2. Etimológicamente: histo= tejido logos: estudio
Es la rama de la biología encargada del análisis
microscópico de la anatomía celular y tisular de los tejidos
biológicos.
Marcello Malpighi es reconocido como el fundador de la
Histología
Las primeras investigaciones histológicas se hicieron en el
siglo XVII gracias a la invención del microscopio óptico por
Antonio Van Leeuwenhoek
IPCHILE - DOCENTE: Veronica
Pantoja S. 2012
¿Qué es la Histología?
3. Obtención de la muestra de material humano: El material
humano puede provenir de tres fuentes: Las necropsias, las
biopsias y las piezas operadas.
IPCHILE - DOCENTE:
Veronica Pantoja S. 2012
Necropsias
Son las piezas que se obtienen
de un cadáver.
4. Piezas operadas
Los tejidos que han sido
extraídos de las
intervenciones
quirúrgicas,
generalmente tumores u
órganos inflamados,
también pueden darnos
material de investigación.
Biopsias
Son trozos de tejido que
se obtienen
de un sujeto con vida
con el objeto de
estudiarlos al
microscopio y efectuar
un
diagnóstico
histopatológico.
5. METODOS HISTOLOGICOS:
a) En fresco: animales unicelulares y
células libres.
b) Coloración vital: usando soluciones
de colorantes no tóxicos
Requiere de la muerte
celular y supone seguir
una serie de pasos, la
Técnica histológica
1-Examen inmediato o in vivo: 2- Examen mediato o post-
morten:
6. PASOSDE LATECNICA:
1.Obtencion del material
2.Fijacion
3.Inclusion
4.Obtencion del corte
5.Coloracion
6.Montaje
Deshidratación
Aclararamiento
7. Pueden provenir de:
* biopsias quirúrgicas
* material obtenido de necropsias
* utilizando animales de laboratorio
* estudios experimentales en animales
* material de cultivos de tejidos
* frotis o extendidos
1- Obtención del material:
8. Es el proceso Físico que logra una situación estable de los constituyentes
tisulares, interrumpiendo las reacciones enzimáticas de autólisis.
2- Fijación
9. Cualidades de un buen
fijador:
1) Actuar con rapidez y detener los
procesos autolíticos.
2) Poder de penetración.
3) Conservación
4) No interferir y facilitar los
procesos posteriores.
5) Endurecer el tejido y darle
mayor consistencia.
10.
11. Es impregnar la pieza con una sustancia que le confiere dureza y permite obtener
cortes uniformes y delgados.
En la técnica corriente, se utiliza la parafina; que es insoluble en agua, está
condicionada por la extracción de toda el agua del material a incluir. Los pasos de la
inclusión son los siguientes:
3- Inclusión
XILOL
12. Confección del taco: Es la
inclusión definitiva del trozo de tejido. Se utiliza
un molde metálico especial denominado barras de
Leuckart, donde se vierte parafina liquida (60°C).
13. Para obtener cortes finos se utilizan aparatos denominados
micrótomos, hay varios tipos.
4- Obtención del corte
Tipo Minot: (Mas Usados) dispone de
4 posiciones de ajuste, según el corte
sea de 1-10 µm, 11-20 µm, 21-30 µm
o 31-40 µm así como ajuste del
ángulo de la cuchilla graduado,
inmovilización de la rueda y
mecanismo de avance de gran
precisión
14. Montaje del corte:
Se colocan sobre una platina con agua caliente. Luego se levantan los cortes con un
portaobjeto, se extiende sobre una película de Albúmina de Mayer, que es una mezcla de
partes iguales de albúmina de huevo, glicerina con un cristal de timol. Los portaobjetos
con los cortes adheridos se llevan a la estufa.
15. Los colorantes se pueden clasificar de diferente manera:
1-Colorantes naturales:
a) animales: carmín.
b) vegetales: hematoxilina, orceina.
2-Colorantes artificiales o sintéticos: (colorantes de anilina).
a) ácidos: Son colorantes citoplasmáticos.
b) básicos: Son colorantes nucleares.
c) neutros: Tiñen citoplasma y núcleo de diferente color
3-Colorantes indiferentes: no forman sales. Sudan III, rojo
escarlata, etc.
5 COLORACION:
16. Las fases del montaje final son:
a) Deshidratación: mediante la acción de alcoholes de gradación
creciente: 70°, 80°, 90° y 100°, sucesivamente.
b) Homogenización o aclaración: se emplea el benzol o xilol a los que
se le puede agregar ácido carbónico o fénico para aumentar su
eficacia, estos son muy ávidos de agua.
c) Colocación del cubreobjeto: con el objeto de proteger el preparado,
se la recubre con una laminilla de vidrio de 0,2 mm de espesor, o
cubreobjeto. Para adherir el cubreobjeto al portaobjeto, se emplea
una resina, el Bálsamo de Canadá.
6) MONTAJE FINAL
