La cromatografía es un método de separación de componentes de mezclas complejas que se basa en las diferentes interacciones de los componentes con fases móviles y estacionarias. Se pueden clasificar las técnicas cromatográficas según la fase estacionaria, incluyendo cromatografía en papel, capa fina, columna, gases y líquidos. La cromatografía es ampliamente utilizada en análisis químicos y de control de calidad en diversas industrias.
3. La cromatografía es un método físico de separación para la
caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas
las ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio
de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos
componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las
cantidades de dichos componentes.
4. La Cromatografía cumple dos funciones
básicas que se complementan:
Separar los componentes de la mezcla, para
obtenerlos mas puros y usarlos posteriormente.
Medir la proporción de los componentes de la
mezclas.
5. Dejamos que se mueva la mezcla por un soporte y los componentes se separan por que
se mueven a diferentes velocidades, debido a las diferentes fuerzas de adsorción que
ejerce el soporte sobre cada elemento, así de fácil.
No confundir el termino adsorción y absorción.
6. Las técnicas cromatografías son
muy variadas, pero en todas ellas
hay una fase móvil que consiste
en el fluido (gas, liquido o fluido
súper critico) que arrastra a la
muestra atraves de una fase
estacionaria que se trata de un
sólido o un líquido fijado en un
sólido.
7. Las cromatografías se hacen en dos
fases principalmente. Una estática y
otra móvil.
En la fase estática o estacionaria, la
mezcla se coloca sobre un soporte
fijo, por ejemplo un papel. En esta
fase tenemos ya la mezcla sobre un
soporte, en nuestro ejemplo del
papel.
8. En la fase móvil se hace mover
otra sustancia sobre la mezcla
que ya está sobre el soporte de
la fase estática. En la fase móvil
empezará el proceso de
separación de los componentes
de la mezcla al moverse a
distintas velocidades por el
líquido los distintos
componentes de la mezcla
sobre el papel.
9. Los componentes de la mezcla
interaccionan en distintas
formas con la fase
estacionaria. De este modo, los
componentes atraviesan la
fase estacionaria a distintas
velocidades y se van
separando.
Después de que los
componentes atraviesen la
fase estacionaria, separándose
pasan por un detector que
genera una señal que puede
depender de la concentración
y del tipo de compuesto.
10. Secuencia Orden de Elución de
Compuestos
Actividad de
Adsorbentes
Fuerza de Elución de
Disolventes
Hidrocarburos Saturados
Hidrocarburos Aromáticos
Derivados Halogenados
Éteres
Cetonas
Aldehídos
Esteres
Alcoholes
Aminas
Ácidos
Celulosa
Sulfato Cálcico (Yeso)
Sílice
Florisil
Oxido de magnesio
Alúmina
Carbón Activo
Eter de petróleo
Ciclohexano
Benceno
Tetracloruro de Carbono
Diclorometano
Cloroformo
Acetato de etilo
Acetona
Etanol
Agua
Acido acético
11. Mijaíl Tsweet usó
columnas de
absorción de
líquidos para
separar pigmentos
vegetales.
El botánico Mijaíl
Tsweet empleó por
primera vez el
termino
“Cromatografía”.
Fue redescubierta
por Kuhn y Lederer
quienes la
aplicaron para la
separación de
carotenoides.
Martin y James
desarrollaron el
cromatografo de
gas liquido.
La cromatografía
liquida de alta
resolución
comenzó a
desarrollarse
después.
Desarrollo de
teorías de la
separación
cromatográfica.
12.
13. El Cromatografo es un
instrumento utilizado
para realizar las
diferentes formas de
cromatografía, este
detecta el cambio de
conductividad eléctrica
que produce la llegada
de los distintos gases al
final de la columna
convirtiéndolos en una
señal grafica o
cromática.
14. Identificación Cualitativa.
Determina la presencia de un compuesto, de
un componente cualquiera que se basa en el
tiempo de retención o tiempo que se tarda
en aparecer al final de la columna, el que es
especifico para cada elemento.
Identificación Cuantitativa.
Determinar las cantidades en el que se
encuentra la sustancia, es mas complicado
pues requiere el calculo del área de la señal, o
pico, dejada por el gas, la cual será
proporcional a la concentración del
componente.
15. 1. Gas de arrastre o acarreador
2. Puerto de inyección
3. Una columna
4. Un detector
5. Un registrador
6. Cromatograma
16. Cumple básicamente 2 propósitos
Transportar los componentes de la muestra.
Crear una matriz adecuada para el detector.
Debe reunir las sig. condiciones:
Debe ser inerte para evitar interacciones.
Debe ser capaz de minimizar la difusión gaseosa.
Debe ser fácilmente disponible y puro.
Debe ser económico.
Debe ser adecuado al detector que se esta por utilizar
en un cromatrografo.
17. La inyección de la muestra es un apartado
critico, ya que se debe inyectar una cantidad
adecuada, y debe introducirse de tal forma
como un tapón de vapor que sea rápida para
evitar el ensanchamiento de la sobandas de
salida.
El método mas empleado es una micro
jeringa (con capacidad de varios micro
litros) para introducir el analito en una
cámara de vaporización instantánea .
18. Es la parte en la cual el analito es arrastrado
por el gas portador para poder así ser
separado.
Se emplean 2 tipos de columnas: las
empaquetadas o de relleno y las tubulares
abiertas o capilares.
La longitud de estas columnas es variable, de 2
hasta 60 metros, y están constituidas por acero
inoxidable, vidrio, sílice fundida o teflón.
19. Es la parte del cromatografo que se encarga de
determinar cuando ha salido el analito por el final de la
columna.
Existen diversos tipos de detectores, los cuales son :
Detector de ionización de llama.
Detector termoiónico.
Detector de captura de electrones.
Detector de emisión atómica.
20. Esta es la parte final de
un cromatografo y es el
resultado grafico de la
cromatografía.
En el caso de la
separación optima de la
mezcla, los diferentes
picos o manchas en el
cromatograma se
corresponden a los
diversos componentes
de la mezcla que a sido
separada.
21.
22. Las técnicas cromatografías se pueden dividir
según como este dispuesta la fase estacionaria.
Cromatografía plana: la fase estacionaria se
sitúa sobre una plana o sobre un papel. Las
principales técnicas son cromatografía en
papel y cromatografía en capa fina.
Cromatografía en columna: la fase
estacionaria se sitúa dentro de una columna.
Según el fluido empleado como fase móvil se
distinguen. Cromatografía de líquidos,
cromatografía de gases, cromatografía de
fluidos supercríticos.
Entrada de Fase Móvil
Columna
Cromatografía
Con
Relleno
Poroso
Detector
Señal
23. Cromatografía en Papel
Cromatografía de Capa Fina
Cromatografía de Exclusión
Cromatografía de Gases
Cromatografía en Columna
Cromatografía Liquida
Cromatografía de Fluidos Supercríticos
24. Es muy utilizado para análisis cualitativos en el laboratorio ya que no
requiere de ningún tipo de equipamiento. Su fase estacionaria es constituida
por una tira de papel filtro.
Factores que influyen para una
cromatografía eficaz:
Elección del disolvente.
Elección del papel filtro.
25. Requisitos:
Un absorbente, placas, un dispositivo que
contenga las placas durante la extensión,
otro para aplicar la capa absorbente, y una
cámara a la que se desarrollan las placas
cubiertas.
Su fase móvil es liquida y su fase
estacionaria consiste en un solido.
Esta basada en la preparación de una capa uniforme de un absorbente
contenido sobre una placa la cual puede ser de aluminio, vidrio, u otro
soporte.
26. No debe confundirse con la
técnica cualitativa y
cuantitativa de análisis.
Permite separar físicamente los
distintos componentes de una
solución por absorción
selectiva de los constituyentes
de una muestra.
Su fase estacionaria puede ser
alúmina, sílice, o resina de
intercambio iónico.
27. Dependiendo del tamaño de los constituyentes de la muestra sean
retenidos por el soporte solido unos mas que otros, lo que provocara su
separación. Las sustancias que permanecen libre en la fase móvil
avanzan mas fácilmente con el fluir de la muestra y las que quedan mas
unidas a la fase estacionaria quedan retenidas por lo que avanzan mas
lento y tardan mas en salir y fluir.
28. Existen 2 tipos:
Cromatografía gas-solido. Su fase
estacionaria es solida y la retención
de los analitos en ella se producen
mediante el proceso de absorción.
Cromatografía gas-liquido. Mayor
utilidad, utiliza como fase
estacionaria moléculas de liquido
inmovilizada sobre la superficie de
un solido inerte.
Técnica cromatografía en la que la muestra se volatiliza y se inyecta en la
cabeza de una columna cromatografía.
29.
30. Es la técnica más desarrollada en los últimos años,
empleada en la química analítica. Su empleo presenta
notables ventajas:
1. Es sencilla, rápida y no requiere aparatos complicados.
2.Abarca escalas microanalíticas hasta escalas
industriales.
3. Es una técnica poco o nada destructiva que puede
aplicarse a sustancias lábiles.
Constituye una metodología imprescindible en estudios
bioquímicos, toxicológicos, estructurales, etc. No solo
utilizando como técnica de separación e identificación,
sino como método preparatorio, incluso a escalas
industriales.
31. 1. Determinación de concentración y porcentaje de
solvente en un producto agroquímico terminado.
2. Control de calidad de pureza de solventes, como
alcohol etílico anhidro, tolueno, xileno, benceno,
que entran como materias primas a una planta.
3. Determinación del contenido de principio activo
de un antitóxico en una planta de medicamentos.
4. Control de calidad de la pureza de materias
primas entrantes a bodega de una fabrica de
productos medicinales, tales como: alcohol etílico
al 95%, glicerina, alcohol isopropilico, o-toluidina,
paracetamol, butanol, acetato de etilo, alcanfor, y
muchos otros.
32. 5. Control de calidad de producto terminado en una
fabrica de cosméticos, como por ejemplo, porcentaje
de alcohol en una laca para el cabello, acetona en un
esmalte de unas, colorantes en casi todos los
productos elaborados, porcentaje de control, en las
esencias que se utilizan para la confección de
perfumes, allí es muy importante, realizar esta
prueba.
6. En fabricas de adhesivos, pegamentos, pinturas, para
controlar que el producto terminado lleve las
cantidades indicadas de solventes, humectantes,
colorantes, gomas, resinas, poliuretanos, secantes, re
llenantes, esponjan tés, suspensores, emulsificantes.
7. En fabricas de alimentos, para control de calidad de
producto terminado y materias primas, tales como:
proteínas, sabores, sustancias que dan el olor, o sea
aromatizantes, pues algunos son sintéticos, como el
olor a pollo, y solo este tiene variantes, como pollo
con barbacoa, pollo frito, pollo asado, determinación
de colorantes.
33. 8. En la industria petrolera, es un método
indispensable, para analizar las
composiciones de casi todos los
productos que van saliendo, del cracking,
los tipos de gasolinas, los compuestos
orgánicos destinados a síntesis.
9. En el control de la producción vinícola,
tiene infinidad de usos, desde usarse
como una nariz electrónica, para
caracterización de vinos, de acuerdo a
parámetros previamente establecidos
por expertos, concentración de
componentes, análisis de aminas, como
etanolamina, metilamina, agmatin.
34. En la actualidad la cromatografía es una
técnica ampliamente utilizada en la
resolución de macromoléculas de interés
en la industria, biotecnológica, biológica
y bioquímica.