Universidad El Bosque                   Posgrado Odontología                       Biología Oral                          ...
Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante    la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresi...
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Sustancia                 RANKL –                    P                                          CGRP                      ...
DISEÑO EXPERIMENTAL    TIPO DE ESTUDIO                   EXPERIMENTAL IN VITRO                          ESQUEMA EXPERIMENT...
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Preparación del Medio de Transporte        Preparación del Medio de Transporte                PBS                 PBS     ...
Tej del Ligamento                                         Tej del Ligamento                                           Peri...
Aplicación de Fuerzas Compresivas             Aplicación de Fuerzas Compresivas                               Flexercell S...
Determinación de la expresión o presencia del RANKL.  Determinación de la expresión o presencia del RANKL.          Kit co...
(3) Meses Después
RANKL/TNFRSF11A
% DE PRESENCIA DEL RANKL EN LAS CÉLULAS DEL     % DE PRESENCIA DEL RANKL EN LAS CÉLULAS DELLIGAMENTO PERIODONTAL EN EL GRU...
ARTICULOS O INSTRUMENTOS           PRECIOS 2 Curetas de Gracey                     34$ αminimun essential medium          ...
 Krishnan,  V;  Davidovitch,  Z.  Cellular, molecular, and tissue- level reactions to orthodontic force.  American  Journa...
Xuan  Khanh  Le,  Claude  Laflamme,  Mahmoud  Rouabhia.  Phorphyromonas Gingivalis decreases osteoblastproliferation throu...
GRACIAS!!!!
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Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.

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Biología del Movimiento Dental, Postgrados de Ortodoncia. Docente Juan Carlos Munevar Niño. Universidad El Bosque

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    1. 1. Universidad El Bosque Posgrado Odontología Biología Oral Residentes: Hernández Joanna Hernández Ma. DanielaProfesor: Dr. Juan Carlos Munévar Nissnick Lorena Reina Diana Uribe Manuel
    2. 2. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas. Planteamiento del Problema
    3. 3. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.•Determinar la relación del RANKL y la reabsorción radicular producida por elmovimiento dental ortodóntico.•Describir el proceso del mecanismo de acción del complejo RANK- RANKLen la reabsorción radicular patológica por movimientos dentalesortodónticos .•Determinar si hay expresión de RANKL en células del ligamento periodontalde dientes de pacientes que presentaron reabsorción radicular durante eltratamiento ortodóntico, luego de ser sometidas a fuerzas compresivas invitro.
    4. 4. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.•Establecer si existe relación entre la cantidad de expresión del RANKL yla aplicación de diferentes intensidades de fuerzas compresivas en lascélulas del ligamento periodontal.•Determinar si la reabsorción radicular patológica inducida pormovimientos dentales ortodónticos está relacionada con la expresión deRANKL en células del ligamento periodontal.
    5. 5. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas. Llave Regulatoria del Remodelado óseo Llave Regulatoria del Remodelado óseo durante el movimiento dental ortodóntico durante el movimiento dental ortodóntico REABSORCIÓN REABSORCIÓN RANKL RANKL Detección Detección Riesgo de Riesgo detemprana de la temprana de la Reabsorción Reabsorción reabsorción reabsorción Severa. Severa.
    6. 6. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas. Marco Teórico Marco Teórico Hallazgo clínicoMovimiento Dental Ortodóntico RANKL/RANKL/OPG•FuerzasIntermitentes DAÑO DAÑO•Fuerzas Continuas
    7. 7. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas. Receptor de la Calcitonina Receptor de la Calcitonina Captesina KK Captesina C-Jun C-Jun FBP-1 FBP-1 GABPα GABPα TRAP TRAP GABPβ GABPβ
    8. 8. Sustancia RANKL – P CGRP PGE Odontología 2 Linfocitos T, Modificación de la TNFα matriz extracelular, monocitos ydistorsión del colágeno macrófagosy membrana celular del fibroblasto IL-1 IL-6 OPG PGE 2 RANK RANKL OSTEOCLASTO OSTEOBLASTO
    9. 9. DISEÑO EXPERIMENTAL TIPO DE ESTUDIO EXPERIMENTAL IN VITRO ESQUEMA EXPERIMENTAL ESQUEMA EXPERIMENTAL HIPOTÉSIS MUESTRAHo: EL RANKL NO SE RELACIONA CON LAREABSORCIÓN RADICULAR PRODUCIDA POR CRITERIOS DE INCLUSIÓN CRITERIOS DE INCLUSIÓN CRITERIOS DE EXLUSIÓN CRITERIOS DE EXLUSIÓNFUERZAS TENSIONALES DURANTE ELMOVIMIENTO ORTODONTICO. •Hombres yyMujeres 13-30 •P. sistemicamente •Hombres Mujeres 13-30 •P. sistemicamente años. años. comprometidos. comprometidos.HA: EL RANKL SE RELACIONA CON LA •P. Requieran extracción •P. Requieran extracción •P. Con tto ortodóntico •P. Con tto ortodónticoREABSORCIÓN RADICULAR PRODUCIDA POR de 1eros premolares por de 1eros premolares por previo. previo.FUERZAS TENSIONALES DURANTE ELMOVIMIENTO ORTODONTICO motivo ortodóntico. motivo ortodóntico. •P. Con trauma •P. Con trauma •P. Sistémicamente Sanos. •P. Sistémicamente Sanos. dentoalveolar previo. dentoalveolar previo. •P. Con enfermedad •P. Con enfermedad Periodontal. Periodontal. GRUPO CONTROL: GRUPO CASO: 5. 1eros premolares 5. 1eros premolaresPROCEDIMIENTOSPROCEDIMIENTOS extraídos de P. con extraídos de P. con R.R. ≤2mm R.R. ≥2mm
    10. 10. ••En la Clínica de la Universidad El Bosque, se seleccionará los En la Clínica de la Universidad El Bosque, se seleccionará lospacientes en los que este indicado la exodoncia de los primeros pacientes en los que este indicado la exodoncia de los primerospremolares por razones ortodónticas. (3 meses). premolares por razones ortodónticas. (3 meses).•Posteriormente, los pacientes seleccionados firmaran unconsentimiento informado, aprobado por el Comité de ética de laUniversidad El Bosque.••Un día antes de las exodoncias se realizará control de placa yy Un día antes de las exodoncias se realizará control de placaprofilaxis, llevadas a cabo por los investigadores. profilaxis, llevadas a cabo por los investigadores.•Exodoncias de 1eros premolares realizadas por Estudiantes del 7mosemestre de la Universidad El Bosque, previamente entrenados.
    11. 11. Preparación del Medio de Transporte Preparación del Medio de Transporte PBS PBS Antibiótico Antibiótico 10 mm 10 mm penicilina, estreptomicina20 ml Obtención de los Explantes Obtención de los Explantes •Lavado PBS 3 VECES POR PBS 3 VECES POR •Desinfección 10 SEG. 10 SEG.
    12. 12. Tej del Ligamento Tej del Ligamento Periodontal Periodontal Raspar tercio Raspar tercio medio con curetas medio con curetas de Gracey de Gracey 100µg xxml de penicilina G 100µg ml de penicilina G 50µg xxml de Gentamicina 50µg ml de Gentamicina αminimun αminimun essential medium essential medium Temp. 37°C Temp. 37°C-20°C
    13. 13. Aplicación de Fuerzas Compresivas Aplicación de Fuerzas Compresivas Flexercell Strain Unit Flexercell Strain Unit •Fuerzas cíclicas de Compresión fueron aplicadas en células del ligamento. •Se aplican, 6 niveles de fuerza compresivas (9,12,15,18,21 y 24% por 5 días).Al grupo Control no se le aplicará las fuerzas compresivasAl grupo Control no se le aplicará las fuerzas compresivas
    14. 14. Determinación de la expresión o presencia del RANKL. Determinación de la expresión o presencia del RANKL. Kit comercial denominado Kit Quantikine Kit comercial denominado Kit Quantikine Anticuerpo Anti-human Anticuerpo Anti-human RANKL/TNFRSF11A RANKL/TNFRSF11AA este se le adiciona un color,el cual puede ser medido a 3,5 a 4,5través de su intensidad,determinando la cantidad del horassustrato
    15. 15. (3) Meses Después
    16. 16. RANKL/TNFRSF11A
    17. 17. % DE PRESENCIA DEL RANKL EN LAS CÉLULAS DEL % DE PRESENCIA DEL RANKL EN LAS CÉLULAS DELLIGAMENTO PERIODONTAL EN EL GRUPO CASO, Y EL GRUPO LIGAMENTO PERIODONTAL EN EL GRUPO CASO, Y EL GRUPO CONTROL POSTERIOR A LA APLICACIÓN DE LAS FUERZAS CONTROL POSTERIOR A LA APLICACIÓN DE LAS FUERZAS COMPRESIVAS COMPRESIVAS N %RANKL grupo %RANKL grupo Control Caso 1 2 3 4 5 Total %
    18. 18. ARTICULOS O INSTRUMENTOS PRECIOS 2 Curetas de Gracey 34$ αminimun essential medium 75$Solución fosfatasa Buffered 107$Cabina de flujo laminar 1850$5 Tissue Train® Culture Plates (6 115$unidades)1000 tubos de ensayo desechables 35$Laboratorio UIBO por 3 meses 1000 $TOTAL EN DOLARES 3216$TOTAL EN PESOS 6.432.000 pesos
    19. 19.  Krishnan,  V;  Davidovitch,  Z.  Cellular, molecular, and tissue- level reactions to orthodontic force.  American  Journal  of Orthodontics and dentofacial Orthopedics. Volumen 129, 2006. Abuabara A. Biomechanical aspects of external root resorption in orthodontic therapy. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. Dec 1; 12 (8): E 610-3. Año 2007. Joanna B. Tyrovola, Meropi N. Spyropoulos, Margarita Makou. Root resorption and the OPG/RANKL/RANK system: a minireview. Journal of Oral Sciencie, Vol 50, No.4, 367-376. 2008 A. George, CA Evans. Detection of root resorption using dentin and bone markers. Orthod Craniofacial Res. 2009 Agosto;  12 (3) 229-235 Hamamoto  Y,  Kawasaki  N,  Jarnbring  F,    Hammarström  L.  Effects and distribution of the enamel matrix derivateEmdogain® in the periodontal tissues of rat molars transplated to rhe abdominal wall. Dental Traumatology 2002: 18: 12-23 Fuss Z, Tsesis I, Lin S. Root resorption-diagnosis, classification and trearment choices based on stimulation factors. Dental Traumatology 2003; 19: 175-182. Barrett  EJ,  Kenny  DJ,  Tenenbaum  HC,  Sigal  MJ,  Johnston  DH.  Replantation of permanent incisors in children usingEmdogain®. Dental traumatology 2005; 21: 269-275. Y. Yagi, N. Suda, Y. Yamakoshi, O. Baba, K. Moriyama.  In vivo Aplication of Amelogenin suppresses root resorption. J Dent Res 88 (2): 176-181, 2009. 
    20. 20. Xuan  Khanh  Le,  Claude  Laflamme,  Mahmoud  Rouabhia.  Phorphyromonas Gingivalis decreases osteoblastproliferation through IL- 6- RANKL/OPG and MMP-9/TIMPs Pathways.  Indian  J  Dent  Research,  20  (2),  2009.  Oral Ecology Research Group, Faculty of Dentistry, Laval University, Quebec City. Canada.  Yamaguchi, Kazutaka. Inflammation in periodontal tissues in response to mechanical forces. Arch Inmunol Ther Exp, 2005, 53, 388-398. Departmet of Orthodontics, Nihon University School of dentistry at Matsudo, Japan. Yamaguchi, Aihara. RANKL increase in compressed periodontal ligament Cells from Root Resorption. J DENT RES 2006; 85; 75. Departmet of Orthodontics, Nihon University School of dentistry at Matsudo, Japan. Yamaguchi,  Shimizu.  Effects  of  different  magnitudes  of  tension-force  on  alkaline  fosfatase  activity  in  periodontal ligament  cells.J  RES  DENT  1996;  75;  889.  Departmet  of  Orthodontics,  Nihon  University  School  of  dentistry  at Matsudo, Japan. TAKAHISA SASAKI. Differentiation and Functions of Osteoclasts and Odontoclasts in Mineralized Tissue Resorption, Microsc. Res. Tech. 61:483–495, 2003 Shimizu,  N;  Ozawa  Y;  Yamaguchi  M.    Induction  of  COX-2  expression  by  mechanical  tensión  force  in  human periodontal ligament cells. J Periodontol., 69, 670-677. Hidefumi  Fukushima,  Akihiro  Nakao,  Fujio  Okamoto,  Masashi  Shin,  Hiroshi  Kajiya,Seiji  Sakano,  Anna  Bigas,  Eijiro Jimi,  and  Koji  Okabe.  The  Association  of  Notch2  and  NF-_B  Accelerates  RANKL-Induced  Osteoclastogenesis MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY, Oct. 2008, p. 6402–6412  Rouha M.S. Granfar, Christopher J.Day, Michael S. Kim, Miguel A. Morrison. Optimised Real time quantitative PCR assays for RANKL regulated genes. Molecular and cellular probes.Vol 19, pag 119-126 2005
    21. 21. GRACIAS!!!!

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