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GENÉTICA BACTERIANA




Docente: Dra. Estela Tango
OBJETIVOS
 Conocer   la genética bacteriana.
 Elementos genéticos móviles:
      - Plásmidos
      - Bacteriofagos
      - Transposones
      - Integrones y cassettes génicos.
 Mecanismos de transferencia genética:
      - Conjugación
      - Transformación
      - Transducción
GENOMA BACTERIANO
         Una molécula de ADN de
          doble hebra circular, en una
          copia (haploides).
         DNA compactado (proteínas
          tipo histonas).
         Alto peso molecular (4x106 pb
          en E. coli).
         Codifica aprox. 4700 genes
          (E. coli).
         Replicación del DNA acoplada
          a la división celular.
ELEMENTOS GENÉTICOS
            MÓVILES
      (Extracromosómico)

 Plásmidos
 Bacteriófagos
 Transposones
 Integrones y cassettes génicos
Plásmidos
   Moléculas de DNA circular extracromosómico
   Origen de replicación propio (Ori) determina
    autonomía de replicación del cromosoma
   Tamaño molecular: 1-200 Kb
   Nº de copias variables (1 - >40)
   Transportan información genética no esencial
    para la vida de las bacterias
REPLICACION
    DEL
 PLASMIDO

En Escherichia coli se
han reconocido muchos
plásmidos, entre ellos
el F ("factor sexual“)
BACTERIOFAGOS
 Virus bacterianos.
 Genoma (acido nucleico ARN o ADN)
  cubierto por capa de proteinas.
 Pueden establecer un ciclo lítico o lisogénico
 Para integrarse reconocen secuencias
  específicas en el genoma bacteriano
CICLO DE REPLICACIÓN DE
   UN BACTERIÓFAGO
TRANSPOSONES
Secuencias de inserción (elementos IS)
 Están compuestas por una secuencia corta
  de DNA que codifica las enzimas necesarias
  para su transposición
 Los extremos son secuencias repetidas
  invertidas idénticas de 15-25 pb, variables en
  distintas IS


    IL-1   IL      Transposasa      IR
Transposones compuestos
      Contienen otros genes, además, de los
       genes necesarios para su transposición Ej R,
       Vir
      A menudo contienen los genes extra en la
       región central, flanqueada en ambos lados
       por elementos de inserción similar ó idéntica

IR            IR                            IL        IL

                        Otros genes

         IS                                      IS
Integrones y cassettes
génicos
Familia  de elementos genéticos potencialmente
móviles capaces de integrar y expresar genes de
resistencia a los antibióticos.
Detectados en bacilos Gram (-) fermentadores:
- Enterobacteriaceae y Vibrionaceae21-23
- En algunos no fermentadores: Pseudomonas
aeruginosa24 y Acinetobacter baumannii25.
-Además, un integrón funcional en bacterias Gram
(+), en una cepa de Corynebacterium glutamicum
INTEGRONES Y CASSETTES GÉNICOS




   Figura 1. Representación esquemática de la estructura básica de un integrón y de la
    adquisición decassettes genéticos de resistencia. intI1: gen que codifica la integrasa
    clase 1; attI: sitio de recombinación del integrón en el cual los cassettes son
    integrados; PI: promotor que transcribe la integrasa; PC: promotor que dirige la
    transcripción de los cassettes integrados. attC: sitio de recombinación
    del cassette genético (esquema no dibujado a escala).
Recombinación genética en las
         bacterias
   Proceso que forma un nuevo genoma recombinante
   Existen tres tipos de recombinación genética en Bact.
   Recombinación general
    ◦ Intercambio recíproco entre un par de secuencias homólogas
      de DNA Ej. Transformación
    ◦ El proceso ocurre a cargo de los productos de los genes rec
   Recombinación específica de sitio
    ◦ El material genético no presenta homología con el cromosoma
      receptor Ej. Transducción
    ◦ El proceso ocurre a cargo de enzimas virales
   Recombinación replicativa
    ◦ No depende de homología de las secuencias
    ◦ La emplean los elementos genéticos móviles
Mecanismos de transferencia horizontal
de información genética en las bacterias
    Se produce recombinación genética en la
     transferencia horizontal de genes

     ◦ Conjugación
     ◦ Transformación
     ◦ Transducción
CONJUGACIÓN
  Operón tra (21 genes)

• Codifica estructuras y proteínas para la
transferencia del plasmido.

• Contiene secuencias homólogas (IS) con
el cromosoma bacteriano.

• Puede existir fuera ó integrado al
cromosoma.
Conjugación Factor F




Una bacteria donadora F+ transmite a través de
un puente o pili, un fragmento de ADN, a otra
bacteria receptora F-. La bacteria que se llama F+
posee un plasmido, además del cromosoma
bacteriano.
Conjugación
Transferencia de genes de resistencia
Transformación

   DNA en solución
    ◦ Fragmentos lineales
    ◦ DNA desnudo
      Deben integrarse


    ◦ Plásmidos
TRANSFORMACIÓN




 Intercambio genético
 Una bacteria capta fragmentos de
  ADN, de otra que se encuentran
  dispersos en el medio donde vive.
TRANSDUCCIÓN
   La transferencia de ADN de una bacteria a
    otra a través de un virus bacteriófago, que
    se comporta como un vector intermediario
    entre las dos bacterias.

   a, el virus se acopla
    a la bacteria
   b, el virus rompe la
    pared bacteriana
   c, el virus inyecta su
    ADN

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Genetica Gacteriana

  • 2. OBJETIVOS Conocer la genética bacteriana. Elementos genéticos móviles: - Plásmidos - Bacteriofagos - Transposones - Integrones y cassettes génicos. Mecanismos de transferencia genética: - Conjugación - Transformación - Transducción
  • 3. GENOMA BACTERIANO  Una molécula de ADN de doble hebra circular, en una copia (haploides).  DNA compactado (proteínas tipo histonas).  Alto peso molecular (4x106 pb en E. coli).  Codifica aprox. 4700 genes (E. coli).  Replicación del DNA acoplada a la división celular.
  • 4. ELEMENTOS GENÉTICOS MÓVILES (Extracromosómico)  Plásmidos  Bacteriófagos  Transposones  Integrones y cassettes génicos
  • 5. Plásmidos  Moléculas de DNA circular extracromosómico  Origen de replicación propio (Ori) determina autonomía de replicación del cromosoma  Tamaño molecular: 1-200 Kb  Nº de copias variables (1 - >40)  Transportan información genética no esencial para la vida de las bacterias
  • 6. REPLICACION DEL PLASMIDO En Escherichia coli se han reconocido muchos plásmidos, entre ellos el F ("factor sexual“)
  • 7. BACTERIOFAGOS  Virus bacterianos.  Genoma (acido nucleico ARN o ADN) cubierto por capa de proteinas.  Pueden establecer un ciclo lítico o lisogénico  Para integrarse reconocen secuencias específicas en el genoma bacteriano
  • 8. CICLO DE REPLICACIÓN DE UN BACTERIÓFAGO
  • 9. TRANSPOSONES Secuencias de inserción (elementos IS)  Están compuestas por una secuencia corta de DNA que codifica las enzimas necesarias para su transposición  Los extremos son secuencias repetidas invertidas idénticas de 15-25 pb, variables en distintas IS IL-1 IL Transposasa IR
  • 10. Transposones compuestos  Contienen otros genes, además, de los genes necesarios para su transposición Ej R, Vir  A menudo contienen los genes extra en la región central, flanqueada en ambos lados por elementos de inserción similar ó idéntica IR IR IL IL Otros genes IS IS
  • 11. Integrones y cassettes génicos Familia de elementos genéticos potencialmente móviles capaces de integrar y expresar genes de resistencia a los antibióticos. Detectados en bacilos Gram (-) fermentadores: - Enterobacteriaceae y Vibrionaceae21-23 - En algunos no fermentadores: Pseudomonas aeruginosa24 y Acinetobacter baumannii25. -Además, un integrón funcional en bacterias Gram (+), en una cepa de Corynebacterium glutamicum
  • 12. INTEGRONES Y CASSETTES GÉNICOS  Figura 1. Representación esquemática de la estructura básica de un integrón y de la adquisición decassettes genéticos de resistencia. intI1: gen que codifica la integrasa clase 1; attI: sitio de recombinación del integrón en el cual los cassettes son integrados; PI: promotor que transcribe la integrasa; PC: promotor que dirige la transcripción de los cassettes integrados. attC: sitio de recombinación del cassette genético (esquema no dibujado a escala).
  • 13. Recombinación genética en las bacterias  Proceso que forma un nuevo genoma recombinante  Existen tres tipos de recombinación genética en Bact.  Recombinación general ◦ Intercambio recíproco entre un par de secuencias homólogas de DNA Ej. Transformación ◦ El proceso ocurre a cargo de los productos de los genes rec  Recombinación específica de sitio ◦ El material genético no presenta homología con el cromosoma receptor Ej. Transducción ◦ El proceso ocurre a cargo de enzimas virales  Recombinación replicativa ◦ No depende de homología de las secuencias ◦ La emplean los elementos genéticos móviles
  • 14. Mecanismos de transferencia horizontal de información genética en las bacterias  Se produce recombinación genética en la transferencia horizontal de genes ◦ Conjugación ◦ Transformación ◦ Transducción
  • 15. CONJUGACIÓN Operón tra (21 genes) • Codifica estructuras y proteínas para la transferencia del plasmido. • Contiene secuencias homólogas (IS) con el cromosoma bacteriano. • Puede existir fuera ó integrado al cromosoma.
  • 16. Conjugación Factor F Una bacteria donadora F+ transmite a través de un puente o pili, un fragmento de ADN, a otra bacteria receptora F-. La bacteria que se llama F+ posee un plasmido, además del cromosoma bacteriano.
  • 18. Transformación  DNA en solución ◦ Fragmentos lineales ◦ DNA desnudo  Deben integrarse ◦ Plásmidos
  • 19. TRANSFORMACIÓN  Intercambio genético  Una bacteria capta fragmentos de ADN, de otra que se encuentran dispersos en el medio donde vive.
  • 20. TRANSDUCCIÓN  La transferencia de ADN de una bacteria a otra a través de un virus bacteriófago, que se comporta como un vector intermediario entre las dos bacterias.  a, el virus se acopla a la bacteria  b, el virus rompe la pared bacteriana  c, el virus inyecta su ADN