Tec. De Secuenciacion

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Tec. De Secuenciacion

  1. 1. INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE MEDICINA Y HOMEOPATÌA PROFESORA: DRA. ARRIAGA PRESENTA: GODINEZ MALVA M A. DE LOURDES. MEDICINA GENÓMICA TÉCNICA DE SECUENCIACIÓN DE NUCLEÓTIDOS
  2. 2. <ul><li>Análisis detallado de la estructura del ADN que consiste en averiguar la secuencia de nucleótidos . </li></ul><ul><li>Los dos protocolos clásicos de secuenciación ( método químico y enzimático ) comparten etapas comunes. </li></ul><ul><li>Marcado : Es necesario marcar las moléculas a secuenciar radiactiva o fluorescentemente </li></ul><ul><li>Separación : Cada protocolo genera una serie de cadenas sencillas de ADN marcadas cuyos tamaños se diferencian en una única base. Estas cadenas de distintas longitudes pueden separarse por electroforesis . </li></ul><ul><li>Para obtener estas cadenas se emplean dos procedimientos: </li></ul>SECUENCIACIÓN DE ADN
  3. 3. MÉTODO QUÍMICO DE MAXAM Y GILBERT Esta técnica consiste en romper cadenas de ADN de cadena sencilla marcadas radiactivamente con reacciones químicas específicas para cada una de las cuatro bases. Los productos de estas cuatro reacciones se resuelven, por electroforésis, en función de su tamaño , donde la secuencia puede leerse en base al patrón de bandas radiactivas obtenidas. MÉTODO ENZIMÁTICO DE SANGER Para este método resulta esencial disponer de un ADN de cadena simpl e (molde) y un iniciador, cebador o &quot;primer&quot; complementario de una región del ADN molde anterior a donde va a iniciarse la secuencia. Este cebador se utiliza como sustrato de la enzima ADN polimerasa I que va a extender la cadena copiando de forma complementaria el molde de ADN.
  4. 4. SECUENCIACIÓN DE ADN
  5. 5. <ul><li>APLICACIONES </li></ul><ul><li>Detección de mutaciones </li></ul><ul><li>Secuenciación de ADNs fósiles </li></ul><ul><li>Diagnóstico de enfermedades genéticas </li></ul><ul><li>Identificación de especies y control de cruces entre animales </li></ul><ul><li>Proyecto genoma humano </li></ul>

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