2. Uso de laboratorios*
Diagnóstico
Seguimient Diagnóstico
o diferencial
Evaluar
extensión
Pronóstico
de
enfermedad
*Con orientación clara en diagnóstico por clínica
3. En el laboratorio de Inmunología
existen diferentes técnicas que permiten
entregar resultados de exámenes para apoyo
al diagnóstico y tratamiento clínico de las
diferentes enfermedades
inmunológicas, reumatológicas y
mesenquimopatías en general.
4. Exámenes Generales
◦ Básicos
Hemograma completo
Examen parcial y citoquímico de
orina
Otras pruebas generales
◦ Reumatológicos
5. Hemograma completo
Resultado Diagnóstico
diferencial
Anemia hemolítica
• LES
Macrocítica
• Sales de oro
Anemia Hipocrómica Microcítica
Deficiencia Fe
• HVD
Enfermedad de curso
Normocítica Normocrómica crónico
6. Hemograma completo
Resultado Diagnóstico diferencial
Vasculitis necrotizante
AR juvenil
+ 18000/mm3
Enfermedad de Still adulto
Artritis séptica
Leucocitosi
Espondiloartropatías
s seronegativas
Hasta 12000/mm3
AR
Moderada
Corticoesteroides
(Neutrofilia)
Poliartrosis inflamatorias
• LES
• Enfermedad Mixta del
Leucopeni - 5000/mm3
Tejido Conectivo (EMTC)
• Síndrome de Sjögren
a (SS)
• Síndrome de Felty
(complicación AR)
7. Hemograma completo
Resultado Diagnóstico diferencial
Trombocitosis AR
Trombocitopenia Síndrome de Felty (complicación AR)
Reticulocitos Anemia hemolítica
8. Parcial y citoquímico de orina
Leucocituria • LES
• Vasculitis
Cilindruria • Medicamento: Sales de oro ó D-
Proteinuria penicilina
Elevación • Acidosis tubular en Síndrome de
Sjögren
pH • AINES
9. Parcial y citoquímico de orina
Investigar alteraciones con:
◦ Creatinina
◦ Depuración de creatinina
◦ Albúmina en orina 24h
◦ Estudios de imágenes
◦ Biopsia renal
Compromiso renal = Mal pronóstico
12. Velocidad de Sedimentación
Velocidad con que los eritrocitos se precipitan en 1
hora en una muestra de sangre no coagulada.
Es una prueba inespecífica.
Detecta procesos inflamatorios, infecciosos y
neoplásicos.
No es una prueba diagnóstica definitiva.
13. Velocidad de Sedimentación
Es un indicador de la evolución de la
enfermedad.
Aumenta cuando empeora la
enfermedad y viceversa.
Refleja modificaciones que sufren las
proteínas del plasma.
Se eleva 48 h. después de iniciarse la
inflamación y se normaliza 10 días
después de haberse terminado.
14. Velocidad de Sedimentación
Valores normales:
◦ Hombres: Hasta 15 mm/h.
◦ Mujeres: Hasta 20 mm/h.
◦ Niños: Hasta 10 mm/h.
◦ Recién nacidos: 0 – 2 mm/h.
15. Velocidad de Sedimentación
Elevada Retrasada
Embarazo Policitemias
Anemia Descenso de
Infecciones agudas o proteínas en el
crónicas plasma: enf. renales y
hepáticas
Enfermedades
inflamatorias Disminución del
fibrinógeno
Infarto miocardio
Medicamentos:
Tumores
aspirina, corticoides, q
Hiper e hipotiroidismo uinina
Medicamentos:
anticonceptivos orales
16. PCR
Proteína C Reactiva
Proteína hepático
Elevación temprana en proc. Inflamatorios
Ciertos medicamentos afectan su
producción
Cuantificar siempre
Valores normales <1mg/dl.
17. PCR
Elevada Disminuida
• Fiebre reumática • LES
• AR • Dermatopolimiositis
• Vasculitis • Escleroderma
• Espondiloartropatias • Enfermedad mixta
del tejido conectivo
18. PCR en fiebre
Indica que la fiebre es por
infección y no por actividad
del LES
Fiebre por actividad de la
enfermedad
•Paciente con LES, febril pueden estar activos como
infectados, de manera que la prueba pierde valor Dx.
19. Asto y Ácido úrico
Pruebas antiguas para diagnóstico de
enfermedades reumáticas
Primeras en relacionar etiología y
fisiopatogenia de estas enfermedades
El uso indiscriminado e inclusión en
memoria cultural causa muchos
diagnósticos erróneos
20. Asto
Sugiere diagnostico de Fiebre
Reumática
Criterios de Jones: poliartralgias
migratorias, carditis, corea menor, eritema
marginado y nódulos subcutáneos.
Criterios menores: ASTO, fiebre y PCR
positiva, presente usualmente en
pacientes < 20 años.
21. - Hipersensibilidad Tipo I: son reacciones en
las que los Ag se combinan con Inmunoglobulinas
(Ig) E específicos que se hallan
fijados por su extremo Fc (Fracción cristalizable)
a receptores de la membrana de
mastocitos y basófilos de sangre periférica.
- Hipersensibilidad Tipo II: son reacciones
mediadas por la interacción de Ac Ig G e
Ig M preformados con Ag presentes en la
superficie celular y otros componentes tisulares.
- Hipersensibilidad Tipo III: son reacciones
producidas por la existencia de inmunocomplejos
(IC) circulantes de Ag- Ac que
al depositarse en los tejidos provocan activación
de fagocitos y daño tisular.
- Hipersensibilidad Tipo IV: son reacciones
de hipersensibilidad celular o mediada por
células, causadas por linfocitos T sensibilizados
al entrar en contacto con el Ag específico,
pudiendo producir una lesión inmunológica
por efecto tóxico directo o a
través de la liberación de sustancias solubles.
22. Rinitis alérgica
- Conjuntivitis alérgica
- Asma alérgico
- Alteraciones cutáneas: Urticaria-
Angioedema- Dermatitis atópica
- Alergia física (frío, luz
solar, calor, traumatismo leve)
- Alergia a alimentos
- Alergia a fármacos: la más común es la
penicilina, también los
AINES, aspirina, sulfas, y otros antibióticos
beta lactámicos
- Alergia a las picaduras de insectos
- Alergia al látex: produce urticaria de
contacto ya sea por contacto directo o por
inhalación de partículas de látex. También
puede manifestarse como alergia
alimentaria por reacción cruzada con frutas
- Anafilaxia.
23. Prueba del pinchazo:
se deposita una gota de antígeno sobre la
piel y luego se pincha a través de la gota
con una aguja o lanceta en forma
perpendicular a la piel (ángulo de 90º).
Los resultados se obtienen a los 15 o 30
minutos y la respuesta se considera
positiva cuando la pápula es mayor de 3
mm con halo de hiperemia. Siempre es
necesario la utilización de dos controles
intrínsecos a las pruebas
Prueba Prick modificado (Método de
Pepys):
se coloca una gota del extracto en la piel y
luego con una aguja hipodérmica fina se
atraviesa la gota insertándola en la
epidermis en un ángulo de 45º con el bisel
hacia arriba, luego se levanta suavemente
la punta de la aguja para elevar una
pequeña porción de la epidermis sin que
ella sangre.
24. Prueba intradérmica: se inocula una
dosis de una dilución de un extracto estéril
suficiente para provocar la formación de
una ampolla de 1 o 2 mm. Es más sensible
que el prick o la puntura pero es más
dolorosa, causa irritación y mayor riesgo
da reacciones anafilácticas. También se
han reportado falsos positivos
La prueba prick by prick es un método
alternativo utilizado para el diagnóstico de
alergia alimentaria, consiste en punzar un
alimento con una lanceta y luego realizar
un prick en la piel del paciente. Tiene alta
sensibilidad, pero también efectos
adversos graves y anafilaxia en pacientes
hipersensibilizados
25. Prueba de radioalergenoabsorción
(RAST):
detecta la Ig E sérica Ag- específica. Se
utiliza cuando no es posible efectuar las
pruebas cutáneas.
Prueba de liberación de histamina por
los
leucocitos: se realiza in vitro, y detecta la
Ig E
Ag- específica sobre basófilos
sensibilizados midiendo la liberación de
histamina inducida por el Ag.
Pruebas de provocación: Son
consideradas
el “Gold estándar” del diagnóstico en las
reacciones alérgicas a alimentos y
medicamentos, se realiza mediante la
administración por vía oral del producto
sospechoso a dosis crecientes y se
observa si hay reacción alérgica. Se utiliza
cuando la positividad de una prueba
plantea dudas.
26. Reacciones transfusionales
- Enfermedad hemolítica del recién nacido
- Anemias hemolíticas
- Púrpura trombocitopénica inducida por Ac
- Leucopenia
- Pénfigo- Penfigoide
- Anemia perniciosa
- Trombocitopenia neonatal
- Rechazo del injerto agudo temprano de
un riñón transplantado.
- Síndrome de Goodpasture
- Hipersensibilidad a fármacos (penicilina)
- Miastenia grave
- Enfermedad de Graves
- Enfermedad de Raynauld
- Diabetes
- Tombocitopenia inducida por
medicamentos
27. Prueba de Coombs directa: detecta el Ac y
el complemento sobre los hematíes. Para
la prueba se utiliza antisuero de conejo,
uno para la Ig y otro para el complemento,
cuando estos reactivos se mezclan con
hematíes revestidos con Ig o complemento
se produce la aglutinación
-Prueba indirecta de la antiglobulina:
detecta el Ac circulante contra los Ag de
los hematíes. Se utiliza suero del paciente
que se incuba con hematíes del mismo
grupo sanguíneo y se realiza la prueba de
antiglobulina sobre los hematíes. La
aglutinación confirma la presencia de Ac.
- Microscopía fluorescente: para detectar
la
presencia de Ig o de complemento en el
tejido (prueba directa), o Ac circulante
(prueba indirecta)
- Pruebas antirreceptor: para detectar Ac
contra receptores.
28. Enfermedad del suero: debido a
suero, puede ocurrir por la administración
de fármacos
- Vasculitis cutánea: en su fisiopatogenia
están implicados los medicamentos.
- Eritema nodoso: se hallan implicados los
anticonceptivos orales, sulfonamidas y
bromuros
- Lupus eritematoso sistémico
- Artritis reumatoidea
- Poliarteritis
- Crioglobulinemia
- Neumonitis por hipersensibilidad
- Aspergilosis broncopulmonar
- Glomerulonefritis aguda
- Glomerulonefritis membranoproliferativa
crónica
- Enfermedad renal asociada.
29. Las pruebas diagnósticas que
actualmente se han desarrollado
para detectar los IC depende de la
capacidad de éstos para reaccionar
con el complemento (Pruebe de
unión al Ciq) o bien en la interacción
de los IC que contienen
componentes del complemento, con
los receptores celulares (Prueba con
células Raji).
30. -Dermatitis por contacto: Se ha demostrado
cerca de 3000 sustancias químicas que son
alérgenos por contacto Neumonitis por
hipersensibilidad
- Rechazo de un aloinjerto
- Granulomas por organismos intracelulares
- Encefalomielitis post vacunación antirrábica
- Algunas enfermedades autoinmunes
(Tiroiditis, esclerosis múltiple, enfermedad
inflamatoria intestinal)
- Hipersensibilidad medicamentosa: Reacciones
liquenoides, necrólisis epidérmica
tóxica, Síndrome de Stevens
Jonhsons, exantemas cutáneos, eritema
polimorfo y erupciones fijas por drogas:
sulfonamidas, betalactámicos, antiepilépticos.
- Fotoalergias por medicamentos de aplicación
tópica o sistémica provocada por el contacto de
una sustancia fotosensibilizante y exposición a
radiación lumínica Nefritis intersticial aguda
31. Métodos epicutáneos (test del parche). Se
utilizan los supuestos alergenos
responsables sobre la piel del paciente
empleando apósitos y manteniendo el
contacto durante 48 horas, luego se retiran
los alergenos y se evalúa la respuesta
entre media y una hora y se reevalúa a las
72- 96 horas. La respuesta es positiva si
aparece una reacción eccematosa en el
lugar de la prueba consistente en un
eritema con cierta induración y en
ocasiones formación de vesículas.
Pruebas intracutáneas el prototipo es la
reacción de tuberculina y el método
utilizado es la reacción de
Mantoux, consiste en la inyección
intradérmica de 0,05 a 0,10 ml de solución
antigénica utilizando aguja con el bisel
hacia arriba en ángulo de 15º a 20º con
respecto a la piel. La reacción comienza
en horas y alcanza su máximo a las 48
hs, momento para realizar la medición
teniendo en cuenta solamente la pápula y
33. 1- TECNICAS DE AUTOINMUNIDAD:
•DETERMINACION DE ANTICUERPOS ANTINUCLEARES (ANA).
•DETERMINACION DE ANTICUERPOS ANTI DNA(n) (DNA)
•DETERMINACION DE ANTICUERPOS ANTIMITOCONDRIALES
(AMA)
2- TECNICAS NEFELOMETRICAS:
•CUANTIFICACION DE INMUNOGLOBULINA G (IgG)
•CUANTIFICACION DE INMUNOGLOBULINA A (IgA)
•CUANTIFICACION DE INMUNOGLOBULINA M (IgM)
•COMPLEMENTO C3 (C3)
•COMPLEMENTO C4 (C4)
•FACTOR REUMATOIDEO (FR)
•ANTIESTREPTOLISINA O (ASO)
34. 3- TECNICAS ELECTROFORETICAS:
•ELECTROFORESIS DE PROTEINAS SERICAS (EF)
4- TECNICAS DE ESTUDIO DEL LIQUIDO
ARTICULAR:
•FISICO-QUIMICO (LA)
•CITOLOGICO (LA)
•ESTUDIO DE CRISTALES CON LUZ POLARIZADA
35. 1- TECNICAS DE AUTOINMUNIDAD
TECNICA DE INMUNOFLUORESCENCIA
INDIRECTA (IFI)
La IFI permite la detección de auto
anticuerpos circulantes contra antígenos
tisulares como:
•Anticuerpos antinucleares (ANA)
•Anticuerpos anti DNA(n) (DNA)
•Anticuerpos antimitocondriales (AMA)
38. ANTICUERPOS ANTINUCLEARES
(ANA)
La determinación de anticuerpos
antinucleares es esencial para el diagnóstico
de:
•Lupus eritematoso sistémico (LES).
•Enfermedad mixta del tejido conectivo.
•Lupus eritematoso sistémico inducido por
drogas.
•Hepatitis crónica activa autoinmune.
•Esclerosis sistémica progresiva.
•Síndrome de Crest.
•Artritis reumatoide.
•Dermatomiositis.
39. PATRONES
DE FLUORESCENCIA
HOMOGENEO: Se observa
en el 60 a 70 % de los lupus
eritematoso sistémico. En el
100 % del lupus inducido por
drogas.
PERIFERICO: Se observa en
proporción variable en el lupus
eritematoso sistémico
40. MOTEADO: Se observa en el
100% de la enfermedad mixta
del tejido conectivo.
NUCLEOLAR: Se observa en
el 90 a 100 % en la esclerosis
sistémica progresiva.
ANTICENTROMERO: Se
observa en el 90 a 100% en el
síndrome de Crest.
42. ANTICUERPOS
ANTIMITOCONDRIALES (AMA)
La determinación de AMA es de
utilidad en el diagnóstico de :
•Cirrosis biliar primaria
(altos títulos)
•Hepatitis crónica activa
(bajos títulos)
43. 2- TECNICAS
NEFELOMETRICAS
La nefelometría es una técnica
automatizada que permite cuantificar
proteínas del suero y otros líquidos
biológicos.
Tiene una alta sensibilidad y precisión.
Miden los niveles de
Inmunoglobulinas, el sistema de
complemento, el factor reumatoide y la
antiestreptolisina O.
44. CUANTIFICACION DE
INMUNOGLOBULINAS
IgG, IgA, IgM
Nos orienta como está reaccionando el
sistema de defensa específico humoral.
Los niveles de cada una de ellas pueden
estar aumentados o disminuidos
dependiendo del tipo de patologías en las
cuales estén involucradas.
46. Hipogammaglobulinemia: Trastornos donde se pierden
inmunoglobulinas en forma excesiva: síndrome nefrótico,
quemaduras.
Síntesis defectuosa de inmunoglobulinas:
agammaglobulinemia y hipogammaglobulinemia congénita.
Enfermedades linfoproliferativas: leucemia linfoide crónica,
enfermedades de cadenas pesadas y mieloma de Bence-
Jones.
Hipergammaglobulinemia
Policlonal: hepatopatías crónicas, enfermedades
autoinmunes (lupus eritematoso sistémico, artritis
reumatoide, síndrome de Sjögren y esclerodermia);
infecciones crónicas (tuberculosis, paludismo, actinomicosis
y mononucleosis infecciosa), Neoplasias (enfermedad de
Hodgkin y metástasis).
47. SISTEMA DEL
COMPLEMENTO
Es un conjunto de unas 30 proteínas del
plasma y otros líquidos orgánicos que
interaccionan entre sí y con otros
componentes del sistema de inmunidad
innata y adaptativa, éstas se encuentran en
forma inactiva y se activan de forma
secuencial para mediar una serie de
reacciones inmunológicas.
48. SISTEMA DEL
COMPLEMENTO
Este es un sistema de activación
enzimático en cascada, el producto de una
reacción es a su vez una enzima para la
siguiente reacción, produciéndose una
respuesta rápida y amplificada del estímulo
inicial, con la finalidad de producir la lisis
celular.
49. EL COMPLEMENTO SE ACTIVA
POR
TRES VIAS DIFERENTES
•La vía clásica que corresponde al sistema
de inmunidad adaptativa
•La vía alternativa que corresponde al
sistema de inmunidad innata
•La vía de las lectinas que corresponde al
sistema de inmunidad innata
50. COMPLEMENTO C3
COMPLEMENTO C4
El complemento C3 y C4 se encuentra:
Disminuido
•Lupus eritematoso sistémico
•Glomerulonefritis
Aumentado
•procesos inflamatorios (artritis
reumatoide)
51. FACTOR REUMATOIDEO
El FR son autoanticuerpos dirigidos
contra los determinantes antigénicos del
fragmento Fc de la molécula Ig G.
El FR puede ser IgG, IgM, IgA. El mas
frecuente es el IgM.
Es de utilidad en el diagnóstico de
Artritis Reumatoide donde se encuentra
aumentado.
52. ANTIESTREPTOLISINA O
El Streptococcus B-hemolítico del grupo
A, produce un número de exotoxinas, que
pueden actuar como antígenos una de estas es
la estreptolisina O.
En una infección estreptocócica reciente la
antiestreptolisina O se halla elevada en el
80% de los casos.
Su determinación es importante en pacientes
con:
•Fiebre reumática
•Glomerulonefrítis
53. 3- TECNICAS ELECTROFORETICAS
La electroforesis de proteínas plasmáticas es
la migración y separación de estas por la
acción de un campo eléctrico.
Las proteínas migran del polo (-) cátodo al
polo (+) ánodo
La EF es muy importante en el diagnostico de:
-Mieloma Múltiple
-Hipogamaglobulinemias
-Síndrome Nefrótico
54. 4- TECNICAS DE ESTUDIO DEL
LÍQUIDO ARTICULAR
•FISICO-QUIMICO (LA)
•CITOLOGICO (LA)
•ESTUDIO DE CRISTALES CON
LUZ POLARIZADA (LA)
55. EL ESTUDIO DEL LA ES IMPORTANTE
PARA EL DIAGNOSTICO DE
-Artritis inflamatorias
-Artritis séptica
-Artritis por cristales:
56. • Cristales de urato monosódico.
Diagnostico de Gota
• Cristales de Pirofosfato de Calcio.
Diagnostico de Seudogota o
Condrocalcinosis
57. OTRAS TÉCNICAS INMUNOLOGICAS
Medición de Antígeno-Anticuerpo:
◦ Reacciones de aglutinación donde se
junta el reactivo con el suero del paciente
y se ve a simple vista. (prueba de
Coombs) ej. Anemia hemolitica.
◦ Reacciones de precipitación que
también se ven a simple vista. Como la
citometría de flujo, que se utiliza para ver
las células alteradas, anemias, para
medir la CD4.
58. TÉCNICA DE ELISA
Consiste en una reaccion antigeno
anticuerpo.
Cambio de color positivo. Sin cambio es
negativo.
59. BIBLIOGRAFIA
Fundamentos de interpretación clínica de los exámenes
de laboratorio. Guillermo Ruiz Reyes / Alejandro Ruiz
Argüelles. Edición: 2ª, Editorial Panamericana: 2010.
Roitt - Inmunología. Fundamentos 11ª edición Delves /
Martin / Burton / Roitt, (aut.)Médica Panamericana11ª ed.
(2008)
Inmunologia de Kuby. 6 edicion Thomas J. Kindt ,Mcgraw-
Hill Interamericana
