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CURSO DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN BOVINOS Ruben Dario Mendoza
Profesores ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
TEMAS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Transferências de embriões bovinos realizadas   no Brasil no período de 1990-1999
TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES NO BRASIL Crescimento de 1000% 1992     14.000 TE 2003     130.000 TE     40.000 FIV      95% bovino de corte Fonte: SBTE 2003 Mundo = 600.000 TE 1 o . EUA      230.000 TE 2 o  e 3 o . Brasil e Japão     130.000 TE
 
IETS Newsletter, Diciembre 2005
IETS Newsletter, Diciembre 2005
www.iets.org
 
 
 
IETS Newsletter, Diciembre 2006
IETS Newsletter, Diciembre 2006
IETS Newsletter, Diciembre 2006
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
IETS Newsletter, Diciembre 2005
 
 
 
 
Selección de Donantes
 
 
 
Selección de Donantes ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Factores inherentes al animal y a su ambiente. Factores relacionados al tratamiento de superovulación FACTORES QUE AFECTAN LA RESPUESTA SUPEROVULATORIA
FACTORES QUE AFECTAN LA TE ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Respuesta SPO Año 1986 2048 Colecciones 11,5/donante Año 2001 1156 Colecciones 12,7/donante Looney, datos no publicados
Variabilidad en la Respuesta Superovulatoria ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Looney et al., 1986
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Factores que afectan la respuesta superovulatoria
Number of donor animals necessary to detect a difference in two superovulation protocols ,[object Object],[object Object],23 3 50 2 199 1 792 0.5 No. of donors required per treatment group Difference in the no. of embryos
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Factores que afectan la respuesta superovulatoria
Gonadotropins for Superovulation ,[object Object],[object Object],[object Object]
Superstimulation with eCG ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
PMSG vs PMSG+MoAB 600 500 400 300 200 100 ESTRADIOL pg/ml Days from treatment 0 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Superovulation with eCG & Antiserum ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Extractos de Pituitaria ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
 
Superstimulation Treatment with p-FSH (Folltropin–V*) ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Factores que afectan la respuesta superovulatoria
Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response Ova/embryos Dose n CL Foll Total Fert. Trans.  100 mg 11 3.6 a 1.0 0.8 a 0.4 a 0.3 200 mg 11 10.7 b 3.8 4.8 b 3.6 b 1.1 400 mg 11 20.3 bc 3.7 6.8 b 5.1 b 2.6 800 mg 11 22.9 c 4.0 6.3 b 4.0 b 2.2   ( abc  P<0.05 )   Mapletoft et al., 1988
Tratamiento de Superovulación en Angus y Hereford (Vacas) ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Dosis Total: 320 mg NIH-FSH-P1
Tratamiento de Superovulación en Vaquillas Angus y Hereford  y Vacas Brangus y Braford ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Dosis Total: 200 mg NIH-FSH-P1
Tratamiento de Superovulación en Brangus y Braford (Vacas) ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Dosis Total: 260 mg NIH-FSH-P1
 
Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response in Brahman Cows Ova/embryos Dose n Year Total Transferable  140 mg 49 2003 9.39 9.20 171 mg 96 2002 9.50 9.02 320 mg 80 2001 9.00 8.55 G. Uribe Mejía, 2004
Tratamiento de Superovulación en Vacas Angus y Hereford  ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Dosis Total: 500 UI
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Factores que afectan la respuesta superovulatoria
IM vs SC Folltropin in Beef Heifers ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Single vs Multiple Injections of Folltropin ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
 
Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response in a single dose treatment Ova/embryos Dose n CL Total Fert. Trans.  200 mg 11 3.6 a 1.8 a 1.5 a 1.2 a 400 mg 12 23.3 b 15.2 b 11.8 b 9.5 b 600 mg 11 25.0 b 12.8 b 7.1 b 5.7 b 800 mg 11 13.9 b 10.2 b 6.1 b 5.3 b   ( abc  P<0.05 )   Bo et al., 1994
Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response Ova/embryos Dose n CL Foll Total Fert. Trans.  100 mg 11 3.6 a 1.0 0.8 a 0.4 a 0.3 200 mg 11 10.7 b 3.8 4.8 b 3.6 b 1.1 400 mg 11 20.3 bc 3.7 6.8 b 5.1 b 2.6 800 mg 11 22.9 c 4.0 6.3 b 4.0 b 2.2   ( abc  P<0.05 )   Mapletoft et al., 1988
Single SC Dose Folltropin (Neck)  Beef Cows ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],ab   P<0.05
 
 
Superovulation of Holstein Cows with a “Split-dose” Folltropin ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
FSH/LH Ratio & Superovulations ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Factores que afectan la respuesta superovulatoria
FSH/LH Ratio and Superovulation Bos taurus ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
FSH/LH Ratios & Superovulation of  Bos indicus  (Overall) ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
120 0 30 90 60 200 100 50 % Response % Dose No. of CL 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Ova/Embryos 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Fert. Ova 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Trans. Embryos % Response % Response % Response Foll. hMG FSH-P
Dose of FSH-P in Nelore Cows ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],ab  P<0.05
Heat Stress & Superovulation: Holstein cows ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Cold Stress & Superovulation:  Bos indicus ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Stress and Superovulation ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Single vs Multiple Injections of Folltropin in Brahman Cows ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
FSH-P Lot Numbers ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Factores que afectan la respuesta superovulatoria
Variabilidad en la Respuesta Superovulatoria ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Looney et al., 1986
[object Object],[object Object]
Day of the Estrous Cycle and Superovulatory Response ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 10 8 6 4 Follicular Diameter (mm) 0  1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
Animais jovens (20.000-30.000 oocitos após puberdade) Oocito primário Estroma + 2 camadas  foliculares Ovulação Oocito secundário Produção de Progesterona Regreção do CL (antigo CL) (> %) Folículo primário Folículo terciário Folículo secundário Folículo atresico Corpus Albicans Corpo lúteo (CL) Corpo hemorrágico Ruptura Folicular Folículo de Graaf Ovum (1N) (2N) Produção de estrógeno
Características Foliculares 50 to 200  Grupo 1: Numero de  Folículos en Crecimiento Monniaux et al., 1983 > 200 Grupo 2:
Singh et al., 2003
Singh et al., 2003
Características Foliculares y Respuesta Superovulatoria Baja 50 to 200  Grupo 1: Respuesta Superovulatoria Numero de  Folículos en Crecimiento Monniaux et al., 1983 > 200 Grupo 2: Baja Alta
Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 10 8 6 4 Follicular Diameter (mm) 0  1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
Superovulatory Response and Wave Emergence ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Nasser et al.,  1993
Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 10 8 6 4 Follicular Diameter (mm) 0  1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
Requisitos para la Superovulación ,[object Object],[object Object]
Superovulatory Response and Wave Emergence ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Nasser et al.,  1993
[object Object],[object Object],Requisitos para la Superovulación
Control del desarrollo folicular ,[object Object],[object Object],[object Object]
Transvaginal ultrasound-guided follicle ablation Bergfelt et al., 1994
Ablación Folicular Transductor Aguja Ecógrafo Bomba Tubo de colección
Ablation  ~ 1.5 . days new wave emergence Bergfelt et al., 1994 Follicle Size  Days Follicular Ablation
Superovulatory Response After  Aspiration of the Dominant Follicle    Dominant Follicle   Aspiration yes no n 11 14 13  CL 7.7 b 19.3 b 21.6 b Ova/Embryos Total  collected 5.1 a 17.4 b 18.7 b Fertilized 2.4 a 12.6 a 12.9 b Transferable 1.0 a 10.3 b 10.1 b ab - P< 0.01   Bungarts and Niemann, 1994
Superovulatory Response After Follicle Ablation  Transf. Emb. n Transf. Emb. n 0.9 10.1  0.6 14  (no dom. fol.) <0.001 6.0   0.6 112 8.9  0.6 112 Hill & Kuehner, 1996 <0.01 1.0   0.1 11  (dom. fol.) 10.1  0.6 13 Bungarts & Niemann, 1994 0.56 5.3   0.4 87 5.0  0.4 87 Shaw and Good, 2000 <0.05 2.3   0.8 87 4.6  0.9 13 Kim et al., 2001 P value No Ablation Ablation Author
Superovulatory Response After Follicle Ablation  Bergfelt et al., 1996 Means and percentages were not different. ab - Reduced variation associated with number of fertilized ova (P<0.1) and number of transferable embryos (P<0.03) in the ablation plus progestogen group.   Control Ablation alone Ablation plus progestogen n 16 17 17 CL (variance) 19.7 ±2.4 (124) 14.6 ±2.7 (235) 18.0 ±2.6 (221) Heifers with <2 CL 1 2 0 Total ova/embryos (variance) 10.9 ±2.3 (82ab) 9.4 ±2.0 (188b) 10.7 ±1.8 (69a) Fertilized ova (variance) 8.3 ±2.2 (76ab) 7.3 ±2.1 (170b) 7.6 ±1.3 (50a) Transferable embryos (variance) 6.6 ±2.1 (70a) 5.8 ±2.2 (75a) 5.9 ±1.1 (38b)
Follicle Ablation and Superovulation Ova/Embryos Group n CL Total Fertilized Transferable Ablation of 20 23.3 11.0 9.4 8.2 2 largest foll. Ablation of all foll    5 mm 18 17.9 12.2 10.1 8.4 Means did not differ Baracaldo et al., 2000
Superstimulation - Follicle Ablation Day 0  AM  - Ablate 2 largest follicles - Insert CIDR  Day 2  AM  - Initiate FSH treatments Day 4  AM  - PGF PM  - PGF & remove CIDR Day 6 PM  - AI Day 7 AM  - AI Day 13 Embryo collection
Control del desarrollo Folicular ,[object Object]
Progestágenos utilizados en Superovulación de Bovinos ,[object Object],[object Object],PRID  CIDR-B    DIB  TRIU-B  CUE-MATE
Estrógenos ,[object Object],[object Object],[object Object]
12 10 8 6 4 LH Progestágenos y estradiol-17    ~ 4 . días nueva onda folicular Bo et al., 1994 Diámetro Folicular (mm) Días Sincronización del desarrollo folicular FSH
Superovulación con Progestágenos y Estradiol ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Tratamiento de Superovulación ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Superovulacion con Progestagenos + Estradiol-17  vs Tradicional
Tratamiento de Superovulación en Vacas de Carne Británicas ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
P4+Estradiol-17  vs  Tradicional (8 to 12 d pos  estro) Adaptado de: Bo et al., 1995, 1999; y Nigro et al., 2002
Follicle Ablation and Superovulation Ova/Embryos Group n CL Total Fertilized Transferable Ablation of 20 23.3 11.0 9.4 8.2 2 largest foll. Ablation of all foll    5 mm 18 17.9 12.2 10.1 8.4 E-17   + P4 23 20.1 8.5 7.5 6.5 Means did not differ Baracaldo et al., 2000
[object Object]
Niveles plasmáticos de estradiol 5 mg E-17   im 5 mg EB im
17   estradiol Benzoato de estradiol Valerato de estradiol Cipionato de estradiol Dias após tratamento 1  2  3  4  5  6  7  8  9
EB im vs EB en cápsulas intravaginales Estradiol-17  Horas post tratamiento
EB VS EB+P4 y Onda Folicular Moreno et al., 2001
EB + P4 and SPO ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
SPO con EB o E-17B
Tratamiento de Superovulación ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],2,5 mg EB + 50 mg P4 2,5 mg  E-17   + 50 mg P4
EB vs E-17B ab - P<0.05
Tratamiento de Superovulación ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],2,5 mg  E-17   + 50 mg P4   2,5 mg EB + 50 mg P4
Superovulación con Progestágenos y Estradiol ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Día  7 AM - PGF  2a PM -  Quitar Progest. Día  9 AM – estrus – AI? PM - AI Día 10 AM - AI Día 16 Colección de Embriones ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],AM - PGF  2a PM -  Quitar Progest. Día  8 AM – estrus – AI? PM - AI Día  9 AM - AI Día 15 Colección de Embriones
E-17   + EB Caccia et al., 2001   E-17  +PGF D6 E-17  +PGF D7 EB+PGF D6 EB+PGF D7 n 27 26 27 25 Ova/embriones totales 12,2  1,4 13,2  2,5 11,1  1,2 10,7  1,5 Fertlizados 8,9  1,2 7,2  1,5 8,4  1,3 7,7  1,4 Grado 1  4,7  0,9 4,0  1,1 4,4  0,8 3,4  0,8 Grado 2 y 3 2,6  0,5 2,2  0,5 2,2  0,4 2,1  0,5
PGF  D6 PGF D7 AI AI AI AI
OVULACIONES
% de ovulaciones. Grupo 1 (PGF D6; ov 77)
% de ovulaciones. Grupo 2 (PGF D7, ov 29)
Ovulaciones por vaca. Grupo PGF D6.
Ovulaciones por vaca. Grupo PGF D7.
% de ovulaciones según la cantidad de CL
Tratamiento de Superovulación ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],2,5 mg EB + 50 mg P4 2,5 mg  E-17   + 50 mg P4
Semen Fresco vs Congelado  39,77 136 42,40 145 342 C * 62,16 368 17,74 105 592 F * TOTAL 36,09 48 38,35 51 133 C F C F C F Semen 63,07 222 13,64 48 352 Genepoel 47,30 35 52,70 39 74 74,24 49 12,12 8 66 Van der Merwe 39,26 53 40,74 55 135 55,75 97 28,16 49 174 AMF % Trans. % UFOs O/E Tot. Lugar De la Rey, ump. 2003 * P<0,0001
 
Brangus vs Angus  Comienzo de Onda ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
DIB D-1 D8 PGF 2  EB+P4: EB (2mg) +P4 (50mg P4) EB 2 mg D0: EB (2mg) D9 D0 PGF 2  EB 3 mg D0 : EB (3mg) EB 2 mg D1 : EB (2mg) EB 3 mg D1 : EB (3mg) D12 D1 EB US 24 / 24 h 12 / 12 h Nelore
Sá Filho et.al (2005) *
Tratamiento de Superovulación en Brangus y Braford ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],2,5 mg EB + 50 mg P4 2,5 mg  E-17   + 50 mg P4
Tratamiento de Superovulación ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],2,5 mg  E-17   + 50 mg P4   2,5 mg EB + 50 mg P4
Implantes subcutáneos ,[object Object],[object Object]
12 10 8 6 4 N + EV ~ 5,5 . días (3 – 8) Bo et al., 1991 Diámetro Folicular (mm) Días Valerato de Estradiol  y desarrollo folicular 0 9
E-17    vs EV  Comienzo de la Nueva Onda Folicular  ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],means abc = P<0.05 variances xy = P<0.01 Martinez et al ., 1996
EV vs E-17B ab - P<0.05 Mapletoft et al., 1999
EV vs E-17B abcd  - Medias (   SEM) o porcentajes con distinta letra difieren (P<0,05).   Nigro et al., 2001   Tradicional E17  +CIDR-B EV+CIDR-B EV+SMB Razas de Carne (n) 945 82 247 69 Ova/emb. totales 13,4  0,3ª 12,6  0,9ª 14,5  0,6 ab 16,4  1,2 b Emb. Transf 6,9  0,2 7,3  0,6 6,7  0,4 6,5  0,9 % Emb. Transf. 51,5 b 58,3 a 45,8 c 39,9 d
Effect of Dose of EV on FWE in CIDR-treated Cows ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Mapletoft et al., 2004 ab   P<0.012 xy  P<0.0006
< 0.05 2 - 8 z 2 - 6 y 2 - 4 x Range < 0.001 5.1 ± 0.4 c 3.7 ± 0.3 b 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Overall  19 20 20 N < 0.05 2 - 6 y 2 - 6 xy 2 - 4 x Range < 0.05 4.0 ± 0.5 b 3.1 ± 0.4 ab 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Cows 10 10 10 N < 0.05 3 - 8 y 3 - 6 xy 2 - 3 x Range < 0.001 6.1 ± 0.6 c 4.2 ± 0.3 b 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Heifers  9 10 10 N P-Value (F Test) EV+Nor ½ EV+Nor EB Parameters Class
Pre-treatment with eCG prior to FSH administration
12 10 8 6 4 Progesterone device + P4 and EB ~ 4 . days Wave emergence Caccia and Bo, 1998 Folicular diameter  (mm) Days Synchronization of Follicular Wave Emergence FSH
0 Follicle Size (mm) ≥ 4 1-3 -2 2 4 6 8 10 -3 Wave emergence Wave emergence -66 -66 Days from wave emergence Hours from wave emergence Dynamics of follicles ≥1 mm Adams et al.
12 10 8 6 4 2 Progesterone device + P4 and EB ~ 4 . days Wave emergence Folicular diameter  (mm) Synchronization of Follicular Wave Emergence FSH
CIDR-B+eCG+FSH ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],CIDR eCG 1
Priming with 300 UI de eCG ab - P<0.05
 
500 UI eCG on Day 2
Synchronization of FWE for Superstimulation ,[object Object],[object Object],[object Object]
GnRH and Follicular Dynamics 4 8 12 16 Day 9 Day 7 mm Day 0 Day 1-2 GnRH
4 8 12 16 Day 9 Day 7 mm Day 0 Day 1-2 GnRH No OV GnRH and Follicular Dynamics
FA GnRH n 19 18 No. of CL 13.9 10.1 Total Ova/Embryos 9.6 5.3 (%) (65) a (53) b Fertilized Ova  5.0 a   2.9 b (%)  (48) (55) Trans. Emb. 3.4 a   1.8 b (%)  (33) (38) Superovulatory response after follicular ablation (FA)  or GnRH Deyo et al., 2001 ab  (P < 0.05)
Alternative: Synchronize Ovulation and Begin Gonadotropin Treatments at the Beginning  of the First Follicular Wave
Superovulatory Response and Wave Emergence ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Nasser et al.,  1993
TREATMENTS  FIRST WAVE GROUPS FSH D15 PGF AM &PM CIDR D10 D0 D5 D9 BE 2mg + P4 (50 mg) PGF 2á LH Group 1 (n= 6) D16 PM D17 AM D17PM D23 IA IA E. Collection LH D11 Ov.
TREATMENTS  FIRST WAVE GROUPS CIDR D10 D0 D5 D9 BE 2mg + P4 (50 mg) PGF 2á LH Group 2 (n= 6) D16 PM D17 AM D17PM D23 IA IA E. Collection LH D11 Ov. FSH D15 PGF AM &PM CIDR
TREATMENTS  CONTROL GROUP CIDR D4 D0 BE 2mg + P4 (50 mg) Group 3(n= 6) FSH D8 PGF AM &PM D9 PM D10 AM D10PM D17 IA IA E. Collection LH
Superstimulation of the First Wave (a,b P<0,05) Nasser et al., 2002 (IETS) 2.5  1.2 2.5    1.6 7.0  2.7 Unfertilized ova 5.1  1.7 b 5.8    1.4 b 0.0    0.0 a Freezable embryos 6.6  2.0 b 8.0    1.8 b 0.2    0.2 ª Transferable embryos 9.2  2.3 11.7    2.9 8.3    2.9 Total ova/embryos 14.5    2.5 12.7    2.7 15.3    4.3 CL 23.0  3.7 18.5    4.5 21.5   6.6 Follicles > 8 mm at FTAI 6 6 6 N EB+P4 Plus CIDR First Wave Plus CIDR First Wave  No CIDR Groups
Nasser et al SBTE  (2005) Superstimulation of the First Wave
Cue-Mate D12 AM D0 PM D10PM PGF LH FIRST WAVE GROUP WITH CUE-MATE Cue-Mate PGF FSH D18 AM PGF AM &PM D19 AM D19 PM D20AM D26 IA IA E. Collection LH D13 PM Ov.
Preliminary Results Table 1.  All donors’ main effects Means did not differ (P>0.28). 4,8±1,3 4,1±1,2 5,5±1,4 7,2±1,4 18 Heifers 5,1±1,0 4,3±1,0 6,7±1,4 10,6±1,6 29 Cows 4,1±1,2 3,4±1,0 5,2±1,4 8,0±1,6 22 Wave 1 5,8±1,1 5,0±1,0 7,2±1,4 10,4±1,6 25 Control Gr.1+2+3 Gr.1+2 Fertilized. Ova-embryos. N Main effects
CIDR-B+eCG+FSH ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Implante
Priming con 300 UI de eCG ab - P<0.05
Priming con 500 UI eCG
Priming con 500 UI eCG ab - P<0.05
RESULTADOS ,[object Object],[object Object],[object Object],Embriones Grado 1 3-4 Embriones Grado 2 1-2
 
Momento de la Ovulacion en Vacas Superestimuladas Pablo M. Chesta   1 Instituto de Reproducción Animal Córdoba (IRAC) ,  2 Universidad Católica de Córdoba,  3 Universidad Nacional de Córdoba
1. Esquema tradicional de superovulação 2. Superovulação com sincronização da onda de crescimento folicular 3. Superovulação com sincronização da onda de crescimento folicular e da ovulação Detecção de  estro FSH (12/12h) Detecção de  estro D-0 D-10 D-13 D-0 D-7 PGF 2  Colheita de  embriões PGF 2  Detecção de  estro FSH (12/12h) Detecção de  estro D-0 D-4 D-7 D-8 D-15 Colheita de  embriões PGF 2  P4 BE + P4 Detecção de  estro FSH (12/12h) Detecção de  estro D-0 D-4 D-7 D-8 D-15 Colheita de  embriões PGF 2  P4 LH BE+P4
Superovulation Treatment with  Progestogen and Estradiol ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
PGF  D6 AI AI
Time of Ovulation in Relation to Superovulatory Response AI AI Ov. Interval 0-11 h: 8/13 (62%) 12/23 h: 3/13 (23 %) 24/35 h: 2/13 (15%)
Time of Ovulation in Relation to Superovulatory Response AI AI
Individual Data. Group PGF D6
Right ovary Left ovary SUPEROVULATORY RESPONSE
Superovulação de doadoras para IATF PGF 2  2 6 10 14 Dia 8 Dia 7 mm Dia 0 Dia 4 BE + P4 LH P4 FSH P4 LH  E2
PGF 2  2 6 10 14 Dia 8 Dia 7 mm Dia 0 Dia 4 BE + P4 LH or GnRH P4 FSH P4
OBJETIVO GENERAL ,[object Object]
Materiales y Métodos ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
DIB 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
0  4  6  7  8  9  15 DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
0  4  6  7  8  9  15 Grupo: Día 7 Control DIB 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA FSH 2x4 Colecta de embriones DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
0  4  6  7  8  9  15 DIB Grupo: Día 7 GnRH 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones Grupo: Día 7 Control DIB 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA FSH 2x4 Colecta de embriones DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
Ultrasonografía
Ultrasonografía 0  4  6  7  8  9  11  15 D 0: ciclicidad c/ 8 hs 1 er PGF: H 0 D 8 - 11: determinación de ovulaciones Ovulación: desaparición de Folículos > 10 mm.
Cantidad de ovulaciones y hora media de ovulación para donantes Aberdeen Angus superestimuladas con Folltropin-V. ab  valores con distintos superíndices difieren (P <0,05) Chesta et al., 2005. 72,8  b 22,5  ab 58,6  b 7,1  a 69 – 96 67 – 83 73 – 96 74 – 82 81,3  +  3,0 77,4  +  1,5 86,3  +  2,7 79,7  +  0,9 12,5  +  2,8 14,7  +  1,1 12,8  +  2,0 15,7  +  2,2 8 10 8 8 NO SI NO SI 6,5 6,5 7 7 Varianza Rango Media  +  EE Hora Media de Ovulacón Cantidad de ovulaciones Media  +  EE N GnRH Duración del tratamiento con DIB 67,9  a 16,2  b 69 – 96 67 – 83 83,8  +  2,0  a 78,4  +  0,9  b 12,6  +  1,6 15,1  +  1,1 16 18 NO SI 45,8 42,2 67 – 96 73 – 96 79,1  +  1,6 83,0  +  1,6 13,7  +  1,3 14,3  +  1,5 18 16 6,5 7 Efectos Principales
 
51.6 33.5 78.2 ± 1.4 81.2 ± 1.1 15.9 ± 1.3 18.0 ± 1.6 27 27 Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) 30.6 53.9 78.1 ± 1.1 c 81.5 ± 1.4 d 17.3 ± 1.4 16.6 ± 1.6 28 26 Yes No Main effects 50.2 b 53.8 b 53.0 b 7.6 a 79.4 ± 2.0 77.1 ± 2.0 83.6 ± 2.0 79.1 ± 0.7 15.2 ± 2.2 16.6 ± 1.6 18.1 .± 2.3 17.9 ± 2.4 13 14 13 14 No Yes No Yes Day 6.5  (P12) Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) Day 7 (P24) Variance Mean Mean Time of Ovulation (h) Ovulations N GnRH (Day 8) Time of DIB removal
4.8 ± 0.7 5.5 ± 0.7 6.8 ± 0.9 8.7 ± 1.0 9.6 ± 1.2 12.2 ± 1.4 46 49 Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) 4.9 ± 0.7 5.4 ± 0.7 7.4 ± 1.0 8.2 ± 1.0 9.8 ± 1.2 12.0 ± 1.4 45 50 No Yes Main effects 4.2 ± 0.8 5.4 ± 1.1 5.6 ± 1.2 5.4 ± 0.9 6.6 ± 1.3 7.0 ± 1.4 8.2 ± 1.4 9.2 ± 1.4 8.8 ± 1.6 10.4 ± 1.8 10.8 ± 1.8 13.3 ± 2.1 23 23 22 27 No Yes No Yes Day6.5  (P12) Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) Day 7 (P24) Grade 1 and 2 embryos Fertilized ova Total ova/embryo N GnRH (Day 8) Time of DIB removal
Distribución de las ovulaciones por Grupo. X 6,5. Control X 7. Control X 6,5. GnRH X 7. GnRH IA 98 %
Gráfico 3.Distribución de las ovulaciones evaluando      la aplicación de GnRH (%). IA GnRH: 95,5 % Control: 81,3 % P < 0,0001
Ovocitos/embriones totales colectados, embriones y embriones transferibles en donantes Brangus. a,b (P = 0,077) Chesta et al., 2005. 4,7  +  1,2 7,3  +  1,3 5,7  +  1,4  a 9,8  +  1,5  b 10,3  +  1,9 14,7  +  2,7 18 20 6,5 7 7,0  +  1,4 5,4  +  1,1 8,3  +  1,7 7,5  +  1,4 11,6  +  2,3 13,4  +  2,5 17 21 NO SI Efectos Principales 6,0  +  1,8 3,8  +  1,5 7,9  +  2,2 6,9  +  1,6 7,1  +  2,5 4,6  +  1,6 9,4  +  2,4 10,2  +  2,1 10,5  +  3,1 10,2  +  2,5 12,6  +  3,6 16,3  +  4,1 8 10 9 11 NO SI NO SI 6,5 6,5 7 7 Embriones Grado 1,2 y 3 Media  +  EE Embriones  Fertilizados Media  +  EE Ovocitos/embriones Totales Media  +  EE n GnRH Duración del tratamiento con DIB
Ovocitos/embriones totales colectados, fertilizados y transferibles en donantes de embriones Angus.   Las medias no difieren (P>0,1) Chesta et al., 2005. 4,8  +  0,8 4,9  +  0,9 6,1  +  0,9 7,3  +  1,4 7,7  +  1,2 9,3  +  1,5 24 24 6,5 7 4,1  +  0,7 5,6  +  0,9 5,9  +  1,0 7,5  +  1,3 8,0  +  1,2 9,1  +  1,4 24 24 NO SI Efectos Principales 4,1  +  1,0 5,6  +  1,2 4,0  +  1,1 5,7  +  1,5 5,9  +  1,4 6,4  +  1,3 6,0  +  1,4 8,5  +  2,3 7,7  +  1,9 7,7  +  1,4 8,2  +  1,5 10,3  +  2,5 13 11 11 13 NO SI NO SI 6,5 6,5 7 7 Embriones Grado 1,2 y 3 Media  +  EE Embriones Fertilizados Media  +  EE Ovocitos/emb.  Totales Media  +  EE N GnRH Duración del tratamiento con DIB
[object Object],[object Object],0bjetivo
0  4  7  8  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h  Colecta de embriones DIB PGF Grupo: X 7.5. GnRH 24 0  4  7  8  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h  Colecta de embriones DIB PGF Grupo: X 7.5. GnRH 12 DIB 0  4  7  8  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h  Colecta de embriones PGF Grupo: X 7. GnRH 24
ab P<0.0001 cd P=0.03 Mean  +  SEM 4.4 c 5.0 c 19.6 d 80.0 – 86.1 78.9 – 86.5 82.0 – 98.8 81.1    0.6 a 81.7    0.6 a 91.1    1.3 b 10.0    1.3 11.7    1.9 12.1    2.0 11 13 13 Day 7. GnRH Day 8 Day 7.5. GnRH Day 8 Day 7.5. GnRH Day 8.5 Variance Range Mean  +  SEM Time of Ovulation (h) Ovulations N Grupo
 
4.2    1.0 4.3    0.7 4.5    0.8 6.4    1.2 5.9    0.8 6.1    1.0 9.1    1,4 9.4    1.3 8.4    1.2 33 36 36 8 8 8.5 Day 7 Day 7.5 Day 7.5 Grade 1 and 2 embryos Fertilized ova Total ova/ embryo N Day of GnRH Time of DIB removal (d)
Mean number of ova/embryo collected, fertilized ova and transferable embryos in superstimulated Red Angus donors treated with progesterone releasing devices (DIB) for 7 or 7.5 d with GnRH treatment on Day 8 or Day 8.5. Means did not differ (P>0.1). 3.2    0.8 3.4    0.6 3.5    0.8 4.6    1.0 4.5    0.8 5.0    0.9 7.4    1.2 6.8    1.0 7.3    1.3 25 27 26 8 8 8.5 Day 7 Day 7.5 Day 7.5 Grade 1 and 2 Embryos  Fertilized Ova Total Ova/Embryo Collected N GnRH Time of DIB renoval (d)
Mean number of ova/embryos collected, fertilized ova and transferable embryos in superstimulated Brangus donors treated with progesterone releasing devices (DIB) for 7 or 7.5 d with GnRH treatment on Day 8 or Day 8.5. Means did not differ (P>0.1). 7.1    3.3 6.8    1.8 7.0    1.9 11.7    3.4 10.2    1.8 9.0    2.3 14.5    3.7 17.4    3.3 11.3    2.6 8 9 10 Day 8 Day 8 Day 8.5 Day 7 Day 7.5 Day 7.5 Grade 1 and 2 Embryos  Fertilized Ova Total Ova/Embryo Collected n GnRH Time of DIB removal
Control CIDR 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF FSH (7 t) EC IA 12 and 24 h after estrus Heat-Watch CIDR LH (12.5 mg Armour, Lutropin-V) 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA pLH FSH (7 t.) EC
IA 12 and 24 h after estrus (Heat-Watch) vs FTAI 12 and 24 after pLH Larkin et al., 2006 9.6ª 11.6ª 21.4ª 57.3ª (53-62) 26.3ª (19-36) LH  (n=10) 7.8ª 11.0ª 28.5ª 58.5ª (51-69) 25.1ª (17-32) Control (n=10) Viable Total Ova No. ovulations Ovulation Time (h) (range) Estrus post CIDR Removal (h) range Protocol
Materiales y Métodos ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
0  4  7  8  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h  Colecta de embriones DIB PGF Grupo: D 7,5. GnRH 24 0  4  7  8  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h  Colecta de embriones DIB PGF Grupo: D 7,5. GnRH 12 DIB 0  4  7  8  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h  Colecta de embriones PGF Grupo: D 7. GnRH 24
Distribución de las ovulaciones por Grupo
SOV EM TEMPO FIXO EM VACAS HOLANDESAS DE ALTA PRODUÇÃO
Grupo P24 LH48 (n=8) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 M PGF 2  Colheita  De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 M Colheita  De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® D0 BE D0 BE Grupo P24 LH60 (n=8) D9 M IA LH 24 h D8 T D9 T IA D8 T IA D8 M D9 M IA LH 12 h
Grupo P36 LH48 (n=8) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 T PGF 2  Colheita  De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 T Colheita  De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® D0 BE D0 BE Grupo P36 LH60 (n=8) D9 M IA LH 24 h D8 T D9 T IA D8 T IA D8 M D9 M IA LH 12 h
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica 3 a  Réplica 4 a  Réplica Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de todas as doadoras superovuladas  (35d) (35d) (35d) Grupo P24/LH48 Grupo P24/LH60 Grupo P36/LH60 Grupo P36/LH48 Grupo P24/LH60 ( 238; 258; 308  ) Grupo P36/LH60 ( 238; 258; 308  ) Grupo P24/LH48 ( 238; 258; 308  ) Grupo P36/LH48 ( 238; 258; 308  ) Grupo P36/LH60 ( 271; 285; 296) Grupo P24/LH60 ( 271; 285; 296) Grupo P36/LH48 ( 271; 285; 296) Grupo P24/LH48 ( 271; 285; 296) Grupo P24/LH60 ( 266; 275; 300 ) Grupo P36/LH60 ( 266; 275; 300 ) Grupo P24/LH48 ( 266; 275; 300 ) Grupo P36/LH48 ( 266; 275; 300 ) Grupo P36/LH60 ( 259; 303; 304 ) Grupo P36/LH60 ( 259; 303; 304 ) Grupo P36/LH48 ( 259; 303; 304 ) Grupo P24/LH48 ( 259; 303; 304 )
 
 
 
Tabela - Efeito do tempo de permanência do dispositivo intravaginal de progesterona (24 ou 36 h) e do momento da aplicação do LH (48 ou 60 h) após a aplicação de prostaglandina em vacas Holandesas de alta produção superovuladas, Poços de Caldas, MG, 2005 Martins et al SBTE  (2005)
52.3 81.3 ± 1.5 7.6 ± 1.1 22 Day 7.5 (P36) 62.7 81.0 ± 1.7 7.3 ± 1.2 21 Day 7 (P24) 52.3 83.9 ± 1.6 b 8.9 ± 1.3 d 21 Day 8.5 48.2 78.6 ± 1.5 a 6.1 ± 0.9 c 22 Day 8 Main effects 24.9 84.9 ± 1.5 9.2 ± 1.8 11 Day 8.5 Day 7.5 (P 36) 56.9 77.8 ± 2.3 5.9 ± 1.1 11 Day 8 Day 7.5 (P36) 85.7 82.7 ± 2.9 8.6 ± 1.9 10 Day 8.5 Day 7 (P24) 42.8 79.5 ± 2.0 6.2 ± 1.4 11 Day 8 Day 7 (P24) Variance Mean Interval to ovulation (h) Ovulations Mean  N pLH Day of DIB removal
Gráfico-  Distribuição das ovulações de acordo tempo de permanência do dispositivo de progesterona (24 ou 36 após PGF) em vacas Holandesas de alta produção ( Bos taurus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo Martins et al., 2005 ** Teste Bartlett (P=0.42)
Gráfico-  Distribuição das ovulações de acordo com o momento da administração do LH (48 ou 60 após a PGF) em vacas Holandesas de alta produção ( Bos taurus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo Martins et al., 2005 ** Teste Bartlett (P=0.09)
 
Pietro Sampaio Baruselli Prof. Dr. Departamento de Reprodução Animal Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Universidade de São Paulo. “ Ultimas Novidades em TETF e IATF
ADEQUAÇÃO DO MOMENTO DA RETIRADA DO DISPOSITIVO DE PROGESTERONA PARA IATF EM EM PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO DE VACAS NELORE ( Bos indicus )
PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM IMPLANTES DE PROGESTERONAE  INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH PARA IATF PGF2  (M e T)  FSH  (133 mg Folltropin) Dispositivo de P4 BE (2,5mg) P4 (50mg) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Grupo 1: Retirada D7 (M; 24h) LH  (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 2: Retirada D7 (T; 36h) Estro D-8
2,2    3,5 5,2    8,7 Não fertilizados 5,2    6,1 6,7    4,8 Embriões degenerados 10,3    5,9 9,3    7,5 Embriões viáveis 17,7    11,7 21,2    15,1 Total de estruturas 63,4 69,1 Taxa de recuperação (%) 10 10 Número de animais P36 P24 Tabela –  Resultados (média    desvio padrão) dos tratamentos superovulatórios P24 e P36 em doadoras de embriões da raça Nelore. Campo Grande, 2000.  Os valores não diferem estatisticamente (P>0,05)  ZANENGA et al., 2003
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
HIPÓTESE   É possível superovular doadoras  Bos taurus indicus  com reduzidas doses de FSHp sem comprometimento da resposta superovulatória, da quantidade e da qualidade dos embriões produzidos
Doadoras de embrião da Fazenda Dinorá - Cornélio Procópio - PR Med. Vet. Rubens Cesar Pinto
Doadoras de embrião da Fazenda Pontal de Ouro - Campo Grande - MS Med. Vet. Luiz Fernando Tonissi Nasser
PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO INDUZINDO A OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH (FOLLTROPIN) PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T)  FSH ?  (Follptropin) Dispositivo P4 BE (2,5mg + 50mg P4) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Retirada D7 (M; 24h) LH  (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 1: 100mg Grupo 2: 133mg Grupo 3: 200mg
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica 3 a  Réplica Empregou-se o mesmo acasalamento por doadora em todas as réplicas  (60d) (60d) Grupo 100mg Folltropin Grupo 133mg Folltropin Grupo 200mg Folltropin Grupo133mg (n=8) Grupo 100mg (n=8) Grupo 200mg (n=8) Grupo 100mg (n=8 ) Grupo 133mg (n=8 ) Grupo 200mg (n=8 ) Grupo 100mg (n=7) Grupo 133mg (n=7) Grupo 200mg  (n=7)
Tabela . Resposta superovulatória (média    desvio padrão) de vacas Nelore superovuladas com diferentes doses de FSH (Folltropin-V) e inseminadas em tempo fixo. São Paulo, 2002. 5,7    7,0 4,4    3,2 6,4    6,5 Embriões congeláveis 6,5    7,7 5,6    4,1 7,7    7,4 Embriões transferíveis 10,6    8,6 9,9    7,0 10,0    7,8 Total de estruturas 70,8     29,7 81,6     34,8 77,5     31,1 Taxa de recuperação (%) 92,6     21,0 84,5     14,3 85,6     24,5 Taxa de ovulação (%) 14,9     11,6 12,1     7,0 13,0    7,2 Número de CL no dia da colheita 23 23 23 Número de animais 200 mg 133 mg 100 mg Dosagem Valores na mesma coluna sem letras sobrescritas não diferem (P>0,4)
PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM CIDR-B ®  INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T)  FSH ? CIDR-B ® BE (2,5mg) P4 (50mg) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Retirada D7 (M; 24h) LH  (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 1: 100mg Grupo 2: 133mg Grupo 3: 200mg
PONTAL DE OURO - CAMPO GRANDE - MS
Vacas Nelore (n=12) serão superovuladas, sendo realizadas 3 coletas de embriões em cada vaca com  diferentes  doses de Folltropin, Campo Grande - MS e Cornélio Procópio - PR - 2001 e 2002
 
[object Object],[object Object],[object Object],Em vias de publicação
PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM DIB ®  INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH (OVAGEN) PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T)  FSH ?  (Ovagen) DIB ® BE (3,0mg)) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Retirada D7 (M; 24h) LH  (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 1: 4,5mg Grupo 2: 6,0mg Grupo 3: 9,0mg D-1
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica 3 a  Réplica (35d) (35d) Grupo 9,0mg Ovagen Grupo 6,0mg Ovagen Grupo 4,5mg Ovagen Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de todas as doadoras superovuladas  Grupo 6,0mg (n=4) Grupo 9,0mg (n=4) Grupo 4,5mg (n=4) Grupo 9,0mg (n=4 ) Grupo 6,0mg (n=4 ) Grupo 4,5mg (n=4 ) Grupo 9,0mg (n=4) Grupo 6,0mg (n=4) Grupo 4,5mg  (n=4)
Tabela - Efeito da dose (9, 6 ou 4.5mg) do extrato de pituitária ovina (Ovagen  ) na resposta superovulatória de vacas Nelore ( Bos indicus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo, Botelhos, MG, 2005. (Martins et al.,) 0.05 0.003 3.1  0.8  b 6.7  1.4  a 7.9  1.3  a Embriões transferíveis (n) 0.05 0.007 2.8  0.7  b 6.1  1.3  a 7.1  1.4  a Embriões congeláveis (n) 0.23 0.0008 16.0  2.3  b 20.0  2.7  b 29.0  2.3  a Intervalo entre 1 a  e ultima ovulação(h) 0.03 0.04 1.9  0.5  b 3.6  1.2  ab 4.6  0.8  a Número de folículos  >8mm (D15) 0.63 0.62 0.5  0.2 0.5  0.3 0.8  0.3 Embriões degenerados (n) 0.74 0.30 0.3  0.1 0.5  0.2 0.8  0.3 Embriões não fertilizados (n) 0.065 0.004 3.8  0.9  b 7.7  1.5  a 9.6  1.5  a Total estruturas (n) 0.28 0.22 59.8  8.9 78.7  9.9 66.4  7.9 Taxa recuperação (%) 0.14 0.80 69.2  6.8   68.9  5.2 73.6  4.6 Taxa de ovulação (%) 0.009 <0.0001 6.0  1.2  c 9.9  1.3  b 13.4  1.3  a Número de corpos lúteos (D15) 0.01 0.0001 8.8  1.4  b 15.1  2.2  a 18.3  1.5  a Número de folículos  >8mm (LH) 0.25 0.97 12.4  1.4 12.7  1.7 12.3  1.6 Número de folículos  D4 (n) Vaca Tratamento Efeito Valor P (Teste F) 4.5 mg (n=12) 6 mg (n=12) 9 mg (n=12)
Effect of Dose of Folltropin-V on Superovulatory Response in Brahman Cows Ova/embryos Dose n Year Total Transferable  140 mg 49 2003 9.39 9.20 171 mg 96 2002 9.50 9.02 320 mg 80 2001 9.00 8.55 G. Uribe Mejía, 2004
 
Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Poços de Caldas - MG
Grupo 1 (n=20) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 M PGF 2  Colheita  de embrião D5 D15 M FSH  (100mg Folltr.) D6 D4 Retirada do DIB ® Grupo 2 (n=20) DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 M Colheita  de embrião D5 D15 T FSH  (100mg Folltr.) D6 D4 Retirada do DIB ® D8 T IA LH 12h D8 M D9 M IA D9 M IA LH 24h D8 T D9 T IA
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica (35d) Grupo P24/LH48 Grupo P24/LH60 Empregou-se o mesmo acasalamento por doadora em todas as réplicas  Grupo P24/LH60 (n=10) Grupo P24/LH48 (n=10) Grupo P24/LH60 (n=10 ) Grupo P24/LH48 (n=10 )
Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Botenhos - MG
Tabela - Efeito do momento da aplicação do LH (48 ou 60 horas) após a aplicação de prostaglandina em vacas Nelore ( Bos indicus ) superovuladas, Poços de Caldas, MG, 2005. (Martins et al., 2005) 0.49 0.02 0.004 3.1  0.5 6.2  1.0 Embriões transferíveis 0.46 0.04 0.002 2.5  0.5 5.9  0.9 Embriões congeláveis 1.00 0.04 0.02 21.0  1.7 15.0  2.1 Intervalo entre 1 a  e ultima ovulação 0.44 0.05 0.008 1.5  0.3 0.6  0.3 Embriões degenerados 0.17 0.51 0.63 0.6  0.2 0.7  0.3 Embriões não fertilizados 0.25 0.006 0.05 5.1  0.5 7.5  1.0 Total estruturas 0.28 0.41 0.74 88.2  3.1 87.1  3.1 Taxa recuperação 0.29 0.23 0.33 64.6  4.0 71.0  4.2 Taxa de ovulação 0.49 0.01 0.08 6.0  0.7 9.1  1.4 Número de corpos lúteos (D15) 0.88 0.001 0.11 9.4  1.0 12.5  1.5 Número de folículos  >8mm (LH) Vaca Tratamento Replica x Tratamento Efeito Valor P (Teste F) LH 60 (n=20) LH 48 (n=20)
Gráfico-  Distribuição das ovulações de acordo com o momento da administração do LH (48 ou 60 após a PGF) em vacas Nelore ( Bos indicus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo Martins et al., 2005 ** Teste Bartlett (P=0.08)
Redução do número de inseminações no protocolo de superovulação com inseminação em tempo fixo em doadoras Nelore (Bos indicus)
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica (35d) Grupo 1 IATF Grupo 2 IATF Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de todas as doadoras superovuladas  Grupo 2 IATF (12 e 24h após LH)  (n=5 ) Grupo 1 IATF (16h após LH) (n=5) Grupo 2 IATF (12 e 24h após LH)  (n=5 ) Grupo 1 IATF (16h após LH) (n=5)
Grupo 1 (n=10) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 T PGF 2  D8 T Colheita  de embrião D5 D15 M FSH  (100mg Folltr.) D6 D4 D8 M D9 M Retirada do DIB ® Grupo 2 (n=10) DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 T D9 Colheita  de embrião D5 D15 M FSH  (100mg Folltr.) D6 D4 D8 M Retirada do DIB ® LH 12h LH 12h IA 16h IA IA 12h  24h
Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Botenhos - MG
Tabela  - Efeito do número de inseminações na eficiência de programas de superovulação com  inseminação artificial em tempo fixo em vacas Nelore ( Bos indicus ),  Martins et al., 2005 0.91 4.2  0.6 4.3  0.7 Embriões transferíveis (n) 0.89 2.8  0.4 2.9  0.6 Embriões congeláveis (n) 0.61 33.6  1.6 32.4  1.8 Intervalo entre 1 a  e ultima ovulação (h) 0.57 4.4  1.0 3.8  0.6 Número de folículos  >8mm (D15) 0.36 2.2  0.3 3.3  0.9 Embriões degenerados (n) 0.57 0.8  0.2 0.6  0.2 Embriões não fertilizados (n) 0.35 7.2  0.8 8.2  0.9 Total estruturas (n) 0.74 77.6  4.8 80.5  4.4 Taxa recuperação (%) 0.94 64.2  4.3 63.8  3.8 Taxa de ovulação (%) 0.23 9.2  0.7 10.5  1.3 Número de corpos lúteos (D15) 0.20 14.8  1.2 16.2  1.4 Número de folículos  >8mm (LH) Efeito Valor P (Teste F) 2 IATF (n=10) 1 IATF (n=10)
Tratamiento de Superovulación ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],2,5 mg EB + 50 mg P4 2,5 mg  E-17   + 50 mg P4
Programación de Donantes
Programa de Producción de Embriones ,[object Object],[object Object]
Niveles de P4 y celo en donantes tratadas con cloprostenol el día de la colecta 7,2 ±0,9 5/9 3,1 ±0,5 b 9/9 b 750   g 7,0 ±0,9 7/8 3,6 ±0,8 b 8/8 b 500   g 10,3 ±0,6 3/10 9,7 ±1,8 a 6/10 a Control Día n Día n Celo Regresión Luteal (P4 < 1 ng/ml) ab P<0,05
Dinámica folicular en donantes tratadas con cloprostenol en el día de la colecta
Superovulaciones repetidas y respuesta 3,5 1,5 2,8 3,5 3,2 Embr. Trans. 7,4 5,8 6 6,8 6,8 CL Vacas “Problema” 6 5,8 6 6,5 7 Embr. Trans. 12 12 9 11 10 CL Vacas Normales Col. 5 Col. 4 Col. 3 Col. 2 Col. 1 Moor et al., 1984
Programación de Donantes (Tradicional con CIDR-B) ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Programación de Donantes (Frare et al., 1997) ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Intervalo Entre Colecciones y Producción de Embriones Frare et al., 1997
Desempeño de vacas Angus donantes superovuladas cada 40 días durante un período de 18 meses (Hasler, 2000) Cantidad de donantes 24 Período de tratamiento 18 meses Superovulaciones, n,  (promedio x donante) [var.] 13,8  [11 - 16] Intervalo promedio entre superovulaciones 39,7 días Promedio embriones x superovul. [variación] 5,5  [0 - 35]
Programación de Donantes  ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Producción de Embriones  Efecto de Fecha de Superovulación   ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],n = 14 vacas - P=0.399
Programación de Donantes  ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Desempeño de vacas Red Angus donantes superovuladas cada 28 - 50 días Cantidad de donantes 20 Período de tratamiento 32 meses Superovulaciones, n,  (promedio x donante) [var.] 16  [11 - 20] Intervalo promedio entre superovulaciones 40 días Promedio embriones x superovul. [variación] 5,8  [0 - 28]
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Programación de Donantes
Superstimulation following E-17 β Day 0  - Insert CIDR  - inject 5 mg E-17β plus 100 mg P4 Day 4  - Initiate FSH treatments Day 6  - PGF - PGF & remove CIDR Day 8 - AI Day 9 - AI Day 15  - Embryo collection & transfer - PGF Day 22  - Estrus - PGF Day 28 - Insert CIDR (donors)  - inject 5 mg E-17 β  plus 100 mg P4
Superstimulation following Follicle Ablation Day 0  - Ablate 2 largest follicles  - Insert CIDR Day 1  - Initiate FSH treatments Day 4  - PGF - PGF & remove CIDR Day 6 - AI Day 7 - AI Day 13 - Embryo collection & transfer - PGF Day 20  - Estrus - PGF Day 28 - Insert CIDR (donors) - Ablate 2 largest follicles
34.11 30.2 39.2 Avg. Days b/t Flushes 1342 893 449 Total IETS # 1 collected 8.5 Traditional 60 day Transferable/flush (1038 Donors) 8.1 8.6 7.2 Transferable/Flush (IETS #1 & #2) 0.93 1.0 0.8 Avg. IETS # 2/Flush 7.14 7.6 6.4 Avg. IETS # 1/Flush 3.49 3.9 3.0 Avg. # of Flushes 188 118 70 # of Flushes 73 30 23 # of Donors Pooled Red Angus Holstein Flush Summary & Averages Stables, 2003
Gonadotropin treatments must be initiated at the  time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Summary
Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Synchronization of follicular wave emergence offers the convenience of initiating FSH treatments quickly and at a self-appointed time… Without the necessity of estrus detection Without sacrificing response Summary
Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Synchronization of follicular wave emergence offers the convenience of initiating FSH treatments quickly and at a self-appointed time… Without the necessity of estrus detection Without sacrificing response Follicular synchronization protocols will permit superstimulation at 25 to 30 day intervals, without regard to ovarian function Summary
Programacion de Donantes y Receptoras ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
D S V J M M L 3 D S V J M AM:X CIDR L 2 D S V J M M L 1 SPO - D AM Gnrh PM IA - D AM IA-D CIDR +EB+P4- D AM y PM: PGF D Col - D

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Clase 1 superovulacion

  • 1. CURSO DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN BOVINOS Ruben Dario Mendoza
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  • 14. Transferências de embriões bovinos realizadas no Brasil no período de 1990-1999
  • 15. TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES NO BRASIL Crescimento de 1000% 1992  14.000 TE 2003  130.000 TE  40.000 FIV  95% bovino de corte Fonte: SBTE 2003 Mundo = 600.000 TE 1 o . EUA  230.000 TE 2 o e 3 o . Brasil e Japão  130.000 TE
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  • 49. Respuesta SPO Año 1986 2048 Colecciones 11,5/donante Año 2001 1156 Colecciones 12,7/donante Looney, datos no publicados
  • 50.
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  • 56. PMSG vs PMSG+MoAB 600 500 400 300 200 100 ESTRADIOL pg/ml Days from treatment 0 3 4 5 6 7 8 9 10 11
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  • 62. Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response Ova/embryos Dose n CL Foll Total Fert. Trans. 100 mg 11 3.6 a 1.0 0.8 a 0.4 a 0.3 200 mg 11 10.7 b 3.8 4.8 b 3.6 b 1.1 400 mg 11 20.3 bc 3.7 6.8 b 5.1 b 2.6 800 mg 11 22.9 c 4.0 6.3 b 4.0 b 2.2 ( abc P<0.05 ) Mapletoft et al., 1988
  • 63.
  • 64.
  • 65.
  • 66.  
  • 67. Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response in Brahman Cows Ova/embryos Dose n Year Total Transferable 140 mg 49 2003 9.39 9.20 171 mg 96 2002 9.50 9.02 320 mg 80 2001 9.00 8.55 G. Uribe Mejía, 2004
  • 68.
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  • 72.  
  • 73. Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response in a single dose treatment Ova/embryos Dose n CL Total Fert. Trans. 200 mg 11 3.6 a 1.8 a 1.5 a 1.2 a 400 mg 12 23.3 b 15.2 b 11.8 b 9.5 b 600 mg 11 25.0 b 12.8 b 7.1 b 5.7 b 800 mg 11 13.9 b 10.2 b 6.1 b 5.3 b ( abc P<0.05 ) Bo et al., 1994
  • 74. Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response Ova/embryos Dose n CL Foll Total Fert. Trans. 100 mg 11 3.6 a 1.0 0.8 a 0.4 a 0.3 200 mg 11 10.7 b 3.8 4.8 b 3.6 b 1.1 400 mg 11 20.3 bc 3.7 6.8 b 5.1 b 2.6 800 mg 11 22.9 c 4.0 6.3 b 4.0 b 2.2 ( abc P<0.05 ) Mapletoft et al., 1988
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  • 83. 120 0 30 90 60 200 100 50 % Response % Dose No. of CL 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Ova/Embryos 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Fert. Ova 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Trans. Embryos % Response % Response % Response Foll. hMG FSH-P
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  • 94. Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 10 8 6 4 Follicular Diameter (mm) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
  • 95. Animais jovens (20.000-30.000 oocitos após puberdade) Oocito primário Estroma + 2 camadas foliculares Ovulação Oocito secundário Produção de Progesterona Regreção do CL (antigo CL) (> %) Folículo primário Folículo terciário Folículo secundário Folículo atresico Corpus Albicans Corpo lúteo (CL) Corpo hemorrágico Ruptura Folicular Folículo de Graaf Ovum (1N) (2N) Produção de estrógeno
  • 96. Características Foliculares 50 to 200 Grupo 1: Numero de Folículos en Crecimiento Monniaux et al., 1983 > 200 Grupo 2:
  • 99. Características Foliculares y Respuesta Superovulatoria Baja 50 to 200 Grupo 1: Respuesta Superovulatoria Numero de Folículos en Crecimiento Monniaux et al., 1983 > 200 Grupo 2: Baja Alta
  • 100. Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 10 8 6 4 Follicular Diameter (mm) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
  • 101.
  • 102. Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 10 8 6 4 Follicular Diameter (mm) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
  • 103.
  • 104.
  • 105.
  • 106.
  • 107. Transvaginal ultrasound-guided follicle ablation Bergfelt et al., 1994
  • 108. Ablación Folicular Transductor Aguja Ecógrafo Bomba Tubo de colección
  • 109. Ablation ~ 1.5 . days new wave emergence Bergfelt et al., 1994 Follicle Size Days Follicular Ablation
  • 110. Superovulatory Response After Aspiration of the Dominant Follicle Dominant Follicle Aspiration yes no n 11 14 13 CL 7.7 b 19.3 b 21.6 b Ova/Embryos Total collected 5.1 a 17.4 b 18.7 b Fertilized 2.4 a 12.6 a 12.9 b Transferable 1.0 a 10.3 b 10.1 b ab - P< 0.01 Bungarts and Niemann, 1994
  • 111. Superovulatory Response After Follicle Ablation Transf. Emb. n Transf. Emb. n 0.9 10.1  0.6 14 (no dom. fol.) <0.001 6.0  0.6 112 8.9  0.6 112 Hill & Kuehner, 1996 <0.01 1.0  0.1 11 (dom. fol.) 10.1  0.6 13 Bungarts & Niemann, 1994 0.56 5.3  0.4 87 5.0  0.4 87 Shaw and Good, 2000 <0.05 2.3  0.8 87 4.6  0.9 13 Kim et al., 2001 P value No Ablation Ablation Author
  • 112. Superovulatory Response After Follicle Ablation Bergfelt et al., 1996 Means and percentages were not different. ab - Reduced variation associated with number of fertilized ova (P<0.1) and number of transferable embryos (P<0.03) in the ablation plus progestogen group.   Control Ablation alone Ablation plus progestogen n 16 17 17 CL (variance) 19.7 ±2.4 (124) 14.6 ±2.7 (235) 18.0 ±2.6 (221) Heifers with <2 CL 1 2 0 Total ova/embryos (variance) 10.9 ±2.3 (82ab) 9.4 ±2.0 (188b) 10.7 ±1.8 (69a) Fertilized ova (variance) 8.3 ±2.2 (76ab) 7.3 ±2.1 (170b) 7.6 ±1.3 (50a) Transferable embryos (variance) 6.6 ±2.1 (70a) 5.8 ±2.2 (75a) 5.9 ±1.1 (38b)
  • 113. Follicle Ablation and Superovulation Ova/Embryos Group n CL Total Fertilized Transferable Ablation of 20 23.3 11.0 9.4 8.2 2 largest foll. Ablation of all foll  5 mm 18 17.9 12.2 10.1 8.4 Means did not differ Baracaldo et al., 2000
  • 114. Superstimulation - Follicle Ablation Day 0 AM - Ablate 2 largest follicles - Insert CIDR Day 2 AM - Initiate FSH treatments Day 4 AM - PGF PM - PGF & remove CIDR Day 6 PM - AI Day 7 AM - AI Day 13 Embryo collection
  • 115.
  • 116.
  • 117.
  • 118. 12 10 8 6 4 LH Progestágenos y estradiol-17  ~ 4 . días nueva onda folicular Bo et al., 1994 Diámetro Folicular (mm) Días Sincronización del desarrollo folicular FSH
  • 119.
  • 120.
  • 121. Superovulacion con Progestagenos + Estradiol-17  vs Tradicional
  • 122.
  • 123. P4+Estradiol-17  vs Tradicional (8 to 12 d pos estro) Adaptado de: Bo et al., 1995, 1999; y Nigro et al., 2002
  • 124. Follicle Ablation and Superovulation Ova/Embryos Group n CL Total Fertilized Transferable Ablation of 20 23.3 11.0 9.4 8.2 2 largest foll. Ablation of all foll  5 mm 18 17.9 12.2 10.1 8.4 E-17  + P4 23 20.1 8.5 7.5 6.5 Means did not differ Baracaldo et al., 2000
  • 125.
  • 126. Niveles plasmáticos de estradiol 5 mg E-17  im 5 mg EB im
  • 127. 17  estradiol Benzoato de estradiol Valerato de estradiol Cipionato de estradiol Dias após tratamento 1 2 3 4 5 6 7 8 9
  • 128. EB im vs EB en cápsulas intravaginales Estradiol-17  Horas post tratamiento
  • 129. EB VS EB+P4 y Onda Folicular Moreno et al., 2001
  • 130.
  • 131. SPO con EB o E-17B
  • 132.
  • 133. EB vs E-17B ab - P<0.05
  • 134.
  • 135.
  • 136.
  • 137. E-17  + EB Caccia et al., 2001   E-17  +PGF D6 E-17  +PGF D7 EB+PGF D6 EB+PGF D7 n 27 26 27 25 Ova/embriones totales 12,2  1,4 13,2  2,5 11,1  1,2 10,7  1,5 Fertlizados 8,9  1,2 7,2  1,5 8,4  1,3 7,7  1,4 Grado 1 4,7  0,9 4,0  1,1 4,4  0,8 3,4  0,8 Grado 2 y 3 2,6  0,5 2,2  0,5 2,2  0,4 2,1  0,5
  • 138. PGF D6 PGF D7 AI AI AI AI
  • 140. % de ovulaciones. Grupo 1 (PGF D6; ov 77)
  • 141. % de ovulaciones. Grupo 2 (PGF D7, ov 29)
  • 142. Ovulaciones por vaca. Grupo PGF D6.
  • 143. Ovulaciones por vaca. Grupo PGF D7.
  • 144. % de ovulaciones según la cantidad de CL
  • 145.
  • 146. Semen Fresco vs Congelado 39,77 136 42,40 145 342 C * 62,16 368 17,74 105 592 F * TOTAL 36,09 48 38,35 51 133 C F C F C F Semen 63,07 222 13,64 48 352 Genepoel 47,30 35 52,70 39 74 74,24 49 12,12 8 66 Van der Merwe 39,26 53 40,74 55 135 55,75 97 28,16 49 174 AMF % Trans. % UFOs O/E Tot. Lugar De la Rey, ump. 2003 * P<0,0001
  • 147.  
  • 148.
  • 149. DIB D-1 D8 PGF 2  EB+P4: EB (2mg) +P4 (50mg P4) EB 2 mg D0: EB (2mg) D9 D0 PGF 2  EB 3 mg D0 : EB (3mg) EB 2 mg D1 : EB (2mg) EB 3 mg D1 : EB (3mg) D12 D1 EB US 24 / 24 h 12 / 12 h Nelore
  • 150. Sá Filho et.al (2005) *
  • 151.
  • 152.
  • 153.
  • 154. 12 10 8 6 4 N + EV ~ 5,5 . días (3 – 8) Bo et al., 1991 Diámetro Folicular (mm) Días Valerato de Estradiol y desarrollo folicular 0 9
  • 155.
  • 156. EV vs E-17B ab - P<0.05 Mapletoft et al., 1999
  • 157. EV vs E-17B abcd - Medias (  SEM) o porcentajes con distinta letra difieren (P<0,05). Nigro et al., 2001   Tradicional E17  +CIDR-B EV+CIDR-B EV+SMB Razas de Carne (n) 945 82 247 69 Ova/emb. totales 13,4  0,3ª 12,6  0,9ª 14,5  0,6 ab 16,4  1,2 b Emb. Transf 6,9  0,2 7,3  0,6 6,7  0,4 6,5  0,9 % Emb. Transf. 51,5 b 58,3 a 45,8 c 39,9 d
  • 158.
  • 159. < 0.05 2 - 8 z 2 - 6 y 2 - 4 x Range < 0.001 5.1 ± 0.4 c 3.7 ± 0.3 b 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Overall 19 20 20 N < 0.05 2 - 6 y 2 - 6 xy 2 - 4 x Range < 0.05 4.0 ± 0.5 b 3.1 ± 0.4 ab 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Cows 10 10 10 N < 0.05 3 - 8 y 3 - 6 xy 2 - 3 x Range < 0.001 6.1 ± 0.6 c 4.2 ± 0.3 b 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Heifers 9 10 10 N P-Value (F Test) EV+Nor ½ EV+Nor EB Parameters Class
  • 160. Pre-treatment with eCG prior to FSH administration
  • 161. 12 10 8 6 4 Progesterone device + P4 and EB ~ 4 . days Wave emergence Caccia and Bo, 1998 Folicular diameter (mm) Days Synchronization of Follicular Wave Emergence FSH
  • 162. 0 Follicle Size (mm) ≥ 4 1-3 -2 2 4 6 8 10 -3 Wave emergence Wave emergence -66 -66 Days from wave emergence Hours from wave emergence Dynamics of follicles ≥1 mm Adams et al.
  • 163. 12 10 8 6 4 2 Progesterone device + P4 and EB ~ 4 . days Wave emergence Folicular diameter (mm) Synchronization of Follicular Wave Emergence FSH
  • 164.
  • 165. Priming with 300 UI de eCG ab - P<0.05
  • 166.  
  • 167. 500 UI eCG on Day 2
  • 168.
  • 169. GnRH and Follicular Dynamics 4 8 12 16 Day 9 Day 7 mm Day 0 Day 1-2 GnRH
  • 170. 4 8 12 16 Day 9 Day 7 mm Day 0 Day 1-2 GnRH No OV GnRH and Follicular Dynamics
  • 171. FA GnRH n 19 18 No. of CL 13.9 10.1 Total Ova/Embryos 9.6 5.3 (%) (65) a (53) b Fertilized Ova 5.0 a 2.9 b (%) (48) (55) Trans. Emb. 3.4 a 1.8 b (%) (33) (38) Superovulatory response after follicular ablation (FA) or GnRH Deyo et al., 2001 ab (P < 0.05)
  • 172. Alternative: Synchronize Ovulation and Begin Gonadotropin Treatments at the Beginning of the First Follicular Wave
  • 173.
  • 174. TREATMENTS FIRST WAVE GROUPS FSH D15 PGF AM &PM CIDR D10 D0 D5 D9 BE 2mg + P4 (50 mg) PGF 2á LH Group 1 (n= 6) D16 PM D17 AM D17PM D23 IA IA E. Collection LH D11 Ov.
  • 175. TREATMENTS FIRST WAVE GROUPS CIDR D10 D0 D5 D9 BE 2mg + P4 (50 mg) PGF 2á LH Group 2 (n= 6) D16 PM D17 AM D17PM D23 IA IA E. Collection LH D11 Ov. FSH D15 PGF AM &PM CIDR
  • 176. TREATMENTS CONTROL GROUP CIDR D4 D0 BE 2mg + P4 (50 mg) Group 3(n= 6) FSH D8 PGF AM &PM D9 PM D10 AM D10PM D17 IA IA E. Collection LH
  • 177. Superstimulation of the First Wave (a,b P<0,05) Nasser et al., 2002 (IETS) 2.5  1.2 2.5  1.6 7.0  2.7 Unfertilized ova 5.1  1.7 b 5.8  1.4 b 0.0  0.0 a Freezable embryos 6.6  2.0 b 8.0  1.8 b 0.2  0.2 ª Transferable embryos 9.2  2.3 11.7  2.9 8.3  2.9 Total ova/embryos 14.5  2.5 12.7  2.7 15.3  4.3 CL 23.0  3.7 18.5  4.5 21.5  6.6 Follicles > 8 mm at FTAI 6 6 6 N EB+P4 Plus CIDR First Wave Plus CIDR First Wave No CIDR Groups
  • 178. Nasser et al SBTE (2005) Superstimulation of the First Wave
  • 179. Cue-Mate D12 AM D0 PM D10PM PGF LH FIRST WAVE GROUP WITH CUE-MATE Cue-Mate PGF FSH D18 AM PGF AM &PM D19 AM D19 PM D20AM D26 IA IA E. Collection LH D13 PM Ov.
  • 180. Preliminary Results Table 1. All donors’ main effects Means did not differ (P>0.28). 4,8±1,3 4,1±1,2 5,5±1,4 7,2±1,4 18 Heifers 5,1±1,0 4,3±1,0 6,7±1,4 10,6±1,6 29 Cows 4,1±1,2 3,4±1,0 5,2±1,4 8,0±1,6 22 Wave 1 5,8±1,1 5,0±1,0 7,2±1,4 10,4±1,6 25 Control Gr.1+2+3 Gr.1+2 Fertilized. Ova-embryos. N Main effects
  • 181.
  • 182. Priming con 300 UI de eCG ab - P<0.05
  • 183. Priming con 500 UI eCG
  • 184. Priming con 500 UI eCG ab - P<0.05
  • 185.
  • 186.  
  • 187. Momento de la Ovulacion en Vacas Superestimuladas Pablo M. Chesta 1 Instituto de Reproducción Animal Córdoba (IRAC) , 2 Universidad Católica de Córdoba, 3 Universidad Nacional de Córdoba
  • 188. 1. Esquema tradicional de superovulação 2. Superovulação com sincronização da onda de crescimento folicular 3. Superovulação com sincronização da onda de crescimento folicular e da ovulação Detecção de estro FSH (12/12h) Detecção de estro D-0 D-10 D-13 D-0 D-7 PGF 2  Colheita de embriões PGF 2  Detecção de estro FSH (12/12h) Detecção de estro D-0 D-4 D-7 D-8 D-15 Colheita de embriões PGF 2  P4 BE + P4 Detecção de estro FSH (12/12h) Detecção de estro D-0 D-4 D-7 D-8 D-15 Colheita de embriões PGF 2  P4 LH BE+P4
  • 189.
  • 190. PGF D6 AI AI
  • 191. Time of Ovulation in Relation to Superovulatory Response AI AI Ov. Interval 0-11 h: 8/13 (62%) 12/23 h: 3/13 (23 %) 24/35 h: 2/13 (15%)
  • 192. Time of Ovulation in Relation to Superovulatory Response AI AI
  • 194. Right ovary Left ovary SUPEROVULATORY RESPONSE
  • 195. Superovulação de doadoras para IATF PGF 2  2 6 10 14 Dia 8 Dia 7 mm Dia 0 Dia 4 BE + P4 LH P4 FSH P4 LH  E2
  • 196. PGF 2  2 6 10 14 Dia 8 Dia 7 mm Dia 0 Dia 4 BE + P4 LH or GnRH P4 FSH P4
  • 197.
  • 198.
  • 199. DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
  • 200. 0 4 6 7 8 9 15 DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
  • 201. 0 4 6 7 8 9 15 Grupo: Día 7 Control DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA FSH 2x4 Colecta de embriones DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
  • 202. 0 4 6 7 8 9 15 DIB Grupo: Día 7 GnRH 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones Grupo: Día 7 Control DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA FSH 2x4 Colecta de embriones DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
  • 204. Ultrasonografía 0 4 6 7 8 9 11 15 D 0: ciclicidad c/ 8 hs 1 er PGF: H 0 D 8 - 11: determinación de ovulaciones Ovulación: desaparición de Folículos > 10 mm.
  • 205. Cantidad de ovulaciones y hora media de ovulación para donantes Aberdeen Angus superestimuladas con Folltropin-V. ab valores con distintos superíndices difieren (P <0,05) Chesta et al., 2005. 72,8 b 22,5 ab 58,6 b 7,1 a 69 – 96 67 – 83 73 – 96 74 – 82 81,3 + 3,0 77,4 + 1,5 86,3 + 2,7 79,7 + 0,9 12,5 + 2,8 14,7 + 1,1 12,8 + 2,0 15,7 + 2,2 8 10 8 8 NO SI NO SI 6,5 6,5 7 7 Varianza Rango Media + EE Hora Media de Ovulacón Cantidad de ovulaciones Media + EE N GnRH Duración del tratamiento con DIB 67,9 a 16,2 b 69 – 96 67 – 83 83,8 + 2,0 a 78,4 + 0,9 b 12,6 + 1,6 15,1 + 1,1 16 18 NO SI 45,8 42,2 67 – 96 73 – 96 79,1 + 1,6 83,0 + 1,6 13,7 + 1,3 14,3 + 1,5 18 16 6,5 7 Efectos Principales
  • 206.  
  • 207. 51.6 33.5 78.2 ± 1.4 81.2 ± 1.1 15.9 ± 1.3 18.0 ± 1.6 27 27 Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) 30.6 53.9 78.1 ± 1.1 c 81.5 ± 1.4 d 17.3 ± 1.4 16.6 ± 1.6 28 26 Yes No Main effects 50.2 b 53.8 b 53.0 b 7.6 a 79.4 ± 2.0 77.1 ± 2.0 83.6 ± 2.0 79.1 ± 0.7 15.2 ± 2.2 16.6 ± 1.6 18.1 .± 2.3 17.9 ± 2.4 13 14 13 14 No Yes No Yes Day 6.5 (P12) Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) Day 7 (P24) Variance Mean Mean Time of Ovulation (h) Ovulations N GnRH (Day 8) Time of DIB removal
  • 208. 4.8 ± 0.7 5.5 ± 0.7 6.8 ± 0.9 8.7 ± 1.0 9.6 ± 1.2 12.2 ± 1.4 46 49 Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) 4.9 ± 0.7 5.4 ± 0.7 7.4 ± 1.0 8.2 ± 1.0 9.8 ± 1.2 12.0 ± 1.4 45 50 No Yes Main effects 4.2 ± 0.8 5.4 ± 1.1 5.6 ± 1.2 5.4 ± 0.9 6.6 ± 1.3 7.0 ± 1.4 8.2 ± 1.4 9.2 ± 1.4 8.8 ± 1.6 10.4 ± 1.8 10.8 ± 1.8 13.3 ± 2.1 23 23 22 27 No Yes No Yes Day6.5 (P12) Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) Day 7 (P24) Grade 1 and 2 embryos Fertilized ova Total ova/embryo N GnRH (Day 8) Time of DIB removal
  • 209. Distribución de las ovulaciones por Grupo. X 6,5. Control X 7. Control X 6,5. GnRH X 7. GnRH IA 98 %
  • 210. Gráfico 3.Distribución de las ovulaciones evaluando la aplicación de GnRH (%). IA GnRH: 95,5 % Control: 81,3 % P < 0,0001
  • 211. Ovocitos/embriones totales colectados, embriones y embriones transferibles en donantes Brangus. a,b (P = 0,077) Chesta et al., 2005. 4,7 + 1,2 7,3 + 1,3 5,7 + 1,4 a 9,8 + 1,5 b 10,3 + 1,9 14,7 + 2,7 18 20 6,5 7 7,0 + 1,4 5,4 + 1,1 8,3 + 1,7 7,5 + 1,4 11,6 + 2,3 13,4 + 2,5 17 21 NO SI Efectos Principales 6,0 + 1,8 3,8 + 1,5 7,9 + 2,2 6,9 + 1,6 7,1 + 2,5 4,6 + 1,6 9,4 + 2,4 10,2 + 2,1 10,5 + 3,1 10,2 + 2,5 12,6 + 3,6 16,3 + 4,1 8 10 9 11 NO SI NO SI 6,5 6,5 7 7 Embriones Grado 1,2 y 3 Media + EE Embriones Fertilizados Media + EE Ovocitos/embriones Totales Media + EE n GnRH Duración del tratamiento con DIB
  • 212. Ovocitos/embriones totales colectados, fertilizados y transferibles en donantes de embriones Angus. Las medias no difieren (P>0,1) Chesta et al., 2005. 4,8 + 0,8 4,9 + 0,9 6,1 + 0,9 7,3 + 1,4 7,7 + 1,2 9,3 + 1,5 24 24 6,5 7 4,1 + 0,7 5,6 + 0,9 5,9 + 1,0 7,5 + 1,3 8,0 + 1,2 9,1 + 1,4 24 24 NO SI Efectos Principales 4,1 + 1,0 5,6 + 1,2 4,0 + 1,1 5,7 + 1,5 5,9 + 1,4 6,4 + 1,3 6,0 + 1,4 8,5 + 2,3 7,7 + 1,9 7,7 + 1,4 8,2 + 1,5 10,3 + 2,5 13 11 11 13 NO SI NO SI 6,5 6,5 7 7 Embriones Grado 1,2 y 3 Media + EE Embriones Fertilizados Media + EE Ovocitos/emb. Totales Media + EE N GnRH Duración del tratamiento con DIB
  • 213.
  • 214. 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones DIB PGF Grupo: X 7.5. GnRH 24 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones DIB PGF Grupo: X 7.5. GnRH 12 DIB 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones PGF Grupo: X 7. GnRH 24
  • 215. ab P<0.0001 cd P=0.03 Mean + SEM 4.4 c 5.0 c 19.6 d 80.0 – 86.1 78.9 – 86.5 82.0 – 98.8 81.1  0.6 a 81.7  0.6 a 91.1  1.3 b 10.0  1.3 11.7  1.9 12.1  2.0 11 13 13 Day 7. GnRH Day 8 Day 7.5. GnRH Day 8 Day 7.5. GnRH Day 8.5 Variance Range Mean + SEM Time of Ovulation (h) Ovulations N Grupo
  • 216.  
  • 217. 4.2  1.0 4.3  0.7 4.5  0.8 6.4  1.2 5.9  0.8 6.1  1.0 9.1  1,4 9.4  1.3 8.4  1.2 33 36 36 8 8 8.5 Day 7 Day 7.5 Day 7.5 Grade 1 and 2 embryos Fertilized ova Total ova/ embryo N Day of GnRH Time of DIB removal (d)
  • 218. Mean number of ova/embryo collected, fertilized ova and transferable embryos in superstimulated Red Angus donors treated with progesterone releasing devices (DIB) for 7 or 7.5 d with GnRH treatment on Day 8 or Day 8.5. Means did not differ (P>0.1). 3.2  0.8 3.4  0.6 3.5  0.8 4.6  1.0 4.5  0.8 5.0  0.9 7.4  1.2 6.8  1.0 7.3  1.3 25 27 26 8 8 8.5 Day 7 Day 7.5 Day 7.5 Grade 1 and 2 Embryos Fertilized Ova Total Ova/Embryo Collected N GnRH Time of DIB renoval (d)
  • 219. Mean number of ova/embryos collected, fertilized ova and transferable embryos in superstimulated Brangus donors treated with progesterone releasing devices (DIB) for 7 or 7.5 d with GnRH treatment on Day 8 or Day 8.5. Means did not differ (P>0.1). 7.1  3.3 6.8  1.8 7.0  1.9 11.7  3.4 10.2  1.8 9.0  2.3 14.5  3.7 17.4  3.3 11.3  2.6 8 9 10 Day 8 Day 8 Day 8.5 Day 7 Day 7.5 Day 7.5 Grade 1 and 2 Embryos Fertilized Ova Total Ova/Embryo Collected n GnRH Time of DIB removal
  • 220. Control CIDR 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF FSH (7 t) EC IA 12 and 24 h after estrus Heat-Watch CIDR LH (12.5 mg Armour, Lutropin-V) 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA pLH FSH (7 t.) EC
  • 221. IA 12 and 24 h after estrus (Heat-Watch) vs FTAI 12 and 24 after pLH Larkin et al., 2006 9.6ª 11.6ª 21.4ª 57.3ª (53-62) 26.3ª (19-36) LH (n=10) 7.8ª 11.0ª 28.5ª 58.5ª (51-69) 25.1ª (17-32) Control (n=10) Viable Total Ova No. ovulations Ovulation Time (h) (range) Estrus post CIDR Removal (h) range Protocol
  • 222.
  • 223. 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones DIB PGF Grupo: D 7,5. GnRH 24 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones DIB PGF Grupo: D 7,5. GnRH 12 DIB 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones PGF Grupo: D 7. GnRH 24
  • 224. Distribución de las ovulaciones por Grupo
  • 225. SOV EM TEMPO FIXO EM VACAS HOLANDESAS DE ALTA PRODUÇÃO
  • 226. Grupo P24 LH48 (n=8) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 M PGF 2  Colheita De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 M Colheita De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® D0 BE D0 BE Grupo P24 LH60 (n=8) D9 M IA LH 24 h D8 T D9 T IA D8 T IA D8 M D9 M IA LH 12 h
  • 227. Grupo P36 LH48 (n=8) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 T PGF 2  Colheita De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 T Colheita De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® D0 BE D0 BE Grupo P36 LH60 (n=8) D9 M IA LH 24 h D8 T D9 T IA D8 T IA D8 M D9 M IA LH 12 h
  • 228. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica 3 a Réplica 4 a Réplica Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de todas as doadoras superovuladas (35d) (35d) (35d) Grupo P24/LH48 Grupo P24/LH60 Grupo P36/LH60 Grupo P36/LH48 Grupo P24/LH60 ( 238; 258; 308 ) Grupo P36/LH60 ( 238; 258; 308 ) Grupo P24/LH48 ( 238; 258; 308 ) Grupo P36/LH48 ( 238; 258; 308 ) Grupo P36/LH60 ( 271; 285; 296) Grupo P24/LH60 ( 271; 285; 296) Grupo P36/LH48 ( 271; 285; 296) Grupo P24/LH48 ( 271; 285; 296) Grupo P24/LH60 ( 266; 275; 300 ) Grupo P36/LH60 ( 266; 275; 300 ) Grupo P24/LH48 ( 266; 275; 300 ) Grupo P36/LH48 ( 266; 275; 300 ) Grupo P36/LH60 ( 259; 303; 304 ) Grupo P36/LH60 ( 259; 303; 304 ) Grupo P36/LH48 ( 259; 303; 304 ) Grupo P24/LH48 ( 259; 303; 304 )
  • 229.  
  • 230.  
  • 231.  
  • 232. Tabela - Efeito do tempo de permanência do dispositivo intravaginal de progesterona (24 ou 36 h) e do momento da aplicação do LH (48 ou 60 h) após a aplicação de prostaglandina em vacas Holandesas de alta produção superovuladas, Poços de Caldas, MG, 2005 Martins et al SBTE (2005)
  • 233. 52.3 81.3 ± 1.5 7.6 ± 1.1 22 Day 7.5 (P36) 62.7 81.0 ± 1.7 7.3 ± 1.2 21 Day 7 (P24) 52.3 83.9 ± 1.6 b 8.9 ± 1.3 d 21 Day 8.5 48.2 78.6 ± 1.5 a 6.1 ± 0.9 c 22 Day 8 Main effects 24.9 84.9 ± 1.5 9.2 ± 1.8 11 Day 8.5 Day 7.5 (P 36) 56.9 77.8 ± 2.3 5.9 ± 1.1 11 Day 8 Day 7.5 (P36) 85.7 82.7 ± 2.9 8.6 ± 1.9 10 Day 8.5 Day 7 (P24) 42.8 79.5 ± 2.0 6.2 ± 1.4 11 Day 8 Day 7 (P24) Variance Mean Interval to ovulation (h) Ovulations Mean N pLH Day of DIB removal
  • 234. Gráfico- Distribuição das ovulações de acordo tempo de permanência do dispositivo de progesterona (24 ou 36 após PGF) em vacas Holandesas de alta produção ( Bos taurus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo Martins et al., 2005 ** Teste Bartlett (P=0.42)
  • 235. Gráfico- Distribuição das ovulações de acordo com o momento da administração do LH (48 ou 60 após a PGF) em vacas Holandesas de alta produção ( Bos taurus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo Martins et al., 2005 ** Teste Bartlett (P=0.09)
  • 236.  
  • 237. Pietro Sampaio Baruselli Prof. Dr. Departamento de Reprodução Animal Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Universidade de São Paulo. “ Ultimas Novidades em TETF e IATF
  • 238. ADEQUAÇÃO DO MOMENTO DA RETIRADA DO DISPOSITIVO DE PROGESTERONA PARA IATF EM EM PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO DE VACAS NELORE ( Bos indicus )
  • 239. PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM IMPLANTES DE PROGESTERONAE INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH PARA IATF PGF2  (M e T) FSH (133 mg Folltropin) Dispositivo de P4 BE (2,5mg) P4 (50mg) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Grupo 1: Retirada D7 (M; 24h) LH (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 2: Retirada D7 (T; 36h) Estro D-8
  • 240. 2,2  3,5 5,2  8,7 Não fertilizados 5,2  6,1 6,7  4,8 Embriões degenerados 10,3  5,9 9,3  7,5 Embriões viáveis 17,7  11,7 21,2  15,1 Total de estruturas 63,4 69,1 Taxa de recuperação (%) 10 10 Número de animais P36 P24 Tabela – Resultados (média  desvio padrão) dos tratamentos superovulatórios P24 e P36 em doadoras de embriões da raça Nelore. Campo Grande, 2000. Os valores não diferem estatisticamente (P>0,05) ZANENGA et al., 2003
  • 241.
  • 242. HIPÓTESE É possível superovular doadoras Bos taurus indicus com reduzidas doses de FSHp sem comprometimento da resposta superovulatória, da quantidade e da qualidade dos embriões produzidos
  • 243. Doadoras de embrião da Fazenda Dinorá - Cornélio Procópio - PR Med. Vet. Rubens Cesar Pinto
  • 244. Doadoras de embrião da Fazenda Pontal de Ouro - Campo Grande - MS Med. Vet. Luiz Fernando Tonissi Nasser
  • 245. PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO INDUZINDO A OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH (FOLLTROPIN) PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T) FSH ? (Follptropin) Dispositivo P4 BE (2,5mg + 50mg P4) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Retirada D7 (M; 24h) LH (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 1: 100mg Grupo 2: 133mg Grupo 3: 200mg
  • 246. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica 3 a Réplica Empregou-se o mesmo acasalamento por doadora em todas as réplicas (60d) (60d) Grupo 100mg Folltropin Grupo 133mg Folltropin Grupo 200mg Folltropin Grupo133mg (n=8) Grupo 100mg (n=8) Grupo 200mg (n=8) Grupo 100mg (n=8 ) Grupo 133mg (n=8 ) Grupo 200mg (n=8 ) Grupo 100mg (n=7) Grupo 133mg (n=7) Grupo 200mg (n=7)
  • 247. Tabela . Resposta superovulatória (média  desvio padrão) de vacas Nelore superovuladas com diferentes doses de FSH (Folltropin-V) e inseminadas em tempo fixo. São Paulo, 2002. 5,7  7,0 4,4  3,2 6,4  6,5 Embriões congeláveis 6,5  7,7 5,6  4,1 7,7  7,4 Embriões transferíveis 10,6  8,6 9,9  7,0 10,0  7,8 Total de estruturas 70,8  29,7 81,6  34,8 77,5  31,1 Taxa de recuperação (%) 92,6  21,0 84,5  14,3 85,6  24,5 Taxa de ovulação (%) 14,9  11,6 12,1  7,0 13,0  7,2 Número de CL no dia da colheita 23 23 23 Número de animais 200 mg 133 mg 100 mg Dosagem Valores na mesma coluna sem letras sobrescritas não diferem (P>0,4)
  • 248. PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM CIDR-B ® INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T) FSH ? CIDR-B ® BE (2,5mg) P4 (50mg) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Retirada D7 (M; 24h) LH (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 1: 100mg Grupo 2: 133mg Grupo 3: 200mg
  • 249. PONTAL DE OURO - CAMPO GRANDE - MS
  • 250. Vacas Nelore (n=12) serão superovuladas, sendo realizadas 3 coletas de embriões em cada vaca com diferentes doses de Folltropin, Campo Grande - MS e Cornélio Procópio - PR - 2001 e 2002
  • 251.  
  • 252.
  • 253. PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM DIB ® INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH (OVAGEN) PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T) FSH ? (Ovagen) DIB ® BE (3,0mg)) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Retirada D7 (M; 24h) LH (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 1: 4,5mg Grupo 2: 6,0mg Grupo 3: 9,0mg D-1
  • 254. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica 3 a Réplica (35d) (35d) Grupo 9,0mg Ovagen Grupo 6,0mg Ovagen Grupo 4,5mg Ovagen Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de todas as doadoras superovuladas Grupo 6,0mg (n=4) Grupo 9,0mg (n=4) Grupo 4,5mg (n=4) Grupo 9,0mg (n=4 ) Grupo 6,0mg (n=4 ) Grupo 4,5mg (n=4 ) Grupo 9,0mg (n=4) Grupo 6,0mg (n=4) Grupo 4,5mg (n=4)
  • 255. Tabela - Efeito da dose (9, 6 ou 4.5mg) do extrato de pituitária ovina (Ovagen  ) na resposta superovulatória de vacas Nelore ( Bos indicus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo, Botelhos, MG, 2005. (Martins et al.,) 0.05 0.003 3.1  0.8 b 6.7  1.4 a 7.9  1.3 a Embriões transferíveis (n) 0.05 0.007 2.8  0.7 b 6.1  1.3 a 7.1  1.4 a Embriões congeláveis (n) 0.23 0.0008 16.0  2.3 b 20.0  2.7 b 29.0  2.3 a Intervalo entre 1 a e ultima ovulação(h) 0.03 0.04 1.9  0.5 b 3.6  1.2 ab 4.6  0.8 a Número de folículos >8mm (D15) 0.63 0.62 0.5  0.2 0.5  0.3 0.8  0.3 Embriões degenerados (n) 0.74 0.30 0.3  0.1 0.5  0.2 0.8  0.3 Embriões não fertilizados (n) 0.065 0.004 3.8  0.9 b 7.7  1.5 a 9.6  1.5 a Total estruturas (n) 0.28 0.22 59.8  8.9 78.7  9.9 66.4  7.9 Taxa recuperação (%) 0.14 0.80 69.2  6.8 68.9  5.2 73.6  4.6 Taxa de ovulação (%) 0.009 <0.0001 6.0  1.2 c 9.9  1.3 b 13.4  1.3 a Número de corpos lúteos (D15) 0.01 0.0001 8.8  1.4 b 15.1  2.2 a 18.3  1.5 a Número de folículos >8mm (LH) 0.25 0.97 12.4  1.4 12.7  1.7 12.3  1.6 Número de folículos D4 (n) Vaca Tratamento Efeito Valor P (Teste F) 4.5 mg (n=12) 6 mg (n=12) 9 mg (n=12)
  • 256. Effect of Dose of Folltropin-V on Superovulatory Response in Brahman Cows Ova/embryos Dose n Year Total Transferable 140 mg 49 2003 9.39 9.20 171 mg 96 2002 9.50 9.02 320 mg 80 2001 9.00 8.55 G. Uribe Mejía, 2004
  • 257.  
  • 258. Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Poços de Caldas - MG
  • 259. Grupo 1 (n=20) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 M PGF 2  Colheita de embrião D5 D15 M FSH (100mg Folltr.) D6 D4 Retirada do DIB ® Grupo 2 (n=20) DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 M Colheita de embrião D5 D15 T FSH (100mg Folltr.) D6 D4 Retirada do DIB ® D8 T IA LH 12h D8 M D9 M IA D9 M IA LH 24h D8 T D9 T IA
  • 260. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica (35d) Grupo P24/LH48 Grupo P24/LH60 Empregou-se o mesmo acasalamento por doadora em todas as réplicas Grupo P24/LH60 (n=10) Grupo P24/LH48 (n=10) Grupo P24/LH60 (n=10 ) Grupo P24/LH48 (n=10 )
  • 261. Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Botenhos - MG
  • 262. Tabela - Efeito do momento da aplicação do LH (48 ou 60 horas) após a aplicação de prostaglandina em vacas Nelore ( Bos indicus ) superovuladas, Poços de Caldas, MG, 2005. (Martins et al., 2005) 0.49 0.02 0.004 3.1  0.5 6.2  1.0 Embriões transferíveis 0.46 0.04 0.002 2.5  0.5 5.9  0.9 Embriões congeláveis 1.00 0.04 0.02 21.0  1.7 15.0  2.1 Intervalo entre 1 a e ultima ovulação 0.44 0.05 0.008 1.5  0.3 0.6  0.3 Embriões degenerados 0.17 0.51 0.63 0.6  0.2 0.7  0.3 Embriões não fertilizados 0.25 0.006 0.05 5.1  0.5 7.5  1.0 Total estruturas 0.28 0.41 0.74 88.2  3.1 87.1  3.1 Taxa recuperação 0.29 0.23 0.33 64.6  4.0 71.0  4.2 Taxa de ovulação 0.49 0.01 0.08 6.0  0.7 9.1  1.4 Número de corpos lúteos (D15) 0.88 0.001 0.11 9.4  1.0 12.5  1.5 Número de folículos >8mm (LH) Vaca Tratamento Replica x Tratamento Efeito Valor P (Teste F) LH 60 (n=20) LH 48 (n=20)
  • 263. Gráfico- Distribuição das ovulações de acordo com o momento da administração do LH (48 ou 60 após a PGF) em vacas Nelore ( Bos indicus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo Martins et al., 2005 ** Teste Bartlett (P=0.08)
  • 264. Redução do número de inseminações no protocolo de superovulação com inseminação em tempo fixo em doadoras Nelore (Bos indicus)
  • 265. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica (35d) Grupo 1 IATF Grupo 2 IATF Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de todas as doadoras superovuladas Grupo 2 IATF (12 e 24h após LH) (n=5 ) Grupo 1 IATF (16h após LH) (n=5) Grupo 2 IATF (12 e 24h após LH) (n=5 ) Grupo 1 IATF (16h após LH) (n=5)
  • 266. Grupo 1 (n=10) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 T PGF 2  D8 T Colheita de embrião D5 D15 M FSH (100mg Folltr.) D6 D4 D8 M D9 M Retirada do DIB ® Grupo 2 (n=10) DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 T D9 Colheita de embrião D5 D15 M FSH (100mg Folltr.) D6 D4 D8 M Retirada do DIB ® LH 12h LH 12h IA 16h IA IA 12h 24h
  • 267. Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Botenhos - MG
  • 268. Tabela - Efeito do número de inseminações na eficiência de programas de superovulação com inseminação artificial em tempo fixo em vacas Nelore ( Bos indicus ), Martins et al., 2005 0.91 4.2  0.6 4.3  0.7 Embriões transferíveis (n) 0.89 2.8  0.4 2.9  0.6 Embriões congeláveis (n) 0.61 33.6  1.6 32.4  1.8 Intervalo entre 1 a e ultima ovulação (h) 0.57 4.4  1.0 3.8  0.6 Número de folículos >8mm (D15) 0.36 2.2  0.3 3.3  0.9 Embriões degenerados (n) 0.57 0.8  0.2 0.6  0.2 Embriões não fertilizados (n) 0.35 7.2  0.8 8.2  0.9 Total estruturas (n) 0.74 77.6  4.8 80.5  4.4 Taxa recuperação (%) 0.94 64.2  4.3 63.8  3.8 Taxa de ovulação (%) 0.23 9.2  0.7 10.5  1.3 Número de corpos lúteos (D15) 0.20 14.8  1.2 16.2  1.4 Número de folículos >8mm (LH) Efeito Valor P (Teste F) 2 IATF (n=10) 1 IATF (n=10)
  • 269.
  • 271.
  • 272. Niveles de P4 y celo en donantes tratadas con cloprostenol el día de la colecta 7,2 ±0,9 5/9 3,1 ±0,5 b 9/9 b 750  g 7,0 ±0,9 7/8 3,6 ±0,8 b 8/8 b 500  g 10,3 ±0,6 3/10 9,7 ±1,8 a 6/10 a Control Día n Día n Celo Regresión Luteal (P4 < 1 ng/ml) ab P<0,05
  • 273. Dinámica folicular en donantes tratadas con cloprostenol en el día de la colecta
  • 274. Superovulaciones repetidas y respuesta 3,5 1,5 2,8 3,5 3,2 Embr. Trans. 7,4 5,8 6 6,8 6,8 CL Vacas “Problema” 6 5,8 6 6,5 7 Embr. Trans. 12 12 9 11 10 CL Vacas Normales Col. 5 Col. 4 Col. 3 Col. 2 Col. 1 Moor et al., 1984
  • 275.
  • 276.
  • 277. Intervalo Entre Colecciones y Producción de Embriones Frare et al., 1997
  • 278. Desempeño de vacas Angus donantes superovuladas cada 40 días durante un período de 18 meses (Hasler, 2000) Cantidad de donantes 24 Período de tratamiento 18 meses Superovulaciones, n, (promedio x donante) [var.] 13,8 [11 - 16] Intervalo promedio entre superovulaciones 39,7 días Promedio embriones x superovul. [variación] 5,5 [0 - 35]
  • 279.
  • 280.
  • 281.
  • 282. Desempeño de vacas Red Angus donantes superovuladas cada 28 - 50 días Cantidad de donantes 20 Período de tratamiento 32 meses Superovulaciones, n, (promedio x donante) [var.] 16 [11 - 20] Intervalo promedio entre superovulaciones 40 días Promedio embriones x superovul. [variación] 5,8 [0 - 28]
  • 283.
  • 284. Superstimulation following E-17 β Day 0 - Insert CIDR - inject 5 mg E-17β plus 100 mg P4 Day 4 - Initiate FSH treatments Day 6 - PGF - PGF & remove CIDR Day 8 - AI Day 9 - AI Day 15 - Embryo collection & transfer - PGF Day 22 - Estrus - PGF Day 28 - Insert CIDR (donors) - inject 5 mg E-17 β plus 100 mg P4
  • 285. Superstimulation following Follicle Ablation Day 0 - Ablate 2 largest follicles - Insert CIDR Day 1 - Initiate FSH treatments Day 4 - PGF - PGF & remove CIDR Day 6 - AI Day 7 - AI Day 13 - Embryo collection & transfer - PGF Day 20 - Estrus - PGF Day 28 - Insert CIDR (donors) - Ablate 2 largest follicles
  • 286. 34.11 30.2 39.2 Avg. Days b/t Flushes 1342 893 449 Total IETS # 1 collected 8.5 Traditional 60 day Transferable/flush (1038 Donors) 8.1 8.6 7.2 Transferable/Flush (IETS #1 & #2) 0.93 1.0 0.8 Avg. IETS # 2/Flush 7.14 7.6 6.4 Avg. IETS # 1/Flush 3.49 3.9 3.0 Avg. # of Flushes 188 118 70 # of Flushes 73 30 23 # of Donors Pooled Red Angus Holstein Flush Summary & Averages Stables, 2003
  • 287. Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Summary
  • 288. Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Synchronization of follicular wave emergence offers the convenience of initiating FSH treatments quickly and at a self-appointed time… Without the necessity of estrus detection Without sacrificing response Summary
  • 289. Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Synchronization of follicular wave emergence offers the convenience of initiating FSH treatments quickly and at a self-appointed time… Without the necessity of estrus detection Without sacrificing response Follicular synchronization protocols will permit superstimulation at 25 to 30 day intervals, without regard to ovarian function Summary
  • 290.
  • 291. D S V J M M L 3 D S V J M AM:X CIDR L 2 D S V J M M L 1 SPO - D AM Gnrh PM IA - D AM IA-D CIDR +EB+P4- D AM y PM: PGF D Col - D

Editor's Notes

  1. 38