2. ¿QUE ES?
El microscopio (mikrós, que significa pequeño y skopéoo, que
significa observar ) es un instrumento que permite observar
objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple
vista.
3. SU HISTORIA
• El microscopio fue inventado hacia los años 1610, por Galileo Galilei según los
italianos, o por Zacharias Janssen, en opinión de los holandeses.
• En 1665 Hooke observó con un microscopio un delgado corte de corcho y notó
que el material era poroso, y en su conjunto, formaban cavidades poco profundas
a modo de cajas a las que llamó células. Se trataba de la primera observación de
células muertas.
4. • A mediados del siglo XVII un holandés, Anton Van Leeuwenhoek, utilizando
microscopios simples de fabricación propia, describió por primera
vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos. El microscopista
Leeuwenhoek, sin ninguna preparación científica, puede considerarse el fundador
de la bacteriología.
• Durante el siglo XVIII el microscopio tuvo diversos adelantos mecánicos que
aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso, aunque no se desarrollaron por el
momento mejoras ópticas. Las mejoras más importantes de la óptica surgieron
en 1877, cuando Ernst Abbe publicó su teoría del microscopio y, por encargo
de Carl Zeiss, mejoró la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite
de cedro, lo que permite obtener imágenes 2000 veces aumentadas.
6. MICROSCOPIO SIMPLE
Microscopio simple.- Es el que utiliza sólo
una lente, es decir, es una lupa, su aumento
depende de la curvatura de la superficie de
la(s) lente(s). Las lupas pueden ampliar las
imágenes de los objetos desde 5, 8,10, 12, 20
y hasta 50 veces. Forman una imagen de
mayor tamaño, derecha y virtual. , pero el
aumento que se puede lograr con este
microscopio para poder observar objetos
pequeños es muy poco.
7. MICROSCOPIO ÓPTICO
Se basa en el uso de lentes ópticas. También se le
conoce como microscopio de luz, microscopio
fotónico (que utiliza luz o "fotones") o microscopio
de campo claro. El desarrollo de este aparato suele
asociarse con los trabajos de Anton van
Leeuwenhoek.
8. MICROSCOPIO FOTÓNICO
COMPUESTO.
Se denominan compuestos porque la imagen se forma mediante la utilización
de tres sistemas de lentes, cada uno de ellos constituidos por lentes convergentes
y divergentes. Los sistemas de lentes son el condensador, los objetivos y los
oculares.
9. MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS
Microscopio electrónico de trasmisión es aquél
que utiliza electrones en lugar de fotones o luz
visible para formar imágenes de objetos
diminutos. Los microscopios electrónicos
permiten alcanzar una capacidad de aumento
muy superior a los microscopios
convencionales (más de 100 aumentos
comparados con los de los mejores
microscopios ópticos).
Microscopio electrónico de barrido, consta de
una punta móvil por la cuál se emiten los
electrones, esta punta ¨barre¨ la muestra, un
receptor toma las ondas reflejadas y las
reproduce sobre una pantalla de Tv
produciendo una imagen en tres dimensiones.
10. MICROSCOPIO DE CAMPO O
MICROSCOPIO CLARO COMPUESTO
Microscopio de campo o microscopio claro
compuesto.- Es una variante del anterior, y es el
más común para usos médicos y en la química
industrial. Consiste en dos sistemas de lentes, el
objetivo y el ocular, están montados en
extremos opuestos de un tubo cerrado. El
objetivo está compuesto de varias lentes que
crea una imagen aumentada de aquello que se
observa, las lentes del microscopio están
dispuestas de tal forma que el objetivo se
encuentra en el punto focal del ocular, el
aumento de la imagen depende de las longitudes
focales de los sistemas de lentes, además poseen
por lo general una “cabeza” giratoria para que
los sistemas de lentes cambien dependiendo de
la graduación necesaria para poder observar el
objeto que se pretende estudiar
11. MICROSCOPIO COMPUESTO
Microscopio compuesto Un
microscopio compuesto es un
aparato óptico hecho para agrandar
objetos, consiste en un número de
lentes formando la imagen por
lentes o una combinación de lentes
posicionados cerca del objeto,
proyectándolo hacia los lentes
oculares u el ocular. El microscopio
compuesto es el tipo de microscopio
más utilizado
12. MICROSCOPIO FLUORESCENTE O
MICROSCOPIO EPI-FLUORESCENTE
Microscopio fluorescente o
"microscopio epi-fluorescente" es
un tipo especial de microscopio
liviano, que en vez de tener un
reflejo liviano y una absorción
utiliza fluorescencia y
fosforescencia para ver las
pruebas y sus propiedades.
13. MICROSCOPIO ESTÉREO
Un microscopio estéreo, también
llamado "microscopio de disección",
utilice dos objetivos y dos oculares que
permiten ver un espécimen bajo
ángulos por los ojos humanos
formando una visión óptica de tercera
dimensión.
15. COMPONENTES MECÁNICOS.
• Base o pié. Es un soporte metálico, amplio y sólido en donde se apoyan y sostienen
los otros componentes del microscopio.
• Brazo, estativo o columna. Permite la sujeción y traslado del microscopio. Soporta
al tubo óptico, a la platina y el revolver.
• Platina. Superficie plana de posición horizontal que posee una perforación circular
central. En ella se apoya la preparación (lámina portaobjetos que contiene a la
muestra que se va a examinar) que se sujeta a la platina mediante pinzas o con un
carrito o charriot que, mediante mandos especiales facilitan el movimiento de la
preparación de derecha a izquierda y de adelante hacia atrás.
16. • Tubo óptico. Consiste en un cilindro metálico que suele medir 160mm o 170
mm de longitud el cual en un extremo, está conectado al revolver o
portaobjetivos y en el otro se relaciona con el (los) ocular(es).
• Revolver o portaobjetivos. Es un componente que gira alrededor de un eje con
la finalidad que los objetivos que sostiene coincidan de manera perpendicular
con la perforación central de la platina.
• Tornillos macrométrico y micrométrico. Ambos tornillos permiten el
desplazamiento de la platina hacia arriba y hacia abajo con la finalidad de
acercar o alejar la preparación hacia los objetivos y así conseguir un enfoque
óptimo de la imagen.
• Engranajes y cremallera. Constituyen mecanismos de desplazamientos de las
diferentes partes del microscopio
17. • Cabezal. Es un componente situado en relación con el tubo del microscopio que
alberga principalmente prismas o espejos que sirven para acondicionar en él dos o
más oculares, o sistemas mecánicos que soportan cámaras fotográficas, de vídeo o
sistemas de proyección de la imagen.
18. COMPONENTES ÓPTICOS
• Condensador: Es el componente óptico que tiene como función principal concentrar y
regular los rayos luminosos que provienen de la fuente luminosa Está formado por una
o dos lentes convergentes que reúnen los rayos luminosos y los orientan hacia la
abertura central de la platina.
• Objetivos. Los objetivos están considerados los elementos más importantes en la
formación de la imagen microscópica, ya que estos sistemas de lentes establecen la
calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que tiene para captar los
detalles de la misma
19. o Acromáticos. Estos objetivos corrigen los rayos luminosos azules y rojos
haciéndolos coincidir en un solo plano focal. En tanto que los otros rayos
coloreados se forman en otro plano focal generando una imagen cuyos bordes se
observan levemente difusos (espectro luminoso secundario). Los objetivos de los
microscopios “de estudiante” son acromáticos.
o Semiapocromáticos. Se les conoce también como objetivos de “fluorita”, corrigen
el espectro secundario dando como resultado imágenes de bordes más nítidos. Por
la alta capacidad que tienen para transmitir las radiaciones luminosas de onda
corta, se les considera como los objetivos ideales para microscopía de
fluorescencia.
20. o Apocromáticos. En estos objetivos se hacen coincidir en un solo plano los rayos
luminosos azules, rojos y verdes, obteniendo así una imagen de bordes
sumamente nítidos, pero la corrección de esta aberración trae consigo la
acentuación de otra, que es la de curvatura de campo, pues la superficie focal de
la imagen es ligeramente curva, dando como resultado que, al observar la
imagen y tratar de enfocarla en la zona central del campo microscópico se
desenfoca la zona periférica y viceversa.
o Planapocromáticos. Son los objetivos en los cuales se han corregido la mayor
cantidad de aberraciones como la cromática, curvatura de campo, de esfericidad
y de astigmatismo; por lo tanto se obtienen imágenes sumamente nítidas y el
campo microscópico aparece totalmente plano, enfocado en toda su extensión.
Son los objetivos que generan imágenes con mejor resolución, es preferible
usarlos cuando se desea obtener imágenes fotográficas ( fotomicrografía).
22. Lo primero es preparar lo que queremos mirar a través del microscopio. A esto
se le llama montar la preparación. Para montar la preparación debemos colocar
lo que queremos ver encima de un cristal (portaobjeto) y poner encima otro
cristal (cubreobjeto). Te recomendamos que empieces por ver una gota de agua
de un charco.
A veces se hecha un líquido entre los 2 cristales para que se vea mejor (depende
lo que se quiera ver).
Encendemos la luz del microscopio y comprobamos que vemos la luz a través
del ocular.
Colocamos la preparación sobre la platina y movemos el revólver para poner
sobre ella el objetivo de menor aumento.
23. Enfocamos la muestra:
• Giramos el tornillo macrométrico hasta que el objetivo esté lo más cerca
posible de la preparación.
• Mirando por el ocular, giramos el tornillo para ir separando el objetivo de la
preparación hasta ver una imagen los más enfocada posible.
• Movemos el tornillo micrométrico para conseguir una imagen más enfocada.
• Podemos observar la muestra con más aumentos, cambiando el objetivo
(mediante el revólver) y ajustando el enfoque con el tornillo micrométrico.
26. Los microscopios son equipos que requieren de un cuidado esmerado para su
buen funcionamiento y prolongación de su vida útil, no solo por su elevado
costo, sino porque resultan imprescindibles en el laboratorio para el examen
de diferentes muestras, que no puede ser resuelto por ningún otro
procedimiento que no sea la microscopía.
Las causas que afectan con mayor frecuencia su óptimo estado de
funcionamiento y por consiguiente su eficacia son: el polvo, la suciedad, los
fuertes impactos, la humedad y los inadecuados métodos de limpieza.
27. • Los lentes que no estén en uso, deben ser colocados en
dispositivos con tapa de rosca para preservarlos del polvo.
• Si desea guardar los microscopios en sus cajas, cerciorarse
de que éstas no tenga humedad que creará un ambiente
muy propicio para que las lentes se contaminen con
hongos que resultan muy difíciles de remover.
• La grasa vieja que se ha solidificado o adherido, removerla
con xilol o gasolina.
MANTENIMIENTO
28. • Lubricar periódicamente las cremalleras con grasa de buena calidad libre de
ácidos.
• Para pulir las partes metálicas lustrosas, utilizar un paño fino impregnado
ligeramente con aceite de máquina exentos de ácidos.
• El equipo debe recibir asistencia técnica especializada cada 6 meses.
29. DURANTE EL EMPLEO
• Ubique el microscopio sobre una mesa o meseta sólida de superficie nivelada,
separándolo ligeramente de la orilla para evitar que accidentalmente pueda caer
al piso y dañarse.
• Antes de instalarlo a la red eléctrica, cerciórese de que el voltaje de la toma, se
corresponda con el requerido para ese microscopio, ya que un error en este
sentido ocasionaría la ruptura de la lámpara y en el mejor de los casos se produce
una disminución de la intensidad lumínica con la consiguiente pérdida de nitidez
de la imagen.
30. AL TERMINAR
• Apague la lámpara. Si se trata de un modelo con regulador de intensidad,
reduzca la luz antes de apagarla. Con esta acción se protege al filamento que
puede quebrarse por cambios bruscos de la temperatura si no se toma esa
medida.
• Antes de retirar la lámina, separe el lente objetivo de la preparación con el
tornillo macrométrico, para evitar roces con la lente frontal que pueden dañarla.
Se utilizó lente de inmersión, remueva el aceite empleado con papel para lentes o
un paño de tela fina que no ocasione ralladuras. No utilice el alcohol para estos
menesteres, pues pueden desprender la lente del cemento que la fija al
dispositivo tubular inutilizable. En caso de emplear xilol, por estar muy
impregnado el aceite, humedezca ligeramente el paño, no lo empape, para evitar
que se produzca el mismo efecto que con el empleo del alcohol.
31. • Coloque la tapa a cada lente ocular para evitar que se afecte por el polvo, y
cubra el microscopio con un tapacete de nylon con el mismo propósito.
33. DEL SISTEMA ÓPTICO
• El vidrio con que se fabrican las lentes es blando, de ahí, que sean muy susceptibles a la
erosión. Cuando se requiera su limpieza se debe emplear, para remover el polvo, un
pincel fino y plano, de ser posible de pelo de camello, que se utilice exclusivamente para
eso o un paño de lino fino o gamuza para la suciedad, que de manera frecuente está
ocasionada por la grasa de la pestañas y los cosméticos. La remoción del aceite de
inmersión ya fue tratada en el acápite de cuidado.
34. • Para detectar la presencia de polvo o suciedad en las lentes oculares, basta con
observar a través de ellas el campo microscópico; si se detectan manchas, haga
rotar el lente sin sacarlo del tubo ocular, las manchas rotan con la lente, es que
está sucia. Después de realizada la limpieza de la manera explicada colóquela
nuevamente en el tubo ocular y compruebe que las manchas han desaparecido, si
persisten, puede deberse a una insuficiente limpieza o que el polvo ha penetrado
el interior del lente, en ese caso, desenrosque el tubito portador de las lentes y
proceda cuidadosamente a su limpieza, volviendo a colocar las lentes en la misma
posición en que estaban, absteniéndose de contactar con el diafragma anular que
se haya en su interior. Si después de realizada esta operación la suciedad persiste,
limpia la lente frontal del lente objetivo, cuyo soporte no debe abrirse nunca,
correspondiendo, solo a un personal especializado, pues de lo contrario se corre
el riesgo de que sufran un daño irreparable.
35. DEL SISTEMA MECÁNICO
• La base, brazo, platina, etc. Se limpiarán con un paño, con el que se
removerá el polvo y la suciedad de sus superficies.
• No debe utilizarse alcohol para limpiar el microscopio pues tiende a
deteriorar la pintura.