Explicações sobre fotometria

2.  Estuda a medição das grandezas relativas à
emissão, à recepção e à absorção da luz.
 Medidas bioquímicas:
◦ Relacionadas à absorção da luz pelas soluções
◦ A concentração do analito na substância absorvente
é proporcional à sua concentração
 Fotocolorímetros
 Espectrofotômetro

4.  Radiação eletromagnética
◦ Comprimentos de onda entre 380 a 750 nm 
visíveis ao olho humano
- Luz branca  prisma  decomposição da luz em
distintos comprimentos de onda
- Projeção desses raios emitidos em um anteparo
produz uma faixa de cores
- Cor da luz é função do seu comprimento de onda.

6. Cores Intervalos de comprimento
de onda (nm)
Ultravioleta ( não visível) < 380
Violeta 380 a 450
Azul 450 a 500
Verde 500 a 570
Amarela 570 a 590
Alaranjada 590 a 620
Vermelha 620 a 750
Infravermelho 750 a 2000

8.  Quando um raio de luz monocromática de
intensidade inicial definida (I0) incide sobre
uma solução colorida, a intensidade da luz
emergente ( I1) é menor que a luz incidente,
ou seja, parte da luz foi absorvida.
T = I0 / I1
% T = T x 100

9.  Mede-se a intensidade de luz absorvida por
uma solução corada pela redução da medida
da intensidade de luz transmitida.
 A medida de absorção é a absorvância (A).
 A = quantidade de luz absorvida
 T = fração total da luz transmitida
A = 2 – log %T

10.  A absorção da luz é maior quanto maior a
concentração da solução por onde ela
atravessa

11.  A absorção da luz é maior quanto maior a
distância percorrida pelo feixe.

13.  A concentração de uma substância é
diretamente proporcional à quantidade de luz
absorvida.
padrão
do
a
Absorvânci
teste
do
a
absorvânci
x
padrão
do
ão
Concentraç
teste
do
ão
Concentraç 

17.  PROTEÍNAS TOTAIS:
◦ Há muitos componentes no sangue
◦ Todos podem absorver a luz
◦ Reações químicas que dão compostos coloridos
◦ Determina-se então só a concentração desse
composto colorido
◦ Anula-se a presença de outros componentes pela
utilização do padrão.