2. INTRODUCCIÓN AL
COLESTEROL
El colesterol es una sustancia cerosa, de tipo grasosa, que existe naturalmente en todas
las partes del cuerpo. El cuerpo necesita determinada cantidad de colesterol para
funcionar adecuadamente. Pero el exceso de colesterol en la sangre, combinado con
otras sustancias, puede adherirse a las paredes de las arterias.

3. 4.- RECONOCIMIENTO
DEL COLESTEROL
Como sabemos el colesterol es una sustancia no coloreada, por lo que resulta
difícil poder realizar su caracterización.
Para este experimento usamos técnicas colorimétricas, con la finalidad de poder
agregar grupos cromóforos y poder adquirir una coloración específica para su
análisis.
FUNDAMENTO:
El colesterol por acción de agentes deshidratantes como el ácido sulfúrico y
anhídrido acético se transforma en colesterileno, compuesto de dobles enlaces
conjugados que presenta color.
a) Reacción de SALKOVSKY.
b) Reacción de LIEBERMAN – BURKHARDT.
A continuación explicaremos cada reacción.

4. a) REACCIÓN DE SALKOVSKY.
A unos de los tubos agregue:
• Agregamos 1 mg de muestra de colesterol disolverlo en 1 ml de CHCl3
(cloroformo) y H2SO4 concentrado, mezcle suavemente y deje separar las
capas, en la capa superior que contienen cloroformo (previamente agregado).
3
2
1
Resultados: aparecerá color rojo y en la inferior
un color rojo amarillento con fluorescencia
verde.

5. B) REACCIÓN DE LIEBERMAN – BURKHARDT
Añadir 10 gotas de anhídrido acético y 2 gotas de H2SO4 concentrado,
mezclar cuidadosamente.
Observe los cambios de coloración que se suceden.
LIEBERMAN-BURCHARD :
Es un reactivo utilizado en un ensayo colorimétrico para detectar el colesterol, lo que da un color
verde intenso. Este color comienza como un color rosa violáceo y progresa a través de un verde
claro y luego de color verde muy oscuro.
El color es debido al grupo hidroxilo (-OH) de colesterol reaccionar con los reactivos y el aumento
de la conjugación de la instauración en el anillo fusionado adyacente.
Puesto que este ensayo utiliza anhídrido acético y acido sulfúrico como reactivos , se debe tener
precaución para no recibir quemaduras graves.

6. PROCEDIMIENTO:
En un tubo de ensayo colocar 1ml de anhídrido acético , 1 ml de CHCl3
(cloroformo) y 2 gotas de H2SO4 concentrado, mezcle suavemente .
Luego agregamos la solución de la muestra ( colesterol) .
*En este experimento haremos la comparación con la muestra biológica de un
paciente.
MUESTRA
BIOLÓGICA
1
2
Resultados:
• En los dos tubos da positiva la reacción ya
que en ambos se da la presencia de
colesterol.
• La oxidación del ion carbonio por el SO2
produce un acido colesta-hexano-sulfonico,
produciendo la tonalidad verdosa oscura.