Presentación E y F SANTE

1. Sante
11312/2021
Daniel Alejandro Rojas Toro
Apartados e y f del documento:

2. ¿Qué es el
Documento
SANTE?
Describe los requisitos de validación de
métodos analíticos y de control de calidad
para respaldar la validez de los datos
utilizados
Se hace para verificar el cumplimiento de
los límites máximos de residuos, las
acciones de cumplimiento o la evaluación
de la exposición de los consumidores a los
plaguicidas en la UE.

3. Conceptos previos
• El nivel más bajo en el cual los residuos se reportarán como números
absolutos. Es igual o superior al LOQ
Reporte limite
(RL)
• El límite de detección de cribado de un método de cribado cualitativo es
la concentración más baja para la que se ha demostrado que un
determinado analito puede detectarse en al menos el 95 % de las
muestras (es decir, un se acepta una tasa de falsos negativos del 5 %).
SDL (cribado
cualitativo)
• La diferencia entre el valor medido (promedio) y el valor verdadero
Sesgo

4. Apartado e
e. Reporte de resultados
01

5. E1
Siempre se deben informar los resultados de los analitos
individuales medidos y su concentraciones expresadas en
mg/kg.
Cuando la definición de residuo incluya más de un analito se
entrega la suma respectiva
Si un laboratorio no permiten la cuantificación de la suma total
de un residuo, se puede calcular una parte de la suma, pero
esto debe indicarse claramente en el informe.
En el envío electrónico de resultados para muestras en
programas de seguimiento, se deben enviar las
concentraciones de todos los analitos individuales y sus LOQ

6. E2 Y E3
Para los métodos cuantitativos, los
residuos de analitos individuales por
debajo del RL deben informarse como
<RL mg/kg.
Cuando se utilicen métodos de detección
y no se detecte un pesticida, el resultado
debe informarse como <SDL mg/kg.
Cuando la muestra se analice mediante
dos técnicas, el resultado debe ser el
obtenido mediante la técnica que se
considere más exacta.
Cuando se obtengan dos
resultados mediante dos técnicas
igualmente precisas o mediante
mediciones repetidas se debe
informar la media del resultado.
En caso de que haya dos
replicas, la diferencia relativa de
los resultados individuales no
debe exceder el 30 % de la
media.

7. Corrección del sesgo del método (E4)
Los resultados de residuos no tienen que
ajustarse para el sesgo del método cuando el
sesgo medio es inferior al 20 % y no se supera la
incertidumbre de medición del 50 %.
En caso de que el sesgo exceda el 20%, el
resultado puede corregirse matemáticamente
utilizando un factor de recuperación.
En cuanto al % de recuperación a utilizar para la
corrección por recuperación, existen múltiples
opciones.
Recuperación en muestra
o en blanco.
La dependencia de la
recuperación con la
concentración.
Los aspectos a tener
en cuenta incluyen la
confiabilidad y
consistencia de la
recuperación de un
plaguicida para una
determinada matriz a
lo largo del tiempo

8. E5 y E6 (Redondeo de datos)
En caso de falta de un factor de recuperación
adecuado para ser utilizado para la corrección de
la recuperación, se pueden considerar enfoques
alternativos para reducir el sesgo del método para
evitar la necesidad de la corrección de la
recuperación.
El uso de la adición estándar antes de la
extracción de la muestra, la adición de un
estándar interno marcado isotópicamente
antes de la extracción de la muestra, o el
uso de calibración de procedimiento
En general, los resultados en o por encima del LR
pero <10 mg/kg deben redondearse a dos cifras
significativas.
Los resultados ≥10 mg/kg deben redondearse a tres
cifras significativas.
El LR debe redondearse a 1 cifra significativa a <10
mg/kg y a dos cifras significativas a ≥10 mg/kg.
Estas reglas de redondeo no reflejan necesariamente
la incertidumbre asociada con los datos informados
El redondeo puede ser especificado o acordado con el
cliente/parte interesada del programa de control o
seguimiento.
El redondeo a cifras significativas debe hacerse
después del cálculo del resultado.

9. Calificación de resultados con
incertidumbre de medición
Los laboratorios deben determinar y poner a
disposición la incertidumbre de medición asociada
con los resultados analíticos.
Los laboratorios deben tener suficientes datos de
repetibilidad/reproducibilidad de la
validación/verificación del método y pruebas internas
de control de calidad, que pueden usarse para
estimar la medida de incertidumbre (MU).
El MU describe el rango alrededor de un resultado
informado o experimental dentro del cual se espera
que el valor real se encuentre dentro de una
probabilidad definida (nivel de confianza).
Los rangos de MU
deben tener en
cuenta todas las
posibles fuentes de
error.
Se puede utilizar la
RSD de
reproducibilidad (o la
RSD de repetibilidad
si no se dispone de
datos de
reproducibilidad),
pero la contribución
de fuentes de
incertidumbre
adicionales también
debe incluirse el.

10. Continuando…
Los datos de MU se relacionan principalmente con el analito y la matriz utilizados y
solo deben extrapolarse a otras combinaciones de analito/matriz con extrema
precaución.
MU tiende a aumentar a niveles de residuos más bajos, especialmente a medida
que se acerca el LOQ. Por lo tanto, puede ser necesario generar datos de MU en
un rango de niveles de residuos para reflejar los que se encuentran típicamente
durante el análisis de rutina.
Un enfoque práctico para que un laboratorio verifique su estimación de UM, con
base en sus propios datos dentro del laboratorio, es evaluando su desempeño en
pruebas de competencia recientes
Estos datos de incertidumbre incluirán la repetibilidad del submuestreo y el análisis,
pero no ningún sesgo entre laboratorios.

11. E11, E12, E13 y E14
La evaluación de un residuo generalmente solo es un problema en los
casos en que el nivel está relativamente cerca del LMR.
Se debe considerar la posibilidad de que haya ocurrido una pérdida de
residuos o una contaminación cruzada antes, durante o después del
muestreo.
Se ha calculado una UM ampliada predeterminada del 50 % (que
corresponde a un nivel de confianza del 95 % y un factor de cobertura
de 2) a partir de las pruebas de competencia de la UE.
En general, este valor del 50 % cubre la variabilidad entre laboratorios
entre los laboratorios europeos y se recomienda que las autoridades
reguladoras lo utilicen en casos de decisiones de aplicación
(superaciones de LMR). Un requisito previo para el uso de la MU
expandida predeterminada del 50 % es que el laboratorio debe
demostrar que su propia MU expandida es inferior al 50 %.
Si los laboratorios
experimentan casos
individuales de
repetibilidad
inaceptablemente alta,
se debe considerar el
uso de una cifra de MU
correspondientemente
más alta.
Si es necesario, el
resultado debe
informarse junto con la
UM ampliada de la
siguiente manera:
Resultado = x ± U
(unidades), donde x
representa el valor
medido.

12. Continuando…
El cumplimiento del LMR debe verificarse asumiendo que se
excede el LMR
Si el valor medido excede el LMR en más de la incertidumbre
expandida (x – U > LMR). Con esta regla de decisión, el valor del
mensurando debe estar por encima del LMR con al menos un
97,5 % de confianza.
Por ejemplo, en caso de que el LMR = 1
El resultado x = 2,2 y U = 50%, entonces x-U = 2,2 - 1,1 (= 50%
de 2,2)=1,1, que es > LMR.

13. Apartado F
F. Estándares de plaguicidas,
soluciones madre y soluciones
estándar de calibración
02

14. Identidad, pureza y
almacenamiento de los
estándares
Los estándares de referencia deben tener identidad
conocida, pureza conocida y permitir trazabilidad
Se deben almacenar a baja temperatura, preferiblemente en
un congelador, para reducir degradación
Se puede reemplazar la fecha de vencimiento del proveedor
por hasta 10 años de almacenamiento apropiado
La identidad química debe verificarse si es un analito nuevo

15. Identidad, pureza y almacenamiento
de estándares de referencia (F1 y F2)
Solo con fines de detección, los estándares de
referencia y las soluciones derivadas pueden
usarse después de la fecha de vencimiento,
siempre que se pueda lograr el RL.
Se debe asignar un código de identificación
único a los estándares de referencia y
registrarlos de manera que se garantice la
trazabilidad completa, incluyendo fuente de
suministro, número de insignia, fecha de
recepción y lugar de almacenamiento.
Si se detecta el pesticida, se debe utilizar un
estándar de referencia nuevo o certificado y una
solución estándar de calibración hecha a partir de
este para la cuantificación.
Se debe excluir la humedad durante el equilibrado del
estándar de referencia a temperatura ambiente antes
de su uso, y se deben corregir las concentraciones
para la pureza del estándar de referencia
Los solventes deben ser apropiados para el analito
(solubilidad, sin reacciones químicas) y el método de
análisis
Se debe registrar la fecha de preparación, la identidad
y la masa (o volumen, para analitos altamente
volátiles) del estándar de referencia y la identidad y
volumen del solvente (u otros diluyentes).

16. F3
Para la preparación de estándares de stock, se deben pesar no menos de 10 mg del
estándar de "referencia" utilizando una balanza de 5 decimales.
La temperatura ambiente debe corresponder a la temperatura a la que se ha calibrado
el material de vidrio; de lo contrario, la preparación del estándar de stock y de trabajo
debe basarse en la medición de masa.
Los analitos líquidos volátiles deben dispensarse por volumen o peso (si se conoce la
densidad) directamente en el disolvente.
Los analitos gaseosos (fumigantes) pueden dispensarse burbujeando en el disolvente
y pesando la masa transferida, o preparando diluciones gaseosas (por ejemplo, con
una jeringa hermética al gas, evitando el contacto con metales reactivos).

17. F4 y F5
Los estándares de stock deben ser etiquetados de forma
indeleble, asignarles una fecha de vencimiento y
almacenarlos a baja temperatura en la oscuridad, en
contenedores que eviten la pérdida de disolvente y la
entrada de agua.
Después de equilibrar a temperatura ambiente, las
soluciones deben ser remezcladas y se debe verificar que el
analito permanezca completamente disuelto, especialmente
cuando la solubilidad a bajas temperaturas es limitada.
El uso de un disolvente diferente, diferentes condiciones de
almacenamiento o la preparación de soluciones de stock con
concentraciones más bajas pueden ayudar a superar este
problema.
La estabilidad de los pesticidas puede depender del
disolvente utilizado.
Los datos disponibles
actualmente muestran que
las soluciones de
estándares de stock de la
mayoría de los pesticidas,
cuando se almacenan
adecuadamente, son
suficientemente estables
durante varios años cuando
se preparan en disolventes
orgánicos como tolueno,
acetona, acetonitrilo,
metanol o acetato de etilo.
Para las suspensiones (por
ejemplo, ditiocarbamatos) y
soluciones (o diluciones
gaseosas) de fumigantes
altamente volátiles que
deben prepararse frescas,
la concentración de la
solución del analito debe
compararse con una
segunda solución realizada
independientemente al
mismo tiempo.

18. Preparación, uso y almacenamiento
de patrones de trabajo. (F6 y F7)
Al preparar estándares de trabajo, se debe
llevar un registro de la identidad y cantidad
de todas las soluciones y disolventes
utilizados.
Los patrones deben etiquetarse de forma
indeleble, asignarles una fecha de
caducidad y almacenarlos a baja
temperatura en la oscuridad en recipientes
que impidan la pérdida de disolvente y la
entrada de agua
Al igual que con las soluciones de stock, el
los disolventes deben ser apropiados para
el analito (solubilidad, sin reacciones
químicas) y el método de análisis.
Los cierres de septum son especialmente
propensos a pérdidas por evaporación
(además de ser una fuente potencial de
contaminación) y deben ser reemplazados
lo antes posible después de perforarlos, si
se van a conservar las soluciones.
Después del equilibrio a temperatura
ambiente, las soluciones se deben volver a
mezclar y se debe verificar que el analito
haya permanecido en la solución,
especialmente cuando la solubilidad a
bajas temperaturas es limitada.
Durante el desarrollo o validación del
método, o para analitos nuevos en el
laboratorio, se debe demostrar que la
respuesta detectada se debe al analito y
no a alguna impureza o artefacto.
Si la degradación del analito ocurre
durante la extracción, limpieza o
separación, y el producto de degradación
se encuentra comúnmente en las
muestras pero está excluido de la
definición de residuo, entonces los
resultados deben confirmarse utilizando
una técnica alternativa que evite este
problema.

19. Pruebas y reemplazo de estándares
La estabilidad de un estándar de "referencia" existente y posiblemente vencido puede verificarse preparando un nuevo
estándar de stock y comparando las respuestas del detector.
La comparación debe realizarse utilizando diluciones apropiadas de estándares individuales o mezclas de estándares.
Las diferencias inexplicables en las concentraciones aparentes entre los estándares viejos y nuevos deben investigarse.
Las discrepancias entre las concentraciones de las soluciones nuevas y viejas pueden deberse a varios factores además
de la degradación del analito: precipitación del analito, evaporación del disolvente, diferencias en las purezas entre los
estándares de referencia viejos y nuevos, errores en la pesada o errores en el análisis instrumental.
Las medias de al menos cinco mediciones replicadas para cada una de las dos soluciones (vieja y nueva) no deberían
diferir normalmente en más del ±10%.
El valor medio de la solución nueva se toma como el 100% y también se utiliza como base para el cálculo de la diferencia
porcentual..

20. F9 y F10
Si la diferencia de las medias supera el ±10%
del nuevo estándar, entonces el tiempo de
almacenamiento o las condiciones pueden
tener que ajustarse.
Ambas soluciones, vieja y nueva, deben
verificarse con otra solución nueva que se
prepare de forma independiente a las dos
primeras.
También se debe tener en cuenta la
variabilidad de al menos 5 inyecciones y
esforzarse por lograr una baja variabilidad
para minimizar la incertidumbre en la
diferencia de concentración calculada entre la
solución nueva y la vieja.

21. ¿Preguntas?
¡¡Gracias!!