Principios de histologia

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Principios de histologia

  1. 1. Histología Veterinaria Aplicada - Willan J. Banks
  2. 2. La HISTOLOGÍA (histós "tejido" y logía, ‘’tratado, estudio, ciencia’’) es la ciencia que estudia todo lo relacionado con los tejidos orgánicos: su estructura microscópica, su desarrollo y sus funciones.
  3. 3. La histología moderna (anatomía microscópica) es una ciencia refinada dirigida al estudio de la estructura y función de los tejidos desde los mas diversos enfoques multidisciplinarios. • Anatomía • Fisiología • Química • Bioquímica • Física • Microscopia • Histoquímica • Citoquímica
  4. 4. • Relación con el avance tecnológico de otras disciplinas. • La histología se basa en la implementación de métodos o técnicas que permiten estudiar tanto células vivas como muertas y resolver problemas. • Microscopia Ej: contraste de fase o campo oscuro • Cámaras transparentes de observación • Colorantes vitales y supravitales • Cultivos celulares
  5. 5. TÉCNICAS DE INCLUSIÓN EN PARAFINA: es el método más común de endurecer el tejido y consiste en infiltrar la muestra con sustancias líquidas que tras un proceso de polimerización o enfriamiento se solidifican, sin afectar a las características del tejido. • Obtención de muestras • Fijación • Deshidratación y aclarado • Inclusión • Obtención de cortes • Tinción y montaje
  6. 6. La tinción tiene como objetivo mostrar las estructuras de la célula, según el colorante se tiene un estructura diferente • Colorantes ácidos y básicos • Hematoxilina y eosina • Tinción de romanowsky • Tinción de acido peryodico
  7. 7. Son muchos los enfoques técnicos que se deben cumplir para obtener la información. La información que se obtiene es limitada por el tipo por el enfoque técnico que se escoja. • Técnicas Citológicas (estructuras de poca importancia) • Técnicas de congelación (alteración morfología y función) • Histoquímica y citoquímica (identificación de sustancias en las células y tejidos) • Técnicas de metacrilato • Autorradiografia • Inmunohistoquímica ( Ag - isotiocianato de fluorescencia) • Microscopia electrónica (trancision – barrido) • Microscopia óptica (campo oscuro, contraste, fluorecencia) • Congelado y fractura (replicas metálicas de los tejidos)
  8. 8. • Técnicas Citológicas: citologia la rama de la biología que estudia las células en lo que concierne a su estructura, sus funciones y su importancia en la complejidad de los seres vivos. (estructuras de poca importancia) Técnicas de congelación (alteración morfología y función)- técnica de liofilizacion (La liofilización es un proceso en el que se congela el producto -170°C y posteriormente se introduce en una cámara de vacío para realizar la separación del agua por sublimación)
  9. 9. • Histoquímica y citoquímica (identificación de sustancias en las células y tejidos) Citoquímica: rama de la biología celular enfocada en el estudio de la composición química de las células y sus procesos biológicos moleculares mediante análisis químicos y quimicofísicos que permitan su observación. Histoquímica: "Conjunto de técnicas que permiten la identificación , localización y cuantificación de una sustancia en un tejido o en una célula".
  10. 10. • Autorradiografia: Imagen obtenida sobre una placa fotográfica por la aplicación de un corte de tejido quecontiene un cuerpo radiactivo: éste, por su radiación, impresiona la placa y revela así sudistribución en el tejido • Inmunohistoquímica (Ag - isotiocianato de fluorescencia); procedimiento histopatológico que se basa en la utilización de un anticuerpo específico, marcado mediante un enlace químico con una enzima aplicado a una muestra de tejido orgánico, correctamente fijada e incluida en parafina.
  11. 11. Congelación - fractura Autorradiografia
  12. 12. Es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del ojo normal.
  13. 13. El tamaño de las células implica el uso de aparatos que permitan aumentar al imagen de las muestras para discriminar estructuras tisulares diminutas como son las células o sus compartimentos. Estos aparatos se llaman microscopios. • Hay dos tipos de microscopios: los ópticos y los electrónicos.
  14. 14. Los microscopios ópticos, o de campo claro, ultilizan la luz visible y lentes de cristal que permiten un aumento de las muestras de unas 1000 veces, con un poder de resolución de unos 0,2 micrómetros.
  15. 15. Los microscopios ópticos ; Modificaciones Contraste de fase. necesita de objetivos especiales y se basa en ligero retraso que sufre la luz cuando pasa por unas estructuras tisulares en función de la densidad. Se emplea para ver muestras sin teñir o acuosas, así como células vivas, por ejemplo en tejidos celulares. Campo oscuro. Consiste en la incorporación de un objeto opaco bajo el condensador, entre la fuente luminosa y la sección de tejido. Este objeto sólo deja pasar la luz más lateral que incidirá sobre la muestra de forma oblicua, allí donde no haya tejido aparecerá obscuro.
  16. 16. FLUORESCENCIA El microscopio de fluorescencia se usa para observar sustancias fluorescentes denominadas fluoróforos. • Los fluoróforos se utilizan como marcadores para la detección de otras moléculas tisulares
  17. 17. Los MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS se basan en la alta frecuencia de los electrones para conseguir un poder de resolución de 1 nanometro. Se usan para observar la ultraestructura de la célula y los tejidos, es decir, para estudiar el nivel subcelular, como orgánulos, membranas u organizaciones moleculares (por ejemplo, se pueden observar los ribosomas). Hay dos tipos de microscopios electrónicos: los de transmisión, que se usan para estudiar la ultraestructura membranosa y molecular de la celula, y el de barrido, que permite estudiar superficies.
  18. 18. Microscopio electrónico de transmisión En este tipo de microscopio se produce el haz de electrones en un filamento de tungsteno, que funciona como cátodo. Los electrones se condensan mediante electroimanes y se focalizan sobre una sección de tejido.
  19. 19. Microscopio electrónico de barrido. Los microscopios electrónicos de barrido sirven para observar superficies tisulares. Ello es posible porque los electrones no atraviesan la muestra sino que interaccionan con su superficie.
  20. 20. • Exámenes de especímenes (observación macroscópica de órganos) • Color y morfología (importancia de la morfología) • Cortado y morfología • Artefactos histológicos (manejo)
  21. 21. • Banks, J. (1996). Histología veterinaria aplicada. El manual moderno S.A; México D.F. • http://webs.uvigo.es/mmegias/inicio.html • http://es.wikipedia.org/wiki/Histolog%C3%ADa BIBLIOGRAFÍA

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