Factores que intervienen en la Administración por Valores.pdf
DIAGNOSTICO-DENGUE-2021.pdf
1. Lic. María Paquita García Mendoza
Responsable
Laboratorio de Referencia Nacional de Metaxénicas virales
Centro Nacional de Salud Pública
Instituto Nacional de Salud
Serotipos circulantes, toma, conservación y procesamiento de
muestra, tipos de pruebas diagnostico
Curso de “Fortalecimiento de la vigilancia epidemiológica de dengue y
otras arbovirosis en Lima Metropolitana y Callao”
29 de abril del 2021
2. EEV, EEE, EEO
ESL,
WN
Filoviridae:
Ebola
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
Hantavirus
Arbovirus y fiebres
hemorragicas
Bunyaviridae Flaviviridae Togaviridae
Fiebre de Oropouche
Virus Zika
Fiebre Amarilla
Dengue
Mayaro
Chikungunya
LABORATORIO DE REFERENCIA NACIONAL METAXENICAS VIRALES
Laboratorio
s:
NB2
NB3
3. GENERALIDADES
Flavivirus: Virus del Dengue
Ralf Bartenschlager & Sven Miller. Molecular aspects of Dengue virus replication. Future Microbiol. (2008) 3(2), 155–165
ARN +
Dímero E
Proteína M
Virion
intracelular
(inmaduro)
Virion
extracelular
(maduro)
Virion
endosomal
(pH bajo)
Trímero E
Proteína prM
Parte pr de la
proteína prM
Proteína C
(nucleocápside)
• Familia: Flaviviridae.
• Genero: Flavivirus
• Vector: Aedes aegypti
• Es un virus ARN monocatenario +.
• Tiene 4 serotipos (DEN-1, 2, 3, 4 y 5? ) y 19
genotipos
• Contiene GENES:
− Estructurales: prM (pre M), E (envoltura) y C
(cápside).
− No estructurales: NS1, NS2A, NS2B, NS3,
NS4A, NS4B y NS5.
4. DENV-1
5 genotipos: I, II, III, IV yV
DENV-2
5 genotipos:América, América/Asia, Asia I,
Asia II, Cosmopolita y Selvático (exclusivo de
primates no humanos)
DENV-3
4 genotipos: I, II, III, IV
Nota: Algunas clasificaciones incluyen el
genotipoV.
DENV- 4
4 genotipos: I, II, III y Selvático (exclusivo de
primates no humanos)
SEROTIPO GENOTIPO
AÑO DE INGRESO
PERÚ
DENV-1 América/África 1990
DENV-2
América 1995
América/Asia 2001-2017
Cosmopolita 2019
DENV-3 India 2001
DENV-4 Indonesia 2001
Fuente: LRN Metaxénicas virales del INS
8. 1. Ficha clínica
2. Tipo de muestra
3. Obtención de muestra
4. Preparación para el
embalaje y envío de la
muestra
5. Transporte de muestra
9. Ficha de investigación
clínica para la Vigilancia de
Dengue, Chikungunya, Zika,
Fiebre Amarilla y otros
arbovirus
Se registraran los datos de
caso sospechoso en forma
completa y legible.
http://www.dge.gob.pe/portal/docs/tools/dengue
/fichaarbovirosis.pdf
1. Fichaclínica-epidemiológica
10. Código de
color
Aditivo Muestra Análisis
Sin aditivo Suero
Química
Serología
Gel/Sin aditivo Suero
Química
Serología
Citrato Plasma Coagulación
EDTA Plasma Hematología
Heparina Plasma
Química
Serología
Citrato Plasma
Velocidad
Horaria de
Sedimentación
Fluoruro Plasma Glucosa
La muestra validada para el
diagnostico de Dengue es
SUERO.
Para la obtención de suero se
utilizarán tubos de extracción
al vacío sin anticoagulantes
(Tapa roja o amarilla)
2.Tipo de muestra
11. En el caso de fallecidos, se
colectará 2 cm3 de hígado, el
mismo que será remitido de
la siguiente manera:
a) 1 cm3 en un frasco con
formol neutro al 10% y
enviar en embalaje a
temperatura ambiente; y
b) 1 cm3 en un frasco sin
preservantes. Este último
será congelado de
inmediato y enviado en
cadena de frio
2.Tipo de muestra
1 – 2 cm
12. Identificar correctamente al paciente. Rotulación inmediata frente al
paciente
Selección del sitio de venopunción. Preferida vena mediana cubital
Limpiar antes de la venopunción con alcohol al 70%
Aplicar el torniquete aproximadamente de
8-10 cm por encima del sitio de la
venopunción
Se colectará sangre en un tubo de
extracción al vacío sin anticoagulante de 7
cm3 (para extraer 2 cm3 de suero).
Invertir el tubo 5 veces para mezclar el
activador de sangre.
13. Centrifugar la muestra según las
especificaciones del fabricante del
los tubos posterior a la
coagulación de la muestra (30-60
minutos). No pasar de dos horas.
Separar el suero, el cual es estable
hasta 48 horas de 2-4ºC, después
de 48 horas en congelación a -
20ºC.
14. Rotular el criovial
Rotular con plumón indeleble en
la parte externa del criovial la
siguiente información:
• Apellidos y nombres
• Fecha de obtención
• Procedencia
Observación:
No usar iniciales
4. Preparación para el embalaje y envío
de la muestra
15. Los crioviales deben ser colocados
en una gradilla, soporte o
portaviales para asegurar su
transporte en posición vertical con
la finalidad de evitar derrames.
Asegurar que la muestra se
mantenga en cadena de frío
durante su transporte ( 2⁰ – 8⁰ C).
Transporte de muestra
16. 1 2 3
+ +
Recipiente
primario hermético
Envase
secundario hermético
Embalaje
exterior
Triple empaque
Usar de 3 a 4 Kg
de refrigerantes
* Adjuntar la documentación: ficha(s) y oficio en un
sobre adherido al envase exterior.
CADENA
DE FRIO
TEMPERATURA
AMBIENTE (sin
refrigerantes)
17. Metodo de
Diagnostico
Enfermedad
Tiempo de enfermedad para la
obtención de muestras
Muestra
Biológica
Cantidad
Minima
Requerida
Conservación y
Transporte
Tiempo de
Resultado en el
Netlab
Elisa antigeno NS1 Dengue
Suero: Pacientes con tiempo de
enfermedad ≤ 5 días (Periodo
Virémico)
Suero 2 mL
Estéril
(enviar a T° por
debajo de +8 °C)
3 días
Dengue,
Chikunguna, Zika y
otras arbovirosis
Suero: Pacientes con tiempo de
enfermedad ≤ 5 días (Periodo
Virémico)
Suero 2 mL
Zika
Orina: Pacientes con tiempo de
enfermedad 6 a 15 días
Orina 2 mL
Zika
Semen: En caso de sospecha de
transmisión sexual
Semen 2 mL
Zika
LCR: En pacientes con Guillan Barré
confirmado, sindrome congénito o
sintomas neurológicos.
LCR 1 mL
Dengue,
Chikunguna, Zika y
otras arbovirosis
Tejido: muestra de Higado, cerebro,
riñon, placenta, cordón umbilical.
Asimismo a casos de abortos o
natimuertos sospechosos a Zika
Tejido 1 cm3
Estéril
(enviar a T° por
debajo de +8 °C)
Histopatología e
IHQ
Dengue,
Chikunguna, Zika y
otras arbovirosis
Tejido: muestra de Higado, cerebro,
riñon, placenta, cordón umbilical.
Asimismo a casos de abortos o
natimuertos sospechosos a Zika
Tejido 1 cm3
Enviar en formol 10%
a temperatura
ambiente
7 días para IHQ
Dengue,
Chikunguna, Zika y
otras arbovirosis
Suero: Pacientes con tiempo de
enfermedad 6 a 15 días
Suero 2 mL
Zika
LCR: En pacientes con Guillan Barré
confirmado,sindrome neurológicos o
sintomas neurológicos.
LCR 1 mL
Sangre: En las primeras 24 horas de
nacidos y cuando es captado el caso
Sangre
2 mL
(para extraer 1
mL de suero)
Estéril
(enviar a T° por
debajo de +8 °C)
3 días
Sangre de cordón umbilical: 5 mL Estéril
ELISA
Muestras de casos con sindrome congenito asociado a la infección por virus zika:
3 días para qRT-PCR
30 días para
Aislamiento viral
3 días
qRT-PCR (detección
de ARN viral) y
aislamiento Viral
ELISA (detección de
IgM e IgG)
Estéril
(enviar a T° por
debajo de +8 °C)
Estéril
(enviar a T° por
debajo de +8 °C)
RM 982-2016 - NTS 125-MINSA/2016/CDC-INS “Normativa Técnica de Salud para la vigilancia epidemiológica y diagnostico
de laboratorio de dengue, chikungunya, zika y otras arbovirosis”
Criterios para la Obtención y conservacíon y transporte de muestra para el diagnóstico
de Dengue, Chikungunya, Zika, Fiebre Amarilla y otros Arbovirus
18. Ministerio de Salud
RM 980-2016/MINSA
NTS N° 125-MINSA/2016/CDC-INS
“Normativa Técnica de Salud
para la vigilancia
epidemiológica y diagnostico
de laboratorio de dengue,
chikungunya, zika y otras
arbovirosis”
19. FINALIDAD
Contribuir a prevenir, controlar la transmisión del dengue, chikungunya, zika y otras
arbovirosis y a mitigar el ingreso de estas enfermedades en escenarios donde no hay
transmisión en el Perú.
OBJETIVO GENERAL
Fortalecer las acciones de vigilancia epidemiológica y diagnóstico para la detección
temprana de los arbovirus emergentes y remergentes, así como el monitoreo de brotes y
epidemias
OBJETIVOS ESPECIFICOS
• Establecer los procedimientos para la captación de casos, registro, notificación e
investigación de los casos de dengue, chikungunya, zika y otras arbovirosis, sus
secuelas y complicaciones en el Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica.
• Establecer las estrategias de vigilancia epidemiológica de dengue, chikungunya, zika
y otras arbovirosis, sus secuelas y complicaciones.
• Estandarizar los procedimientos de obtención, conservación y transporte de muestras
biológicas para su procesamiento, así como para el diagnóstico de dengue,
chikungunya, zika y otras arbovirosis en el Perú.
Normativa Técnica de Salud para la vigilancia
epidemiológica y diagnostico de Laboratorio de Dengue,
Chikungunya, Zika y otras Arbovirosis
23. Es muy importante conocer la fecha de inicio de síntomas
(En general Fiebre) para asociarlo a la prueba de
diagnostico a realizar.
Datos importantes para el personal de Laboratorio:
Fecha de inicio de síntomas
Fecha de toma de muestra.
Tipo de muestra
El tiempo de enfermedad esta asociado directamente a la
carga viral y/o el título de anticuerpos
24. +1 +2 +3 +4 +5 +6 +7 +8 +9 +10 +11 +12 +13 +14 +15 +16
0
-1 -2 -3 -4
Aparición de
síntomas
Periodo de
incubación
Fuente: Adaptado de Sullivan N Pathology (2014)
Tiempo en días
Periodo de incubación:
Humanos: 3 - 6 días
Mosquitos: 7 - 14 días
Infección
ARN viral
IgG
IgM
25. METODOS DIRECTOS
Son aquellos que detectan:
1. Presencia de antígeno NS1 del
virus Dengue:
- ELISA NS1
2. Presencia de genoma viral e
identificación de serotipo:
- RT-PCR MULTIPLEX en
tiempo real
3. Aislamiento en cultivos
celulares del serotipo de
Dengue.
Son aquellos que reconocen
componentes humorales
(Anticuerpos) producidos por la
exposición al virus:
1. Anticuerpos específicos
antivirales por técnicas
inmunológicas (ELISA IgM,
ELISA IgG).
2. Neutralización
METODOS INDIRECTOS
27. Pruebas para muestras ≤ 5 días
Serológicas: ELISA Antígeno NS1
Moleculares: RT-PCR tiempo real Multiplex.
Secuenciación genética (genotipos).
Virológicas: Aislamiento viral en línea C6-36.
Pruebas para muestras ≥ 6 días
Serológicas: in house
- ELISA IgM Tariki para dengue (Prod. por el INS)
- ELISA IgG de captura para dengue (Infección secundaria).
- ELISA IgG Indirecta (Infección pasada).
PRNT prueba de neutralización por reducción de placa
28. - ELISA NS1
- RT PCR tiempo real Multiplex
- Aislamiento viral
- Secuenciación genética.
- ELISA IgM
- ELISA IgG de captura
- ELISA IgG Indirecta
- PRNT
Diagnóstico
DENGUE
5
1
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
10
días
6
29. NS1
Proteína No Estructural tipo 1:
- Altamente conservada.
- Producida por el Virus del Dengue.
- Se le encuentra asociada a la membrana del virus y
también en forma libre.
30. 1) Prueba ELISA AgNS1
• Detecta antígeno NS1.
• Suero de 1-5 días.
• Diagnóstico temprano de
dengue.
V. Kumarasamya,A.H.AbdulWahaba, S.K. Chuab, Z. Hassana,Y.K. Chema, M. Mohamada and K.B. Chua. Evaluation
of a commercial dengue NS1 antigen-capture ELISA for laboratory diagnosis of acute dengue virus infection.
Journal ofVirological MethodsVolume 140, Issues 1-2, March 2007, Pages 75-79
Sensibilidad 93%
Especificidad 100%
Sensibilidad (97.3%) en Inf. Aguda primaria
Sensibilidad (70.0%) en Inf. Aguda secundaria
VPP 100%
VPN 97.3%.
31. 50.00%
100.00%
91.30% 88.89% 90.00% 91.55%
0.00%
10.00%
20.00%
30.00%
40.00%
50.00%
60.00%
70.00%
80.00%
90.00%
100.00%
1er día 2do día 3er día 4to día 5to día TE ≤ 5días
Especificidad ELISA NS1
Tiempo de
enfermedad
Especificidad
ELISA NS1
N
1er día 50.00% 4
2do día 100.00% 38
3er día 91.30% 48
4to día 88.89% 43
5to día 90.00% 37
TE ≤ 5días 91.55% 169
* Comparado con la seroconversión de ELISA IgG
Fuente: LRN Metaxénicas Virales – INS.
32. Pruebas inmunocromatográficas
«Pruebas rápidas»
Definición: Ensayo basado en la unión antígeno-
anticuerpo.
Se fundamenta en la migración de anticuerpos o
antígenos (Del SUERO del paciente) por capilaridad
en una membrana de nitrocelulosa, estas se unen a
un conjugado durante el recorrido por la membrana y
retenidos finalmente en la “Zona de Captura” .
La retención en esta zona permite la coloración de los
complejos inmunes, por la exposición permanente en
este lugar.
34. I. No existe suficiente evidencia científica que recomiende
el uso masivo de las pruebas inmunocromatográficas, por
la baja sensibilidad (estudios Instituto Nacional de Salud y
laboratorios colaboradores de la OMS)
II. Toda prueba inmunocromatográfica debe ser CONFIRMADA
con pruebas diagnósticas estándares (aislamiento, PCR,
ELISA NS1 o ELISA IgM/IgG).
III. Podrían constituir en una herramienta clínica para el
diagnóstico de casos graves y la vigilancia de dengue en
áreas geográficamente distantes a los laboratorios de
referencia regional.
IV. Se sugiere el uso de varios marcadores en simultaneo para
incrementar la sensibilidad de las pruebas IC. (Combos)
35. RT-PCR Y RT- PCR TIEMPO REAL
• Two-Step (RT y PCR por
separado)
• One-Step
RT-PCR convencional
• Con Sondas Taqman
• Con SYBR Green
RT-PCR tiempo real
36. DIAGNOSTICO MOLECULAR DE DENGUE
RT-PCR EN TIEMPO REAL:
- Uso de sondas TaqMan
- Pares de Primers para
DENV 1, 2, 3 y 4
INS
- Verificación y Reproducibilidad
de la prueba RT-PCR.
-Protocolos estandarizados y
validados.
40. DEN-1 F 5-CAAAAGGAAGTCGTGCAATA-3
DEN-1 C 5-CTGAGTGAATTCTCTCTACTGAACC-3
DEN-1 FAM 5-CATGTGGTTGGGAGCACGC-3 BHQ-1
DEN-2 F 5-CAGGTTATGGCACTGTCACGAT-3
DEN-2 C 5-CCATCTGCAGCAACACCATCTC-3
DEN-2 HEX 5-CTCTCCGAGAACAGGCCTCGACTTCAA-3 BHQ-1
DEN-3 F 5-GGACTGGACACACGCACTCA-3
DEN-3 C 5-CATGTCTCTACCTTCTCGACTTGTCT-3
DEN-3 TxRed 5-ACCTGGATGTCGGCTGAAGGAGCTTG-3 BHQ-2
DEN-4 F 5-TTGTCCTAATGATGCTGGTCG-3
DEN-4 C 5-TCCACCTGAGACTCCTTCCA-3
DEN-4 Cy5 5-TTCCTACTCCTACGCATCGCATTCCG-3 BHQ-3
Ct
41. Técnica de Biología celular mediante la cual se obtiene
cepas puras a partir de muestras biológicas como suero,
orina, tejidos o fluidos biológicos.
Existen dos líneas celulares usadas para aislar Virus
Dengue:
1) Línea C6/36
2) Linea Vero
La línea C6/36 es mas susceptible a la replicación del Virus
Dengue.
La evidencia de la presencia de un virus es el efecto
citopático.
45. IMPLEMENTACION: 2008 -2010
TRANSFERENCIA: 2010 lotes pilotos
PRUEBA
DIAGNÓSTICA
SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD
TARIKI IgM
DENGUE - INS 99.3% 98%
PRUEBA DE
REFERENCIA
+ - Total
TARIKI IgM
DENGUE INS
+ 149 2 154
- 1 100 101
Total 150 102 255
46.
47. El reporte de un alto porcentaje de muestras negativas a
Dengue, demanda considerar la realización del
diagnóstico diferencial.
El diagnóstico diferencial se realizará frente a infecciosas
prevalentes en la región, según el enfoque sindrómico.
48. Asintomático
Síndromes clínicos
Febril
Exantemático
febril/artritis
Fiebre hemorrágica
Encefalitis
Microcefalia (Zika)
Guillain Barré
Familia
(Género)
Virus
Togaviridae
(Alphavirus)
Chikungunya
Mayaro
Encefalitis Equina del Este
Encefalitis Equina Venezolana
Encefalitis Equina del Oeste
Flaviviridae
(Flavivirus)
Dengue 1, 2, 3 & 4
Fiebre amarilla
Rócio
Encefalitis de San Luis
Nilo del Oeste
Zika
Bunyaviridae
(Ortobunyavirus)
(Phlebovirus)
Caraparu & otros virus del Grupo C
Catu & otros virus del Grupo Guama
Guaroa
Encefalitis de California
Oropouche
Alenquer & otros Phlebovirus
Rhabdoviridae
(Vesiculovirus)
Virus de la estomatitis vesicular
49. Muestra de suero tomada
1-5 día de síntomas
Positivo
RT-PCRDENV
Negativo
Tipificar
RT-PCRCHKV
Positivo Positivo
RT-PCRZIKV
DENV
Positivo Negativo
CHIKV ZIKV
50. Paciente febril agudo con
sospecha de dengue
Tomar 7 mL de sangre y enviar 2 mL de
suero al Laboratorio de Salud Pública
Si el tiempo de
enfermedad ≤ 5 días
ELISA NS1
ELISA NS1
Reactivo
Envío al INS/LRR
implementado para
identificación de
serotipos por
RT-PCR
ELISA NS1
No Reactivo
ELISA IgM
Caso confirmado
de Dengue
ELISA IgM
Reactivo
ELISA IgM
No reactivo
Caso confirmado
de Dengue
Solicitar segunda
muestra de
suero
ELISA IgM
Reactivo
ELISA IgM
No reactivo
Caso confirmado
de Dengue
Caso descartado
de Dengue
Si el tiempo de
enfermedad > 5 días
ELISA IgM
ELISA IgM
Reactivo
ELISA IgM
No Reactivo
Caso confirmado
de Dengue
TE ≤ 10 días TE > 10 días
Solicitar
segunda muestra
de suero
ELISA IgM
Reactivo
ELISA IgM
No reactivo
Caso confirmado
de Dengue
Caso descartado
de Dengue
Caso descartado
de Dengue
52. Comprende conjunto de procesos y actividades
que siguen a la fase analítica
Revisión sistemática de los resultados obtenidos.
Validación
Interpretación de Laboratorio
Liberación
Informe
Transmisión de los resultados
Almacenamiento y resguardo tanto de los resultados obtenidos,
como de las muestras analizadas.
53. “DETRÁS de cada muestra hay un paciente”
“El laboratorio debe diseñar sistemas de control
interno para verificar que la calidad alcanzada es
la especificada….Se debería poner especial
atención a la eliminación de errores en el proceso
de manejo de muestras, solicitudes de exámenes,
informes, etc”.
54. CASO CONFIRMADO CASO DESCARTADO
Se debe considerar cuando existe uno ó
más de las siguientes criterios:
• Resultado Positivo por RT-PCR.
• Resultado Positivo de aislamiento viral.
• Resultado Positivo a antígeno NS1
• Resultado Positivo de IgM en una sola
muestra.
• Evidencia de seroconversión en IgG en
muestras pareadas.
Se debe considerar cuando existe los
siguientes criterios:
• Resultado Negativo de IgM en una sola
muestra con tiempo de enfermedad
mayor a 10 días.
• Resultado Negativo IgG, en muestras
pareadas, la segunda muestra tomada
con un tiempo de enfermedad mayor a
10 días.
NOTA: Las pruebas negativas de RT-PCR, aislamiento viral o NSI,
no descartan el caso o la enfermedad.
GUIA TECNICA: GUIA DE PRÁCTICA CLÍNICA PARA LA ATENCION DE CASOS DE DENGUE EN EL PERÚ
56. La ficha clínico-epidemiológica es
importante en la interpretación de
los resultados, por que los datos
clínicos y epidemiológicos nos
ayudan a correlacionar los
resultados de las pruebas, así
como también a orientar el
diagnóstico diferencial con otras
etiologías
57. Situación 1
Primera muestra de 1-3 días
Situación 2
Primera muestra de 1-3 días
ELISA Ag NS1: Positivo
qRT-PCR: Positivo
Aislamiento viral: Positivo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo
ELISA IgG: Negativo
Segunda muestra de 15-30 días
ELISA IgM: Positivo
ELISA IgG: Negativo o Positivo débil
Interpretación
Infección reciente e infección primaria
ELISA Ag NS1: Positivo
qRT-PCR: Positivo
Aislamiento viral: Positivo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo
ELISA IgG: Positivo (cuantitativo)
Segunda muestra de 15-30 días
ELISA IgM: Positivo
ELISA IgG: Positivo
Interpretación
Infección reciente e infección secundaria
58. Situación 1
Primera muestra de 4-5 días
Situación 2
Primera muestra de 4-5 días
ELISA Ag NS1: NEGATIVO O POSITIVO
qRT-PCR: Negativo o Positivo
Aislamiento viral: Negativo o Positivo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Negativo
Segunda muestra de 15-30 días
ELISA IgM: Positivo
ELISA IgG: Negativo o Positivo débil
Interpretación
Infección reciente primaria
ELISA Ag NS1: NEGATIVO O POSITIVO
qRT-PCR: Negativo o Positivo
Aislamiento viral: Negativo o Positivo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Positivo
Segunda muestra de 15-30 días
ELISA IgM: Positivo
ELISA IgG: Positivo
Interpretación
Infección reciente y secundaria
59. Situación 1
Primera muestra de 1-5 días
Situación 2
Primera muestra de 1-5 días
ELISA Ag NS1: NEGATIVO
qRT-PCR: Negativo
Aislamiento viral: Negativo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo
ELISA IgG: Negativo
Segunda muestra de 15-30 días
ELISA IgM: Negativo
ELISA IgG: Negativo
Interpretación
No existe infección reciente por dengue.
ELISA Ag NS1: NEGATIVO
qRT-PCR: Negativo
Aislamiento viral: Negativo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo
ELISA IgG: Positivo
En segunda muestra de 15-30 días
ELISA IgM: Negativo
ELISA IgG: Positivo
Interpretación
No existe infección reciente, solo hay
evidencia de infección pasada
Hacer diagnostico diferencial
60. Situación 1
Primera muestra de >5 días
Situación 2
Primera muestra de >5 días
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Negativo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Negativo
En segunda muestra de 15-30 días:
ELISA IgM: Positivo
ELISA IgG: Negativo
Interpretación
Infección reciente primaria
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Positivo (cuantitativo)
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Positivo
En segunda muestra de 15-30 días:
ELISA IgM: Positivo
ELISA IgG: Positivo (cuantitativo)
Interpretación
Infección reciente y secundaria
61. PRUEBA RESULTADO INTERPRETACION OBSERVACION
ELISA NS1 1 -5
DIAS
POSITIVO
CASO DE DENGUE (CON
CLINICA)
INESPECIFICO: PAC. ENF.
AUTOINMUNE.
NEGATIVO NO DESCARTA CASO SE SOLICITA SEGUNDA MUESTRA
RT- PCR 1 - 5
DIAS
POSITIVO
CASO DE DENGUE (CON
CLINICA) CONTAMINACIÓN
NEGATIVO NO DESCARTA CASO SE SOLICITA SEGUNDA MUESTRA
ELISA IGM 6 -
10 DIAS
POSITIVO
CASO DE DENGUE (CON
CLINICA)
INESPECIFICO: PAC. ENF.
AUTOINMUNE, LEPT. MALARIA
NEGATIVO NO DESCARTA CASO SE SOLICITA SEGUNDA MUESTRA
ELISA IGG 1 -
5 DIAS
POSITIVO
INFECCION SECUNDARIA
DENGUE CON LA CLINICA Y PCR Y NS1
NEGATIVO
INFECCION PRIMARIA
DENGUE
Lab. Ref. Nacional de Metaxenicas Virales-INS
INSTITUTO NACIONAL DE
SALUD
63. Red de laboratorios para el diagnóstico de dengue
Puerto Maldonado
Tumbes
Cajamarca
Piura
Chiclayo
La Libertad
Huaraz
Huancayo
Lima**
Huancavelica
Ayacucho
Arequipa
Bagua
Tarapoto
Pucallpa
Iquitos
Cusco
Abancay
Puno
Tacna
1 LAB. DE REFERENCIA NACIONAL
24 LAB. DE REFERENCIA REGIONAL
ELISA (IgM y Ag.NS1)
RT-PCR
4 DISAS - LIMA
65. Objetivo:
Desarrollar el conocimiento genómico del virus del dengue en la región y con
esta base establecer una vigilancia genómica del dengue de manera
sistemática, a través de los sistemas de vigilancia integrados.
Problema:
El conocimiento sobre la diversidad genética del virus del dengue en las
Américas Región es muy limitado.
66.
67.
68.
69.
70.
71. Departamentos
AISLAMIENTO Y TIPIFICACION
VIRAL DENGUE
ELISA DE CAPTURA
IGG DENGUE
ELISA DE CAPTURA IGM
DENGUE
ELISA NS1
RT PCR EN
TIEMPO REAL
TOTAL
AMAZONAS 2 4 1 7
ANCASH 4 1 1 6
APURIMAC 1 1
AREQUIPA 1 2 5 1 9
AYACUCHO 2 4 2 8
CAJAMARCA 4 3 1 8
CALLAO 1 5 10 2 18
CUSCO 2 1 3
HUANCAVELICA 2 2 9 13
HUANUCO 18 8 4 30
ICA 2 1 3
JUNIN 61 68 1 200 330
LA LIBERTAD 4 7 1 12
LAMBAYEQUE 6 7 1 14
LIMA 2 38 83 39 162
LORETO 22 15 631 1654 442 2764
MADRE DE DIOS 1 1
PASCO 3 6 2 7 18
PIURA 48 70 1 119
PUNO 1 1
SAN MARTIN 1 1 9 12 7 30
TACNA 4 5 9
TUMBES 162 252 414
UCAYALI 2 4 5 11
Total general 23 87 1023 2142 725 4000
72. 0
500
1000
1500
2000
2500
3000
Pruebas realizadas a nivel nacional a junio 2020
AISLAMIENTO Y TIPIFICACION VIRAL DENGUE ELISA DE CAPTURA IGG DENGUE
ELISA DE CAPTURA IGM DENGUE ELISA NS1
RT PCR EN TIEMPO REAL TOTAL
73. Genotipos circulantes en Perú
SEROTIPO GENOTIPO
AÑO DE INGRESO
PERÚ
DENV-1 América/África 1990
DENV-2
América 1995
América/Asia 2001/2010
Cosmopolita 2019
DENV-3 India 2001
DENV-4 Indonesia 2001
Fuente: Instituto Nacional de Salud
78. CONCLUSIONES:
- En los últimos 5 años, se observa la circulación de los 4 serotipos de dengue, en diferentes
regiones.
- En los últimos 10 años, se evidencia la circulación del genotipo America Asia del
DENV-2.
- El 2019 se registra el ingreso del nuevo genotipo “Cosmopolita” a la Región
Madre de Dios, al Perú y a las Américas y su dispersión a Cusco y Puno
RECOMENDACIONES:
- Se debe realizar la vigilancia de la dispersión del genotipo “Cosmopolita” del DENV 2 y el
genotipo América del DENV 1.
- Es importante fortalecer y sistematizar la Vigilancia de Serotipos y Genotipos de los 4 serotipos
de dengue en el Perú.
