Este documento describe un estudio experimental in vitro que busca determinar la relación entre la expresión del RANKL y la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas durante el movimiento ortodóntico. Se aplicarán diferentes niveles de fuerza compresiva a células del ligamento periodontal extraídas de pacientes, y se medirá la expresión de RANKL antes y después de la aplicación de fuerzas. Los resultados podrían establecer si existe una relación entre la cantidad de RANKL expresado y el grado de reabsorción radicular, lo que
SESION DE PERSONAL SOCIAL. La convivencia en familia 22-04-24 -.doc
Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.
1. Universidad El Bosque
Posgrado Odontología
Biología Oral
Residentes:
Hernández Joanna
Hernández Ma. Daniela
Profesor: Dr. Juan Carlos Munévar Nissnick Lorena
Reina Diana
Uribe Manuel
2. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante
la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.
Planteamiento del Problema
3. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante
la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.
•Determinar la relación del RANKL y la reabsorción radicular producida por el
movimiento dental ortodóntico.
•Describir el proceso del mecanismo de acción del complejo RANK- RANKL
en la reabsorción radicular patológica por movimientos dentales
ortodónticos .
•Determinar si hay expresión de RANKL en células del ligamento periodontal
de dientes de pacientes que presentaron reabsorción radicular durante el
tratamiento ortodóntico, luego de ser sometidas a fuerzas compresivas in
vitro.
4. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante
la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.
•Establecer si existe relación entre la cantidad de expresión del RANKL y
la aplicación de diferentes intensidades de fuerzas compresivas en las
células del ligamento periodontal.
•Determinar si la reabsorción radicular patológica inducida por
movimientos dentales ortodónticos está relacionada con la expresión de
RANKL en células del ligamento periodontal.
5. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante
la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.
Llave Regulatoria del Remodelado óseo
Llave Regulatoria del Remodelado óseo
durante el movimiento dental ortodóntico
durante el movimiento dental ortodóntico
REABSORCIÓN
REABSORCIÓN RANKL
RANKL
Detección
Detección Riesgo de
Riesgo de
temprana de la
temprana de la Reabsorción
Reabsorción
reabsorción
reabsorción Severa.
Severa.
6. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante
la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.
Marco Teórico
Marco Teórico
Hallazgo clínico
Movimiento Dental Ortodóntico
RANKL/RANKL/OPG
•Fuerzas
Intermitentes DAÑO
DAÑO
•Fuerzas Continuas
7. Expresión del RANKL en células del Ligamento Periodontal durante
la reabsorción radicular inducida por fuerzas compresivas.
Receptor de la Calcitonina
Receptor de la Calcitonina
Captesina KK
Captesina
C-Jun
C-Jun
FBP-1
FBP-1
GABPα
GABPα
TRAP
TRAP
GABPβ
GABPβ
8. Sustancia
RANKL – P
CGRP PGE
Odontología 2
Linfocitos T,
Modificación de la TNFα
matriz extracelular, monocitos y
distorsión del colágeno macrófagos
y membrana celular del
fibroblasto
IL-1
IL-6
OPG PGE
2
RANK RANKL
OSTEOCLASTO OSTEOBLASTO
9. DISEÑO EXPERIMENTAL
TIPO DE ESTUDIO EXPERIMENTAL IN VITRO
ESQUEMA EXPERIMENTAL
ESQUEMA EXPERIMENTAL
HIPOTÉSIS MUESTRA
Ho: EL RANKL NO SE RELACIONA CON LA
REABSORCIÓN RADICULAR PRODUCIDA POR CRITERIOS DE INCLUSIÓN
CRITERIOS DE INCLUSIÓN CRITERIOS DE EXLUSIÓN
CRITERIOS DE EXLUSIÓN
FUERZAS TENSIONALES DURANTE EL
MOVIMIENTO ORTODONTICO. •Hombres yyMujeres 13-30 •P. sistemicamente
•Hombres Mujeres 13-30 •P. sistemicamente
años.
años. comprometidos.
comprometidos.
HA: EL RANKL SE RELACIONA CON LA •P. Requieran extracción
•P. Requieran extracción •P. Con tto ortodóntico
•P. Con tto ortodóntico
REABSORCIÓN RADICULAR PRODUCIDA POR
de 1eros premolares por
de 1eros premolares por previo.
previo.
FUERZAS TENSIONALES DURANTE EL
MOVIMIENTO ORTODONTICO motivo ortodóntico.
motivo ortodóntico. •P. Con trauma
•P. Con trauma
•P. Sistémicamente Sanos.
•P. Sistémicamente Sanos. dentoalveolar previo.
dentoalveolar previo.
•P. Con enfermedad
•P. Con enfermedad
Periodontal.
Periodontal.
GRUPO CONTROL: GRUPO CASO:
5. 1eros premolares 5. 1eros premolares
PROCEDIMIENTOS
PROCEDIMIENTOS extraídos de P. con extraídos de P. con
R.R. ≤2mm R.R. ≥2mm
10. ••En la Clínica de la Universidad El Bosque, se seleccionará los
En la Clínica de la Universidad El Bosque, se seleccionará los
pacientes en los que este indicado la exodoncia de los primeros
pacientes en los que este indicado la exodoncia de los primeros
premolares por razones ortodónticas. (3 meses).
premolares por razones ortodónticas. (3 meses).
•Posteriormente, los pacientes seleccionados firmaran un
consentimiento informado, aprobado por el Comité de ética de la
Universidad El Bosque.
••Un día antes de las exodoncias se realizará control de placa yy
Un día antes de las exodoncias se realizará control de placa
profilaxis, llevadas a cabo por los investigadores.
profilaxis, llevadas a cabo por los investigadores.
•Exodoncias de 1eros premolares realizadas por Estudiantes del 7mo
semestre de la Universidad El Bosque, previamente entrenados.
11. Preparación del Medio de Transporte
Preparación del Medio de Transporte
PBS
PBS Antibiótico
Antibiótico
10 mm
10 mm penicilina, estreptomicina
20 ml
Obtención de los Explantes
Obtención de los Explantes
•Lavado
PBS 3 VECES POR
PBS 3 VECES POR
•Desinfección 10 SEG.
10 SEG.
12. Tej del Ligamento
Tej del Ligamento
Periodontal
Periodontal
Raspar tercio
Raspar tercio
medio con curetas
medio con curetas
de Gracey
de Gracey
100µg xxml de penicilina G
100µg ml de penicilina G
50µg xxml de Gentamicina
50µg ml de Gentamicina αminimun
αminimun
essential medium
essential medium
Temp. 37°C
Temp. 37°C
-20°C
13. Aplicación de Fuerzas Compresivas
Aplicación de Fuerzas Compresivas
Flexercell Strain Unit
Flexercell Strain Unit
•Fuerzas cíclicas de Compresión
fueron aplicadas en células del
ligamento.
•Se aplican, 6 niveles de fuerza
compresivas (9,12,15,18,21 y
24% por 5 días).
Al grupo Control no se le aplicará las fuerzas compresivas
Al grupo Control no se le aplicará las fuerzas compresivas
14. Determinación de la expresión o presencia del RANKL.
Determinación de la expresión o presencia del RANKL.
Kit comercial denominado Kit Quantikine
Kit comercial denominado Kit Quantikine
Anticuerpo Anti-human
Anticuerpo Anti-human
RANKL/TNFRSF11A
RANKL/TNFRSF11A
A este se le adiciona un color,
el cual puede ser medido a
3,5 a 4,5
través de su intensidad,
determinando la cantidad del horas
sustrato
18. % DE PRESENCIA DEL RANKL EN LAS CÉLULAS DEL
% DE PRESENCIA DEL RANKL EN LAS CÉLULAS DEL
LIGAMENTO PERIODONTAL EN EL GRUPO CASO, Y EL GRUPO
LIGAMENTO PERIODONTAL EN EL GRUPO CASO, Y EL GRUPO
CONTROL POSTERIOR A LA APLICACIÓN DE LAS FUERZAS
CONTROL POSTERIOR A LA APLICACIÓN DE LAS FUERZAS
COMPRESIVAS
COMPRESIVAS
N %RANKL grupo %RANKL grupo
Control Caso
1
2
3
4
5
Total %
19.
20. ARTICULOS O INSTRUMENTOS PRECIOS
2 Curetas de Gracey 34$
αminimun essential medium 75$
Solución fosfatasa Buffered 107$
Cabina de flujo laminar 1850$
5 Tissue Train® Culture Plates (6 115$
unidades)
1000 tubos de ensayo desechables 35$
Laboratorio UIBO por 3 meses 1000 $
TOTAL EN DOLARES 3216$
TOTAL EN PESOS 6.432.000 pesos
21.
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