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CURSO DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN BOVINOS Ruben Dario Mendoza
Profesores <ul><li>Humberto Tribulo </li></ul><ul><li>Gabriel Bo </li></ul><ul><li>Ricardo Tribulo </li></ul><ul><li>Esteb...
TEMAS <ul><li>Superovulación </li></ul><ul><li>Técnicas de Colección y Transferencia </li></ul><ul><li>Evaluación de Embri...
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Transferências de embriões bovinos realizadas   no Brasil no período de 1990-1999
TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES NO BRASIL Crescimento de 1000% 1992     14.000 TE 2003     130.000 TE     40.000 FIV      95...
 
IETS Newsletter, Diciembre 2005
IETS Newsletter, Diciembre 2005
www.iets.org
 
 
 
IETS Newsletter, Diciembre 2006
IETS Newsletter, Diciembre 2006
IETS Newsletter, Diciembre 2006
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
IETS Newsletter, Diciembre 2005
 
 
 
 
Selección de Donantes
 
 
 
Selección de Donantes <ul><li>Ciclos estrales regulares y que hayan comenzado a temprana edad. </li></ul><ul><li>Dos o men...
<ul><li>Estadío de desarrollo folicular en el momento del tratamiento  </li></ul><ul><li>Estado nutricional  </li></ul><ul...
FACTORES QUE AFECTAN LA TE <ul><li>DONANTES: </li></ul><ul><ul><li>Variación de la  </li></ul></ul><ul><ul><li>respuesta S...
Respuesta SPO Año 1986 2048 Colecciones 11,5/donante Año 2001 1156 Colecciones 12,7/donante Looney, datos no publicados
Variabilidad en la Respuesta Superovulatoria <ul><li>2048  donantes </li></ul><ul><li>E. Totales -  11.5 </li></ul><ul><li...
<ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia repr...
Number of donor animals necessary to detect a difference in two superovulation protocols <ul><li>Assumptions: A standard d...
<ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia repr...
Gonadotropins for Superovulation <ul><li>Pregnant mare’s serum (PMSG/eCG) </li></ul><ul><li>Pituitary extracts (FSH) </li>...
Superstimulation with eCG <ul><li>Day 10: 2500 IU i.m. </li></ul><ul><li>Day 12: PGF (am) </li></ul><ul><li>Day 14: Estrus...
PMSG vs PMSG+MoAB 600 500 400 300 200 100 ESTRADIOL pg/ml Days from treatment 0 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Superovulation with eCG & Antiserum <ul><li>Ova/embryos </li></ul><ul><li>Group n CL Foll Total Fert. Trans. </li></ul><ul...
Extractos de Pituitaria <ul><li>Folltropin-V (Bioniche, Canada). Dosis:100 a 200 mg Cebuínos y 200 a 400 mg en Taurinos. <...
 
Superstimulation Treatment with p-FSH (Folltropin–V*) <ul><li>Day 10 – 4 ML i.m. Bid </li></ul><ul><li>Day 11 – 3 ML i.m. ...
<ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia repr...
Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response Ova/embryos Dose n CL Foll Total Fert. Trans.  100 ...
Tratamiento de Superovulación en Angus y Hereford (Vacas) <ul><li>Día 10 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,5 ml ...
Tratamiento de Superovulación en Vaquillas Angus y Hereford  y Vacas Brangus y Braford <ul><li>Día 10 am 2,0 ml Folltropin...
Tratamiento de Superovulación en Brangus y Braford (Vacas) <ul><li>Día 10 am 3,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,0 ml...
 
Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response in Brahman Cows Ova/embryos Dose n Year Total Trans...
Tratamiento de Superovulación en Vacas Angus y Hereford  <ul><li>Día 10 am 2,0 ml Pluset </li></ul><ul><li>pm 2,0 ml Pluse...
<ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia repr...
IM vs SC Folltropin in Beef Heifers <ul><li>` Ova/Embryos </li></ul><ul><li>Group n CL   Total Fert   Trans </li></ul><ul>...
Single vs Multiple Injections of Folltropin <ul><li>Ova/Embryos </li></ul><ul><li>Treatment n CL   Total Fert Trans </li><...
 
Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response in a single dose treatment Ova/embryos Dose n CL To...
Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response Ova/embryos Dose n CL Foll Total Fert. Trans.  100 ...
Single SC Dose Folltropin (Neck)  Beef Cows <ul><li>Ova/Embryos </li></ul><ul><li>n CL   Total Fert Trans </li></ul><ul><l...
 
 
Superovulation of Holstein Cows with a “Split-dose” Folltropin <ul><li>Multiple im Single sc 15ml sc </li></ul><ul><li>End...
FSH/LH Ratio & Superovulations <ul><li>FSH LH Ratio Cows CL Ova Trans </li></ul><ul><li>450mg  4500mg  0.1 12 2.1 0.5 0.5 ...
<ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia repr...
FSH/LH Ratio and Superovulation Bos taurus <ul><li>    Ova/embryos </li></ul><ul><li>Group n   CL   Total Fert.(%) Trans.(...
FSH/LH Ratios & Superovulation of  Bos indicus  (Overall) <ul><li>Group n CL TOE FO </li></ul><ul><li>100%LH 27 6.0 a 4.6 ...
120 0 30 90 60 200 100 50 % Response % Dose No. of CL 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Ova/Embryos 120 0 30 90 60 2...
Dose of FSH-P in Nelore Cows <ul><li>Dose of FSH-P (mg) </li></ul><ul><li>50 36 24 </li></ul><ul><li>N 52 45 28 </li></ul>...
Heat Stress & Superovulation: Holstein cows <ul><li>Cool Temp (68 o F) Heat Stress (80 o F) </li></ul><ul><li>FSH-P Folltr...
Cold Stress & Superovulation:  Bos indicus <ul><li>Summer Winter </li></ul><ul><li>Group n CL Total Fert.  n CL Total Fert...
Stress and Superovulation <ul><li>Treatment N Cortisol CL </li></ul><ul><li>Control 13 28.4 20.4* </li></ul><ul><li>Stress...
Single vs Multiple Injections of Folltropin in Brahman Cows <ul><li>Group n CL % in estrus </li></ul><ul><li>I 1x i.m. 9 4...
FSH-P Lot Numbers <ul><li>  Experiment 1  Experiment 2 </li></ul><ul><li>536A86   522H85  526K85   526K85  514F85 </li></u...
<ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia repr...
Variabilidad en la Respuesta Superovulatoria <ul><li>2048  donantes </li></ul><ul><li>E. Totales -  11.5 </li></ul><ul><li...
<ul><li>Approximadamente 70% de la  variabilidad puede estar relacionada con las características ováricas en el momento de...
Day of the Estrous Cycle and Superovulatory Response <ul><li>Day 3 Day 6 Day 9 Day 12 </li></ul><ul><li>CL 15.3 b 17.0 ab ...
Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 ...
Animais jovens (20.000-30.000 oocitos após puberdade) Oocito primário Estroma + 2 camadas  foliculares Ovulação Oocito sec...
Características Foliculares 50 to 200  Grupo 1: Numero de  Folículos en Crecimiento Monniaux et al., 1983 > 200 Grupo 2:
Singh et al., 2003
Singh et al., 2003
Características Foliculares y Respuesta Superovulatoria Baja 50 to 200  Grupo 1: Respuesta Superovulatoria Numero de  Folí...
Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 ...
Superovulatory Response and Wave Emergence <ul><li>Initiation No. of follicles   No. of ovul. </li></ul><ul><li>of treatme...
Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 ...
Requisitos para la Superovulación <ul><li>Control de la fase luteal  </li></ul><ul><li>Control del desarrollo folicular  <...
Superovulatory Response and Wave Emergence <ul><li>Initiation No. of follicles   No. of ovul. </li></ul><ul><li>of treatme...
<ul><li>Control de la Fase Luteal. </li></ul><ul><li>Control del Desarrollo Folicular. </li></ul>Requisitos para la Supero...
Control del desarrollo folicular <ul><li>Ablación Folicular </li></ul><ul><li>GnRH </li></ul><ul><li>Progesterona y estrad...
Transvaginal ultrasound-guided follicle ablation Bergfelt et al., 1994
Ablación Folicular Transductor Aguja Ecógrafo Bomba Tubo de colección
Ablation  ~ 1.5 . days new wave emergence Bergfelt et al., 1994 Follicle Size  Days Follicular Ablation
Superovulatory Response After  Aspiration of the Dominant Follicle    Dominant Follicle   Aspiration yes no n 11 14 13  CL...
Superovulatory Response After Follicle Ablation  Transf. Emb. n Transf. Emb. n 0.9 10.1  0.6 14  (no dom. fol.) <0.001 6....
Superovulatory Response After Follicle Ablation  Bergfelt et al., 1996 Means and percentages were not different. ab - Redu...
Follicle Ablation and Superovulation Ova/Embryos Group n CL Total Fertilized Transferable Ablation of 20 23.3 11.0 9.4 8.2...
Superstimulation - Follicle Ablation Day 0  AM  - Ablate 2 largest follicles - Insert CIDR  Day 2  AM  - Initiate FSH trea...
Control del desarrollo Folicular <ul><li>Dispositivos con Progesterona + Estradiol </li></ul>
Progestágenos utilizados en Superovulación de Bovinos <ul><li>Implantes subcutáneos  SMB o Crestar </li></ul><ul><li>Dispo...
Estrógenos <ul><li>Estradiol-17  </li></ul><ul><li>Valerato de Estradiol </li></ul><ul><li>Benzoato de Estradiol </li></ul>
12 10 8 6 4 LH Progestágenos y estradiol-17    ~ 4 . días nueva onda folicular Bo et al., 1994 Diámetro Folicular (mm) Dí...
Superovulación con Progestágenos y Estradiol <ul><ul><ul><ul><ul><li>  </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><li>Día  0  Proge...
Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0  CIDR-B + 5 mg  E-17   + 100 mg P4   </li></ul><ul><li>Día 4 am 4 ml Folltrop...
Superovulacion con Progestagenos + Estradiol-17  vs Tradicional
Tratamiento de Superovulación en Vacas de Carne Británicas <ul><li>Día 0  CIDR-B + 5 mg  E-17   + 100 mg P4   </li></ul><...
P4+Estradiol-17  vs  Tradicional (8 to 12 d pos  estro) Adaptado de: Bo et al., 1995, 1999; y Nigro et al., 2002
Follicle Ablation and Superovulation Ova/Embryos Group n CL Total Fertilized Transferable Ablation of 20 23.3 11.0 9.4 8.2...
<ul><li>Benzoato de Estradiol (EB) </li></ul>
Niveles plasmáticos de estradiol 5 mg E-17   im 5 mg EB im
17   estradiol Benzoato de estradiol Valerato de estradiol Cipionato de estradiol Dias após tratamento 1  2  3  4  5  6  ...
EB im vs EB en cápsulas intravaginales Estradiol-17  Horas post tratamiento
EB VS EB+P4 y Onda Folicular Moreno et al., 2001
EB + P4 and SPO <ul><li>CONTROL EB + P4 Day 0 EB Day 1 </li></ul><ul><li>n 17 18 16 </li></ul><ul><li>CL 9.7 ± 1.4  a 12.7...
SPO con EB o E-17B
Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0  CIDR-B +  </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3...
EB vs E-17B ab - P<0.05
Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0  CIDR-B + </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,...
Superovulación con Progestágenos y Estradiol <ul><ul><ul><ul><ul><li>  </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><li>Día  0  Proge...
Día  7 AM - PGF  2a PM -  Quitar Progest. Día  9 AM – estrus – AI? PM - AI Día 10 AM - AI Día 16 Colección de Embriones <u...
E-17   + EB Caccia et al., 2001   E-17  +PGF D6 E-17  +PGF D7 EB+PGF D6 EB+PGF D7 n 27 26 27 25 Ova/embriones totales 1...
PGF  D6 PGF D7 AI AI AI AI
OVULACIONES
% de ovulaciones. Grupo 1 (PGF D6; ov 77)
% de ovulaciones. Grupo 2 (PGF D7, ov 29)
Ovulaciones por vaca. Grupo PGF D6.
Ovulaciones por vaca. Grupo PGF D7.
% de ovulaciones según la cantidad de CL
Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0  CIDR-B +  </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3...
Semen Fresco vs Congelado  39,77 136 42,40 145 342 C * 62,16 368 17,74 105 592 F * TOTAL 36,09 48 38,35 51 133 C F C F C F...
 
Brangus vs Angus  Comienzo de Onda <ul><li>Vaquillonas de 20 a 24 meses de edad. </li></ul><ul><li>Tratamiento DIB + 2 mg ...
DIB D-1 D8 PGF 2  EB+P4: EB (2mg) +P4 (50mg P4) EB 2 mg D0: EB (2mg) D9 D0 PGF 2  EB 3 mg D0 : EB (3mg) EB 2 mg D1 : EB ...
Sá Filho et.al (2005) *
Tratamiento de Superovulación en Brangus y Braford <ul><li>Día 0  CIDR-B +  </li></ul><ul><li>Día 4 am 2,0 ml Folltropin <...
Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0  CIDR-B + </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,...
Implantes subcutáneos <ul><li>SMB o Crestar </li></ul><ul><li>Valerato de Estradiol (EV) </li></ul>
12 10 8 6 4 N + EV ~ 5,5 . días (3 – 8) Bo et al., 1991 Diámetro Folicular (mm) Días Valerato de Estradiol  y desarrollo f...
E-17    vs EV  Comienzo de la Nueva Onda Folicular  <ul><li>Syncro-Mate-B Crestar </li></ul><ul><li>E-17  + P4   3.7 ...
EV vs E-17B ab - P<0.05 Mapletoft et al., 1999
EV vs E-17B abcd  - Medias (   SEM) o porcentajes con distinta letra difieren (P<0,05).   Nigro et al., 2001   Tradiciona...
Effect of Dose of EV on FWE in CIDR-treated Cows <ul><li>Dose (mg) 0 1 2 5 </li></ul><ul><li>FWE (d) 1.6 a 2.5 ab 3.4 ab 4...
< 0.05 2 - 8 z 2 - 6 y 2 - 4 x Range < 0.001 5.1 ± 0.4 c 3.7 ± 0.3 b 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Overall  19 2...
Pre-treatment with eCG prior to FSH administration
12 10 8 6 4 Progesterone device + P4 and EB ~ 4 . days Wave emergence Caccia and Bo, 1998 Folicular diameter  (mm) Days Sy...
0 Follicle Size (mm) ≥ 4 1-3 -2 2 4 6 8 10 -3 Wave emergence Wave emergence -66 -66 Days from wave emergence Hours from wa...
12 10 8 6 4 2 Progesterone device + P4 and EB ~ 4 . days Wave emergence Folicular diameter  (mm) Synchronization of Follic...
CIDR-B+eCG+FSH <ul><li>  </li></ul><ul><li>EB+P4 FSH 2 PGF IA Emb. Col. </li></ul><ul><li>D. 0 D. 2 D.4 D. 6 D. 8 D. 15 </...
Priming with 300 UI de eCG ab - P<0.05
 
500 UI eCG on Day 2
Synchronization of FWE for Superstimulation <ul><li>Estradiol – 4 days  (5 mg E-17 β  or  2 mg EB or EV plus P4 ) </li></u...
GnRH and Follicular Dynamics 4 8 12 16 Day 9 Day 7 mm Day 0 Day 1-2 GnRH
4 8 12 16 Day 9 Day 7 mm Day 0 Day 1-2 GnRH No OV GnRH and Follicular Dynamics
FA GnRH n 19 18 No. of CL 13.9 10.1 Total Ova/Embryos 9.6 5.3 (%) (65) a (53) b Fertilized Ova  5.0 a   2.9 b (%)  (48) (5...
Alternative: Synchronize Ovulation and Begin Gonadotropin Treatments at the Beginning  of the First Follicular Wave
Superovulatory Response and Wave Emergence <ul><li>Initiation No. of follicles   No. of ovul. </li></ul><ul><li>of treatme...
TREATMENTS  FIRST WAVE GROUPS FSH D15 PGF AM &PM CIDR D10 D0 D5 D9 BE 2mg + P4 (50 mg) PGF 2á LH Group 1 (n= 6) D16 PM D17...
TREATMENTS  FIRST WAVE GROUPS CIDR D10 D0 D5 D9 BE 2mg + P4 (50 mg) PGF 2á LH Group 2 (n= 6) D16 PM D17 AM D17PM D23 IA IA...
TREATMENTS  CONTROL GROUP CIDR D4 D0 BE 2mg + P4 (50 mg) Group 3(n= 6) FSH D8 PGF AM &PM D9 PM D10 AM D10PM D17 IA IA E. C...
Superstimulation of the First Wave (a,b P<0,05) Nasser et al., 2002 (IETS) 2.5  1.2 2.5    1.6 7.0  2.7 Unfertilized ov...
Nasser et al SBTE  (2005) Superstimulation of the First Wave
Cue-Mate D12 AM D0 PM D10PM PGF LH  FIRST WAVE GROUP WITH CUE-MATE Cue-Mate PGF FSH D18 AM PGF AM &PM D19 AM D19 PM D20AM ...
Preliminary Results Table 1.  All donors’ main effects Means did not differ (P>0.28). 4,8±1,3 4,1±1,2 5,5±1,4 7,2±1,4 18 H...
CIDR-B+eCG+FSH <ul><li>  </li></ul><ul><li>EB+P4 eCG 1 FSH 2 PGF   IA C. Emb. </li></ul><ul><li>D. 0 D. 2 D.4 D. 6 D. 8 D....
Priming con 300 UI de eCG ab - P<0.05
Priming con 500 UI eCG
Priming con 500 UI eCG ab - P<0.05
RESULTADOS <ul><li>CL: 10-12 </li></ul><ul><li>Embriones Totales: 8-10 </li></ul><ul><li>Embriones Transferibles: 5-6  </l...
 
Momento de la Ovulacion en Vacas Superestimuladas Pablo M. Chesta   1 Instituto de Reproducción Animal Córdoba (IRAC) ,  2...
1. Esquema tradicional de superovulação 2. Superovulação com sincronização da onda de crescimento folicular 3. Superovulaç...
Superovulation Treatment with  Progestogen and Estradiol <ul><ul><ul><ul><ul><li>  </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><li>D...
PGF  D6 AI AI
Time of Ovulation in Relation to Superovulatory Response AI AI Ov. Interval 0-11 h: 8/13 (62%) 12/23 h: 3/13 (23 %) 24/35 ...
Time of Ovulation in Relation to Superovulatory Response AI AI
Individual Data. Group PGF D6
Right ovary Left ovary SUPEROVULATORY RESPONSE
Superovulação de doadoras para IATF PGF 2  2 6 10 14 Dia 8 Dia 7 mm Dia 0 Dia 4 BE + P4 LH P4 FSH P4 LH  E2
PGF 2  2 6 10 14 Dia 8 Dia 7 mm Dia 0 Dia 4 BE + P4 LH or GnRH P4 FSH P4
OBJETIVO GENERAL <ul><li>Evaluar el efecto de la sincronización de la ovulación sobre la producción de embriones fertiliza...
Materiales y Métodos <ul><li>86 vacas y vaquillonas; Angus coloradas (34 para ovulación.) </li></ul><ul><li>CC: entre 3 y ...
DIB 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
0  4  6  7  8  9  15 DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0  4  ...
0  4  6  7  8  9  15 Grupo: Día 7 Control DIB 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA FSH 2x4 Colecta de emb...
0  4  6  7  8  9  15 DIB Grupo: Día 7 GnRH 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de e...
Ultrasonografía
Ultrasonografía 0  4  6  7  8  9  11  15 D 0: ciclicidad c/ 8 hs 1 er PGF: H 0 D 8 - 11: determinación de ovulaciones Ovul...
Cantidad de ovulaciones y hora media de ovulación para donantes Aberdeen Angus superestimuladas con Folltropin-V. ab  valo...
 
51.6 33.5 78.2 ± 1.4 81.2 ± 1.1 15.9 ± 1.3 18.0 ± 1.6 27 27 Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) 30.6 53.9 78.1 ± 1.1 c 81.5 ± 1.4 d ...
4.8 ± 0.7 5.5 ± 0.7 6.8 ± 0.9 8.7 ± 1.0 9.6 ± 1.2 12.2 ± 1.4 46 49 Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) 4.9 ± 0.7 5.4 ± 0.7 7.4 ± 1.0...
Distribución de las ovulaciones por Grupo. X 6,5. Control X 7. Control X 6,5. GnRH X 7. GnRH IA 98 %
Gráfico 3.Distribución de las ovulaciones evaluando      la aplicación de GnRH (%). IA GnRH: 95,5 % Control: 81,3 % P < 0,...
Ovocitos/embriones totales colectados, embriones y embriones transferibles en donantes Brangus. a,b (P = 0,077) Chesta et ...
Ovocitos/embriones totales colectados, fertilizados y transferibles en donantes de embriones Angus.   Las medias no difier...
<ul><li>Evaluar el efecto de la remoción del dispositivo con progesterona  en el día 7 por la tarde sobre el número y cali...
0  4  7  8  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h  Colecta de embriones DIB PGF Grupo: X 7.5. GnRH 24 0  ...
ab P<0.0001 cd P=0.03 Mean  +  SEM 4.4 c 5.0 c 19.6 d 80.0 – 86.1 78.9 – 86.5 82.0 – 98.8 81.1    0.6 a 81.7    0.6 a 91...
 
4.2    1.0 4.3    0.7 4.5    0.8 6.4    1.2 5.9    0.8 6.1    1.0 9.1    1,4 9.4    1.3 8.4    1.2 33 36 36 8 8 8...
Mean number of ova/embryo collected, fertilized ova and transferable embryos in superstimulated Red Angus donors treated w...
Mean number of ova/embryos collected, fertilized ova and transferable embryos in superstimulated Brangus donors treated wi...
Control CIDR 0  4  6  7  8  9  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   PGF FSH (7 t) EC IA 12 and 24 h after estrus Heat-Watch CIDR L...
IA 12 and 24 h after estrus (Heat-Watch) vs FTAI 12 and 24 after pLH Larkin et al., 2006 9.6ª 11.6ª 21.4ª 57.3ª (53-62) 26...
Materiales y Métodos <ul><li>55 vacas y vaquillonas; AA col., Brangus.  </li></ul><ul><li>CC: entre 3 y 4 </li></ul><ul><l...
0  4  7  8  15 2,5 mg  E-17  50 mg P4   FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h  Colecta de embriones DIB PGF Grupo: D 7,5. GnRH 24 0  ...
Distribución de las ovulaciones por Grupo
SOV EM TEMPO FIXO EM VACAS HOLANDESAS DE ALTA PRODUÇÃO
Grupo P24 LH48 (n=8) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 M PGF 2  Colheita  De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Re...
Grupo P36 LH48 (n=8) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 T PGF 2  Colheita  De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Re...
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica 3 a  Réplica 4 a  Réplica Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de...
 
 
 
Tabela - Efeito do tempo de permanência do dispositivo intravaginal de progesterona (24 ou 36 h) e do momento da aplicação...
52.3 81.3 ± 1.5 7.6 ± 1.1 22 Day 7.5 (P36) 62.7 81.0 ± 1.7 7.3 ± 1.2 21 Day 7 (P24) 52.3 83.9 ± 1.6 b 8.9 ± 1.3 d 21 Day 8...
Gráfico-  Distribuição das ovulações de acordo tempo de permanência do dispositivo de progesterona (24 ou 36 após PGF) em ...
Gráfico-  Distribuição das ovulações de acordo com o momento da administração do LH (48 ou 60 após a PGF) em vacas Holande...
 
Pietro Sampaio Baruselli Prof. Dr. Departamento de Reprodução Animal Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Univers...
ADEQUAÇÃO DO MOMENTO DA RETIRADA DO DISPOSITIVO DE PROGESTERONA PARA IATF EM EM PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO DE VACAS NELOR...
PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM IMPLANTES DE PROGESTERONAE  INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH PARA IATF PGF2  (M e T)  FSH  (133 ...
2,2    3,5 5,2    8,7 Não fertilizados 5,2    6,1 6,7    4,8 Embriões degenerados 10,3    5,9 9,3    7,5 Embriões vi...
<ul><li>ADEQUAÇÃO DA DOSE DE FSH (FOLLTROPIN-V ® ) EM PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO DE VACAS NELORE ( Bos taurus indicus ) C...
HIPÓTESE   É possível superovular doadoras  Bos taurus indicus  com reduzidas doses de FSHp sem comprometimento da respost...
Doadoras de embrião da Fazenda Dinorá - Cornélio Procópio - PR Med. Vet. Rubens Cesar Pinto
Doadoras de embrião da Fazenda Pontal de Ouro - Campo Grande - MS Med. Vet. Luiz Fernando Tonissi Nasser
PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO INDUZINDO A OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH (FOLLTROPIN) PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T)  FSH ?  (Foll...
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica 3 a  Réplica Empregou-se o mesmo acasalamento por doadora em todas as répli...
Tabela . Resposta superovulatória (média    desvio padrão) de vacas Nelore superovuladas com diferentes doses de FSH (Fol...
PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM CIDR-B ®  INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T)  FSH ? CIDR-B...
PONTAL DE OURO - CAMPO GRANDE - MS
Vacas Nelore (n=12) serão superovuladas, sendo realizadas 3 coletas de embriões em cada vaca com  diferentes  doses de Fol...
 
<ul><li>ADEQUAÇÃO DA DOSE DE FSH (OVAGEN ® ) EM PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO DE VACAS NELORE ( Bos taurus indicus ) COM INS...
PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM DIB ®  INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH (OVAGEN) PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T)  FSH ? ...
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica 3 a  Réplica (35d) (35d) Grupo 9,0mg Ovagen Grupo 6,0mg Ovagen Grupo 4,5mg ...
Tabela - Efeito da dose (9, 6 ou 4.5mg) do extrato de pituitária ovina (Ovagen  ) na resposta superovulatória de vacas Ne...
Effect of Dose of Folltropin-V on Superovulatory Response in Brahman Cows Ova/embryos Dose n Year Total Transferable  140 ...
 
Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Poços de Caldas - MG
Grupo 1 (n=20) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 M PGF 2  Colheita  de embrião D5 D15 M FSH  (100mg Folltr.) ...
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica (35d) Grupo P24/LH48 Grupo P24/LH60 Empregou-se o mesmo acasalamento por do...
Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Botenhos - MG
Tabela - Efeito do momento da aplicação do LH (48 ou 60 horas) após a aplicação de prostaglandina em vacas Nelore ( Bos in...
Gráfico-  Distribuição das ovulações de acordo com o momento da administração do LH (48 ou 60 após a PGF) em vacas Nelore ...
Redução do número de inseminações no protocolo de superovulação com inseminação em tempo fixo em doadoras Nelore (Bos indi...
Desenho Experimental 1 a  Réplica 2 a  Réplica (35d) Grupo 1 IATF Grupo 2 IATF Empregou-se a mesma partida de sêmen para I...
Grupo 1 (n=10) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 T PGF 2  D8 T Colheita  de embrião D5 D15 M FSH  (100mg Foll...
Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Botenhos - MG
Tabela  - Efeito do número de inseminações na eficiência de programas de superovulação com  inseminação artificial em temp...
Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0  DISP P4 +  </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm ...
Programación de Donantes
Programa de Producción de Embriones <ul><li>Objetivo: </li></ul><ul><li>Producir el mayor número de embriones en el menor ...
Niveles de P4 y celo en donantes tratadas con cloprostenol el día de la colecta 7,2 ±0,9 5/9 3,1 ±0,5 b 9/9 b 750   g 7,0...
Dinámica folicular en donantes tratadas con cloprostenol en el día de la colecta
Superovulaciones repetidas y respuesta 3,5 1,5 2,8 3,5 3,2 Embr. Trans. 7,4 5,8 6 6,8 6,8 CL Vacas “Problema” 6 5,8 6 6,5 ...
Programación de Donantes (Tradicional con CIDR-B) <ul><li>Día 0 Colección de Embriones + PGF </li></ul><ul><li>Día 5-7   C...
Programación de Donantes (Frare et al., 1997) <ul><li>Día 0 Colección de Embriones  </li></ul><ul><ul><li>+ CIDR-B + PGF  ...
Intervalo Entre Colecciones y Producción de Embriones Frare et al., 1997
Desempeño de vacas Angus donantes superovuladas cada 40 días durante un período de 18 meses (Hasler, 2000) Cantidad de don...
Programación de Donantes  <ul><li>Día 0 Colección de Embriones </li></ul><ul><li>+ PGF </li></ul><ul><li>Día 25-35 CIDR + ...
Producción de Embriones  Efecto de Fecha de Superovulación   <ul><li>1. diciembre 1, 1997 </li></ul><ul><li>2. enero 9, 19...
Programación de Donantes  <ul><li>Día 0 Colección de Embriones </li></ul><ul><li>+ PGF </li></ul><ul><li>Día 13 CIDR + EB ...
Desempeño de vacas Red Angus donantes superovuladas cada 28 - 50 días Cantidad de donantes 20 Período de tratamiento 32 me...
<ul><li>Producción estimada  </li></ul><ul><li>(en base a 5,8 embriones transferibles por vaca) </li></ul><ul><li>365 días...
Superstimulation following E-17 β Day 0  - Insert CIDR  - inject 5 mg E-17β plus 100 mg P4 Day 4  - Initiate FSH treatment...
Superstimulation following Follicle Ablation Day 0  - Ablate 2 largest follicles  - Insert CIDR Day 1  - Initiate FSH trea...
34.11 30.2 39.2 Avg. Days b/t Flushes 1342 893 449 Total IETS # 1 collected 8.5 Traditional 60 day Transferable/flush (103...
Gonadotropin treatments must be initiated at the  time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Su...
Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Syn...
Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Syn...
Programacion de Donantes y Receptoras <ul><li>Día 0: CIDR+EB+P4 </li></ul><ul><li>Día 4: SPO </li></ul><ul><li>Día 6 AM: P...
D S V J M M L 3 D S V J M AM:X CIDR L 2 D S V J M M L 1 SPO - D AM Gnrh PM IA - D AM IA-D CIDR +EB+P4- D AM y PM: PGF D Co...
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Clase 1 superovulacion

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Clase 1 superovulacion

  1. 1. CURSO DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN BOVINOS Ruben Dario Mendoza
  2. 2. Profesores <ul><li>Humberto Tribulo </li></ul><ul><li>Gabriel Bo </li></ul><ul><li>Ricardo Tribulo </li></ul><ul><li>Esteban Balla </li></ul><ul><li>Andres Tribulo </li></ul>
  3. 3. TEMAS <ul><li>Superovulación </li></ul><ul><li>Técnicas de Colección y Transferencia </li></ul><ul><li>Evaluación de Embriones </li></ul><ul><li>Manejo y Sincronización de Receptoras </li></ul><ul><li>Congelación de embriones </li></ul><ul><li>Factores que afectan los índices de preñez </li></ul>
  4. 14. Transferências de embriões bovinos realizadas no Brasil no período de 1990-1999
  5. 15. TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES NO BRASIL Crescimento de 1000% 1992  14.000 TE 2003  130.000 TE  40.000 FIV  95% bovino de corte Fonte: SBTE 2003 Mundo = 600.000 TE 1 o . EUA  230.000 TE 2 o e 3 o . Brasil e Japão  130.000 TE
  6. 17. IETS Newsletter, Diciembre 2005
  7. 18. IETS Newsletter, Diciembre 2005
  8. 19. www.iets.org
  9. 23. IETS Newsletter, Diciembre 2006
  10. 24. IETS Newsletter, Diciembre 2006
  11. 25. IETS Newsletter, Diciembre 2006
  12. 37. IETS Newsletter, Diciembre 2005
  13. 42. Selección de Donantes
  14. 46. Selección de Donantes <ul><li>Ciclos estrales regulares y que hayan comenzado a temprana edad. </li></ul><ul><li>Dos o menos servicios por concepción en años anteriores. </li></ul><ul><li>Comportamiento individual superior en características de importancia económica. </li></ul><ul><li>Crías superiores a la media del rodeo. Especialmente comparado con sus hermanos/as (hijos del mismo toro). </li></ul><ul><li>Ningún problema al parto o irregularidades reproductivas. </li></ul><ul><li>Ningún defecto genético o de conformación detectable. </li></ul><ul><li>Entre 15 meses y 10 años de edad. </li></ul>
  15. 47. <ul><li>Estadío de desarrollo folicular en el momento del tratamiento </li></ul><ul><li>Estado nutricional </li></ul><ul><li>Historia reproductiva </li></ul><ul><li>Edad de la donante </li></ul><ul><li>Estación del año </li></ul><ul><li>Raza </li></ul><ul><li>Causas genéticas o fisiológicas </li></ul><ul><li>Repetición de tratamientos superovulatorios </li></ul><ul><li>Momento de iniciación del tratamiento con relación al ciclo estral </li></ul><ul><li>Tipo de gonadotrofina utilizada </li></ul><ul><li>Lotes de gonadotrofinas </li></ul><ul><li>Relación FSH y LH de los preparados comerciales </li></ul><ul><li>Duración del tratamiento </li></ul><ul><li>Dosis total de gonadotrofinas </li></ul><ul><li>Vía de administración de las gonadotrofinas </li></ul><ul><li>Uso de hormonas adicionales </li></ul>Factores inherentes al animal y a su ambiente. Factores relacionados al tratamiento de superovulación FACTORES QUE AFECTAN LA RESPUESTA SUPEROVULATORIA
  16. 48. FACTORES QUE AFECTAN LA TE <ul><li>DONANTES: </li></ul><ul><ul><li>Variación de la </li></ul></ul><ul><ul><li>respuesta Superovulatoria </li></ul></ul><ul><ul><li>Costo de las hormonas </li></ul></ul><ul><li>RECEPTORAS: </li></ul><ul><ul><li>Manejo </li></ul></ul><ul><ul><li>Sincronización </li></ul></ul><ul><ul><li>% de utilización </li></ul></ul>
  17. 49. Respuesta SPO Año 1986 2048 Colecciones 11,5/donante Año 2001 1156 Colecciones 12,7/donante Looney, datos no publicados
  18. 50. Variabilidad en la Respuesta Superovulatoria <ul><li>2048 donantes </li></ul><ul><li>E. Totales - 11.5 </li></ul><ul><li>E. Transferibles - 6.2 </li></ul><ul><li>24 % de las donantes no produjo embriones </li></ul><ul><li>30 % de las donantes produjo el 70% de los embriones </li></ul>Looney et al., 1986
  19. 51. <ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia reproductiva </li></ul><ul><li>Dosis Edad </li></ul><ul><li>Vía de adm. Estación del año </li></ul><ul><li>Frecuencia Status ovárico </li></ul><ul><li>Lugar de adm. </li></ul>Factores que afectan la respuesta superovulatoria
  20. 52. Number of donor animals necessary to detect a difference in two superovulation protocols <ul><li>Assumptions: A standard deviation of 4 good embryos per donor superovulated. Statistical significance of P<0.05 ( α ), with an 80% chance of detecting a specified true difference. (1-tail test) </li></ul><ul><li>To detect the following differences between the two superovulation treatments : </li></ul>23 3 50 2 199 1 792 0.5 No. of donors required per treatment group Difference in the no. of embryos
  21. 53. <ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia reproductiva </li></ul><ul><li>Dosis Edad </li></ul><ul><li>Vía de adm. Estación del año </li></ul><ul><li>Frecuencia Status ovárico </li></ul><ul><li>Lugar de adm. </li></ul>Factores que afectan la respuesta superovulatoria
  22. 54. Gonadotropins for Superovulation <ul><li>Pregnant mare’s serum (PMSG/eCG) </li></ul><ul><li>Pituitary extracts (FSH) </li></ul><ul><li>Human menopausal gonadotropin (hmG) </li></ul>
  23. 55. Superstimulation with eCG <ul><li>Day 10: 2500 IU i.m. </li></ul><ul><li>Day 12: PGF (am) </li></ul><ul><li>Day 14: Estrus (am) </li></ul><ul><li>Ab and AI (pm) </li></ul><ul><li>Day 15: AI (am) </li></ul>
  24. 56. PMSG vs PMSG+MoAB 600 500 400 300 200 100 ESTRADIOL pg/ml Days from treatment 0 3 4 5 6 7 8 9 10 11
  25. 57. Superovulation with eCG & Antiserum <ul><li>Ova/embryos </li></ul><ul><li>Group n CL Foll Total Fert. Trans. </li></ul><ul><li>I-48 hr 8 13.9 ab 1.9 a 6.0 4.9 4.0 </li></ul><ul><li>II-60 hr 8 17.0 a 2.2 a 9.7 5.9 5.3 </li></ul><ul><li>III-Control 8 7.8 b 6.1 b 4.5 2.8 2.1 </li></ul><ul><li>ab P<0.05 Wang et al., 1987 </li></ul>
  26. 58. Extractos de Pituitaria <ul><li>Folltropin-V (Bioniche, Canada). Dosis:100 a 200 mg Cebuínos y 200 a 400 mg en Taurinos. </li></ul><ul><li>Pluset (Calier, España). </li></ul><ul><li>Dosis: 200 a 350 UI en Cebuínos y 350 a 1000 UI en Taurinos. </li></ul><ul><li>Ovagen (ICP, Nueva Zelandia) </li></ul><ul><li>Dosis: 6 a 10 mg en Cebuínos y 17,6 mg (20 ml) en Taurinos. </li></ul>
  27. 60. Superstimulation Treatment with p-FSH (Folltropin–V*) <ul><li>Day 10 – 4 ML i.m. Bid </li></ul><ul><li>Day 11 – 3 ML i.m. Bid </li></ul><ul><li>Day 12 – 2 ML i.m. Bid and PGF (AM) </li></ul><ul><li>Day 13 – 1 ML i.m. Bid </li></ul><ul><li>Day 14 - A.I. (PM) </li></ul><ul><li>Day 15 - A.I. (AM) </li></ul><ul><li>* Bioniche Animal Health </li></ul>
  28. 61. <ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia reproductiva </li></ul><ul><li>Dosis Edad </li></ul><ul><li>Vía de adm. Estación del año </li></ul><ul><li>Frecuencia Status ovárico </li></ul><ul><li>Lugar de adm. </li></ul>Factores que afectan la respuesta superovulatoria
  29. 62. Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response Ova/embryos Dose n CL Foll Total Fert. Trans. 100 mg 11 3.6 a 1.0 0.8 a 0.4 a 0.3 200 mg 11 10.7 b 3.8 4.8 b 3.6 b 1.1 400 mg 11 20.3 bc 3.7 6.8 b 5.1 b 2.6 800 mg 11 22.9 c 4.0 6.3 b 4.0 b 2.2 ( abc P<0.05 ) Mapletoft et al., 1988
  30. 63. Tratamiento de Superovulación en Angus y Hereford (Vacas) <ul><li>Día 10 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 11 am 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 12 am 1,5 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>pm 1,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 13 am 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 14 am Celo + IA </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 15 am IA </li></ul><ul><li>Día 21 Colección de embriones </li></ul>Dosis Total: 320 mg NIH-FSH-P1
  31. 64. Tratamiento de Superovulación en Vaquillas Angus y Hereford y Vacas Brangus y Braford <ul><li>Día 10 am 2,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 11 am 1,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 1,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 12 am 1,0 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>pm 1,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 13 am 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 14 am Celo + IA </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 15 am IA </li></ul><ul><li>Día 21 Colección de embriones </li></ul>Dosis Total: 200 mg NIH-FSH-P1
  32. 65. Tratamiento de Superovulación en Brangus y Braford (Vacas) <ul><li>Día 10 am 3,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 11 am 2,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 12 am 1,0 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>pm 1,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 13 am 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 14 am Celo + IA </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 15 am IA </li></ul><ul><li>Día 21 Colección de embriones </li></ul>Dosis Total: 260 mg NIH-FSH-P1
  33. 67. Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response in Brahman Cows Ova/embryos Dose n Year Total Transferable 140 mg 49 2003 9.39 9.20 171 mg 96 2002 9.50 9.02 320 mg 80 2001 9.00 8.55 G. Uribe Mejía, 2004
  34. 68. Tratamiento de Superovulación en Vacas Angus y Hereford <ul><li>Día 10 am 2,0 ml Pluset </li></ul><ul><li>pm 2,0 ml Pluset </li></ul><ul><li>Día 11 am 1,5 ml Pluset </li></ul><ul><li>pm 1,5 ml Pluset </li></ul><ul><li>Día 12 am 1,0 ml Pluset + PGF </li></ul><ul><li>pm 1,0 ml Pluset </li></ul><ul><li>Día 13 am 0,5 ml Pluset </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Pluset </li></ul><ul><li>Día 14 am Celo + IA </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 15 am IA </li></ul><ul><li>Día 21 Colección de embriones </li></ul>Dosis Total: 500 UI
  35. 69. <ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia reproductiva </li></ul><ul><li>Dosis Edad </li></ul><ul><li>Vía de adm . Estación del año </li></ul><ul><li>Frecuencia Status ovárico </li></ul><ul><li>Lugar de adm. </li></ul>Factores que afectan la respuesta superovulatoria
  36. 70. IM vs SC Folltropin in Beef Heifers <ul><li>` Ova/Embryos </li></ul><ul><li>Group n CL Total Fert Trans </li></ul><ul><li>8x IM 9 17.1 a 6.2 4.3 3.0 </li></ul><ul><li>8x SC 10 8.1 b 4.8 3.8 2.6 </li></ul><ul><li>ab P<0.01 </li></ul>
  37. 71. Single vs Multiple Injections of Folltropin <ul><li>Ova/Embryos </li></ul><ul><li>Treatment n CL Total Fert Trans </li></ul><ul><li>1 x SC 84 16.6 9.8 7.3 5.3 </li></ul><ul><li>8 x IM 54 14.9 7.4 5.5 3.8 </li></ul>
  38. 73. Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response in a single dose treatment Ova/embryos Dose n CL Total Fert. Trans. 200 mg 11 3.6 a 1.8 a 1.5 a 1.2 a 400 mg 12 23.3 b 15.2 b 11.8 b 9.5 b 600 mg 11 25.0 b 12.8 b 7.1 b 5.7 b 800 mg 11 13.9 b 10.2 b 6.1 b 5.3 b ( abc P<0.05 ) Bo et al., 1994
  39. 74. Effect of Dose (NIH-FSH-P1) of Folltropin-V on Superovulatory Response Ova/embryos Dose n CL Foll Total Fert. Trans. 100 mg 11 3.6 a 1.0 0.8 a 0.4 a 0.3 200 mg 11 10.7 b 3.8 4.8 b 3.6 b 1.1 400 mg 11 20.3 bc 3.7 6.8 b 5.1 b 2.6 800 mg 11 22.9 c 4.0 6.3 b 4.0 b 2.2 ( abc P<0.05 ) Mapletoft et al., 1988
  40. 75. Single SC Dose Folltropin (Neck) Beef Cows <ul><li>Ova/Embryos </li></ul><ul><li>n CL Total Fert Trans </li></ul><ul><li>Fat 23 22 a 10.6 6.1 4.5 </li></ul><ul><li>Lean 16 3.0 b 1.8 1.6 1.2 </li></ul>ab P<0.05
  41. 78. Superovulation of Holstein Cows with a “Split-dose” Folltropin <ul><li>Multiple im Single sc 15ml sc </li></ul><ul><li>End Point injections injection 5ml sc </li></ul><ul><li>N 12 13 13 </li></ul><ul><li>CL 14.0 a 6.4 b 10.5 ab </li></ul><ul><li>Ova/emb 7.7 3.1 5.3 </li></ul><ul><li>Fert. ova 7.0 2.3 4.7 </li></ul><ul><li>Trans. emb 5.6 2.3 3.0 </li></ul><ul><li>ab P<0.05 Lovie et al., 1994 </li></ul>
  42. 79. FSH/LH Ratio & Superovulations <ul><li>FSH LH Ratio Cows CL Ova Trans </li></ul><ul><li>450mg 4500mg 0.1 12 2.1 0.5 0.5 </li></ul><ul><li>450mg 900mg 0.5 15 4.9 3.5 2.1 </li></ul><ul><li>450mg 52mg 8.7 14 8.4 7.1 4.6 </li></ul><ul><li>450 mg FSH = 52 mg FSH-P Chupin et al., 1984 </li></ul>
  43. 80. <ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia reproductiva </li></ul><ul><li>Dosis Edad </li></ul><ul><li>Vía de adm. Estación del año </li></ul><ul><li>Frecuencia Status ovárico </li></ul><ul><li>Lugar de adm. </li></ul>Factores que afectan la respuesta superovulatoria
  44. 81. FSH/LH Ratio and Superovulation Bos taurus <ul><li> Ova/embryos </li></ul><ul><li>Group n CL Total Fert.(%) Trans.(%) </li></ul><ul><li>I 100% LH 21 10.2 a 7.3 a 5.3 c (73) 4.0 (55) </li></ul><ul><li>II 32% LH 20 11.1 a 6.4 a 4.6 c (72) 3.9 (61) </li></ul><ul><li>III 16% LH 20 15.6 b 13.6 b 9.7 d (71) 7.7 (57) </li></ul><ul><li>IV Pure FSH 20 17.2 b 13.2 b 8.3 d (63) 5.5 (42) </li></ul><ul><li>( ab P<0.05; cd P<0.07) Willmott et al., 1990 </li></ul>
  45. 82. FSH/LH Ratios & Superovulation of Bos indicus (Overall) <ul><li>Group n CL TOE FO </li></ul><ul><li>100%LH 27 6.0 a 4.6 3.9 </li></ul><ul><li>16%LH 27 11.7 ab 5.8 4.0 </li></ul><ul><li>Pure FSH 29 18.1 b 8.5 6.8 </li></ul><ul><li>ab P<0.05 </li></ul><ul><li>Tribulo et al., 1991 </li></ul>
  46. 83. 120 0 30 90 60 200 100 50 % Response % Dose No. of CL 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Ova/Embryos 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Fert. Ova 120 0 30 90 60 200 100 50 % Dose No. of Trans. Embryos % Response % Response % Response Foll. hMG FSH-P
  47. 84. Dose of FSH-P in Nelore Cows <ul><li>Dose of FSH-P (mg) </li></ul><ul><li>50 36 24 </li></ul><ul><li>N 52 45 28 </li></ul><ul><li>% trans. emb. 25 a 29 ab 50 b </li></ul><ul><li>Trans. 1.4 1.4 1.7 </li></ul><ul><li>UFO 3.4 1.8 1.1 </li></ul><ul><li>Fert. (%) 29.2 a 43.8 b 60.2 c </li></ul><ul><li>Elsden & Kessler, 1983 </li></ul>ab P<0.05
  48. 85. Heat Stress & Superovulation: Holstein cows <ul><li>Cool Temp (68 o F) Heat Stress (80 o F) </li></ul><ul><li>FSH-P Folltropin FSH-P Folltropin </li></ul><ul><li>n 20 20 20 20 </li></ul><ul><li>CL 10.7 ab 10.1 ab 9.8 b 13.1 a </li></ul><ul><li>Fert. 4.8 ab 4.7 ab 3.5 a 7.1 b </li></ul><ul><li>(%) 88 ab 7.3 a 89 ab 95 b </li></ul><ul><li>Trans. 3.1 a 3.3 a 2.9 a 6.3 b </li></ul><ul><li>ab-P<0.05 Page et al., 1989 </li></ul>
  49. 86. Cold Stress & Superovulation: Bos indicus <ul><li>Summer Winter </li></ul><ul><li>Group n CL Total Fert. n CL Total Fert. </li></ul><ul><li>100% LH 13 8.5 4.7 4.2 14 3.7 a 4.4 3.4 </li></ul><ul><li>16% LH 12 19.2* 9.6 7.0 15 5.9 a 1.6 0.8 </li></ul><ul><li>Pure FSH 14 16.5 7.0 5.7 15 19.4 ab 10.6 8.3 </li></ul><ul><li>* ab P<0.05 </li></ul><ul><li>Tribulo et al., 1991 </li></ul>
  50. 87. Stress and Superovulation <ul><li>Treatment N Cortisol CL </li></ul><ul><li>Control 13 28.4 20.4* </li></ul><ul><li>Stressed 17 34.8 15.4 </li></ul><ul><li>*P<0.01 </li></ul><ul><li>Edwards et al., 1987 </li></ul>
  51. 88. Single vs Multiple Injections of Folltropin in Brahman Cows <ul><li>Group n CL % in estrus </li></ul><ul><li>I 1x i.m. 9 4.8 20 </li></ul><ul><li>II 1x s.c. 10 30.6 60 </li></ul><ul><li>Ill 8x i.m. 10 11.1 100 </li></ul><ul><li>IV 8x s.c. 10 9.3 100 </li></ul><ul><li>P<0.05 </li></ul>
  52. 89. FSH-P Lot Numbers <ul><li> Experiment 1 Experiment 2 </li></ul><ul><li>536A86 522H85 526K85 526K85 514F85 </li></ul><ul><li>Potency 46.0 46.9 64.1 64.1 46.9 </li></ul><ul><li>n 26 26 30 19 19 </li></ul><ul><li>CL 10.0 11.2 11.1 13.6 14.4 </li></ul><ul><li>Xu et al., 1988 </li></ul>
  53. 90. <ul><li>Extrínsecos Intrínsecos </li></ul><ul><li>Gonadotrofinas Status nutricional </li></ul><ul><li>Pureza Historia reproductiva </li></ul><ul><li>Dosis Edad </li></ul><ul><li>Vía de adm. Estación del año </li></ul><ul><li>Frecuencia Status ovárico </li></ul><ul><li>Lugar de adm. </li></ul>Factores que afectan la respuesta superovulatoria
  54. 91. Variabilidad en la Respuesta Superovulatoria <ul><li>2048 donantes </li></ul><ul><li>E. Totales - 11.5 </li></ul><ul><li>E. Transferibles - 6.2 </li></ul><ul><li>24 % de las donantes no produjo embriones </li></ul><ul><li>30 % de las donantes produjo el 70% de los embriones </li></ul>Looney et al., 1986
  55. 92. <ul><li>Approximadamente 70% de la variabilidad puede estar relacionada con las características ováricas en el momento del comienzo de los tratamientos </li></ul><ul><li>(Monniaux et al., 1983) </li></ul>
  56. 93. Day of the Estrous Cycle and Superovulatory Response <ul><li>Day 3 Day 6 Day 9 Day 12 </li></ul><ul><li>CL 15.3 b 17.0 ab 33.3 a 23.9 ab </li></ul><ul><li>Ova/embryos </li></ul><ul><li>Total 10.0 11.0 17.0 11.7 </li></ul><ul><li>Fertilized 6.7 ab 6.3 b 13.3 a 6.6 ab </li></ul><ul><li>Trans. 2.7 4.3 7.2 3.9 </li></ul><ul><li>ab P<0.05 </li></ul><ul><li>Lindsell et al., 1986 </li></ul>
  57. 94. Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 10 8 6 4 Follicular Diameter (mm) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
  58. 95. Animais jovens (20.000-30.000 oocitos após puberdade) Oocito primário Estroma + 2 camadas foliculares Ovulação Oocito secundário Produção de Progesterona Regreção do CL (antigo CL) (> %) Folículo primário Folículo terciário Folículo secundário Folículo atresico Corpus Albicans Corpo lúteo (CL) Corpo hemorrágico Ruptura Folicular Folículo de Graaf Ovum (1N) (2N) Produção de estrógeno
  59. 96. Características Foliculares 50 to 200 Grupo 1: Numero de Folículos en Crecimiento Monniaux et al., 1983 > 200 Grupo 2:
  60. 97. Singh et al., 2003
  61. 98. Singh et al., 2003
  62. 99. Características Foliculares y Respuesta Superovulatoria Baja 50 to 200 Grupo 1: Respuesta Superovulatoria Numero de Folículos en Crecimiento Monniaux et al., 1983 > 200 Grupo 2: Baja Alta
  63. 100. Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 10 8 6 4 Follicular Diameter (mm) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
  64. 101. Superovulatory Response and Wave Emergence <ul><li>Initiation No. of follicles No. of ovul. </li></ul><ul><li>of treatment n (>7 mm) (ultrasound) </li></ul><ul><li>Day -1 11 22.0 ± 3.4 a 9.5 ± 2.3 b </li></ul><ul><li>Day 0 7 20.3 ± 3.8 a 18.4 ± 3.4 a </li></ul><ul><li>Day +1 6 7.7 ± 2.4 b 6.7 ± 2.2 b </li></ul><ul><li>Day +2 6 7.3 ± 2.3 b 6.5 ± 2.3 b </li></ul><ul><li>ab (P<0.05). </li></ul>Nasser et al., 1993
  65. 102. Follicular Waves in Cattle Days after ovulation 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 16 14 12 10 8 6 4 Follicular Diameter (mm) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
  66. 103. Requisitos para la Superovulación <ul><li>Control de la fase luteal </li></ul><ul><li>Control del desarrollo folicular </li></ul>
  67. 104. Superovulatory Response and Wave Emergence <ul><li>Initiation No. of follicles No. of ovul. </li></ul><ul><li>of treatment n (>7 mm) (ultrasound) </li></ul><ul><li>Day -1 11 22.0 ± 3.4 a 9.5 ± 2.3 b </li></ul><ul><li>Day 0 7 20.3 ± 3.8 a 18.4 ± 3.4 a </li></ul><ul><li>Day +1 6 7.7 ± 2.4 b 6.7 ± 2.2 b </li></ul><ul><li>Day +2 6 7.3 ± 2.3 b 6.5 ± 2.3 b </li></ul><ul><li>ab (P<0.05). </li></ul>Nasser et al., 1993
  68. 105. <ul><li>Control de la Fase Luteal. </li></ul><ul><li>Control del Desarrollo Folicular. </li></ul>Requisitos para la Superovulación
  69. 106. Control del desarrollo folicular <ul><li>Ablación Folicular </li></ul><ul><li>GnRH </li></ul><ul><li>Progesterona y estradiol </li></ul>
  70. 107. Transvaginal ultrasound-guided follicle ablation Bergfelt et al., 1994
  71. 108. Ablación Folicular Transductor Aguja Ecógrafo Bomba Tubo de colección
  72. 109. Ablation ~ 1.5 . days new wave emergence Bergfelt et al., 1994 Follicle Size Days Follicular Ablation
  73. 110. Superovulatory Response After Aspiration of the Dominant Follicle Dominant Follicle Aspiration yes no n 11 14 13 CL 7.7 b 19.3 b 21.6 b Ova/Embryos Total collected 5.1 a 17.4 b 18.7 b Fertilized 2.4 a 12.6 a 12.9 b Transferable 1.0 a 10.3 b 10.1 b ab - P< 0.01 Bungarts and Niemann, 1994
  74. 111. Superovulatory Response After Follicle Ablation Transf. Emb. n Transf. Emb. n 0.9 10.1  0.6 14 (no dom. fol.) <0.001 6.0  0.6 112 8.9  0.6 112 Hill & Kuehner, 1996 <0.01 1.0  0.1 11 (dom. fol.) 10.1  0.6 13 Bungarts & Niemann, 1994 0.56 5.3  0.4 87 5.0  0.4 87 Shaw and Good, 2000 <0.05 2.3  0.8 87 4.6  0.9 13 Kim et al., 2001 P value No Ablation Ablation Author
  75. 112. Superovulatory Response After Follicle Ablation Bergfelt et al., 1996 Means and percentages were not different. ab - Reduced variation associated with number of fertilized ova (P<0.1) and number of transferable embryos (P<0.03) in the ablation plus progestogen group.   Control Ablation alone Ablation plus progestogen n 16 17 17 CL (variance) 19.7 ±2.4 (124) 14.6 ±2.7 (235) 18.0 ±2.6 (221) Heifers with <2 CL 1 2 0 Total ova/embryos (variance) 10.9 ±2.3 (82ab) 9.4 ±2.0 (188b) 10.7 ±1.8 (69a) Fertilized ova (variance) 8.3 ±2.2 (76ab) 7.3 ±2.1 (170b) 7.6 ±1.3 (50a) Transferable embryos (variance) 6.6 ±2.1 (70a) 5.8 ±2.2 (75a) 5.9 ±1.1 (38b)
  76. 113. Follicle Ablation and Superovulation Ova/Embryos Group n CL Total Fertilized Transferable Ablation of 20 23.3 11.0 9.4 8.2 2 largest foll. Ablation of all foll  5 mm 18 17.9 12.2 10.1 8.4 Means did not differ Baracaldo et al., 2000
  77. 114. Superstimulation - Follicle Ablation Day 0 AM - Ablate 2 largest follicles - Insert CIDR Day 2 AM - Initiate FSH treatments Day 4 AM - PGF PM - PGF & remove CIDR Day 6 PM - AI Day 7 AM - AI Day 13 Embryo collection
  78. 115. Control del desarrollo Folicular <ul><li>Dispositivos con Progesterona + Estradiol </li></ul>
  79. 116. Progestágenos utilizados en Superovulación de Bovinos <ul><li>Implantes subcutáneos SMB o Crestar </li></ul><ul><li>Dispositivos intravaginales </li></ul>PRID CIDR-B DIB TRIU-B CUE-MATE
  80. 117. Estrógenos <ul><li>Estradiol-17  </li></ul><ul><li>Valerato de Estradiol </li></ul><ul><li>Benzoato de Estradiol </li></ul>
  81. 118. 12 10 8 6 4 LH Progestágenos y estradiol-17  ~ 4 . días nueva onda folicular Bo et al., 1994 Diámetro Folicular (mm) Días Sincronización del desarrollo folicular FSH
  82. 119. Superovulación con Progestágenos y Estradiol <ul><ul><ul><ul><ul><li> </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><li>Día 0 Progest. + E-17  + P4 </li></ul><ul><li>Día 4 SPO </li></ul><ul><li>Día 6 AM - PGF 2a </li></ul><ul><li>PM - Quitar Progest. </li></ul><ul><li>Día 8 AM – estrus – AI? </li></ul><ul><li>PM - AI </li></ul><ul><li>Día 9 AM - AI </li></ul><ul><li>Día 15 Colección de Embriones </li></ul>
  83. 120. Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0 CIDR-B + 5 mg E-17  + 100 mg P4 </li></ul><ul><li>Día 4 am 4 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 4 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 5 am 3 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 6 am 2 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>pm 2 ml Folltropin + Sacar CIDR-B + PGF </li></ul><ul><li>Día 7 am 1 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 1 ml Folltropin (observar Celo) </li></ul><ul><li>Día 8 am Celo + IA </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 9 am IA </li></ul><ul><li>Día 15 Colección de embriones </li></ul>
  84. 121. Superovulacion con Progestagenos + Estradiol-17  vs Tradicional
  85. 122. Tratamiento de Superovulación en Vacas de Carne Británicas <ul><li>Día 0 CIDR-B + 5 mg E-17  + 100 mg P4 </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 5 am 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 6 am 1,5 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>pm 1,5 ml Folltropin + Sacar CIDR-B + PGF </li></ul><ul><li>Día 7 am 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin (ver Celo) </li></ul><ul><li>Día 8 am Celo + IA </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 9 am IA </li></ul><ul><li>Día 15 Colección de embriones </li></ul>
  86. 123. P4+Estradiol-17  vs Tradicional (8 to 12 d pos estro) Adaptado de: Bo et al., 1995, 1999; y Nigro et al., 2002
  87. 124. Follicle Ablation and Superovulation Ova/Embryos Group n CL Total Fertilized Transferable Ablation of 20 23.3 11.0 9.4 8.2 2 largest foll. Ablation of all foll  5 mm 18 17.9 12.2 10.1 8.4 E-17  + P4 23 20.1 8.5 7.5 6.5 Means did not differ Baracaldo et al., 2000
  88. 125. <ul><li>Benzoato de Estradiol (EB) </li></ul>
  89. 126. Niveles plasmáticos de estradiol 5 mg E-17  im 5 mg EB im
  90. 127. 17  estradiol Benzoato de estradiol Valerato de estradiol Cipionato de estradiol Dias após tratamento 1 2 3 4 5 6 7 8 9
  91. 128. EB im vs EB en cápsulas intravaginales Estradiol-17  Horas post tratamiento
  92. 129. EB VS EB+P4 y Onda Folicular Moreno et al., 2001
  93. 130. EB + P4 and SPO <ul><li>CONTROL EB + P4 Day 0 EB Day 1 </li></ul><ul><li>n 17 18 16 </li></ul><ul><li>CL 9.7 ± 1.4 a 12.7 ± 1.8 a 11.7 ± 1.9 a </li></ul><ul><li>Ova/Embryos </li></ul><ul><li>Total 6.1 ± 1.1 a 9.4 ± 1.8 a 5.8 ± 1.8 a </li></ul><ul><li>Fertilized ova 4.1 ± 0.9 a 8.1 ± 1.5 b 3.2 ± 1.3 a </li></ul><ul><li>Grade 1 1.5 ± 0.5 a 3.7 ± 0.8 b 1.4 ± 0.8 a </li></ul><ul><li>Grade 2 1.6 ± 0.6 a 1.6 ± 0.4 a 0.8 ± 0.4 a </li></ul><ul><li>ab - Means with different superscripts are different P<0.01 </li></ul>
  94. 131. SPO con EB o E-17B
  95. 132. Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0 CIDR-B + </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 5 am 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 6 am 1,5 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>pm 1,5 ml Folltropin + Sacar CIDR-B + PGF </li></ul><ul><li>Día 7 am 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 8 pm IA </li></ul><ul><li>Día 9 am IA </li></ul><ul><li>Día 15 Colección de embriones </li></ul>2,5 mg EB + 50 mg P4 2,5 mg E-17  + 50 mg P4
  96. 133. EB vs E-17B ab - P<0.05
  97. 134. Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0 CIDR-B + </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 5 am 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 6 am 1,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 1,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 7 am 0,5 ml Folltropin +PGF </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin + Sacar CIDR-B + PGF </li></ul><ul><li>Día 9 am </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 10 am IA </li></ul><ul><li>Día 16 Colección de embriones </li></ul>2,5 mg E-17  + 50 mg P4 2,5 mg EB + 50 mg P4
  98. 135. Superovulación con Progestágenos y Estradiol <ul><ul><ul><ul><ul><li> </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><li>Día 0 Progest. + EB + P4 </li></ul><ul><li>Día 4 SPO </li></ul><ul><li>Día 6 AM - PGF 2a </li></ul><ul><li>PM - Quitar Progest. </li></ul><ul><li>Día 8 AM – estrus – AI? </li></ul><ul><li>PM - AI </li></ul><ul><li>Día 9 AM - AI </li></ul><ul><li>Día 15 Colección de Embriones </li></ul>
  99. 136. Día 7 AM - PGF 2a PM - Quitar Progest. Día 9 AM – estrus – AI? PM - AI Día 10 AM - AI Día 16 Colección de Embriones <ul><ul><ul><ul><ul><li> </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><li>Día 0 Progest. + EB + P4 </li></ul><ul><li>Día 4 SPO </li></ul><ul><li>Día 6 </li></ul>AM - PGF 2a PM - Quitar Progest. Día 8 AM – estrus – AI? PM - AI Día 9 AM - AI Día 15 Colección de Embriones
  100. 137. E-17  + EB Caccia et al., 2001   E-17  +PGF D6 E-17  +PGF D7 EB+PGF D6 EB+PGF D7 n 27 26 27 25 Ova/embriones totales 12,2  1,4 13,2  2,5 11,1  1,2 10,7  1,5 Fertlizados 8,9  1,2 7,2  1,5 8,4  1,3 7,7  1,4 Grado 1 4,7  0,9 4,0  1,1 4,4  0,8 3,4  0,8 Grado 2 y 3 2,6  0,5 2,2  0,5 2,2  0,4 2,1  0,5
  101. 138. PGF D6 PGF D7 AI AI AI AI
  102. 139. OVULACIONES
  103. 140. % de ovulaciones. Grupo 1 (PGF D6; ov 77)
  104. 141. % de ovulaciones. Grupo 2 (PGF D7, ov 29)
  105. 142. Ovulaciones por vaca. Grupo PGF D6.
  106. 143. Ovulaciones por vaca. Grupo PGF D7.
  107. 144. % de ovulaciones según la cantidad de CL
  108. 145. Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0 CIDR-B + </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 5 am 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 6 am 1,5 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>pm 1,5 ml Folltropin + Sacar CIDR-B + PGF </li></ul><ul><li>Día 7 am 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 8 am IA </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 9 am IA </li></ul><ul><li>Día 15 Colección de embriones </li></ul>2,5 mg EB + 50 mg P4 2,5 mg E-17  + 50 mg P4
  109. 146. Semen Fresco vs Congelado 39,77 136 42,40 145 342 C * 62,16 368 17,74 105 592 F * TOTAL 36,09 48 38,35 51 133 C F C F C F Semen 63,07 222 13,64 48 352 Genepoel 47,30 35 52,70 39 74 74,24 49 12,12 8 66 Van der Merwe 39,26 53 40,74 55 135 55,75 97 28,16 49 174 AMF % Trans. % UFOs O/E Tot. Lugar De la Rey, ump. 2003 * P<0,0001
  110. 148. Brangus vs Angus Comienzo de Onda <ul><li>Vaquillonas de 20 a 24 meses de edad. </li></ul><ul><li>Tratamiento DIB + 2 mg EB + 50 mg P4 </li></ul><ul><li>Brangus 3.9  0.6 dias </li></ul><ul><li>Angus 4.3  0.2 dias </li></ul>
  111. 149. DIB D-1 D8 PGF 2  EB+P4: EB (2mg) +P4 (50mg P4) EB 2 mg D0: EB (2mg) D9 D0 PGF 2  EB 3 mg D0 : EB (3mg) EB 2 mg D1 : EB (2mg) EB 3 mg D1 : EB (3mg) D12 D1 EB US 24 / 24 h 12 / 12 h Nelore
  112. 150. Sá Filho et.al (2005) *
  113. 151. Tratamiento de Superovulación en Brangus y Braford <ul><li>Día 0 CIDR-B + </li></ul><ul><li>Día 4 am 2,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 5 am 1,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 1,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 6 am 1,0 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>pm 1,0 ml Folltropin + Sacar CIDR-B + PGF </li></ul><ul><li>Día 7 am 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin +Celo </li></ul><ul><li>Día 8 am Celo + IA </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 9 am IA </li></ul><ul><li>Día 15 Colección de embriones </li></ul>2,5 mg EB + 50 mg P4 2,5 mg E-17  + 50 mg P4
  114. 152. Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0 CIDR-B + </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 5 am 2,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,0 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 6 am 1,0 ml Folltropin +PGF </li></ul><ul><li>pm 1,0 ml Folltropin + Sacar CIDR-B + PGF </li></ul><ul><li>Día 7 am 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 9 am Celo + IA </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 10 am IA </li></ul><ul><li>Día 16 Colección de embriones </li></ul>2,5 mg E-17  + 50 mg P4 2,5 mg EB + 50 mg P4
  115. 153. Implantes subcutáneos <ul><li>SMB o Crestar </li></ul><ul><li>Valerato de Estradiol (EV) </li></ul>
  116. 154. 12 10 8 6 4 N + EV ~ 5,5 . días (3 – 8) Bo et al., 1991 Diámetro Folicular (mm) Días Valerato de Estradiol y desarrollo folicular 0 9
  117. 155. E-17  vs EV Comienzo de la Nueva Onda Folicular <ul><li>Syncro-Mate-B Crestar </li></ul><ul><li>E-17  + P4   3.7 ± 0.2 a 3.3 ± 0.2 a (3 - 4) x (3 - 4) x </li></ul><ul><li>n = 10 n = 9 </li></ul><ul><li>EV + N 6.2 ± 0.4 c 4.7 ± 0.5 b </li></ul><ul><li> (5 - 8) y (3 - 8) y n = 10 n = 9 </li></ul>means abc = P<0.05 variances xy = P<0.01 Martinez et al ., 1996
  118. 156. EV vs E-17B ab - P<0.05 Mapletoft et al., 1999
  119. 157. EV vs E-17B abcd - Medias (  SEM) o porcentajes con distinta letra difieren (P<0,05). Nigro et al., 2001   Tradicional E17  +CIDR-B EV+CIDR-B EV+SMB Razas de Carne (n) 945 82 247 69 Ova/emb. totales 13,4  0,3ª 12,6  0,9ª 14,5  0,6 ab 16,4  1,2 b Emb. Transf 6,9  0,2 7,3  0,6 6,7  0,4 6,5  0,9 % Emb. Transf. 51,5 b 58,3 a 45,8 c 39,9 d
  120. 158. Effect of Dose of EV on FWE in CIDR-treated Cows <ul><li>Dose (mg) 0 1 2 5 </li></ul><ul><li>FWE (d) 1.6 a 2.5 ab 3.4 ab 4.6 b </li></ul><ul><li>SD 3.2 x 2.3 x 0.8 y 1.1 y </li></ul><ul><li>Range -4 to 6 -4 to 4 2 to 5 3 to 7 </li></ul>Mapletoft et al., 2004 ab P<0.012 xy P<0.0006
  121. 159. < 0.05 2 - 8 z 2 - 6 y 2 - 4 x Range < 0.001 5.1 ± 0.4 c 3.7 ± 0.3 b 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Overall 19 20 20 N < 0.05 2 - 6 y 2 - 6 xy 2 - 4 x Range < 0.05 4.0 ± 0.5 b 3.1 ± 0.4 ab 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Cows 10 10 10 N < 0.05 3 - 8 y 3 - 6 xy 2 - 3 x Range < 0.001 6.1 ± 0.6 c 4.2 ± 0.3 b 2.5 ± 0.2 a Day of follicular emergence Heifers 9 10 10 N P-Value (F Test) EV+Nor ½ EV+Nor EB Parameters Class
  122. 160. Pre-treatment with eCG prior to FSH administration
  123. 161. 12 10 8 6 4 Progesterone device + P4 and EB ~ 4 . days Wave emergence Caccia and Bo, 1998 Folicular diameter (mm) Days Synchronization of Follicular Wave Emergence FSH
  124. 162. 0 Follicle Size (mm) ≥ 4 1-3 -2 2 4 6 8 10 -3 Wave emergence Wave emergence -66 -66 Days from wave emergence Hours from wave emergence Dynamics of follicles ≥1 mm Adams et al.
  125. 163. 12 10 8 6 4 2 Progesterone device + P4 and EB ~ 4 . days Wave emergence Folicular diameter (mm) Synchronization of Follicular Wave Emergence FSH
  126. 164. CIDR-B+eCG+FSH <ul><li> </li></ul><ul><li>EB+P4 FSH 2 PGF IA Emb. Col. </li></ul><ul><li>D. 0 D. 2 D.4 D. 6 D. 8 D. 15 </li></ul><ul><li>1. 500 UI (Novormón, Syntex) </li></ul><ul><li>2. 400 mg NIH-FSH-P1 (Folltropin-V, Bioniche) </li></ul>CIDR eCG 1
  127. 165. Priming with 300 UI de eCG ab - P<0.05
  128. 167. 500 UI eCG on Day 2
  129. 168. Synchronization of FWE for Superstimulation <ul><li>Estradiol – 4 days (5 mg E-17 β or 2 mg EB or EV plus P4 ) </li></ul><ul><li>Follicular ablation – 1.5 days (2 largest follicles) </li></ul><ul><li>GnRH/pLH ?? </li></ul>
  130. 169. GnRH and Follicular Dynamics 4 8 12 16 Day 9 Day 7 mm Day 0 Day 1-2 GnRH
  131. 170. 4 8 12 16 Day 9 Day 7 mm Day 0 Day 1-2 GnRH No OV GnRH and Follicular Dynamics
  132. 171. FA GnRH n 19 18 No. of CL 13.9 10.1 Total Ova/Embryos 9.6 5.3 (%) (65) a (53) b Fertilized Ova 5.0 a 2.9 b (%) (48) (55) Trans. Emb. 3.4 a 1.8 b (%) (33) (38) Superovulatory response after follicular ablation (FA) or GnRH Deyo et al., 2001 ab (P < 0.05)
  133. 172. Alternative: Synchronize Ovulation and Begin Gonadotropin Treatments at the Beginning of the First Follicular Wave
  134. 173. Superovulatory Response and Wave Emergence <ul><li>Initiation No. of follicles No. of ovul. </li></ul><ul><li>of treatment n (>7 mm) (ultrasound) </li></ul><ul><li>Day -1 11 22.0 ± 3.4 a 9.5 ± 2.3 b </li></ul><ul><li>Day 0 7 20.3 ± 3.8 a 18.4 ± 3.4 a </li></ul><ul><li>Day +1 6 7.7 ± 2.4 b 6.7 ± 2.2 b </li></ul><ul><li>Day +2 6 7.3 ± 2.3 b 6.5 ± 2.3 b </li></ul><ul><li>ab (P<0.05). </li></ul>Nasser et al., 1993
  135. 174. TREATMENTS FIRST WAVE GROUPS FSH D15 PGF AM &PM CIDR D10 D0 D5 D9 BE 2mg + P4 (50 mg) PGF 2á LH Group 1 (n= 6) D16 PM D17 AM D17PM D23 IA IA E. Collection LH D11 Ov.
  136. 175. TREATMENTS FIRST WAVE GROUPS CIDR D10 D0 D5 D9 BE 2mg + P4 (50 mg) PGF 2á LH Group 2 (n= 6) D16 PM D17 AM D17PM D23 IA IA E. Collection LH D11 Ov. FSH D15 PGF AM &PM CIDR
  137. 176. TREATMENTS CONTROL GROUP CIDR D4 D0 BE 2mg + P4 (50 mg) Group 3(n= 6) FSH D8 PGF AM &PM D9 PM D10 AM D10PM D17 IA IA E. Collection LH
  138. 177. Superstimulation of the First Wave (a,b P<0,05) Nasser et al., 2002 (IETS) 2.5  1.2 2.5  1.6 7.0  2.7 Unfertilized ova 5.1  1.7 b 5.8  1.4 b 0.0  0.0 a Freezable embryos 6.6  2.0 b 8.0  1.8 b 0.2  0.2 ª Transferable embryos 9.2  2.3 11.7  2.9 8.3  2.9 Total ova/embryos 14.5  2.5 12.7  2.7 15.3  4.3 CL 23.0  3.7 18.5  4.5 21.5  6.6 Follicles > 8 mm at FTAI 6 6 6 N EB+P4 Plus CIDR First Wave Plus CIDR First Wave No CIDR Groups
  139. 178. Nasser et al SBTE (2005) Superstimulation of the First Wave
  140. 179. Cue-Mate D12 AM D0 PM D10PM PGF LH FIRST WAVE GROUP WITH CUE-MATE Cue-Mate PGF FSH D18 AM PGF AM &PM D19 AM D19 PM D20AM D26 IA IA E. Collection LH D13 PM Ov.
  141. 180. Preliminary Results Table 1. All donors’ main effects Means did not differ (P>0.28). 4,8±1,3 4,1±1,2 5,5±1,4 7,2±1,4 18 Heifers 5,1±1,0 4,3±1,0 6,7±1,4 10,6±1,6 29 Cows 4,1±1,2 3,4±1,0 5,2±1,4 8,0±1,6 22 Wave 1 5,8±1,1 5,0±1,0 7,2±1,4 10,4±1,6 25 Control Gr.1+2+3 Gr.1+2 Fertilized. Ova-embryos. N Main effects
  142. 181. CIDR-B+eCG+FSH <ul><li> </li></ul><ul><li>EB+P4 eCG 1 FSH 2 PGF IA C. Emb. </li></ul><ul><li>D. 0 D. 2 D.4 D. 6 D. 8 D. 15 </li></ul><ul><li>1. 500 UI (Novormón, Syntex) </li></ul><ul><li>2. 400 mg NIH-FSH-P1 (Folltropin-V, Vetrepharm) </li></ul><ul><li> </li></ul>Implante
  143. 182. Priming con 300 UI de eCG ab - P<0.05
  144. 183. Priming con 500 UI eCG
  145. 184. Priming con 500 UI eCG ab - P<0.05
  146. 185. RESULTADOS <ul><li>CL: 10-12 </li></ul><ul><li>Embriones Totales: 8-10 </li></ul><ul><li>Embriones Transferibles: 5-6 </li></ul>Embriones Grado 1 3-4 Embriones Grado 2 1-2
  147. 187. Momento de la Ovulacion en Vacas Superestimuladas Pablo M. Chesta 1 Instituto de Reproducción Animal Córdoba (IRAC) , 2 Universidad Católica de Córdoba, 3 Universidad Nacional de Córdoba
  148. 188. 1. Esquema tradicional de superovulação 2. Superovulação com sincronização da onda de crescimento folicular 3. Superovulação com sincronização da onda de crescimento folicular e da ovulação Detecção de estro FSH (12/12h) Detecção de estro D-0 D-10 D-13 D-0 D-7 PGF 2  Colheita de embriões PGF 2  Detecção de estro FSH (12/12h) Detecção de estro D-0 D-4 D-7 D-8 D-15 Colheita de embriões PGF 2  P4 BE + P4 Detecção de estro FSH (12/12h) Detecção de estro D-0 D-4 D-7 D-8 D-15 Colheita de embriões PGF 2  P4 LH BE+P4
  149. 189. Superovulation Treatment with Progestogen and Estradiol <ul><ul><ul><ul><ul><li> </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><li>Day 0 Progestogen device + E-17  + P4 </li></ul><ul><li>Day 4 Initiate Folltropin-V treatment </li></ul><ul><li>Day 6 AM - PGF 2a </li></ul><ul><li>PM - PGF 2a Remove P4 device </li></ul><ul><li>Day 8 PM - AI </li></ul><ul><li>Day 9 AM - AI </li></ul><ul><li>Day 15 Embryo Collection </li></ul>
  150. 190. PGF D6 AI AI
  151. 191. Time of Ovulation in Relation to Superovulatory Response AI AI Ov. Interval 0-11 h: 8/13 (62%) 12/23 h: 3/13 (23 %) 24/35 h: 2/13 (15%)
  152. 192. Time of Ovulation in Relation to Superovulatory Response AI AI
  153. 193. Individual Data. Group PGF D6
  154. 194. Right ovary Left ovary SUPEROVULATORY RESPONSE
  155. 195. Superovulação de doadoras para IATF PGF 2  2 6 10 14 Dia 8 Dia 7 mm Dia 0 Dia 4 BE + P4 LH P4 FSH P4 LH  E2
  156. 196. PGF 2  2 6 10 14 Dia 8 Dia 7 mm Dia 0 Dia 4 BE + P4 LH or GnRH P4 FSH P4
  157. 197. OBJETIVO GENERAL <ul><li>Evaluar el efecto de la sincronización de la ovulación sobre la producción de embriones fertilizados y transferibles en vacas superestimuladas con FSH. </li></ul>
  158. 198. Materiales y Métodos <ul><li>86 vacas y vaquillonas; Angus coloradas (34 para ovulación.) </li></ul><ul><li>CC: entre 3 y 4 </li></ul><ul><li>Dosis Total de Folltropin-V: </li></ul><ul><li>320 mg NIH-FSH-P1 para vacas </li></ul><ul><li>200 mg NIH-FSH-P1 para vaquillonas </li></ul>
  159. 199. DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
  160. 200. 0 4 6 7 8 9 15 DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
  161. 201. 0 4 6 7 8 9 15 Grupo: Día 7 Control DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA FSH 2x4 Colecta de embriones DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
  162. 202. 0 4 6 7 8 9 15 DIB Grupo: Día 7 GnRH 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones Grupo: Día 7 Control DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA FSH 2x4 Colecta de embriones DIB Grupo: Día 6,5 GnRH 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA GnRH FSH 2x4 Colecta de embriones DIB 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 Grupo: Día 6,5 Control PGF IA Colecta de embriones FSH 2x4
  163. 203. Ultrasonografía
  164. 204. Ultrasonografía 0 4 6 7 8 9 11 15 D 0: ciclicidad c/ 8 hs 1 er PGF: H 0 D 8 - 11: determinación de ovulaciones Ovulación: desaparición de Folículos > 10 mm.
  165. 205. Cantidad de ovulaciones y hora media de ovulación para donantes Aberdeen Angus superestimuladas con Folltropin-V. ab valores con distintos superíndices difieren (P <0,05) Chesta et al., 2005. 72,8 b 22,5 ab 58,6 b 7,1 a 69 – 96 67 – 83 73 – 96 74 – 82 81,3 + 3,0 77,4 + 1,5 86,3 + 2,7 79,7 + 0,9 12,5 + 2,8 14,7 + 1,1 12,8 + 2,0 15,7 + 2,2 8 10 8 8 NO SI NO SI 6,5 6,5 7 7 Varianza Rango Media + EE Hora Media de Ovulacón Cantidad de ovulaciones Media + EE N GnRH Duración del tratamiento con DIB 67,9 a 16,2 b 69 – 96 67 – 83 83,8 + 2,0 a 78,4 + 0,9 b 12,6 + 1,6 15,1 + 1,1 16 18 NO SI 45,8 42,2 67 – 96 73 – 96 79,1 + 1,6 83,0 + 1,6 13,7 + 1,3 14,3 + 1,5 18 16 6,5 7 Efectos Principales
  166. 207. 51.6 33.5 78.2 ± 1.4 81.2 ± 1.1 15.9 ± 1.3 18.0 ± 1.6 27 27 Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) 30.6 53.9 78.1 ± 1.1 c 81.5 ± 1.4 d 17.3 ± 1.4 16.6 ± 1.6 28 26 Yes No Main effects 50.2 b 53.8 b 53.0 b 7.6 a 79.4 ± 2.0 77.1 ± 2.0 83.6 ± 2.0 79.1 ± 0.7 15.2 ± 2.2 16.6 ± 1.6 18.1 .± 2.3 17.9 ± 2.4 13 14 13 14 No Yes No Yes Day 6.5 (P12) Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) Day 7 (P24) Variance Mean Mean Time of Ovulation (h) Ovulations N GnRH (Day 8) Time of DIB removal
  167. 208. 4.8 ± 0.7 5.5 ± 0.7 6.8 ± 0.9 8.7 ± 1.0 9.6 ± 1.2 12.2 ± 1.4 46 49 Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) 4.9 ± 0.7 5.4 ± 0.7 7.4 ± 1.0 8.2 ± 1.0 9.8 ± 1.2 12.0 ± 1.4 45 50 No Yes Main effects 4.2 ± 0.8 5.4 ± 1.1 5.6 ± 1.2 5.4 ± 0.9 6.6 ± 1.3 7.0 ± 1.4 8.2 ± 1.4 9.2 ± 1.4 8.8 ± 1.6 10.4 ± 1.8 10.8 ± 1.8 13.3 ± 2.1 23 23 22 27 No Yes No Yes Day6.5 (P12) Day 6.5 (P12) Day 7 (P24) Day 7 (P24) Grade 1 and 2 embryos Fertilized ova Total ova/embryo N GnRH (Day 8) Time of DIB removal
  168. 209. Distribución de las ovulaciones por Grupo. X 6,5. Control X 7. Control X 6,5. GnRH X 7. GnRH IA 98 %
  169. 210. Gráfico 3.Distribución de las ovulaciones evaluando la aplicación de GnRH (%). IA GnRH: 95,5 % Control: 81,3 % P < 0,0001
  170. 211. Ovocitos/embriones totales colectados, embriones y embriones transferibles en donantes Brangus. a,b (P = 0,077) Chesta et al., 2005. 4,7 + 1,2 7,3 + 1,3 5,7 + 1,4 a 9,8 + 1,5 b 10,3 + 1,9 14,7 + 2,7 18 20 6,5 7 7,0 + 1,4 5,4 + 1,1 8,3 + 1,7 7,5 + 1,4 11,6 + 2,3 13,4 + 2,5 17 21 NO SI Efectos Principales 6,0 + 1,8 3,8 + 1,5 7,9 + 2,2 6,9 + 1,6 7,1 + 2,5 4,6 + 1,6 9,4 + 2,4 10,2 + 2,1 10,5 + 3,1 10,2 + 2,5 12,6 + 3,6 16,3 + 4,1 8 10 9 11 NO SI NO SI 6,5 6,5 7 7 Embriones Grado 1,2 y 3 Media + EE Embriones Fertilizados Media + EE Ovocitos/embriones Totales Media + EE n GnRH Duración del tratamiento con DIB
  171. 212. Ovocitos/embriones totales colectados, fertilizados y transferibles en donantes de embriones Angus. Las medias no difieren (P>0,1) Chesta et al., 2005. 4,8 + 0,8 4,9 + 0,9 6,1 + 0,9 7,3 + 1,4 7,7 + 1,2 9,3 + 1,5 24 24 6,5 7 4,1 + 0,7 5,6 + 0,9 5,9 + 1,0 7,5 + 1,3 8,0 + 1,2 9,1 + 1,4 24 24 NO SI Efectos Principales 4,1 + 1,0 5,6 + 1,2 4,0 + 1,1 5,7 + 1,5 5,9 + 1,4 6,4 + 1,3 6,0 + 1,4 8,5 + 2,3 7,7 + 1,9 7,7 + 1,4 8,2 + 1,5 10,3 + 2,5 13 11 11 13 NO SI NO SI 6,5 6,5 7 7 Embriones Grado 1,2 y 3 Media + EE Embriones Fertilizados Media + EE Ovocitos/emb. Totales Media + EE N GnRH Duración del tratamiento con DIB
  172. 213. <ul><li>Evaluar el efecto de la remoción del dispositivo con progesterona en el día 7 por la tarde sobre el número y calidad de embriones. </li></ul><ul><li>Evaluar el efecto de la aplicación de GnRH a las 12 o 24 h de la remoción del dispositivo con progesterona sobre el número y calidad de embriones . </li></ul>0bjetivo
  173. 214. 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones DIB PGF Grupo: X 7.5. GnRH 24 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones DIB PGF Grupo: X 7.5. GnRH 12 DIB 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones PGF Grupo: X 7. GnRH 24
  174. 215. ab P<0.0001 cd P=0.03 Mean + SEM 4.4 c 5.0 c 19.6 d 80.0 – 86.1 78.9 – 86.5 82.0 – 98.8 81.1  0.6 a 81.7  0.6 a 91.1  1.3 b 10.0  1.3 11.7  1.9 12.1  2.0 11 13 13 Day 7. GnRH Day 8 Day 7.5. GnRH Day 8 Day 7.5. GnRH Day 8.5 Variance Range Mean + SEM Time of Ovulation (h) Ovulations N Grupo
  175. 217. 4.2  1.0 4.3  0.7 4.5  0.8 6.4  1.2 5.9  0.8 6.1  1.0 9.1  1,4 9.4  1.3 8.4  1.2 33 36 36 8 8 8.5 Day 7 Day 7.5 Day 7.5 Grade 1 and 2 embryos Fertilized ova Total ova/ embryo N Day of GnRH Time of DIB removal (d)
  176. 218. Mean number of ova/embryo collected, fertilized ova and transferable embryos in superstimulated Red Angus donors treated with progesterone releasing devices (DIB) for 7 or 7.5 d with GnRH treatment on Day 8 or Day 8.5. Means did not differ (P>0.1). 3.2  0.8 3.4  0.6 3.5  0.8 4.6  1.0 4.5  0.8 5.0  0.9 7.4  1.2 6.8  1.0 7.3  1.3 25 27 26 8 8 8.5 Day 7 Day 7.5 Day 7.5 Grade 1 and 2 Embryos Fertilized Ova Total Ova/Embryo Collected N GnRH Time of DIB renoval (d)
  177. 219. Mean number of ova/embryos collected, fertilized ova and transferable embryos in superstimulated Brangus donors treated with progesterone releasing devices (DIB) for 7 or 7.5 d with GnRH treatment on Day 8 or Day 8.5. Means did not differ (P>0.1). 7.1  3.3 6.8  1.8 7.0  1.9 11.7  3.4 10.2  1.8 9.0  2.3 14.5  3.7 17.4  3.3 11.3  2.6 8 9 10 Day 8 Day 8 Day 8.5 Day 7 Day 7.5 Day 7.5 Grade 1 and 2 Embryos Fertilized Ova Total Ova/Embryo Collected n GnRH Time of DIB removal
  178. 220. Control CIDR 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF FSH (7 t) EC IA 12 and 24 h after estrus Heat-Watch CIDR LH (12.5 mg Armour, Lutropin-V) 0 4 6 7 8 9 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 PGF IA pLH FSH (7 t.) EC
  179. 221. IA 12 and 24 h after estrus (Heat-Watch) vs FTAI 12 and 24 after pLH Larkin et al., 2006 9.6ª 11.6ª 21.4ª 57.3ª (53-62) 26.3ª (19-36) LH (n=10) 7.8ª 11.0ª 28.5ª 58.5ª (51-69) 25.1ª (17-32) Control (n=10) Viable Total Ova No. ovulations Ovulation Time (h) (range) Estrus post CIDR Removal (h) range Protocol
  180. 222. Materiales y Métodos <ul><li>55 vacas y vaquillonas; AA col., Brangus. </li></ul><ul><li>CC: entre 3 y 4 </li></ul><ul><li>Dosis Total de Folltropin-V: </li></ul><ul><li>360 mg NIH-FSH-P1 vc. Angus </li></ul><ul><li>320 mg NIH-FSH-P1 vc. Brangus </li></ul><ul><li>200 mg NIH-FSH-P1 vq. Angus </li></ul><ul><li>180 mg NIH-FSH-P1 vq. Brangus </li></ul>
  181. 223. 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones DIB PGF Grupo: D 7,5. GnRH 24 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones DIB PGF Grupo: D 7,5. GnRH 12 DIB 0 4 7 8 15 2,5 mg E-17  50 mg P4 FSH 2x4 GnRH IA 12 y 24 h Colecta de embriones PGF Grupo: D 7. GnRH 24
  182. 224. Distribución de las ovulaciones por Grupo
  183. 225. SOV EM TEMPO FIXO EM VACAS HOLANDESAS DE ALTA PRODUÇÃO
  184. 226. Grupo P24 LH48 (n=8) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 M PGF 2  Colheita De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 M Colheita De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® D0 BE D0 BE Grupo P24 LH60 (n=8) D9 M IA LH 24 h D8 T D9 T IA D8 T IA D8 M D9 M IA LH 12 h
  185. 227. Grupo P36 LH48 (n=8) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 T PGF 2  Colheita De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® DIB ® Colocação do DIB D -1 D7 T Colheita De Embrião D15 200mg Folltropin ® D6 D4 Retirada do DIB ® D0 BE D0 BE Grupo P36 LH60 (n=8) D9 M IA LH 24 h D8 T D9 T IA D8 T IA D8 M D9 M IA LH 12 h
  186. 228. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica 3 a Réplica 4 a Réplica Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de todas as doadoras superovuladas (35d) (35d) (35d) Grupo P24/LH48 Grupo P24/LH60 Grupo P36/LH60 Grupo P36/LH48 Grupo P24/LH60 ( 238; 258; 308 ) Grupo P36/LH60 ( 238; 258; 308 ) Grupo P24/LH48 ( 238; 258; 308 ) Grupo P36/LH48 ( 238; 258; 308 ) Grupo P36/LH60 ( 271; 285; 296) Grupo P24/LH60 ( 271; 285; 296) Grupo P36/LH48 ( 271; 285; 296) Grupo P24/LH48 ( 271; 285; 296) Grupo P24/LH60 ( 266; 275; 300 ) Grupo P36/LH60 ( 266; 275; 300 ) Grupo P24/LH48 ( 266; 275; 300 ) Grupo P36/LH48 ( 266; 275; 300 ) Grupo P36/LH60 ( 259; 303; 304 ) Grupo P36/LH60 ( 259; 303; 304 ) Grupo P36/LH48 ( 259; 303; 304 ) Grupo P24/LH48 ( 259; 303; 304 )
  187. 232. Tabela - Efeito do tempo de permanência do dispositivo intravaginal de progesterona (24 ou 36 h) e do momento da aplicação do LH (48 ou 60 h) após a aplicação de prostaglandina em vacas Holandesas de alta produção superovuladas, Poços de Caldas, MG, 2005 Martins et al SBTE (2005)
  188. 233. 52.3 81.3 ± 1.5 7.6 ± 1.1 22 Day 7.5 (P36) 62.7 81.0 ± 1.7 7.3 ± 1.2 21 Day 7 (P24) 52.3 83.9 ± 1.6 b 8.9 ± 1.3 d 21 Day 8.5 48.2 78.6 ± 1.5 a 6.1 ± 0.9 c 22 Day 8 Main effects 24.9 84.9 ± 1.5 9.2 ± 1.8 11 Day 8.5 Day 7.5 (P 36) 56.9 77.8 ± 2.3 5.9 ± 1.1 11 Day 8 Day 7.5 (P36) 85.7 82.7 ± 2.9 8.6 ± 1.9 10 Day 8.5 Day 7 (P24) 42.8 79.5 ± 2.0 6.2 ± 1.4 11 Day 8 Day 7 (P24) Variance Mean Interval to ovulation (h) Ovulations Mean N pLH Day of DIB removal
  189. 234. Gráfico- Distribuição das ovulações de acordo tempo de permanência do dispositivo de progesterona (24 ou 36 após PGF) em vacas Holandesas de alta produção ( Bos taurus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo Martins et al., 2005 ** Teste Bartlett (P=0.42)
  190. 235. Gráfico- Distribuição das ovulações de acordo com o momento da administração do LH (48 ou 60 após a PGF) em vacas Holandesas de alta produção ( Bos taurus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo Martins et al., 2005 ** Teste Bartlett (P=0.09)
  191. 237. Pietro Sampaio Baruselli Prof. Dr. Departamento de Reprodução Animal Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Universidade de São Paulo. “ Ultimas Novidades em TETF e IATF
  192. 238. ADEQUAÇÃO DO MOMENTO DA RETIRADA DO DISPOSITIVO DE PROGESTERONA PARA IATF EM EM PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO DE VACAS NELORE ( Bos indicus )
  193. 239. PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM IMPLANTES DE PROGESTERONAE INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH PARA IATF PGF2  (M e T) FSH (133 mg Folltropin) Dispositivo de P4 BE (2,5mg) P4 (50mg) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Grupo 1: Retirada D7 (M; 24h) LH (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 2: Retirada D7 (T; 36h) Estro D-8
  194. 240. 2,2  3,5 5,2  8,7 Não fertilizados 5,2  6,1 6,7  4,8 Embriões degenerados 10,3  5,9 9,3  7,5 Embriões viáveis 17,7  11,7 21,2  15,1 Total de estruturas 63,4 69,1 Taxa de recuperação (%) 10 10 Número de animais P36 P24 Tabela – Resultados (média  desvio padrão) dos tratamentos superovulatórios P24 e P36 em doadoras de embriões da raça Nelore. Campo Grande, 2000. Os valores não diferem estatisticamente (P>0,05) ZANENGA et al., 2003
  195. 241. <ul><li>ADEQUAÇÃO DA DOSE DE FSH (FOLLTROPIN-V ® ) EM PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO DE VACAS NELORE ( Bos taurus indicus ) COM INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM TEMPO FIXO (SOTF) </li></ul><ul><ul><li>Baruselli, P.S. 1 ; Marques, M.O. 1 ; Reis, E.L. 1 ; Nasser, L.F.T. 1 ; Silva, R.C.P. 1 ; Menegatti, J.A. 1 ; Valentin, R 2 ., Santos, I.C.C. 2 </li></ul></ul><ul><li>1 Departamento de Reprodução Animal, FMVZ-USP, São Paulo, SP </li></ul><ul><li>2 Tecnopec, São Paulo - SP </li></ul>
  196. 242. HIPÓTESE É possível superovular doadoras Bos taurus indicus com reduzidas doses de FSHp sem comprometimento da resposta superovulatória, da quantidade e da qualidade dos embriões produzidos
  197. 243. Doadoras de embrião da Fazenda Dinorá - Cornélio Procópio - PR Med. Vet. Rubens Cesar Pinto
  198. 244. Doadoras de embrião da Fazenda Pontal de Ouro - Campo Grande - MS Med. Vet. Luiz Fernando Tonissi Nasser
  199. 245. PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO INDUZINDO A OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH (FOLLTROPIN) PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T) FSH ? (Follptropin) Dispositivo P4 BE (2,5mg + 50mg P4) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Retirada D7 (M; 24h) LH (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 1: 100mg Grupo 2: 133mg Grupo 3: 200mg
  200. 246. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica 3 a Réplica Empregou-se o mesmo acasalamento por doadora em todas as réplicas (60d) (60d) Grupo 100mg Folltropin Grupo 133mg Folltropin Grupo 200mg Folltropin Grupo133mg (n=8) Grupo 100mg (n=8) Grupo 200mg (n=8) Grupo 100mg (n=8 ) Grupo 133mg (n=8 ) Grupo 200mg (n=8 ) Grupo 100mg (n=7) Grupo 133mg (n=7) Grupo 200mg (n=7)
  201. 247. Tabela . Resposta superovulatória (média  desvio padrão) de vacas Nelore superovuladas com diferentes doses de FSH (Folltropin-V) e inseminadas em tempo fixo. São Paulo, 2002. 5,7  7,0 4,4  3,2 6,4  6,5 Embriões congeláveis 6,5  7,7 5,6  4,1 7,7  7,4 Embriões transferíveis 10,6  8,6 9,9  7,0 10,0  7,8 Total de estruturas 70,8  29,7 81,6  34,8 77,5  31,1 Taxa de recuperação (%) 92,6  21,0 84,5  14,3 85,6  24,5 Taxa de ovulação (%) 14,9  11,6 12,1  7,0 13,0  7,2 Número de CL no dia da colheita 23 23 23 Número de animais 200 mg 133 mg 100 mg Dosagem Valores na mesma coluna sem letras sobrescritas não diferem (P>0,4)
  202. 248. PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM CIDR-B ® INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T) FSH ? CIDR-B ® BE (2,5mg) P4 (50mg) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Retirada D7 (M; 24h) LH (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 1: 100mg Grupo 2: 133mg Grupo 3: 200mg
  203. 249. PONTAL DE OURO - CAMPO GRANDE - MS
  204. 250. Vacas Nelore (n=12) serão superovuladas, sendo realizadas 3 coletas de embriões em cada vaca com diferentes doses de Folltropin, Campo Grande - MS e Cornélio Procópio - PR - 2001 e 2002
  205. 252. <ul><li>ADEQUAÇÃO DA DOSE DE FSH (OVAGEN ® ) EM PROTOCOLOS DE SUPEROVULAÇÃO DE VACAS NELORE ( Bos taurus indicus ) COM INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM TEMPO FIXO (SOTF) </li></ul><ul><ul><li>Martins, C.M.; Castricini, E.S.C.; Sá Filho, M.F. Gimenes, L.U.; Baruselli, P.S. 1 </li></ul></ul><ul><li>1 Departamento de Reprodução Animal, FMVZ-USP, São Paulo, SP </li></ul>Em vias de publicação
  206. 253. PROTOCOLO DE SUPEROVULAÇÃO COM DIB ® INDUÇÃO DA OVULAÇÃO COM LH DOSE DE FSH (OVAGEN) PARA ZEBUÍNOS PGF2  (M e T) FSH ? (Ovagen) DIB ® BE (3,0mg)) IA tempo fixo 12 e 24h após LH D0 D4 D5 D6 D7 D8 Retirada D7 (M; 24h) LH (25mg) (M) D15 Colheita Grupo 1: 4,5mg Grupo 2: 6,0mg Grupo 3: 9,0mg D-1
  207. 254. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica 3 a Réplica (35d) (35d) Grupo 9,0mg Ovagen Grupo 6,0mg Ovagen Grupo 4,5mg Ovagen Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de todas as doadoras superovuladas Grupo 6,0mg (n=4) Grupo 9,0mg (n=4) Grupo 4,5mg (n=4) Grupo 9,0mg (n=4 ) Grupo 6,0mg (n=4 ) Grupo 4,5mg (n=4 ) Grupo 9,0mg (n=4) Grupo 6,0mg (n=4) Grupo 4,5mg (n=4)
  208. 255. Tabela - Efeito da dose (9, 6 ou 4.5mg) do extrato de pituitária ovina (Ovagen  ) na resposta superovulatória de vacas Nelore ( Bos indicus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo, Botelhos, MG, 2005. (Martins et al.,) 0.05 0.003 3.1  0.8 b 6.7  1.4 a 7.9  1.3 a Embriões transferíveis (n) 0.05 0.007 2.8  0.7 b 6.1  1.3 a 7.1  1.4 a Embriões congeláveis (n) 0.23 0.0008 16.0  2.3 b 20.0  2.7 b 29.0  2.3 a Intervalo entre 1 a e ultima ovulação(h) 0.03 0.04 1.9  0.5 b 3.6  1.2 ab 4.6  0.8 a Número de folículos >8mm (D15) 0.63 0.62 0.5  0.2 0.5  0.3 0.8  0.3 Embriões degenerados (n) 0.74 0.30 0.3  0.1 0.5  0.2 0.8  0.3 Embriões não fertilizados (n) 0.065 0.004 3.8  0.9 b 7.7  1.5 a 9.6  1.5 a Total estruturas (n) 0.28 0.22 59.8  8.9 78.7  9.9 66.4  7.9 Taxa recuperação (%) 0.14 0.80 69.2  6.8 68.9  5.2 73.6  4.6 Taxa de ovulação (%) 0.009 <0.0001 6.0  1.2 c 9.9  1.3 b 13.4  1.3 a Número de corpos lúteos (D15) 0.01 0.0001 8.8  1.4 b 15.1  2.2 a 18.3  1.5 a Número de folículos >8mm (LH) 0.25 0.97 12.4  1.4 12.7  1.7 12.3  1.6 Número de folículos D4 (n) Vaca Tratamento Efeito Valor P (Teste F) 4.5 mg (n=12) 6 mg (n=12) 9 mg (n=12)
  209. 256. Effect of Dose of Folltropin-V on Superovulatory Response in Brahman Cows Ova/embryos Dose n Year Total Transferable 140 mg 49 2003 9.39 9.20 171 mg 96 2002 9.50 9.02 320 mg 80 2001 9.00 8.55 G. Uribe Mejía, 2004
  210. 258. Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Poços de Caldas - MG
  211. 259. Grupo 1 (n=20) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 M PGF 2  Colheita de embrião D5 D15 M FSH (100mg Folltr.) D6 D4 Retirada do DIB ® Grupo 2 (n=20) DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 M Colheita de embrião D5 D15 T FSH (100mg Folltr.) D6 D4 Retirada do DIB ® D8 T IA LH 12h D8 M D9 M IA D9 M IA LH 24h D8 T D9 T IA
  212. 260. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica (35d) Grupo P24/LH48 Grupo P24/LH60 Empregou-se o mesmo acasalamento por doadora em todas as réplicas Grupo P24/LH60 (n=10) Grupo P24/LH48 (n=10) Grupo P24/LH60 (n=10 ) Grupo P24/LH48 (n=10 )
  213. 261. Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Botenhos - MG
  214. 262. Tabela - Efeito do momento da aplicação do LH (48 ou 60 horas) após a aplicação de prostaglandina em vacas Nelore ( Bos indicus ) superovuladas, Poços de Caldas, MG, 2005. (Martins et al., 2005) 0.49 0.02 0.004 3.1  0.5 6.2  1.0 Embriões transferíveis 0.46 0.04 0.002 2.5  0.5 5.9  0.9 Embriões congeláveis 1.00 0.04 0.02 21.0  1.7 15.0  2.1 Intervalo entre 1 a e ultima ovulação 0.44 0.05 0.008 1.5  0.3 0.6  0.3 Embriões degenerados 0.17 0.51 0.63 0.6  0.2 0.7  0.3 Embriões não fertilizados 0.25 0.006 0.05 5.1  0.5 7.5  1.0 Total estruturas 0.28 0.41 0.74 88.2  3.1 87.1  3.1 Taxa recuperação 0.29 0.23 0.33 64.6  4.0 71.0  4.2 Taxa de ovulação 0.49 0.01 0.08 6.0  0.7 9.1  1.4 Número de corpos lúteos (D15) 0.88 0.001 0.11 9.4  1.0 12.5  1.5 Número de folículos >8mm (LH) Vaca Tratamento Replica x Tratamento Efeito Valor P (Teste F) LH 60 (n=20) LH 48 (n=20)
  215. 263. Gráfico- Distribuição das ovulações de acordo com o momento da administração do LH (48 ou 60 após a PGF) em vacas Nelore ( Bos indicus ) superovuladas e inseminadas em tempo fixo Martins et al., 2005 ** Teste Bartlett (P=0.08)
  216. 264. Redução do número de inseminações no protocolo de superovulação com inseminação em tempo fixo em doadoras Nelore (Bos indicus)
  217. 265. Desenho Experimental 1 a Réplica 2 a Réplica (35d) Grupo 1 IATF Grupo 2 IATF Empregou-se a mesma partida de sêmen para IATF de todas as doadoras superovuladas Grupo 2 IATF (12 e 24h após LH) (n=5 ) Grupo 1 IATF (16h após LH) (n=5) Grupo 2 IATF (12 e 24h após LH) (n=5 ) Grupo 1 IATF (16h após LH) (n=5)
  218. 266. Grupo 1 (n=10) PGF 2  DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 T PGF 2  D8 T Colheita de embrião D5 D15 M FSH (100mg Folltr.) D6 D4 D8 M D9 M Retirada do DIB ® Grupo 2 (n=10) DIB ® Colocação do DIB BE (D0) D-1 D7 T D9 Colheita de embrião D5 D15 M FSH (100mg Folltr.) D6 D4 D8 M Retirada do DIB ® LH 12h LH 12h IA 16h IA IA 12h 24h
  219. 267. Médico Veterinário: Claudiney de Melo Martins Fazenda: Santa Bárbara, Botenhos - MG
  220. 268. Tabela - Efeito do número de inseminações na eficiência de programas de superovulação com inseminação artificial em tempo fixo em vacas Nelore ( Bos indicus ), Martins et al., 2005 0.91 4.2  0.6 4.3  0.7 Embriões transferíveis (n) 0.89 2.8  0.4 2.9  0.6 Embriões congeláveis (n) 0.61 33.6  1.6 32.4  1.8 Intervalo entre 1 a e ultima ovulação (h) 0.57 4.4  1.0 3.8  0.6 Número de folículos >8mm (D15) 0.36 2.2  0.3 3.3  0.9 Embriões degenerados (n) 0.57 0.8  0.2 0.6  0.2 Embriões não fertilizados (n) 0.35 7.2  0.8 8.2  0.9 Total estruturas (n) 0.74 77.6  4.8 80.5  4.4 Taxa recuperação (%) 0.94 64.2  4.3 63.8  3.8 Taxa de ovulação (%) 0.23 9.2  0.7 10.5  1.3 Número de corpos lúteos (D15) 0.20 14.8  1.2 16.2  1.4 Número de folículos >8mm (LH) Efeito Valor P (Teste F) 2 IATF (n=10) 1 IATF (n=10)
  221. 269. Tratamiento de Superovulación <ul><li>Día 0 DISP P4 + </li></ul><ul><li>Día 4 am 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 3,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 5 am 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>pm 2,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 6 am 1,5 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>pm 1,5 ml Folltropin + PGF </li></ul><ul><li>Día 7 am 0,5 ml Folltropin + sacar disp. P4 </li></ul><ul><li>pm 0,5 ml Folltropin </li></ul><ul><li>Día 8 am GnRH </li></ul><ul><li>pm IA </li></ul><ul><li>Día 9 am IA </li></ul><ul><li>Día 15 Colección de embriones </li></ul>2,5 mg EB + 50 mg P4 2,5 mg E-17  + 50 mg P4
  222. 270. Programación de Donantes
  223. 271. Programa de Producción de Embriones <ul><li>Objetivo: </li></ul><ul><li>Producir el mayor número de embriones en el menor tiempo posible. </li></ul>
  224. 272. Niveles de P4 y celo en donantes tratadas con cloprostenol el día de la colecta 7,2 ±0,9 5/9 3,1 ±0,5 b 9/9 b 750  g 7,0 ±0,9 7/8 3,6 ±0,8 b 8/8 b 500  g 10,3 ±0,6 3/10 9,7 ±1,8 a 6/10 a Control Día n Día n Celo Regresión Luteal (P4 < 1 ng/ml) ab P<0,05
  225. 273. Dinámica folicular en donantes tratadas con cloprostenol en el día de la colecta
  226. 274. Superovulaciones repetidas y respuesta 3,5 1,5 2,8 3,5 3,2 Embr. Trans. 7,4 5,8 6 6,8 6,8 CL Vacas “Problema” 6 5,8 6 6,5 7 Embr. Trans. 12 12 9 11 10 CL Vacas Normales Col. 5 Col. 4 Col. 3 Col. 2 Col. 1 Moor et al., 1984
  227. 275. Programación de Donantes (Tradicional con CIDR-B) <ul><li>Día 0 Colección de Embriones + PGF </li></ul><ul><li>Día 5-7 Celo </li></ul><ul><li>Día 28 Celo </li></ul><ul><li>Día 33 CIDR+EB+P4 </li></ul><ul><li>Día 37 Folltropin-V </li></ul><ul><li>Día 42 IA </li></ul><ul><li>Día 49 Colección </li></ul>
  228. 276. Programación de Donantes (Frare et al., 1997) <ul><li>Día 0 Colección de Embriones </li></ul><ul><ul><li>+ CIDR-B + PGF </li></ul></ul><ul><li>Día 1 PGF </li></ul><ul><li>Día 10 Sacar CIDR-B </li></ul><ul><li>Día 12 Celo </li></ul><ul><li>Día 22 Superovulación </li></ul><ul><li>Día 26 IA </li></ul><ul><li>Día 33 Colección </li></ul>
  229. 277. Intervalo Entre Colecciones y Producción de Embriones Frare et al., 1997
  230. 278. Desempeño de vacas Angus donantes superovuladas cada 40 días durante un período de 18 meses (Hasler, 2000) Cantidad de donantes 24 Período de tratamiento 18 meses Superovulaciones, n, (promedio x donante) [var.] 13,8 [11 - 16] Intervalo promedio entre superovulaciones 39,7 días Promedio embriones x superovul. [variación] 5,5 [0 - 35]
  231. 279. Programación de Donantes <ul><li>Día 0 Colección de Embriones </li></ul><ul><li>+ PGF </li></ul><ul><li>Día 25-35 CIDR + EB + P4 </li></ul><ul><li>Día 29-39 Folltropin-V </li></ul><ul><li>Día 33-43 IA </li></ul><ul><li>Día 40-50 Colección de Embriones </li></ul>
  232. 280. Producción de Embriones Efecto de Fecha de Superovulación <ul><li>1. diciembre 1, 1997 </li></ul><ul><li>2. enero 9, 1998 (40 días) </li></ul><ul><li>3. febrero 24, 1998 (46 días) </li></ul><ul><li>4. abril 15, 1998 (50 días) </li></ul><ul><li>5. junio 3, 1998 (49 días) </li></ul><ul><li>6. julio 13, 1998 (40 días) </li></ul><ul><li>7. setiembre 2, 1998 (50 días) </li></ul><ul><li>8. octubre 1, 1998* (29 días) </li></ul>n = 14 vacas - P=0.399
  233. 281. Programación de Donantes <ul><li>Día 0 Colección de Embriones </li></ul><ul><li>+ PGF </li></ul><ul><li>Día 13 CIDR + EB + P4 </li></ul><ul><li>Día 17 Folltropin-V </li></ul><ul><li>Día 21 IA </li></ul><ul><li>Día 28 Colección de Embriones </li></ul>
  234. 282. Desempeño de vacas Red Angus donantes superovuladas cada 28 - 50 días Cantidad de donantes 20 Período de tratamiento 32 meses Superovulaciones, n, (promedio x donante) [var.] 16 [11 - 20] Intervalo promedio entre superovulaciones 40 días Promedio embriones x superovul. [variación] 5,8 [0 - 28]
  235. 283. <ul><li>Producción estimada </li></ul><ul><li>(en base a 5,8 embriones transferibles por vaca) </li></ul><ul><li>365 días / 40 días = 9 colecciones por año </li></ul><ul><li>9 col. x 5,8 emb. transf. = 52,2 emb. por vaca por año </li></ul><ul><li>52 emb. x 60 % preñez = 31 preñeces por vaca por año </li></ul>Programación de Donantes
  236. 284. Superstimulation following E-17 β Day 0 - Insert CIDR - inject 5 mg E-17β plus 100 mg P4 Day 4 - Initiate FSH treatments Day 6 - PGF - PGF & remove CIDR Day 8 - AI Day 9 - AI Day 15 - Embryo collection & transfer - PGF Day 22 - Estrus - PGF Day 28 - Insert CIDR (donors) - inject 5 mg E-17 β plus 100 mg P4
  237. 285. Superstimulation following Follicle Ablation Day 0 - Ablate 2 largest follicles - Insert CIDR Day 1 - Initiate FSH treatments Day 4 - PGF - PGF & remove CIDR Day 6 - AI Day 7 - AI Day 13 - Embryo collection & transfer - PGF Day 20 - Estrus - PGF Day 28 - Insert CIDR (donors) - Ablate 2 largest follicles
  238. 286. 34.11 30.2 39.2 Avg. Days b/t Flushes 1342 893 449 Total IETS # 1 collected 8.5 Traditional 60 day Transferable/flush (1038 Donors) 8.1 8.6 7.2 Transferable/Flush (IETS #1 & #2) 0.93 1.0 0.8 Avg. IETS # 2/Flush 7.14 7.6 6.4 Avg. IETS # 1/Flush 3.49 3.9 3.0 Avg. # of Flushes 188 118 70 # of Flushes 73 30 23 # of Donors Pooled Red Angus Holstein Flush Summary & Averages Stables, 2003
  239. 287. Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Summary
  240. 288. Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Synchronization of follicular wave emergence offers the convenience of initiating FSH treatments quickly and at a self-appointed time… Without the necessity of estrus detection Without sacrificing response Summary
  241. 289. Gonadotropin treatments must be initiated at the time of follicular wave emergence to optimize superovulatory response Synchronization of follicular wave emergence offers the convenience of initiating FSH treatments quickly and at a self-appointed time… Without the necessity of estrus detection Without sacrificing response Follicular synchronization protocols will permit superstimulation at 25 to 30 day intervals, without regard to ovarian function Summary
  242. 290. Programacion de Donantes y Receptoras <ul><li>Día 0: CIDR+EB+P4 </li></ul><ul><li>Día 4: SPO </li></ul><ul><li>Día 6 AM: PGF </li></ul><ul><li> PM: remov. CIDR +PGF </li></ul><ul><li>Día 8: AM: IA </li></ul><ul><ul><ul><li>PM: IA </li></ul></ul></ul><ul><li>Día 9: AM IA </li></ul><ul><li>Día 15: Colección </li></ul><ul><li>Día -2: CIDR+EB +P4 </li></ul><ul><li>Día 3: PGF + eCG </li></ul><ul><li>Día 6 AM: remov CIDR </li></ul><ul><li>Día 7 AM: 1 mg EB </li></ul><ul><li>Día 8: Estro (estimado) </li></ul><ul><li>Día 15: Transferencia </li></ul>
  243. 291. D S V J M M L 3 D S V J M AM:X CIDR L 2 D S V J M M L 1 SPO - D AM Gnrh PM IA - D AM IA-D CIDR +EB+P4- D AM y PM: PGF D Col - D

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