DETERMINACIÓN DE LA CURVA DE CALIBRADO DEL AZUL DEL METILO POR ESPECTRODOTOMETRIA MOLECULAR.

1. DETERMINACION DE LA CURVA DE CALIBRADO DEL AZUL DEL METILO
POR ESPECTRODOTOMETRIA MOLECULAR.
I. FUNDAMENTO TEORICO:
Cada sustancia tiene su espectro característico, por lo que podemos
identificarla en una solución cuya composición desconocemos, y esto se
suele emplear en la determinación de tóxicos en líquidos biológicos.
Existen dos formas de llevar a cabo los espectros de absorción:
Manualmente: se lleva a cabo en un espectrofotómetro de haz simple,
se coloca en la cubeta la solución y vamos midiendo las absorbancias a
distintas longitudes de onda.
Automáticamente: se lleva a cabo en un espectrofotómetro de haz
doble, en el que se sitúa la cubeta con el blanco en una de sus celdas y
en la otra la solución problema, se programa el aparato para q haga
incidir distintas longitudes de onda y este hace el barrido.
La Ley de Lambert y Beer expresa que la absorbancia de una solución
es directamente proporcional al camino recorrido por la radiación
electromagnética y a la concentración de la solución.
Transmitancia: La transmitancia se define como la cantidad de energía
que atraviesa un cuerpo en determinada cantidad de tiempo. Existen
varios tipos de transmitancia, dependiendo de qué tipo de energía
consideremos.
 La transmitancia óptica se refiere a la cantidad de luz que atraviesa un
cuerpo, en una determinada longitud de onda. Cuando un haz de luz incide
sobre un cuerpo traslúcido, una parte de esa luz es absorbida por el mismo,
y otra fracción de ese haz de luz atravesará el cuerpo, según su
transmitancia. El valor de la transmitancia óptica de un objeto se puede
determinar según la siguiente expresión:
Absorbancia, En espectrofotometría, la absorbancia (a veces, absorbencia) ( ) es
definida como:

2. Dónde:
 Es la intensidad de la luz con una longitud de onda específica y que es
pasada por una muestra (intensidad de la luz transmitida).
 Es la intensidad de la luz antes de que entre a la muestra (intensidad de
la luz incidente).
El término es frecuentemente intercambiable con densidad óptica, si bien este
último se refiere a la absorbancia por unidad de longitud. Las medidas de
absorbancia son frecuentemente usadas en química analítica, ya que la
absorbancia es proporcional al grosor de una muestra y la concentración de la
sustancia en ésta, en contraste a la transmitancia I / I0, la cual varía
exponencialmente con el grosor y la concentración.
II. MATERIALES Y METODOS:
 Papel de filtro
 Vaso de precipitado
 Matraz
 Pipeta de 5 ml
 Pipeta Pasteur
 Tubo de ensayo
 Cubetas
 Espectrofotómetro
III. PROCEDIMIENTO:
1. Para elaborar una curva de absorción se preparara el siguiente sistema:
2. Calcular cuántos gramos de azul de metileno debemos pesar para tener
una mezcla de azul de metileno a 100ppm.
100ppm
mg
0.1L
10mg = 0.01gr

3. 3. Dividir en 3 fiolas de 100ml cada uno con:
Grupo1 Grupo2
ST-1 0.3ppm 0.4 ppm
ST-2 0.6 ppm 0.8 ppm
ST-3 0.9 ppm 1.2 ppm

4. 4. Luego a cada uno se afora hasta llenar los matraces.
5. Luego se procederá a realizar lecturas en el espectrofotómetro a las
siguientes longitudes de onda: 560, 580, 600, 620 640, 660, 680 y 700 nm.
IV. RESULTADOS:

5. No debería darse los números negativos, hubo una falla del sistema
con el espectrofotómetro usado.
V. CONCLUSIONES:
 Se necesita prender el espectrofotómetro unos 20 minutos antes
 Nos permitió darnos cuenta de la precisión y la dedicación que se debe
tener al realizar este tipo de procedimientos, ya que cualquier error en el
método nos entregaría un resultado equivoco.
 La espectrofotometría se refiere a los métodos, cuantitativos, de análisis
químico que utilizan la luz para medir la concentración de las sustancias
químicas.
VI. DISCUSIONES:
 Por cuestiones del espectrofotómetro no se pudo hallar la curva de
calibrado, tuvo que ver mucho el sistema de la máquina que se usó.
 A mayor concentración, es mayor la energía que absorbe la muestra.
 Los materiales de las celdas para colocar la muestra son de distintos
materiales; cuarzo, plástico, bromuro de sodio (duro poco porque absorbe
humedad y se deteriora), vidrio (se usaba anteriormente).
 Se coloca un blanco (aquella que tiene todos los reactivos y en la misma
concentración de la que tiene la muestra, pero sin contener el elemento que
se está determinando) en el espectrofotómetro.
VII. BIBLIOGRAFÍA
- Mahan Bruce H. Química curso universitario. Editorial fondo educativo
interamericano, 2ª edición. 1977, 1968 Bogota, caracas, México.

6. - https://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r55275.PDF
comunidad.uach.mx/hescobed/SOLAMORTIG.doc