PRIMER DIA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA

1. PRIMER DÍA MUNDIAL
DE LAS LEUCODISTROFIAS
EN COLOMBIA
Centro de
Medicina
Genómica
de la FCV
Auditorio Ligia Aguirre de Sánchez
3° piso, Fundación Cardiovascular.
29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.
1

2. Isidro Arévalo Vargas M. Sc
Departamento de Ciencias Biológicas
Centro de Investigaciones en Bioquímica
Universidad de los Andes
Bogotá, Colombia 2

3.  Las enfermedades de depósito lisosomal (EDL) pertenecen a un grupo
de errores innatos del metabolismo que se caracterizan por el bloqueo en
una ruta metabólica de una o varias enzimas lisosomales.
(Hayashi, Nakamura et al. 2011).
Acumulación
No producción
Ausencia
Clasificación ruta
afectada:
Mucopolisacaridosis
Esfingolipidosis
Glucoproteinosis
Figura tomada el dia 16 de mayo de de gauchercare.com
(Martins 1999; Mehta, Beck et al. 2006)
(Figura modificada el día 14 de mayo de 2012 de Pollitt et.al., 1997)
3
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

4.  Modo de herencia:
 Autosómico dominante • Distrofia muscular de Duchene
 Autosómico recesivo • Gaucher
• Hunter (MPS II)/ Fabry
 Ligado al cromosoma X.
 Frecuencia
 Muy baja
Alta incidencia entre 1:5000-7000 recién
 Gaucher 1:57000
nacidos
 Sialidosis 1:4.2 Mill.
(Marsden and Levy 2010). (Staretz, et al., 2009).
4
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

5. Perdida de habilidades
adquiridas.
DETERIORO
SUSTANCIA
BLANCA. Devastación
neurologica.
Enfermedades geneticas
Degeneración Defecto: Sintesis
mielina vainas y mantenimiento
SNC. de mielina.
(Kohlschütter & Eichler, 2011)
5
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

6.  Progresivo deterioro
Dismielinización Desmielinización
(Anormalidades en la (Pérdida de mielina CLASIFICACIÓN BIOQUIMICA
formación y mantenimiento formada previamente
de mielina). normal tanto morfológica 1) Metabolismo lipídico.
como funcionalmente) 2) Proteínas
3) Ácidos orgánicos
4) Otras causas
Sustancia blanca del CNS.
(Tsuji, 2007; Kanekar and Gustas, 2011).
6
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

7. METABOLISMO LIPIDICO DESORDEN PROTEÍNA DESORDENES ACIDOS OTRAS
MIELINA ORGANICOS LEUCODISTROFIAS
Adrenoleucodistrofia Pelizaeus-Merzbacher Canavan (AR). Alexander.
(Ligado-X). Def. Aspartoacilasa Def. Proteína gliofibrilar
Def. Proteolipido proteico. ácida (GFAP)
Krabbe Desvanecimiento de la
sustancia blanca.
Síndrome de Sjögren- Arteriopatía cerebral
Larsson (AR). autosómica dominante
Def. Lipoaldehído con infartos subcorticales
deshidrogenasa y leucoencefalopatía
Xantomatosis
cerebrotendinosa (AR).
Def. Esterol 27-hidroxilasa.
(Tsuji, 2007.)
7
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

8.  Alteración en la ruta de los esfingolípidos
en el metabolismo lisosomal.
(Kolter and Sandhoff , 2006)
Enzima Arilsulfatasa A (ASA)
(Natowicz, Prence et al. 1996;
Cesani, Capotondo et al. 2009)
Deficiencia
Cofactor Saposin B (SapB)
(Deconincka, Messaaoui et al. 2008).
(Figura tomada de Huwiler, Kolter et al. 2000)
8
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

9. Enzima ASA / Cofactor SapB.
Catalizan cerebrósido 3-sulfato (Sulfatidio).
Componente principal en la formación de la mielina
4%. (Riñón, epitelio ducto biliar).
(Gieselmann, 2008)
Sulfatidios.
(Saravanan, Büssow et al. 2007).
Oligodendrocitos (SNC).
Desmielinización
Células de Schwan (SNP).
(Baumann, Turpin et al. 2002; Colsch, Afonso et al.
2008; Faust, Kaye et al. 2010)
Imagen tomada de internet el día 15 de mayo de 2012 de http://www.glycoforum.gr.jp/index.html
9
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

10.  La desmielinización generalizada es lo que conlleva a presentar un deterioro en la
función neurológica y por último la muerte.
(Tan, Fuller et al. 2010).
Tres etapas (infantil, juvenil y adulta)
Deterioro progresivo de •Hipotonía Deterioro rendimiento:
varias destrezas •Marcha inestable laboral o escolar.
adquiridas. •Retraso mental Trastornos emocionales,
comportamiento.
(Von Figura, Gieselmann et al. 2001)
(Wang, 2007) Síntomas psiquiátricos
Estado vegetativo en todas las fases de la
enfermedad (Kolter and Sandhoff 2006).
10
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

11. • Valoración de sulfatidios en la orina.
Cromatografía (Rafi, Coppola et al. 2003)
capa fina (CCF)
• Colorimétrico. (Baum, Dodgson et al. 1959; Cordoba 1991)
Actividad de
ASA en
• Fluorométrico. (Shapira, Blitzer et al. 1989)
leucocitos.
• Mutaciones.
(Gieselmann, Polten et al. 1989; Qu, Miller
Biología
Molecular.
• Pseudodeficiencias (PD-ASA). et al. 1997; Pedron, Gaspar et al. 1999)
Deficiencia
• Fluorométrico.
Múltilple de (Artigalás, Roberto da Silva et al. 2009)
Sulfatasas
11
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

12.  Limitaciones en cuanto al acceso de los pacientes a los procesos de diagnóstico.
 Estudios aislamientos leucocitarios.
 Son muy difíciles de cumplir en algunas ciudades intermedias, lo que genera una
serie de inconvenientes que en un buen número de casos dejan las muestras
inservibles para procesos de análisis bioquímico.
12
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

13.  Estandarizar.
 Protocolo fluorométrico mas sensible.
 Establecer y comparar valores.
13
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

14.  Resolución No. 008430 de 1993 de
la República de Colombia.
 Consentimiento informado.
 85 muestras de sangre total de
pacientes control (1-68 años).
 (2009-2012) 85 muestras de
individuos TND (0.15-47 años).
14
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

15. Valoración
proteína. FL-
BCA
Prueba FL (Shapira et Análisis
al., 1989). estadístico.
4-metilumberilferona SPSS
Pacientes sulfato (4-MUS)
remitidos. Daño Muestra sangre
sustancia total.
blanca. Aislamiento
Neuroimágen. leucocitos Prueba COL (Baum, et al 1954 y
POSITIVO. (Shapira et al., Córdoba, 1995)
1989) p-nitrocatecol sulfato (p-NCS)
Extracción
sulfatidios –
Muestras
Cromatografía
de orina.
(Rafi, Coppola et Prueba β-GAL (Shapira et al.,
al., 2003). NEGATIVO. 1989.)
Otra enfermedad 4-metilumbeliferona-β-D-
neurodegenerativa. galactosidasa
Prueba FL
ASA B GSSPF
15
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

16. 4 Pacientes detectados ASA.
4 Pacientes confirmados LM.
2 Pacientes confirmados GM1. 7.05 % alto riesgo.
 CCF. Prueba sulfatidios diagnostico
diferencial de la LM.
 Cofactor SapB.
 PD-ASA.
 Método de tamizaje.
16
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

17.  Es importante concluir que ante casos en los cuales se tengan la prueba FL
positiva de ASA y la presencia de sulfatidios es necesario que se haga al menos
una prueba de una sulfatasa diferente, con el fin de poder descartar una posible
DMS.
 Método tamizaje GSSPF. Ventajas sobre los leucocitos con respecto al manejo,
transporte y mantenimiento de la muestra.
17
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

18.  Es importante que nosotros como laboratorio de referencia a nivel nacional e
internacional tengamos las técnicas apropiadas para la detección temprana y de
esta manera que el paciente y la familia tengan la oportunidad de recibir
tratamiento oportuno y mejorar su calidad de vida, que en últimas es nuestro
principal objetivo.
18
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

19. Dedicación especial a todas las familias y
pacientes que fueron participes de este estudio.
Familia Zapata Moncada, Medellín.
Familia Henao García, Bogotá.
Centro de
Medicina
Genómica
de la FCV
19
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

20. “No pretendamos que las cosas cambien, si siempre hacemos lo mismo.
La crisis es la mejor bendición que puede sucederle a personas y países, porque
la crisis trae progresos. La verdadera crisis es la crisis de la incompetencia.
El inconveniente de las personas y los países es la pereza para encontrar las
salidas y soluciones. Hablar de crisis es promoverla, y callar en la crisis es
exaltar el conformismo. En vez de esto, trabajemos duro. Acabemos de una vez
con la única crisis amenazadora, que es la tragedia de no querer luchar por
superarla”.
Albert Einstein
20
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.

21.  Artigalás, O. A., L. Roberto da Silva, et al. (2009). "Multiple sulfatase deficiency: clinical report and description of two novel mutations in a Brazilian patient." Metabolic Brain Disease 24(3): 493-500.
 Ballabio, A., & Gieselmann, V. (2009). "Lysosomal disorders: From storage to cellular damage." Biochimica et Biophysica Acta 1793 684–696.
 Baumann, N., Pham-Dinh D. (2001) Physiol Rev;81:871-927.
 Baumann, N., J.-C. Turpin, et al. (2002). "Motor and psycho-cognitive clinical types in adult metachromatic leukodystrophy: genotype/phenotype relationships?" Journal of Physiology-Paris 96(3–4): 301-306.
 Baum, H., K. Dodgson, et al. (1959). "The assay of arylsulfatases A and B in human urine." Clin Chim Acta 4: 453-455.
 Cesani, M., A. Capotondo, et al. (2009). "Characterization of New Arylsulfatase A Gene Mutations Reinforces Genotype-Phenotype Correlation in Metachromatic Leukodystrophy." Human Mutation 30(10): E936-
E945.
 Colsch, B., C. Afonso, et al. (2008). "Sulfogalactosylceramides in motor and psycho-cognitive adult metachromatic leukodystrophy: relations between clinical, biochemical analysis and molecular aspects."
Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects 1780(3): 434-440.
 Cordoba, A. (1991). Estudio del comportamiento de la Arilsulfatasa A en una poblacion colombiana. Master, Universidad de los Andes.
 Deconincka, N., A. Messaaoui, et al. (2008). "Metachromatic leukodystrophy without arylsulfatase A deficiency: A new case of saposin-B deficiency." European Journal of Paediatric Neurology 12: 46-50.
 Faust, P. L., E. M. Kaye, et al. (2010). "Myelin lesions associated with lysosomal and peroxisomal disorders." Expert Review of Neurotherapeutics 10(9): 1449-1466.
 Gieselmann, V., A. Polten, et al. (1989). "Arylsulfatase A pseudodeficiency: Loss of a polyadenylylation signal and N-glycosylation site." Proceedings of the National Academy of Sciences 86: 9436-9440.
 Gieselmann, V. (2008). " Metachromatic leukodystrophy: genetics, pathogenesis and therapeutic options. " Acta Padiatrica;97: 15-21.
 Haberlandta, E., S. Scholl-Bürgia, et al. (2009). "Peripheral neuropathy as the sole initial finding in three children with infantile metachromatic leukodystrophy." EUROPEAN JOURNAL OF PAEDIATRIC
NEUROLOGY 13: 257-260.
 Hayashi, T., M. Nakamura, et al. (2011). "Adult-type metachromatic leukodystrophy with compound heterozygous ARSA mutations: A case report and phenotypic comparison with a previously reported case."
Psychiatry and Clinical Neurosciences 65: 105-108.
 Huwiler, A., Kolter, T. et al. (2000). " Physiology and pathophysiology of sphingolipid metabolism and signaling." Biochimica et Biophysica Acta ;1485 :63-99.
 Kolter, T. and K. Sandhoff (2006). "Sphingolipid metabolism diseases." Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranes 1758(12): 2057-2079.
 Luciani, J. J., P. De Mas, et al. (2003). "Telomeric 22q13 deletions resulting from rings, simple deletions, and translocations: cytogenetic, molecular, and clinical analyses of 32 new observations." Journal of
Medical Genetics 40: 690-696.
 Marsden, D. and H. Levy (2010). "Newborn screening of lysosomal storage disorders." Clin Chem 56(7): 1071-1079.
 Martins, A. (1999). "Inborn errors of metabolism: a clinical overview." Sao Paulo Medical Journal 117(6): 251-265.
 Mehta, A., M. Beck, et al. (2006). 1. History of lysosomal storage diseases: an overview. Fabry Disease: Perspectives from 5 Years of FOS. A. Mehta, M. Beck and G. Sunder-Plassmann. Oxford, Oxford
PharmaGenesis.
 Natowicz, M. R., E. M. Prence, et al. (1996). "Urine sulfatides and the diagnosis of metachromatic leukodystrophy." Clinical chemistry 42(2): 232-238.
 Pedron, C. G., P. A. Gaspar, et al. (1999). "Arylsulfatase A pseudodeficiency in healthy Brazilian individuals." Brazilian Journal of Medical and Biological Research 32: 941-945.
 Pollitt, R., Green, A. et al. (1997). " Neonatal screening for inborn errors of metabolism: cost, yield and outcome. " Health Technology Assessment ;1.
 Qu, Y., J. B. Miller, et al. (1997). "Arylsulfatase A Pseudodeficiency: Altered Kinetic and Heat-Inactivation Properties." GENETIC TESTING 1(4): 283-287.
 Rafi, M., S. Coppola, et al. (2003). "Disease-causing mutations in cis with the common arylsulfatase A pseudodeficiency allele compound the difficulties in accurately identifying patients and carriers of
metachromatic leukodystrophy." Molecular Genetics and Metabolism 79.
 Saravanan, K., H. Büssow, et al. (2007). "A spontaneously immortalized Schwann cell line to study the molecular aspects of metachromatic leukodystrophy." Journal of Neuroscience Methods 161(2): 223-233.
 Shapira, E., M. Blitzer, et al. (1989). Biochemical Genetics a laboratory Manual.
 Staretz, C., Lang, T. (2009). " Lysosomal storage disorders in the newborn. " Pediatrics 123(4):1191-207.
 Tan, M. A. F., M. Fuller, et al. (2010). "Biochemical profiling to predict disease severity in metachromatic leukodystrophy." Molecular Genetics and Metabolism 99(2): 142-148.
 Von Figura, K., V. Gieselmann, et al. (2001). Metachromatic leukodystrophy. The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease. McGraw-Hill. New York, NY: 3695-3724.
 Wang, J., W. Zhang, et al. (2007). "ARSA Gene Mutations in Five Chinese Metachromatic Leukodystrophy Patients." Pediatric Neurology 36(6): 397-401.
21
PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.