1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE LABORATORIO CLINICO E HISTOPATOLOGICO
ASIGNATURA:
TECNICAS HISTOLOGICAS
INFORME INVESTIGATIVO BASADO EN LA PRACTICA DE LABORATORIO
DE TECNICAS HISTOLOGICAS
TEMA:
RECONOCIMIENTO DE LAS DISTINTAS AREAS DENTRO DEL LABORATORIO
DE TECNICAS HISTOLOGICAS
ELABORADO POR:
BRANDON CAIZA
TERCER SEMESTRE
DOCENTE:
LIC.IVAN PEÑAFIEL MENDEZ
FECHA DE LA PRÁCTICA:
20/04/2016
FECHA DE ENTREGA:
27/04/2016
PERIODO:
ABRIL-AGOSTO 2016
RIOBAMBA – ECUADOR
2. TECNICAS HISTOLOGICAS
1.-Tema: Reconocimiento de las distintas áreas dentro del laboratorio de técnicas
histológicas
2.-Objetivo General: Identificar las áreas y equipos que se encuentran formando un
laboratorio de Anatomía Patológica.
3.-Objetivos Específicos:
Identificar cuál es la función que cumple cada área del laboratorio de anatomía
patológica.
Conocer cuáles son los materiales y equipos utilizados en cada área del
laboratorio.
Diferenciar el trabajo que se va a cumplir dentro de cada área, obteniendo un
aprendizaje significativo.
4.-Materiales:
Mandil
Cobertor de cabello
Guantes
Mascarilla
Libreta de apuntes
Esferos
5.-Marco teórico:
En una institución asistencial o docente-asistencial el laboratorio de patología o de
anatomía patológica también denominado servicio o departamento se ocupa del estudio
morfológico de muestras de células, tejidos y órganos obtenidos de pacientes vivos y de las
necropsias.
La distribución de las distintas áreas del laboratorio de anatomía patológica van a ser un
requisito primordial para el correcto procesamiento de las muestras en estudio; para lo cual
se van a dividir en distintas las distintas áreas para facilitar el trabajo y lograr un excelente
resultado.
Área de Microscopia:
3. TECNICAS HISTOLOGICAS
En esta área es necesario hacer énfasis en las condiciones de recepción de muestras para
que posteriormente durante el inicio de la técnica histológica que comprende; el estudio
macroscópico no se cometa errores.
Este estudio normalmente es llevado a cabo en un espacio físico denominado sala de tallado
o área de microscopia es la primera recepción de muestras, biopsias, tejidos que vienen
codificados; deben tener toma de agua que este en constante fluido el agua, para evitar que
los patógenos de la muestra contaminen el área y que no se queden en el mesón.
Plancha de madera y corcho:
Es un instrumento en forma de resbalera que nos va a servir para medir, cortar y manipular
los órganos que llegan a ser examinados, además nos va ayudar a que el bisturí o cualquier
otro objeto utilizado para en corte se dañe y que el fluido de dichos órganos se vaya
directamente a la cañería evitando el posible contagio con muestras contaminadas.
Casetas:
La utilización de las casetas son las de contener las porciones más sospechosas que van
directamente a los procesadores para eliminar fluidos, agua tisular y que de esta forma
queden aptas para su estudio.
PROCESAMIENTO DE TEJIDOS
El Procesamiento de muestras para anatomía patológica se las puede realizar de dos
maneras manuales y automatizadas.
Fijación
Deshidratación
Aclaramiento
Incrustación o inclusión
Corte de tejidos
Tinción
Observación
Fijación (2 horas): en este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para
evitar los cambios post-mortem. • Unos de los fijadores más usado es el Formol al 10%
(Formaldehido) formol
Deshidratación (6 horas): se da por la presencia de alcoholes en este caso el etanol 50-90
%, se debe primero diluir el formol de mayor a menor para que no se endure la muestra.
Aclaramiento (2 horas ): se usa Xilol o sustituto de Xilol que es incoloro y rico en plomo el
tejido vuelve a su forma normal aclarándolo y blanqueando el tejido.
Inclusión (2 horas) • Se debe lavar el tejido para quitar exceso de fijador, luego se
deshidrata y se pasa por un líquido intermediario que es miscible con la parafina.
•Infiltración: en este paso la muestra se coloca en parafina liquida, de manera que se
impregne con ella.
4. TECNICAS HISTOLOGICAS
Aquí se forman bloques de parafina y dentro de estos bloques están las muestras a estudiar.
Se deja enfriar para que adquiera dureza.
Corte: tallado Previo al corte, se debe tallar el bloque para el obtener secciones
adecuadas en el micrótomo. El micrótomo es un instrumento que permite obtener cortes
muy delgados de muestra (5μm).
Los cortes se obtienen seriados, uno tras otro, obteniendo una cinta. Luego se echa a un
baño de flotación para que se estiren y se rescatan con un portaobjetos, que luego se
calienta para evaporar el agua y que los cortes queden adheridos.
Tinción: las placas se tiñen con la técnica de hematoxilina/eosina u otra especial. La
muestra debe desparafinarse y pasar por una serie de soluciones. Finalmente, las muestras
se deshidratan y se montan para ser vistas al microscopio.
Observación: el patólogo observa la muestra al microscopio y consigna el diagnóstico.
El estudio de las muestras demora 12 horas en ser procesadas en caso de ser muestras de
emergencia las muestras se procesaran en 3 días y las muestras de rutina de 8 a 15 días.
EQUIPOS UTILIZADOS PARA EL PROCESAMIENTO DE MUESTRAS
Estación de inclusión de tejidos en parafina acompañado de plancha fría
Se trata de una estación modular de inclusión diseñada para el encastramiento del tejido y
la confección de bloques de parafina, figura. Cuenta con un módulo calefactado de
dispensación de parafina con una capacidad de 3 litros y una superficie de trabajo espaciosa
así como zonas de almacenaje tanto para casetes como moldes.
Todas las funciones se controlan a través de una pantalla LED de fácil lectura, incluido el
ajuste de la temperatura para las bandejas de calentamiento derecha e izquierda, el depósito
de parafina y la superficie de trabajo. Cuanta además con un porta-pinzas extraíble y
calentable para 6 pinzas, accesible por los dos lados. La activación del flujo de parafina es
mediante clip de altura ajustable y pivotable, cuya activación manual se hace mediante el
molde de inclusión o con el dedo.
La velocidad de flujo es regulable y los recipientes colectores de parafina extraíbles,
calentados (de forma indirecta a través de la superficie de trabajo). Dicha superficie de
trabajo es grande y de fácil limpieza con zona de enfriamiento integrada también para
casetes extra grandes con sistema de salida de parafina.
5. TECNICAS HISTOLOGICAS
La iluminación de la superficie de trabajo óptima gracias a la lámpara halógena ajustable
individualmente. Y un portapinzas extraíble, calentable para 6 pinzas, accesible por los dos
lados. La temperatura del depósito de casetes/moldes de inclusión, de la superficie de
trabajo y del recipiente de parafina regulable entre 55° C y 70° C. La indicación de
temperatura permanente para todos los rangos de trabajo.
Se pueden programar los días y horas de trabajo para lograr un funcionamiento automático
del equipo. Las bandejas calefactadas de los casetes y de los moldes son intercambiables
para adaptarse a los cambios en el flujo de trabajo.
Accesorios:
Placa fría
Pedalera
Regulador de energía
Micrótomo:
Los micrótomos son instrumentos de corte para la elaboración de preparados que se usan en
la microscopía. Para cumplir con las altas exigencias de tales preparados, los micrótomos
permiten realizar cortes extremadamente finos. Los micrótomos en la elaboración de
preparados para la microscopía Normalmente los micrótomos modernos permiten cortes de
un espesor de 0,1 hasta 100 µm. A modo comparativo: El cabello humano tiene un espesor
entre 50 y 70 µm. La historia de los micrótomos empezó con el inicio de los microscopios
de luz. Para poder analizar objetos, estos debían ser lo suficientemente finos para que la luz
los traspasara. Los primeros micrótomos eran en su inicio simples cuchillas (normalmente
cuchillas de afeitar) con los que se hacían cortes de forma manual. Como las exigencias a
los preparados iban en aumento, fue necesario que los micrótomos se desarrollaran. Los
primeros micrótomos, tal como hoy en día los conocemos, se desarrollaron en 1770. Con
estos se podía fijar la prueba y ajustar el grosor del corte mediante unos tornillos. Hoy en
día, los micrótomos mecánicos se componen de un bloque, un sujeta-muestras y un equipo
técnico para el control del avance. La calidad de los preparados depende del tipo de avance,
de la geometría de la cuchilla y de la declinación (ángulo entre la cuchilla y la dirección de
corte). Adicionalmente se puede influir en el resultado en la preparación de la muestra
(mediante congelación).
6. TECNICAS HISTOLOGICAS
BAÑO DE FLOTACION
El baño de María es un equipo que se utiliza en el laboratorio para realizar pruebas
serológicas y procedimientos de incubación, aglutinación, inactivación, biomédicos,
farmacéuticos y hasta industriales. Por lo general, se utilizan con agua, pero también
permiten trabajar con aceite. Los rangos de temperatura en los cuales normalmente son
utilizados están entre la temperatura ambiente y los 60 °C. También se pueden seleccionar
temperaturas de 100 °C, utilizando una tapa de características especiales. Los baños de
María son fabricados con cámaras cuya capacidad puede seleccionarse entre los 2 y los 30
litros.
ESTUFAS:
La estufa de secado es un equipo que se utiliza para secar y esterilizar recipientes de vidrio
y metal en el laboratorio. Se identifica también con el nombre de Horno de secado. Los
fabricantes han desarrollado básicamente dos tipos de estufa: las que operan mediante
convección natural y las que operan mediante convección forzada. Las estufas operan, por
lo general entre la temperatura ambiente y los 350°C. Se conocen también con el nombre
de pupinel.
La estufa de secado se emplea para esterilizar o secarel material de vidrio y metal
utilizado en los exámenes o prueba, que realiza el laboratorio y que proviene de la sección
de lavado, donde se envía luego de ser usado en algún procedimiento.
La esterilización que se efectúa en la estufa se denomina de calor seco y se realiza a
180°C durante 2 horas; la cristalería, al ser calentada por aire a alta temperatura, absorbe
humedad y elimina la posibilidad de que se mantenga cualquier actividad biológica debido
a las elevadas temperaturas y a los tiempos utilizados.
7. TECNICAS HISTOLOGICAS
BATERIA DE TINCION:
Las baterías de tinción serán única y exclusivas para el área donde se encuentren en este
caso para el área de anatomía patológica; deben tener su respectiva rotulación en todas la
cubetas; los colorantes se deben filtrar inmediatamente antes de llenar las cubetas usando
un embudo y papel filtro además se requiere que la batería de tinción este bajo la campana
de extracción de gases
Se deben dar dos tipos de mantenimiento a los colorantes los cuales son:
Mantenimiento general: el cual consiste en remover cada 8 días cualquier material celular
que haya desprendido después de su respectiva filtración. Además se debe mirar los niveles
de soluciones en las baterías de tinciones.
Mantenimiento específico: en la hematoxilina se debe retirar la capa de aspecto metálico
que se forman sobre los colorantes con papel absorbente o filtración. El etanol es
indispensable mantenerlo bien tapado.
6.-CONCLUSIONES:
Se pudo identificar y conocer las áreas que están dentro del laboratorio de anatomía
patológica
Se logró conocer cuál es la función de cada área y todos los procedimientos que se
realizan dentro de las mismas.
Se adquirió conocimiento en cuanto a al función que desempeña cada equipo dentro
del laboratorio de anatomía patológica.
7.-RECOMENDACIONES:
Se recomienda por parte de los estudiantes contar con todos los materiales de
bioseguridad necesarios para las prácticas ya que son de gran importancia dentro del
laboratorio.
Se requiere tener el conocimiento previo a la práctica mediante la facilitación de la
guía de cada laboratorio por parte del docente.
Se debe mantener la calma dentro del mismo ya que se está conociendo y
manejando equipos sumamente costosos que son de gran ayuda para nuestro
aprendizaje.
8. TECNICAS HISTOLOGICAS
8.-BIBLIOGRAFIA:
Gabriel M. (2006) Micrótomo. Disponible en:
https://laboratorioap.wordpress.com/2015/05/13/el-microtomo/
Luis G. (2015) Importancia del Área de Macroscopia. Disponible en:
http://histoscientifics.blogspot.com/2015/10/importancia-del-area-de-macroscopia-
y.html
García del Moral, R. (1993).Manual de laboratorio de anatomía patológica. Editorial
MacGraw-Hill / Interamericana de España S.A
Stevens, A. (2001).Anatomía patológica .Barcelona: Editorial lsevier España, S.A,
9. TECNICAS HISTOLOGICAS
9.-ANEXOS:
ANEXO N°1
FOTOS DE LOS EQUIPOS UTILIZADOS EN EL LABORATORIODE ANATOMIA
PATOLOGICA.
IMAGENN°1
Estaciónde inclusiónde tejidos
IMAGENN°2
Micrótomo
IMAGENN°3
Equipoutilizadoparael bañode flotación
IMAGENN°4
Batería de tinción