Haemophilus.

1. • Géneros: Haemophilus: influenzae, ducreyi y Bordetella
pertussis.
http://www.investigacionvasquez.webs.com
Dr. Antonio Vásquez Hidalgo, Ph.D.
Médico /Microbiólogo /Salubrista/Investigador
Depto de Microbiología Facultad de Medicina
Universidad de El Salvador

4. Características entre Haemophilus y Bordetella
Especie Tipo Crecimiento Capsula Factores
de
adheren
cia
Toxinas Aspectos
epidemiol
ógicos
enfermedad
Haemophilus
H. Influenzae A-f X V Polisacári
d
Pili - Flora
normal
Meningitiis
artiritis
Sepsis
Otitis
media
H. ducreyi - X V - pili Toxina Contacto
sexual
Chancroide
Otras especies - X V - - - Flora
normal
Bronquitis
Bordetella
B. pertussis - Nicotinamida - Pertactin
a
Adenilciclasa Patogeno
estricto
Tosferina
B. parapertussis - Nicotinamida - - Semejante
a pertussis
Rinitis
B broquiseptica - Nicotinamida - - Perros
conejos
Rinitis,tos

5. GENERALIDADES
• Pleomórficos.
• Medio enriquecido, sangre o derivados.
• 9 especies patógenas en humanos y 5 en animales
• H. influenzae – tipo b, patógeno más importante para el ser
humano.
• H. ducreyi – vía sexual y causa chancroide.
• Otros Haemophilus están en membranas mucosas, flora normal.

6. Familia Pasteurellaceae
3 Géneros mas importantes de la familia
Pasteurellaceae, son:
1.Haemophilus
2.Actinobacillus
3.Pasteurella

7. Haemophilus: influenzae

8. 1. Haemophilus influenzae

9. GENERO: HAEMOPHILUS
ESPECIES:
Haemophilus influenzae
Haemophilus parainfluenzae
Haemophilus haemoliticus
Haemophilus parahemoliticus
Haemophilus aphrophilus
Haemophilus paraphrophilus
Haemophilus segnis
Haemophilus ducreyi
Haemophilus aegyptus

11. Morfología e identificación
• Pleomorfos e inmóviles.
 Cocobacilo corto de 0,2 a 0,3 x 1
a 2 µm. no esporulados inmóviles.
 Gramnegativo
 Extremos incurvados
 Son las mas pequeñas.
 Tiene 6 serotipos. A hasta la f
 Tiene 8 Biotipos de desde I
hasta VIII
 Tiene 1 Biogrupos : aegypticus
• Temperatura óptima de crecimiento a
37
H. influenzae
Serotipos Biotipos
Serogrupos

12. Fisiología
 Del griego Haema: sangre y
philos: amor o deseo .
Amante de la sangre
 H.aemophilus influenzae
crece en:
 factores presentes en
sangre
 Factor X =hemina
 Factor V=NAD (nucleotico
de nicotinamida y adenina)
 Crece en Agar chocolate
• Oxidasa positiva
 Requiere 5-10% CO2

13. Características y requerimientos para el desarrollo
de algunas especies de Haemophilus.
IDENTIFICACION DE ESPECIES
Especies Requerimientos Hemólisis
X V
H.Influenzae + + -
H. parainfluenzae - + -
H. ducreyi + - -
H. haemolyticus + + +
H. parahaemolyticus - + +
H. aphrophilus - - -

14. Factores de virulencia.
• El H. influenzae contiene tres clases principales de antígenos de
superficie: el polisacárido capsular, el lipopolisacárido y las
proteínas de membrana externa.
• Estos seria responsables de la virulencia, adherencia y
resistencia a la fagocitosis.
• Elaboran proteasas de Ig A que son enzimas capaces de
hidrolizar la cadena pesada de Ig A1 humana.
• L.O.S Actúan como un factor siliostático, daña el epitelio ciliado y
hace que las células epiteliales se desprendan.

15. Patogénesis
1. Polisacárido capsular tipo b
principal factor de virulencia
Contiene ribosa,ribitol y
fosfato.
1. Cápsula:
*Resistente a Fagocitosis
2. Cepas sin cápsula:
1. Menos invasivas
2. Capaces de generar respuesta
inflamatoria que causa
enfermedad.
Sin capsulaCon capsula

16. Patogenia
• Hábitat: Tracto respiratorio
superior.
• Niños 85 %.
• Invasión por inflamación y
edema.
• Se difunde en tejidos
profundos. Ej Celulitis,
Meningitis y otras.
• No produce exotoxina pero
fabrica proteasa IgA que
favorece la colonización.

17. Estructura antigénica.
El Haemophilus influenzae posee en sus
envolturas 3 factores antigénicos
importantes ellos son:
El polisacárido capsular
El LPS (endotoxina)
La proteína de la membrana externa
(proteasas de Ig A humanas)
Los componentes más importantes son: el
polisacárido capsular y la endotoxina.
Estos seria responsables de la virulencia,
adherencia y resistencia a la fagocitosis.
Se fija a las mucosas mediado por Ig A. Factores antigénicos

18. Inmunidad
• Se producen Acs contra los
siguientes antígenos de la a
hasta f.
• La composición química de la
capsula de Haemophilus
influenzae . Fosfato de
polirribitol (PRF) Ribosa, ribitol y
fosfato.

19. Enfermedades clínicas
1. Meningitis Aguda.
2.Epiglotitis
 Obstrucción de vías
aéreas en niños de 2-
4 años
3. Celulitis,
4. Osteomielitis, e infecciones
articulares
5. Otitis media y sinusutis
6. Bronquitis, bacteremia,
neumonía,
7. Conjuntivitis.

20. Epidemiología
1. Flora nasofaringea normal
20 – 80 %.
Frecuente en niños
menores de dos años.
1. MECANISMO DE
TRANSMISIÓN: Es por vía
inhalatoria .
2. penetran a los tejidos por
vías respiratorias
superiores.
3. Enfermedad invasora a
otros tejidos.
4. Coloniza mucosas de vías
respiratorias.
MECANISMO DE TRANSMISION

21. Epidemiología
• FUENTE DE INFECCIÓN: Es
humano.
• Época del año.
• DISTRIBUCIÓN GEOGRAFICA:
Mundial-pobreza
70 %
35%

22. Al Gram
• Cocobacilos gramnegativos.
• Inmóviles.
• No esporulados
• Aerobios y anaerobios
facultativos
• .
Al Gram

23. Pruebas de laboratorio.
• Catalasa positiva. La enzima catalasa convierte el peróxido de
hidrógeno (H2O2) en oxígeno y agua.

24. • Indol positivo. la presencia de la enzima Triptofanasa en nuestras
bacterias. Esta enzima cataliza la reacción de desanimación, atacando la
molécula triptófano. Anillo rosado.
Positivo negativo

25. • Ureasa positivo. El agente desdobla la urea en C02 y amoníaco
por acción de la enzima ureasa.

26. Cultivo
• Agar chocolate es el más
utilizado.
• Se añade sangre y se calienta.
Calor libera factores X y V.
• Colonias traslucidas, mucoides
luego rugosas.
Satelitismo: crecimiento de Staphylococcus
aureus alrededor de las colonias en agar
sangre no calentado.

27. Exámenes de laboratorio clínico de Indicación
Médica. Análisis e interpretación.
1. Gram: R/ se observan cocos bacilos
gramnegativos.
2. Cultivos.( Hemocultivo. 50 – 90
%) R/ se aisla Haemophilus
influenzae . (barrera
hematoencefalica.)
3. Punción lumbar R/
análisis e interpretación del LCR
Parámetro Normal Meningitis
Presión 70-200 mmhg aumentada
Aspecto Agua de roca Turbio o
purulento
Células 0-10 mayor de 500
Tipo de células Mononucleares PMN
Proteínas 15-45 mg/100
ml
Aumentados
Glucosa 50-90 mg/100
ml
Muy baja o
ausente
Lactato 0,97 mg/100 ml aumentado
pH 7.34- 7.4 Bajo
Sensible Intermedio Resistent
e
Vancomicina +
Rifampicina +
Gentamicina +
Oxacilina +
Lincomicina +

28. Haemophilus ducreyi

29. 2. Haemophilus ducreyi
• Bacilos o cocobacilos
pleomorfos.
• Gram negativo, Inmóviles
pequeños.
• Anaerobios facultativos
• Catalasa positivos. Crece en
Agar chocolate.
• Causante del chancroide o
Chancro blando ETS

30. Recolección y transporte de la muestra
Muestra de úlceras
• El raspado de la úlcera o pus.
• Se puede colocar directamente el
portaobjetos en la ulcera.
1.- Limpie la úlcera con un hisopo o
gasa estéril y humedecida con
solución salina.
2.- Con un hisopo de algodón o
Dacron estéril y seco, frote la úlcera.
3.- Introduzca el hisopo en el tubo con
el medio de transporte.
4.- Enviar muestra a laboratorio .

31. Examen Médico a indicar para laboratorio.
• Tinción de Gram: Hallazgo de pequeños grupos o cadenas de
bacilos gram negativos.
• Cultivo: Requerimientos especiales de crecimiento, el
aislamiento es difícil.
• El H.ducreyi se desarrolla en Agar chocolate con vancomicina, y
• Agar Sangre + inhibidores en un ambiente de 10% CO2.
• Un cultivo positivo confirma el diagnóstico clínico.

32. H. ducreyi en agar chocolate con
vancomicina. Tincion Gram de H. ducreyi
Frotis teñidos con Gram.positivos
Son pleomorficos

33. Enfermedad clínica: Chancroide
Pápula dolorosa a la palpación ,eritematosa que se
transforma en una ulcera dolorosa con linfadenopatia
asociada.

34. Epidemiologia
• El agente se trasmite por contacto sexual.
• No hay datos estadísticos en El Salvador reportados por MISPAS.
• Frecuente mas en hombres. Pobres y mala higiene.
• En mujeres es asintomático.

35. Bordetella pertussis

36. 3. Bordetella pertussis
• Es el único microorganismo con significancia clínica dentro de este
género; causa la tosferina en niños menores de cinco años
• Especies del genero Bordetella: pertussis, parapertussis y
bronchisepica.
B. pertussis

37. Morfología:
• Son pequeños cortos.
• Cocobacilos gramnegativos
• Aerobios estricto
• No móviles.
• Oxidasa positivo.
• Miden de 0,2 a 0,3 micras x
0.5 a 1 micra.
• Se presentan solas, en
pares o racimos.
• Posee capsula.
B. pertussis

38. Fisiologìa
• Son muy contagiosos. Cilios
• Se multiplica en los cilios de las
células epiteliales.
• Hombre es único hospedero de
pertussis y parapertussis, la
bronchiseptica es de animales.
• Son aerobios estrictos con
metabolismo respiratorio.
• .
• .
B. pertussis
Adherencia mediada por pili,pertactina y
subunidades de la toxina tosferina.

39. • Tiene adherencia y crecimiento sobre las
células ciliadas.
• El microorganismo llega al tracto
respiratorio y se adhiere a la superficie
epitelial (cilios) de la tráquea y bronquios.
Esta unión esta mediada, fundamentalmente,
por la hemaglutinina, y la pertactina, las
fimbrias y la toxina Pertusis.
• Se multiplica con rapidez e interfiere con la
acción ciliar pero no invade la sangre.
• Produce toxinas y sustancias que irritan
las células superficiales (toxina
dermonecrotica, citotoxina traqueal)
produciendo tos y linfocitosis. La citotoxina
traqueal produce también ciliostasis, por lo
que se altera la defensa mucociliar.
• Aparecen zonas de necrosis en el epitelio.
Los bronquios más pequeños se obstruyen
con moco. (La toxina pertusis y la
adenilato ciclasa son capaces de inhibir a
las células fagocíticas.)

40. Exámenes de laboratorio por indicación Médica.
• Gram: bacilos o cocobacilos gramnegativos.
• Cultivo: zona de hemolisis
B. pertussis

41. Cultivo• Las colonias son en punta de
alfiler, lisas, convexas, brillantes,
casi transparentes de aspecto
perlado.
• Las tres especies presentan zona
de hemolisis.
• Crecimiento lento
B. pertussis

42. Factores de virulencia
B. pertussis

43. • Hemaglutinina filamentosa. B. pertussis tienen la capacidad de adherirse a los cilios del epitelio
respiratorio. Es capaz de aglutinar diversos tipos de eritrocitos
• Citotoxina traqueal. Es un monómero de peptidoglucano de la pared celular, que tiene afinidad
por las células epiteliales ciliadas. A bajas concentraciones produce cilio-estasis y a
concentraciones elevadas provoca extrusión de las células ciliadas. La citotoxina traqueal
interfiere de forma específica en la síntesis de DNA, por lo que impide la regeneración de las
células dañadas.
• Toxina dermonecrótica. Es una toxina termolábil y se considera contribuye a la destrucción
tisular localizada en la infección en el humano.
• Pertactina. Se relaciona con la adherencia del microorganismo al epitelio respiratorio.
• Lipopolisacárido. Posee toxicidad e inducción inespecífica de interferón. Esta compuesto de dos
lípidos llamados “A” y “X” y dos cadenas de oligosacáridos.
B. pertussis

44. • Lipopolisacarido.
• La endotoxinas causan varios efectos fisiopatológicos.
• Toxina en gran cantidad mas lisis celular bacteriana causa colapso
cardiovascular.
• En cantidades más pequeñas, activan una variedad de
mediadores de la inflamación y genera productos de la
activación del complemento.
• Capsula: es antifagocitica.
• Proteasa IgA: la fabrica para colonización.
B. pertussis

45. Epidemiología
• Enfermedad en el humano: Tosferina.
• Es una enfermedad endémica de distribución
mundial, con brotes epidémicos cada 4 años.
• Es mas frecuentes en el sexo femenino y en clima
frio.
• Disminución por la vacunación.
• Es endémica.
• Mundial.
• Afecta 60 millones de personas/año.
• Frecuente en niños menores de 1 año.
• La enfermedad es más transmisible durante la fase
catarral.
B. pertussis

46. Enfermedades clínicas
• Fase catarral: Catarro común
• Fase paroxística: Tos
• Fase convalecencia. Tosferina.
B. pertussis

47. ….. gracias
BIBLIOGRAFIA REFERENCIA:
Murray , Microbiología Médica. 6ª edición.2009
Sherris. Microbiología Médica. 4ª edic 2004
Basualdo, Microbiología Biomédica.1ª edic 2008
Brooks, Microbiología Médica de Jawetz.18
ed.2005
Zinsser . Microbiología. 2ª edic. 1997
Y otros de consulta…………………………….