bajos
porcentajes de gestación (30
a 40%).
Existe una escasa resistencia
a la Criopreservación,
dificultando su conservación
a largo plazo.
Incremento de la mortalidad
embrionaria, abortos,
problemas gestacionales
como el hidroalantoides y
alargamiento de la gestación.
Nacimiento de terneros muy
voluminosos, con anomalías
estructurales y funcionales,
conocido con el nombre de
síndrome de exceso de
volumen fetal.
Incremento del porcentaje de
distocias por exceso de
volumen fetal.”
5. DONANTES
Vacas de tercer parto; porque ya hay suficiente información sobre su producción.
Novillas hijas de padres de buena genética.
Superioridad genética.
Alta fertilidad, con actividad cíclica.
Probabilidad de producir grandes cantidades de embriones.
Condición corporal ideal de 3.5 en vacas lecheras y 7 en vacas de carne.
No presentar enfermedades hereditarias.
No presentar enfermedades reproductivas.
Tener el registro de vacunas obligatorias y necesarias según la incidencia de
enfermedades en la zona.
6. RECEPTORAS
Lo ideal debe ser una vaca joven secas; con una condición corporal de 3.5 en ganado lechero y de
7 en ganado de carne, y en novilla mayores de 24 meses, y que el desarrollo corporal este acorde
a la edad, que hayan alcanzado el 75% del peso vivo adulto.
Libre de enfermedades y trastornos reproductivos.
Registro de la vacunación de enfermedades incidentes en la zona como: IBR, DVB y
leptospirosis.
Ciclo estral regular.
Aparato reproductor normal, sin alteraciones en la anatomía del cérvix y útero.
No tener dificultad de parto.
Probada fertilidad y buena habilidad materna
7. SUPEROVULACION
• La superovulación consiste en la estimulación hormonal de la donante
para la formación y desarrollo de varios folículos y su ovulación en
ambos ovarios en un momento previamente fijado. Con la transferencia
de embriones el promedio para cada vaca donante superovulada puede
ser de 8 a 10 huevos colectados, de 6 a 7 embriones transferidos y 3 a 4
gestaciones
Protocolo
Dia 0 colocamos implante CIDR (dispositivo a base de progesterona) intravaginal por nueve días.
Dia 7 colocamos Fsh (foltropin) durante cuatro días, dos dosis por día una en la mañana y una en la
tarde.
Dia 9 retiramos implante y colocamos una dosis de prostaglandina
Dia 10 colocamos últimas dos dosis de fsh
Dia 11 detectamos celo si se detecta en la mañana se insemina en la tarde y si el celo se detecta en
la tarde se insemina al otro día.
Después de la inseminación se espera 7 días para hacer el lavado y colecta de embriones
8. SINCRONIZACIÓN EN RECEPTORAS
Estos procedimientos están
influenciados principalmente por la
acción de la prostaglandina F2α que
produce la regresión de una
manera precoz del cuerpo lúteo.
Otra manera para Sincronizar el ciclo
estral de la hembra bovina es con la
ayuda de los progestágenos, por medio
de la cual se trata de simular la fase
luteínica del ciclo estral, prolongándola.
El beneficio de este sistema de control
del ciclo estral, es que no se necesita
que el animal presente un cuerpo lúteo
funcional.
9. RECOLECCIÓN O LAVADO DE EMBRIONES
• Hoy en día es posible realizar la extracción de los embriones, por medio de técnicas
no quirúrgicas, como: a) Circuito abierto con flujo discontinuo, b) Circuito cerrado
con flujo continuo.
Técnica
En el proceso de lavado y colecta de embriones se debe
contar con los siguientes elementos:
Circuito de lavado
Sonda Foley (Con estilete o mandril)
Medio de lavado (PBS)
Dilatador de cérvix
Guantes de palpación ginecológica
Filtro de recolección
Jeringas
Lidocaína al 2%
Ecógrafo
Catéter de Folley
11. Tipos de lavado uterino:
1. Circuito abierto con flujo discontinuo
1. Inyección y recolección con una jeringa
Esta técnica se realiza por medio de catéteres flexibles de 2 vías y no requiere
de tubuladuras. El medio se inyecta y recolecta por la misma vía y con la misma
jeringa, se utilizan 2 jeringas de 15ml, 2 jeringas de 20ml, 2 jeringas de 25ml y 2
jeringas de 30ml, estas jeringas son especiales para lavar embriones, en esta
técnica se descarga un volumen de medio (PBS) fijado por el operador. Se
debe palpar el cuerno uterino para controlar y determinar su llenado a fin de
evitar lesiones de la pared uterina por exceso de medio.
1. Circuito cerrado con flujo continuo
Con este método se emplean catéteres de 3 vías, rígidos o
flexibles. La primera vía, es destinada a la inyección del medio para
el lavado, posee una llave que controla el paso del medio y
mediante una tubuladura de goma látex o silicona se conecta al
frasco o bolsa que contiene la solución o medio para el lavado de
embriones (PBS), en esta técnica se utiliza alrededor de 800ml de
medio, es decir, 400ml por cada cuerno uterino. La solución se
inyecta por gravedad, colocando el frasco con el medio a
aproximadamente 1 m por encima del frasco recolector con el
filtro de embriones.
12. EN EL LABORATORIO
Preparación del equipo de manipulación de
embriones.
Termostato (36.5°C), estereoscopio, jeringas,
agujas, medio de lavado del filtro y
mantenimiento, platos de manipulación de
embriones (búsqueda, holding), tripsina.
Lavado del filtro de embriones.
Empezar el lavado en la parte donde está la malla del filtro
a una inclinación de 45° y colocar el medio con los
embriones en los platos de búsqueda.
Usar una jeringa de 20 mL para lavar el filtro utilizando el
medio de lavado PVS al 1% con aguja hipodérmica
desechable calibre 20G * ½”.
Hacer de 2 a 3 lavados en el filtro de embriones.
13. Búsqueda de embriones.
Usar platos de búsqueda a temperatura de 37°C (mantener los paltos de búsqueda sobre un termostato). Para
identificar el plato de búsqueda se escribe el número de la vaca sobre uno de los costados del plato.
Solamente al momento de hacer la búsqueda los paltos no están sobre el termostato.
Para facilitar la búsqueda, los platos están marcados con líneas horizontales y verticales en la base, estas líneas forman
cuadrículas. Horizontalmente van de la A-E, verticalmente del 1-5.
Al finalizar la búsqueda, los embriones se pasan a los platos de mantenimiento.
Clasificación de embriones.
A: Grado 1 Excelente o bueno: Embriones uniformes en color
tamaño y densidad.
B: Grado 2 Regular: Moderadamente presenta irregularidades
en los embriones individuales en tamaño, color y densidad.
C: Grado 3 Pobre: Presenta mayores irregularidades en la masa
del embrión en el tamaño color y densidad de las células
individuales.
D y E: Grado 4 Degenerado: Embriones de una sola célula,
estos embriones no son viables.