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¿por qué es necesario
 diagnosticar tuberculosis (TB) en
 el siglo XXI?

 ¿cómo diagnosticarla?

¿dónde diagnosticarla?
¿qué ocurre con la co-infección
 por el VIH?

 ¿qué ocurre con la fármaco
 resistencia?

¿cuál es la situación/capacidad de
 los laboratorios?
Iniciativa Global de la Estrategia STOP TB
          OMS para los Laboratorios
El cuidado del paciente con TB comienza en el proceso del
diagnóstico que debe basarse en el cultivo y la identificación
de Mycobacterium tuberculosis, a partir de materiales
clínicos, para confimar o excluir TB. Debe estar atravesado
en cada etapa por estándares de calidad
Situación global de TB en las Américas


           Carga total TB
              294.636




                                                                             Perú
                                                                            Bolivia       Paraguay
                                                                                           Brasil
                                                            310.0                          Uruguay
                                                                             Chile




Tasa
            Global Tuberculosis Control 2011. Epidemiology, Strategy, Financing. World Health Organization
La co-infección: VIH-TB
 • Riesgo de desarrollar TB: 20-37 veces > en co-
   infectados
 • Año 2009:
    – 9,4 millones de casos nuevos de TB
    – co-infectados: 1,2 millones (13,0%)
    – defunciones por TB: 1,7 millones
    – co-infectados: 400.000 (24,0%)
    – defunciones en VIH: 22,0% con TB
 • TB es la causa mas importante de mortalidad entre
   personas viviendo con VIH


Fuente: 1 Guidelines for intensified tuberculosis case finding and isoniazid preventive therapy for people living with HIV
in resource-constrained setting. World Health Organization, 2011. 2 Global tuberculosis control report. World Health
Organization, 2010. 3 UNAIDS 2010 Global Report Fact Sheet.
TB-M/XDR definiciones

MDR:
resistencia a INH y RIF
Incidencia mundial: ≈500.000 casos/año

XDR:
MDR+FQ+AG (AMK, KM) o CPM
Incidencia mundial: 25.000-35.000
casos/año

    TDR: EXISTE OPERATIVAMENTE
     N0 existe desde la definición
XDR-TB Años 2000-2010
Situación de TB en Argentina

          TOTAL DE CASOS
           NUEVOS DE TB
          ARGENTINA 2010
                             9993

    TOTAL DE MUERTES DE TB
       ARGENTINA 2009*
                                 698                                                                                      1 PUNTO = 5 CASOS



Fuente: Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias (INER) “Emilio Coni”, con base en los datos de los Programas de Control de las 25
Jurisdicciones. Ministerio de Salud y Ambiente. Argentina. Agosto de 2010.
*Dirección de Estadística e Información de Salud-Ministerio de Salud
Situación de TB en Argentina

          TOTAL DE CASOS
           NUEVOS DE TB
          ARGENTINA 2010
                             9993
                                                  6.88%< 2009 IR: 25%000
    TOTAL DE MUERTES DE TB
       ARGENTINA 2009*
                                                  698 muertes, 0.85%<2008
                                 698                                                                                      1 PUNTO = 5 CASOS



Fuente: Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias (INER) “Emilio Coni”, con base en los datos de los Programas de Control de las 25
Jurisdicciones. Ministerio de Salud y Ambiente. Argentina. Agosto de 2010.
*Dirección de Estadística e Información de Salud-Ministerio de Salud
33,95   4979




               IR BAP: 1.5 >IR RA
               IR GBA:1.2>IR BAP
               IR GBA: 1.8>IR RA
33,95   4979




               HIV: 134.000




               IR BAP: 1.5 >IR RA
               IR GBA:1.2>IR BAP
               IR GBA: 1.8>IR RA
Situación global de TB en
                              Buenos Aires

                              GBA




                        Habitantes
      15.594.428 (39,0%)             9.910.202 (63,5%)

            BA IR: 32.0%000          GBA IR: 40.7%000

  MDR-HIV: 22/190                       MDR/XDR: 200 cases
      (11.6%)                             N: 190 TTO: 123
XDR-HIV: 1/22 (4.5%)
                        HIV: 55000
                                              XDR: 10
SITUACION DE LA TB: TENDENCIA DE LA MULTIRRESISTENCIA.
                    Argentina, 1968-2006
                                                  (sin considerar brote de 1994, marcado con punto).
 %
 18

  16
                                                                                           15,4
  14

  12                                       MR casos antes tratados
                                           MR casos antes tratados
  10
                                               10,3                          9,4
   8
                                  7,8
   6

   4
                                                                 MR casos nuevos
                                                                  MR casos nuevos
   2                                                                                       2,2
                 0,9                          0,2                           1,8
   0             0                0
          1968-78          1979-86          1987-92            1994    1999-2000      2005-2006



Fuente: Servicio Micobacterias. Instituto Nacional de Enfermedades
Infecciosas.ANLIS “Carlos G. Malbran”. Argentina
SITUACION DE LA TB: TENDENCIA DE LA MULTIRRESISTENCIA.
                    Argentina, 1968-2006
                                                  (sin considerar brote de 1994, marcado con punto).
 %
 18

  16                                                                                     9.8%-22.6%
                                                                                           15,4
  14

  12                                       MR casos antes tratados
                                           MR casos antes tratados
  10
                                               10,3                          9,4
   8
                                  7,8
   6

   4
                                                                 MR casos nuevos
                                                                  MR casos nuevos
   2                                                                                       2,2
                                                                                         1.2%-3.6%
                 0,9                          0,2                           1,8
   0             0                0
          1968-78          1979-86          1987-92            1994    1999-2000      2005-2006



Fuente: Servicio Micobacterias. Instituto Nacional de Enfermedades
Infecciosas.ANLIS “Carlos G. Malbran”. Argentina
Proporción de casos nuevos TB-XDR entre casos nuevos
            TB-MDR. Argentina 2003-2010




                                      46;
                                     6,6%
                                              XDR
                                              MDR


                              652;
                             93,4%
Evolución de la MDR-TB Buenos
           Aires. Periodo 1998-2010



    70

    60
N
ú   50
m
e   40
r
o   30

    20

    10                                                 Total acumulado: 302

    0
         1998 1999 2000   2001   2002   2003   2004   2005   2006   2007   2008   2009   2010
         1     2     3      4      5      6       7      8     9      10     11     12     13

                                          Años
Casos acumulados VIH-TB MDR
    12


    10
N
ú
     8
m
e
r    6
o

     4
                                             Total acumulado: 66 (21,8%)
     2


     0       1998               //               //         //                  2010
         1          2   3   4        5   6   7          8    9   10   11   12     13
                                                 Años
TB-XDR

       Período 1998-2010

• VIH/TB-XDR: 10 casos (15,7%)

• Sin co-infección: 11 casos (4,6%)
Conclusión de la OMS

Iniciativa Global de la
 estrategia STOP TB
para los Laboratorios
Iniciativa Global de la Estrategia STOP TB
            OMS para los Laboratorios

Los laboratorios carecen de adecuada capacidad
  diagnóstica:
Sólo el 5% de los casos M/XDR se diagostican en el
  mundo

Reforzar la capcidad de los laboratorios


Identificar países y áreas donde la M/DRX y el HIV son
   altamente prevalentes
 Incrementar el uso del cultivo especialmente en áreas
   prevalentes de ls co-infección
Iniciativa Global de la Estrategia STOP TB
         OMS para los Laboratorios
•   Locales: BS, mantenimiento, adecuación

•   Validación y mantenimiento de equipos

•   Transporte y delivery de muestras clínicas

•   Provisión continua de equipos y rectivos

•   Sistemas de manejo de datos

•   Sistemas de controles de calidad y aseguramiento de la
    calidad (QC y QA)

•   Estrategias para capacitación continua del RRHH

•   Coordinación y asistencia técnica

• Políticas basadas en algoritmos diagnósticos
¿qué se puede/debe hacer
 desde los laboratorios?


           Los métodos convencionales de
           detección de resistencia en medio
           sólido pueden producir resultados
           entre los 20-40 días de la
           inoculación de la PS.
Herramientas DX




Source: Global Tuberculosis Control 2011. Geneva, World Health Organization, 2011.
Available at http://www.who.int/tb/publications/global_report/2011/gtbr11_full.pdf.
¿Qué son los métodos rápidos para la
     detección de resistencia a R y H?

¿Qué son los métodos rápidos?
– FENOTIPICOS

   • MGIT automatizado y manual

   • no comerciales
       – Nitrato reductasa
       – Resarzurina o MTT

– GENOTIPICOS

       – comerciales (Line probe assays y Xpert)
Métodos rápidos de aislamiento y drogo
                           sensibilidad

               MGIT 960® (Año 2000)
Determinación de CIM a DSL (2004)
                   SUBSIDIOS A LA INVESTIGACIÓN CIENTÍFICA

1. European Commission Proyecto Nº 201690: “Development of a two-approach plate
   system for the fast and simultaneous detection of MDR and XDR M. tuberculosis”.
   Acrónimo: FAST-XDR-DETECT. Febrero de 2008 (en curso).
        H2O SC/GC   ETH   CS   CPM    KM AMK     MOX    LZ OFX  RBT H2O
2. Desarrollo e innovación en el ámbito del Convenio Bilateral de Cooperación entre el CNPq
   y la Agencia Nacional de Promoción Científica y Técnica (ANPCyT), de Argentina. Edital
   MCT/CNPq Nº 10/2008. Proyecto de pesquisa: “Tuberculosis Multirresistente y
   Micobacterias no tuberculosas: estudio molecular y virulencia”. Agosto de 2008 (en
   curso).

3. Cooperación Iberoamericana. Ciencia y Tecnología para el desarrollo (CYTED), España:
   “Red de epidemiología molecular de la tuberculosis multirresistente en Iberoamérica”.
   Año 2006 (en curso).

4. South American Program for Science and Technology Support and Cooperation
   (Programa Sul-Americano de Apoio a Cooperação em Ciência e Tecnologia) (PROSUL).
   Project number 490514/2007-3: “Latinamerican network for Mycobacteria: development
   and assessment of new tuberculosis diagnostic methods in Latin American countries”.
   November 2007 (on going).

5. Specific Targeted Research Project European Commission: “Development of a molecular
   platform for the simultaneous detection of Mycobacterium tuberculosis resistance to
   rifampin and fluoroquinolones”. FP6-2003-LIFESCHIEALTH-3. March 24th 2004 (two years
   grant). This project includes a trial for testing the clinical performance of the developed
   platform.

6. Programa VIGI+A, PNUD, Proyecto Nº: 1012: “Riesgo de infección por tuberculosis en
   relación con la transmisión reciente de Mycobacterium tuberculosis analizada por
   métodos moleculares y epidemiológicos”. Año 2005.

7. Concerted Action for Financial Support from the European Commission, INCO Project No:
   ICA4-CT 2001-10087: “RELACTB: New strategies for diagnosis drug resistance detection
   and control of tuberculosis”. Febrero 2001.                                                   28
¿Qué son los métodos rápidos para la
    detección de resistencia a R y H?


– GENOTIPICOS

     – Comerciales: basados en Line probe assays

     – Con equipamiento

                          Gene Xpert



     – Sin equipamiento
        » GenoType MTBDR®
        » GenoType MTBDRPLUS®
GenoType MTBDR®
GenoType MTBDRplus®                            AÑO 2011
        Detección del complejo M. tuberculosis y su resistencia a Rif , gen rpoB, e INH, gen
        KatG, desde cultivos, en un único procedimiento. Duración de la prueba: 5hs.



               CC
               UC
    Complejo MTB
           rpoß uni
          rpoß wt 1
          rpoß wt 2
          rpoß wt 3
          rpoß wt 4
          rpoß wt 5
       rpoß D516V
      Rpoß H526Y
       rpoß H526C
       rpoß S531L
           katG uni
           katG wt
    katG mutation 1
    katG mutation 2
Principios del algoritmo
•Diseño acorde con las necesidades de salud de la población y
las ecomendaciones nacionales e internacionales


•Herramientas técnicas con diferente grado de complejidad

•Racionalización de los recursos económicos

•Optimización del uso de los recursos económicos, materiales
y humanos

•Condiciones epidemiológicas y clínicas del paciente
Algoritmo diagnóstico

El algoritmo de laboratorio comprende
   tres pasos principales
a) Detección de los bacilos ácido alcohol resistentes (BAAR)
   y aislamiento de M. tuberculosis y/o micobacterias no
   tuberculosas (MNT)

b) Identificación de la especie bacteriana y determinación de
   la sensibilidad a drogas anti-TB

c) Epidemiología molecular de TB para estudios de vigilancia
   epidemiológica y transmisión
Algoritmo diagnóstico
Primer paso
a) Detección de BAAR y
   aislamiento de
   M. tuberculosis y/o MNT




                                EpiCenter
Segundo paso:
a) identificación            Immunocromatografía




 Identificación bioquímica




                             PRA




                              Métodos moleculares de
                                  identificación
Segundo paso:
b) Determinación de sensibilidad (DST)        Gold Standard:

                                              ILJ/M7H11
 BD EpiCenter™ TB-eXiST Extended         MTBC/MNT
 Individual Susceptibility Testing
                                     NRA      I-CMM/REMA
                                              D-CMM/REMA
      DPL y DSL                  DPL Y DSL
                                                 DPL Y DSL
Tercer paso:

a) Estudios de Epidemiología molecular
                                                    Microsofts:
100   Spoligotyping                                 BioNumerics®
                              Mt   878 Esquivel     GelCompare®
                                                   Walter
                              Mt   H37Rv
                              Mt   5108 Gimenez    Juan Carlos
                              Mt   5099 Ordoñez    Tamara
                              Mt   5201 Zalazar    Leonela
                              Mt   3187 Zalazar    Milagros
                              Mt   3982 Junka      Marcela
                              Mt   3850 Esquivel   Walter
                              Mt   2799 Coria      Aurora
                              Mt   4319 Dotti      Sebastian

      IS6110 RFLP




                                              A               B
                                          Evidencia de transmisión
Algoritmo diagnóstico




 NTP
             HIV+/PPT
               Niños
              IC, CC
BAAR-     BAAR+
                              BAAR+
                  BAAR-
        NTP
                          HIV+/PPT
                            Niños
                           IC, CC
BAAR-     BAAR+
                              BAAR+
                  BAAR-
        NTP
                                      Grupo A
                          PPT/HIV+
                            Niños
                           IC, CC
Grupo B


BAAR-     BAAR+
                              BAAR+
                  BAAR-
        NTP
                                      Grupo A
                          PPT/HIV+
                            Niños
                           IC, CC
Grupo B                       GenoType
                                     MTBDRplus®
BAAR-     BAAR+
                             AFB+

        NTP       BAAR-
                                        Grupo A
                          PPT/HIV+
                            Niños
                           IC, CC
D-NRA/
                  D-CMM
        Grupo B                        GenoType
                                      MTBDRplus®
BAAR-     BAAR+
                  BAAR-       BAAR+

        NTP
                                         Grupo A
                           PPT/HIV+
                             Niños
                            IC, CC
MDS
                                      MDR


                  D-NRA/
                  D-CMM
       Grupo B                         GenoType
                                      MTBDRplus®
BAAR     BAAR +
-                 BAAR        BAAR+
                  -
       NTP
                                            Grupo A
                           PPT/HIV+
                             Niños
                            IC, CC
MGIT
                  SIRE                MDR


                  D-NRA/
                  D-CMM
       Grupo B                          GenoType
                                       MTBDRplus®
BAAR     BAAR +
-                 BAAR        BAAR +
                  -
       NTP
                           PPT/HIV+         Grupo A
                             Niños
                            IC, CC
MGIT
                   SIRE                  MDR


                  D-NRA/D-
                    CMM
 C+
       Grupo B                            GenoType
                   C+
                                         MTBDRplus®
BAAR     BAAR +
-                 BAAR          BAAR +
                  -
       NTP
                                               Grupo A
                             PPT/HIV+
                               Niños
                              IC, CC
MGIT
                      SIRE               MDR

Grupo C
                     D-NRA/
                     D-CMM
  C+
          Grupo B                         GenoType
                      C+                 MTBDRplus®
 BAAR       BAAR +
 -                   BAAR        BAAR+
                     -
          NTP
                                               Grupo A
                              PPT/HIV+
                                Niños
                               IC, CC
MGIT
                      SIRE                MDR

Grupo C
                     D-NRA/
                     D-CMM
  C+
          Grupo B                          GenoType
                      C+     Grupo D      MTBDRplus®
 BAAR-      BAAR +
                     BAAR        BAAR +
                     -
          NTP
                                                Grupo A
                              PPT/HIV+
                                Niños
                               IC, CC
I-NRA/
I-CMM                 MGIT
                                        MDR
                      SIRE
Groupo
   C                D-NRA/
                    D-CMM
  C+
         Grupo B                          GenoType
                    C+     Grupo D       MTBDRplus®
 BAAR-     BAAR +
                    BAAR        BAAR +
                    -
         NTP
                                              Grupo A
                             PPT/HIV+
                               Niños
                              IC, CC
I-NRA/      MDS
I-CMM       MDR      MGIT
                     SIRE               MDR

Grupo C
                    D-NRA/D-
                      CMM        MDS
  C+                             MDR
          Grupo B                         GenoType
                    C+      Grupo D      MTBDRplus®
 BAAR-      BAAR+
                    BAAR        BAAR +
                    -
          NTP
                                              Grupo A
                             PPT/HIV+
                               Niños
                              IC, CC
I-NRA/      MDS
I-CMM       MDR     MGIT
                    SIRE                MDR

Grupo C
                    D-NRA/D-
                      CMM         MDS
  C+                              MDR
          Grupo B                         GenoType
                    C+      Grupo D      MTBDRplus®
 BAAR-      BAAR+
                    BAAR-       BAAR+

          NTP
                                              Grupo A
                             PPT/HIV+
                               Niños
                              IC, CC
I-NRA/
I-CMM       MDR
                     MGIT
                     SIRE              MDR

Grupo C
                    D-NRA/D-
                      CMM
  C+                             MDR
          Grupo B                       GenoType
                    C+     Grupo D     MTBDRplus®
 AFB-       AFB+
                    AFB-       AFB+

          NTP
                                             Grupo A
                            PPT/HIV+
                              Niños
                             IC, CC
MGIT 2nd
                            Line. TBexist
I-NRA/
            MDR
I-CMM                MGIT
                     SIRE                MDR

Grupo C
                    D-NRA/D-
                      CMM
  C+
          Grupo B                         GenoType
                    C+      Grupo D      MTBDRplus®
 BAAR-      BAAR+
                    BAAR-        BAAR+

          NTP
                                               Grupo A
                             PPT/HIV+
                               Niños
                              IC, CC
MDR
                                XDR
                              MGIT 2nd
I-NRA/                      Line. TBexist
            MDR
I-CMM                 MGIT
                      SIRE               MDR

Grupo C
                    D-NRA/D-
                      CMM
  C+
          Grupo B                            GenoType
                     C+      Grupo D        MTBDRplus®
 BAAR-      BAAR+
                    BAAR-        BAAR+

          NTP
                                               Grupo A
                              PPT/HIV+
                                Niños
                               IC, CC
Mol. Epi
                                MDR            studies
                                XDR
                              MGIT 2nd
                            Line. TBexist
I-NRA/
            MDR      MGI
I-CMM
                       T                 MDR
                     SIRE
Grupo C
                    D-NRA/D-
                      CMM
  C+
          Grupo B                            GenoType
                    C+      Grupo D         MTBDRplus®
 BAAR-      BAAR+
                    BAAR-        BAAR+

          NTP
                                                Grupo A
                             PPT/HIV+
                               Niños
                              IC, CC
Mol. Epi
  Contact                          MDR            studies
  tracing                          XDR
                                 MGIT 2nd
                               Line. TBexist
I-NRA/
              MDR       MGI
I-CMM
                          T                 MDR
                        SIRE
Grupo C
                      D-NRA/D-
                        CMM
  C+
            Grupo B                          GenoType
                       C+      Grupo D      MTBDRplus®
 BAAR-        BAAR+
                      BAAR-         BAAR+

            NTP
                                                  Grupo A
                                PPT/HIV+
                                  Niños
                                 IC, CC
Trans.                        Mol. Epi
  Contact                            MDR            studies
                      studies
  tracing                            XDR
                                   MGIT 2nd
                                 Line. TBexist
I-NRA/
              MDR
I-CMM                     MGIT
                          SIRE                MDR

Grupo C
                        D-NRA/D-
                          CMM
  C+
            Grupo B                            GenoType
                         C+      Grupo D      MTBDRplus®
 BAAR-        BAAR+
                         BAAR-        BAAR+

            NTP
                                                     Grupo A
                                  PPT/HIV+
                                    Niños
                                   IC, CC
Trans.                          Mol. Epi
   Contact                              MDR              studies
                         studies
   tracing                              XDR
                                      MGIT 2nd
                                    Line. TBexist
INRA/
                   MDR
I-CMM                        MGIT
                             SIRE                 MDR


Grupo C
                           D-NRA/D-
                             CMM
  C+
             Grupo B                                 GenoType
                            C+      Grupo D         MTBDRplus®
 BAAR-         BAAR+
                            BAAR-        BAAR+

             NTP
                                                          Grupo A
                                      PPT/HIV+
                                        Niños
                                       IC, CC

                                       AFB+/-           Grupo E
                                      C+ (MNT?)
Trans.                          Mol. Epi
   Contact                              MDR              studies
                         studies
   tracing                              XDR
                                      MGIT 2nd
                                    Line. TBexist
I-NRA/
                   MDR
I-CMM                        MGIT
                             SIRE                 MDR


Grupo C                                                             MNT
                           D-NRA/D-
                             CMM
  C+
             Grupo B                                 GenoType
                            C+      Grupo D         MTBDRplus®
 BAAR-         BAAR+
                            BAAR-        BAAR+

             NTP
                                                          Grupo A
                                      PPT/HIV+
                                        Niños
                                       IC, CC

                                       AFB+/-           Grupo E
                                      C+ (MNT?)
Trans.                         Mol. Epi
   Contact                              MDR             studies
                         studies
   tracing                              XDR
                                      MGIT 2nd
                                    Line. TBexist
I-REMA/
                   MDR                                        ID+CMM
 I-CMM                       MGIT
                                                 MDR            MNT
                             SIRE

Grupo C                                                            MNT
                           D-NRA/D-
                             CMM
  C+
             Grupo B                                 GenoType
                            C+      Grupo D         MTBDRplus®
 AFB-          AFB+
                            AFB-         AFB+

             NTP
                                                         Grupo A
                                      PPT/HIV+
                                        Niños
                                       IC, CC

                                      AFB+/-           Grupo E
                                       C+
Hallazgos en el período 2008-2011
• SR analizados: 32.351
• Casos diagnosticados: 1833
• DST por métodos fenotípicos: 1690
• Diagnóstico molecular: 1era. fase: 780 casos de TB
• Diagnóstico molecular: 2da. fase: resistencia a INH y RIF
                            • 2da. fase: GenoType: 100 E+
                            • 2da. Fase: GenoType: 52 C+
                            • Métodos moleculares de resistencia
                              por métodos experimentales:
          – 200 aislamientos clínicos
          – 40 cepas codificadas
• Estudios de epidemiología molecular: 590 M. tuberculosis DS
          – 169 MDR/XDR y DR strains
• MNT: 108 casos (2006-2010)
          – Especies: 17
Evaluación del MGIT SIRE y el MMC
          Resultados obtenidos sobre 1690 aislamientos clínicos


            Drug-resistance                    DR-isolates/DST N° (%)
                 INH                               286/1,532 (18.7)
                 EMB                                71/1,532 (4.6)                  MGIT
                  LX                                10/1,532 (0.7)                  SIRE
                  RIF                              156/1,532 (10.2)
                  SM                               195/1,532 (12.7)              I-REMA/
                                                                                  I-CMM
                 AMK                                 25/94 (26.6)
                 CPM                                  8/94 (8.5)
                  CS                                 19/94(20.2)
                 ETH                                 25/94 (26.6)
                  KM                                 29/94 (30.9)
                  LZ                                  1/94 (1.1)
                 MOX                                  3/94 (3.2)
                 OFX                                 13/94 (13.8)
                 PAS                                  4/94 (4.3)
Morcillo N., Imperiale B., Di Giulio B. Evaluation of MGIT 960® and the colorimetric-based
method for tuberculosis drug-susceptibility testing". Int J Tuberc Lung Dis. 2010; 14: 1169-
1175
Evaluación del MGIT SIRE y el MMC
      Drug                      Method/drug-concentration (µg/mL)                                MGIT
                                                                                                 SIRE
   First-line                  CMM                      MGIT960                      ILJ
                                                                                               I-REMA/
                           1.00 to 0.03                     0.10                     0.20       I-CMM
       INH
       EMB                32.00 to 1.00                     5.00                    2.00
        LX                4.00 to 0.13                        -                     4.00
       RIF                2.00 to 0.06                      1.00                    40.00
        SM                8.00 to 0.25                      1.00                    4.00

 Second-line                                                                   PM-M7H11
    AMK                   8.00 to 0.25            8.00, 4.00, 2.00               5.00
    CPM                   10.00 to 0.65           10.00, 5.00, 2.50              30.00
     CS                  120.00 to 3.75          60.00, 30.00, 15.00             5.00
    ETH                  10.00 to 0.065           10.00, 5.00, 2.50              5.00
     KM                   10.00 to 0.65           10.00, 5.00, 2.50              5.00
      LZ                  2.00 to 0.06            2.00, 1.00, 0.50               1.00
    MOX                   1.00 to 0.03            10.00, 5.00, 2.50              0.50
    OFX                   4.00 to 0.13            2.00, 1.00, 0.50               2.00
     PAS                  8.00 to 0.25                    -                      1.00
Morcillo N., Imperiale B., Di Giulio B. Evaluation of MGIT 960® and the colorimetric-based
method for tuberculosis drug-susceptibility testing". Int J Tuberc Lung Dis. 2010; 14: 1169-
1175
Evaluación del MGIT SIRE y el MMC
                   DST method/Nº of isolates and correlation coefficient
Method/Drug     ILJ              r              MGIT9601                 r
               717 2           0.97                368 3               0.96
   CMM1
       INH                       0.98                                 0.96
       SM                        0.92                                 0.93
       RIF                       0.99                                 1.00
       EMB                       0.95                                 0.96
       LX                        0.99                                   -

 MGIT9601      10524             0.97
      INH                        0.98                -                  -
      SM                         0.99
      RIF                        1.00
      EMB                        0.90
              PMM7H11                            MGIT9602
   CMM2         94               0.96               94                0.94
      AMK                        1.00                                 1.00
      CPM                        1.00                                 1.00
      CS                         0.78                                 0.70
      ETH                        0.94                                 0.90
      KM                         0.96                                 0.95
      LZ                         1.00                                 1.00
      MOX                        1.00                                 1.00
     OFX                         1.00                                 1.00
      PAS                        1.00                                   -

 MGIT9602       94               0.97
                                                     -                  -       MGIT
     AMK                         1.00                                           SIRE
     CPM                         1.00
     CS                          0.82
     ETH                         0.94                                         I-REMA/
     KM                          0.96
     LZ                          1.00                                          I-CMM
     MOX                         1.00
     OFX                         1.00
Evaluación del MGIT SIRE y el MMC
                                                                                                   MGIT
                                                                                                   SIRE
                                                                                     Critical
Drug              S (%)               SP (%)                     ACC              concentration
                                                                                    (µg/mL)

         MGIT960          CMM     MGIT960      CMM      MGIT960        CMM      MGIT960        CMM


 INH       100.0          94.8     98.2        97.3       0.99         0.97       0.10         0.25
EMB         95.2          80.0     96.2        90.0       0.96         0.96       5.00         4.00
 LX          ND           100.0     ND         98.0        ND          0.98        ND          1.00
           100.0          100.0    100.0       99.7       1.00         1.00       1.00         0.50
 SM         93.0          83.3     96.7        96.6       0.91         0.92       1.00         2.00
AMK        100.0          100.0    100.0      100.0        1.0         1.0        4.00         4.00
CPM        100.0          100.0    95.0       100.0       0.95         1.0        5.00         2.00
 CS         80.0          87.5     94.3        93.5       0.94         0.95       30.00        15.00
 ETH        91.7          90.0     90.5        95.7       0.98         0.91       5.00         2.00
 KM         90.0          100.0    100.0       99.0       0.97         0.99       5.00         2.00
 LZ        100.0          100.0    100.0      100.0       ND*          ND*        1.00         1.00
MOX          ND           100.0     ND        100.0        ND          ND*         ND          0.50
 OFX       100.0          100.0    100.0      100.0       1.00         1.00       2.00         1.00
 PAS         ND           100.0     ND        100.0        ND          1.00        ND          1.00

Morcillo N., Imperiale B., Di Giulio B. Evaluation of MGIT 960® and the colorimetric-based     I-REMA/
method for tuberculosis drug-susceptibility testing". Int J Tuberc Lung Dis. 2010; 14: 1169-    I-CMM
1175
Características de las técnicas

    Técnica                   TAT          Dific         Aut       Costo                 Uso
                             (días)
         ZN                    1-2            2            0            1         Microscopía y
Dec+concentración                                                                    cultivo

 Cultivos en                 15-60            3            0            2           aislamiento
medios sólidos

   MGIT 960                  12-23            2            1            3           aislamiento
     ICROM                    7-25            1            0            4                  ID
     BCHID                   45-65            4            0            2                  ID
  GenoType®                  15-20            2            0            5                  ID
Mycobacterium CM
 ZN: Ziehl-Neelses stain; TAT: includes time for administrative procedures; DIFF: Compelxity of the
 technique; IID: immunodifussion identification; BCHID: biochemical identification: genus or species
 identification
Características de las técnicas

          Técnica                   TAT           Dif          Aut          Costo*            Uso
                                   (días)
          D-REMA                   10-21           2            0               2             DST
           D-NRA                   10-21           3            0               2             DST
          I-REMA                   25-42           4            0               3             DST
           I-NRA                   25-42           3            0               3             DST
        MGIT SIRE                  25-35           1            1               4             DST
 D-GenoType MTBDR                      3           2            0               5             DST
       plus
  I-GenoType MTBDR                 17-22           2            0               5             DST
         plus
Cost estimated on the bases on:

Acuna-Villaorduna C, Vassall A, Henostroza G, Seas C, Guerra H1, Vasquez L, Morcillo, N, Saravia
J, O’Brien R, Perkins MD, Cunningham J, Llanos-ZavalagaL, Gotuzzo E. Cost-Effectiveness Analysis of the
Introduction of Rapid, Alternative Methods to Identify Multidrug-Resistant Tuberculosis in Middle-Income
Countries. Clin Infectious Diseases 2008; 47:487–95
Estrategias para combatir la XDR-TB
Control básico de TB
Capacidad para el manejo clínico de MDR/XDR-TB
Incremento de la capacidad de los laboratorios para el diagnóstico de
MDR/XDR-TB
Implementación de las medidas prácticas del control de la infecciones
Acceso a ARVs
Gestión para la disponibilidad de recursos
Incremento de la investigación epidemiológica
Vigilancia epidemiológica para determinar la magnitud real del problema
Desarrollo de pruebas rápidas de diagnóstico
Desarrollo de nuevas drogas
Flujograma propuesto en Buenos Aires


   Procedimiento de
diagnóstico de MDR-TB                                         Elemento:
                                                    Planilla PPCTB notificación del
                                                                                                                      Niveles:
                                                           caso de MDR-TB

                         NOTIFICACIÓN
                                                                                                                     Regional
    Diagnóstico                                    Responsable municipal de TB
                         NOTIFICACIÓ                                                                  Notificación
    Confirmado           N


                         Elementos: Hoja de
                           derivación/planilla
Centros hospitalarios    notificación-ficha rosa
                                                                                      Información                    Provincial
                                                                                                            CAPS
 referenciales local                                                                                        para
 (1er o 2do nivel de                                                                                        TDO
    complejidad)                              Centros hospitalarios de                 DERIVACIÓN
                        DERIVACIÓN                referencia local                     del PACIENTE
                        del PACIENTE                                                   para TDO
                                             (2do nivel de complejidad)                                              Nacional


        Clínica         DERIVACIÓN del PACIENTE para TDO
      Laboratorio
Graduate implementation
  1952   • ZN, culture on solid media: LJ and SB;
           DST by PM in LJ
  1992   • IS6110 RFLP; GelCompare®
         • MGIT manual version
  1995
  1996
         •Spoligotyping, Rifoligotyping
  1998   •LCx Abbott, molecular diagnosis of TB
         •CMM for first and second line drugs
  1999

  2000   • MGIT 960, EpiCenter Microsoft, DST:
           MGIT 960 SIRE; BioNumerics®; IID;
  2011   • GenoType MDRTBplus, TBeXIST (SL-
           DST)
Graduate implementation
        • 2500 RS analyzed
 1980   • 250 TB cases          1 MDR/3 years
 1995   • TB: 10%



 1996
        •3250 RS analyzed
 1998   •375 TB cases           3 MDR/year
        •TB: 11.5%
 1999

 2000   • 5000 RS analyzed
        • 577 TB cases       MDR: 6.5 cases/year
 2011   • TB: 11.5%          MDR: 3.5%; NTP: 6.3%
                               PTP: 22.2%

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Morcillo tb multirresistente

  • 1.
  • 2. ¿por qué es necesario diagnosticar tuberculosis (TB) en el siglo XXI? ¿cómo diagnosticarla? ¿dónde diagnosticarla?
  • 3. ¿qué ocurre con la co-infección por el VIH? ¿qué ocurre con la fármaco resistencia? ¿cuál es la situación/capacidad de los laboratorios?
  • 4. Iniciativa Global de la Estrategia STOP TB OMS para los Laboratorios El cuidado del paciente con TB comienza en el proceso del diagnóstico que debe basarse en el cultivo y la identificación de Mycobacterium tuberculosis, a partir de materiales clínicos, para confimar o excluir TB. Debe estar atravesado en cada etapa por estándares de calidad
  • 5. Situación global de TB en las Américas Carga total TB 294.636 Perú Bolivia Paraguay Brasil 310.0 Uruguay Chile Tasa Global Tuberculosis Control 2011. Epidemiology, Strategy, Financing. World Health Organization
  • 6. La co-infección: VIH-TB • Riesgo de desarrollar TB: 20-37 veces > en co- infectados • Año 2009: – 9,4 millones de casos nuevos de TB – co-infectados: 1,2 millones (13,0%) – defunciones por TB: 1,7 millones – co-infectados: 400.000 (24,0%) – defunciones en VIH: 22,0% con TB • TB es la causa mas importante de mortalidad entre personas viviendo con VIH Fuente: 1 Guidelines for intensified tuberculosis case finding and isoniazid preventive therapy for people living with HIV in resource-constrained setting. World Health Organization, 2011. 2 Global tuberculosis control report. World Health Organization, 2010. 3 UNAIDS 2010 Global Report Fact Sheet.
  • 7. TB-M/XDR definiciones MDR: resistencia a INH y RIF Incidencia mundial: ≈500.000 casos/año XDR: MDR+FQ+AG (AMK, KM) o CPM Incidencia mundial: 25.000-35.000 casos/año TDR: EXISTE OPERATIVAMENTE N0 existe desde la definición
  • 9. Situación de TB en Argentina TOTAL DE CASOS NUEVOS DE TB ARGENTINA 2010 9993 TOTAL DE MUERTES DE TB ARGENTINA 2009* 698 1 PUNTO = 5 CASOS Fuente: Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias (INER) “Emilio Coni”, con base en los datos de los Programas de Control de las 25 Jurisdicciones. Ministerio de Salud y Ambiente. Argentina. Agosto de 2010. *Dirección de Estadística e Información de Salud-Ministerio de Salud
  • 10. Situación de TB en Argentina TOTAL DE CASOS NUEVOS DE TB ARGENTINA 2010 9993 6.88%< 2009 IR: 25%000 TOTAL DE MUERTES DE TB ARGENTINA 2009* 698 muertes, 0.85%<2008 698 1 PUNTO = 5 CASOS Fuente: Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias (INER) “Emilio Coni”, con base en los datos de los Programas de Control de las 25 Jurisdicciones. Ministerio de Salud y Ambiente. Argentina. Agosto de 2010. *Dirección de Estadística e Información de Salud-Ministerio de Salud
  • 11. 33,95 4979 IR BAP: 1.5 >IR RA IR GBA:1.2>IR BAP IR GBA: 1.8>IR RA
  • 12. 33,95 4979 HIV: 134.000 IR BAP: 1.5 >IR RA IR GBA:1.2>IR BAP IR GBA: 1.8>IR RA
  • 13. Situación global de TB en Buenos Aires GBA Habitantes 15.594.428 (39,0%) 9.910.202 (63,5%) BA IR: 32.0%000 GBA IR: 40.7%000 MDR-HIV: 22/190 MDR/XDR: 200 cases (11.6%) N: 190 TTO: 123 XDR-HIV: 1/22 (4.5%) HIV: 55000 XDR: 10
  • 14.
  • 15. SITUACION DE LA TB: TENDENCIA DE LA MULTIRRESISTENCIA. Argentina, 1968-2006 (sin considerar brote de 1994, marcado con punto). % 18 16 15,4 14 12 MR casos antes tratados MR casos antes tratados 10 10,3 9,4 8 7,8 6 4 MR casos nuevos MR casos nuevos 2 2,2 0,9 0,2 1,8 0 0 0 1968-78 1979-86 1987-92 1994 1999-2000 2005-2006 Fuente: Servicio Micobacterias. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas.ANLIS “Carlos G. Malbran”. Argentina
  • 16. SITUACION DE LA TB: TENDENCIA DE LA MULTIRRESISTENCIA. Argentina, 1968-2006 (sin considerar brote de 1994, marcado con punto). % 18 16 9.8%-22.6% 15,4 14 12 MR casos antes tratados MR casos antes tratados 10 10,3 9,4 8 7,8 6 4 MR casos nuevos MR casos nuevos 2 2,2 1.2%-3.6% 0,9 0,2 1,8 0 0 0 1968-78 1979-86 1987-92 1994 1999-2000 2005-2006 Fuente: Servicio Micobacterias. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas.ANLIS “Carlos G. Malbran”. Argentina
  • 17. Proporción de casos nuevos TB-XDR entre casos nuevos TB-MDR. Argentina 2003-2010 46; 6,6% XDR MDR 652; 93,4%
  • 18. Evolución de la MDR-TB Buenos Aires. Periodo 1998-2010 70 60 N ú 50 m e 40 r o 30 20 10 Total acumulado: 302 0 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Años
  • 19. Casos acumulados VIH-TB MDR 12 10 N ú 8 m e r 6 o 4 Total acumulado: 66 (21,8%) 2 0 1998 // // // 2010 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Años
  • 20. TB-XDR Período 1998-2010 • VIH/TB-XDR: 10 casos (15,7%) • Sin co-infección: 11 casos (4,6%)
  • 21. Conclusión de la OMS Iniciativa Global de la estrategia STOP TB para los Laboratorios
  • 22. Iniciativa Global de la Estrategia STOP TB OMS para los Laboratorios Los laboratorios carecen de adecuada capacidad diagnóstica: Sólo el 5% de los casos M/XDR se diagostican en el mundo Reforzar la capcidad de los laboratorios Identificar países y áreas donde la M/DRX y el HIV son altamente prevalentes Incrementar el uso del cultivo especialmente en áreas prevalentes de ls co-infección
  • 23. Iniciativa Global de la Estrategia STOP TB OMS para los Laboratorios • Locales: BS, mantenimiento, adecuación • Validación y mantenimiento de equipos • Transporte y delivery de muestras clínicas • Provisión continua de equipos y rectivos • Sistemas de manejo de datos • Sistemas de controles de calidad y aseguramiento de la calidad (QC y QA) • Estrategias para capacitación continua del RRHH • Coordinación y asistencia técnica • Políticas basadas en algoritmos diagnósticos
  • 24. ¿qué se puede/debe hacer desde los laboratorios? Los métodos convencionales de detección de resistencia en medio sólido pueden producir resultados entre los 20-40 días de la inoculación de la PS.
  • 25. Herramientas DX Source: Global Tuberculosis Control 2011. Geneva, World Health Organization, 2011. Available at http://www.who.int/tb/publications/global_report/2011/gtbr11_full.pdf.
  • 26. ¿Qué son los métodos rápidos para la detección de resistencia a R y H? ¿Qué son los métodos rápidos? – FENOTIPICOS • MGIT automatizado y manual • no comerciales – Nitrato reductasa – Resarzurina o MTT – GENOTIPICOS – comerciales (Line probe assays y Xpert)
  • 27. Métodos rápidos de aislamiento y drogo sensibilidad MGIT 960® (Año 2000)
  • 28. Determinación de CIM a DSL (2004) SUBSIDIOS A LA INVESTIGACIÓN CIENTÍFICA 1. European Commission Proyecto Nº 201690: “Development of a two-approach plate system for the fast and simultaneous detection of MDR and XDR M. tuberculosis”. Acrónimo: FAST-XDR-DETECT. Febrero de 2008 (en curso). H2O SC/GC ETH CS CPM KM AMK MOX LZ OFX RBT H2O 2. Desarrollo e innovación en el ámbito del Convenio Bilateral de Cooperación entre el CNPq y la Agencia Nacional de Promoción Científica y Técnica (ANPCyT), de Argentina. Edital MCT/CNPq Nº 10/2008. Proyecto de pesquisa: “Tuberculosis Multirresistente y Micobacterias no tuberculosas: estudio molecular y virulencia”. Agosto de 2008 (en curso). 3. Cooperación Iberoamericana. Ciencia y Tecnología para el desarrollo (CYTED), España: “Red de epidemiología molecular de la tuberculosis multirresistente en Iberoamérica”. Año 2006 (en curso). 4. South American Program for Science and Technology Support and Cooperation (Programa Sul-Americano de Apoio a Cooperação em Ciência e Tecnologia) (PROSUL). Project number 490514/2007-3: “Latinamerican network for Mycobacteria: development and assessment of new tuberculosis diagnostic methods in Latin American countries”. November 2007 (on going). 5. Specific Targeted Research Project European Commission: “Development of a molecular platform for the simultaneous detection of Mycobacterium tuberculosis resistance to rifampin and fluoroquinolones”. FP6-2003-LIFESCHIEALTH-3. March 24th 2004 (two years grant). This project includes a trial for testing the clinical performance of the developed platform. 6. Programa VIGI+A, PNUD, Proyecto Nº: 1012: “Riesgo de infección por tuberculosis en relación con la transmisión reciente de Mycobacterium tuberculosis analizada por métodos moleculares y epidemiológicos”. Año 2005. 7. Concerted Action for Financial Support from the European Commission, INCO Project No: ICA4-CT 2001-10087: “RELACTB: New strategies for diagnosis drug resistance detection and control of tuberculosis”. Febrero 2001. 28
  • 29. ¿Qué son los métodos rápidos para la detección de resistencia a R y H? – GENOTIPICOS – Comerciales: basados en Line probe assays – Con equipamiento Gene Xpert – Sin equipamiento » GenoType MTBDR® » GenoType MTBDRPLUS®
  • 30. GenoType MTBDR® GenoType MTBDRplus® AÑO 2011 Detección del complejo M. tuberculosis y su resistencia a Rif , gen rpoB, e INH, gen KatG, desde cultivos, en un único procedimiento. Duración de la prueba: 5hs. CC UC Complejo MTB rpoß uni rpoß wt 1 rpoß wt 2 rpoß wt 3 rpoß wt 4 rpoß wt 5 rpoß D516V Rpoß H526Y rpoß H526C rpoß S531L katG uni katG wt katG mutation 1 katG mutation 2
  • 31. Principios del algoritmo •Diseño acorde con las necesidades de salud de la población y las ecomendaciones nacionales e internacionales •Herramientas técnicas con diferente grado de complejidad •Racionalización de los recursos económicos •Optimización del uso de los recursos económicos, materiales y humanos •Condiciones epidemiológicas y clínicas del paciente
  • 32. Algoritmo diagnóstico El algoritmo de laboratorio comprende tres pasos principales a) Detección de los bacilos ácido alcohol resistentes (BAAR) y aislamiento de M. tuberculosis y/o micobacterias no tuberculosas (MNT) b) Identificación de la especie bacteriana y determinación de la sensibilidad a drogas anti-TB c) Epidemiología molecular de TB para estudios de vigilancia epidemiológica y transmisión
  • 33. Algoritmo diagnóstico Primer paso a) Detección de BAAR y aislamiento de M. tuberculosis y/o MNT EpiCenter
  • 34. Segundo paso: a) identificación Immunocromatografía Identificación bioquímica PRA Métodos moleculares de identificación
  • 35. Segundo paso: b) Determinación de sensibilidad (DST) Gold Standard: ILJ/M7H11 BD EpiCenter™ TB-eXiST Extended MTBC/MNT Individual Susceptibility Testing NRA I-CMM/REMA D-CMM/REMA DPL y DSL DPL Y DSL DPL Y DSL
  • 36. Tercer paso: a) Estudios de Epidemiología molecular Microsofts: 100 Spoligotyping BioNumerics® Mt 878 Esquivel GelCompare® Walter Mt H37Rv Mt 5108 Gimenez Juan Carlos Mt 5099 Ordoñez Tamara Mt 5201 Zalazar Leonela Mt 3187 Zalazar Milagros Mt 3982 Junka Marcela Mt 3850 Esquivel Walter Mt 2799 Coria Aurora Mt 4319 Dotti Sebastian IS6110 RFLP A B Evidencia de transmisión
  • 37. Algoritmo diagnóstico NTP HIV+/PPT Niños IC, CC
  • 38. BAAR- BAAR+ BAAR+ BAAR- NTP HIV+/PPT Niños IC, CC
  • 39. BAAR- BAAR+ BAAR+ BAAR- NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 40. Grupo B BAAR- BAAR+ BAAR+ BAAR- NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 41. Grupo B GenoType MTBDRplus® BAAR- BAAR+ AFB+ NTP BAAR- Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 42. D-NRA/ D-CMM Grupo B GenoType MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR- BAAR+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 43. MDS MDR D-NRA/ D-CMM Grupo B GenoType MTBDRplus® BAAR BAAR + - BAAR BAAR+ - NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 44. MGIT SIRE MDR D-NRA/ D-CMM Grupo B GenoType MTBDRplus® BAAR BAAR + - BAAR BAAR + - NTP PPT/HIV+ Grupo A Niños IC, CC
  • 45. MGIT SIRE MDR D-NRA/D- CMM C+ Grupo B GenoType C+ MTBDRplus® BAAR BAAR + - BAAR BAAR + - NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 46. MGIT SIRE MDR Grupo C D-NRA/ D-CMM C+ Grupo B GenoType C+ MTBDRplus® BAAR BAAR + - BAAR BAAR+ - NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 47. MGIT SIRE MDR Grupo C D-NRA/ D-CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR + BAAR BAAR + - NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 48. I-NRA/ I-CMM MGIT MDR SIRE Groupo C D-NRA/ D-CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR + BAAR BAAR + - NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 49. I-NRA/ MDS I-CMM MDR MGIT SIRE MDR Grupo C D-NRA/D- CMM MDS C+ MDR Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR BAAR + - NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 50. I-NRA/ MDS I-CMM MDR MGIT SIRE MDR Grupo C D-NRA/D- CMM MDS C+ MDR Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR- BAAR+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 51. I-NRA/ I-CMM MDR MGIT SIRE MDR Grupo C D-NRA/D- CMM C+ MDR Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® AFB- AFB+ AFB- AFB+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 52. MGIT 2nd Line. TBexist I-NRA/ MDR I-CMM MGIT SIRE MDR Grupo C D-NRA/D- CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR- BAAR+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 53. MDR XDR MGIT 2nd I-NRA/ Line. TBexist MDR I-CMM MGIT SIRE MDR Grupo C D-NRA/D- CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR- BAAR+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 54. Mol. Epi MDR studies XDR MGIT 2nd Line. TBexist I-NRA/ MDR MGI I-CMM T MDR SIRE Grupo C D-NRA/D- CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR- BAAR+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 55. Mol. Epi Contact MDR studies tracing XDR MGIT 2nd Line. TBexist I-NRA/ MDR MGI I-CMM T MDR SIRE Grupo C D-NRA/D- CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR- BAAR+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 56. Trans. Mol. Epi Contact MDR studies studies tracing XDR MGIT 2nd Line. TBexist I-NRA/ MDR I-CMM MGIT SIRE MDR Grupo C D-NRA/D- CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR- BAAR+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC
  • 57. Trans. Mol. Epi Contact MDR studies studies tracing XDR MGIT 2nd Line. TBexist INRA/ MDR I-CMM MGIT SIRE MDR Grupo C D-NRA/D- CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR- BAAR+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC AFB+/- Grupo E C+ (MNT?)
  • 58. Trans. Mol. Epi Contact MDR studies studies tracing XDR MGIT 2nd Line. TBexist I-NRA/ MDR I-CMM MGIT SIRE MDR Grupo C MNT D-NRA/D- CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® BAAR- BAAR+ BAAR- BAAR+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC AFB+/- Grupo E C+ (MNT?)
  • 59. Trans. Mol. Epi Contact MDR studies studies tracing XDR MGIT 2nd Line. TBexist I-REMA/ MDR ID+CMM I-CMM MGIT MDR MNT SIRE Grupo C MNT D-NRA/D- CMM C+ Grupo B GenoType C+ Grupo D MTBDRplus® AFB- AFB+ AFB- AFB+ NTP Grupo A PPT/HIV+ Niños IC, CC AFB+/- Grupo E C+
  • 60. Hallazgos en el período 2008-2011 • SR analizados: 32.351 • Casos diagnosticados: 1833 • DST por métodos fenotípicos: 1690 • Diagnóstico molecular: 1era. fase: 780 casos de TB • Diagnóstico molecular: 2da. fase: resistencia a INH y RIF • 2da. fase: GenoType: 100 E+ • 2da. Fase: GenoType: 52 C+ • Métodos moleculares de resistencia por métodos experimentales: – 200 aislamientos clínicos – 40 cepas codificadas • Estudios de epidemiología molecular: 590 M. tuberculosis DS – 169 MDR/XDR y DR strains • MNT: 108 casos (2006-2010) – Especies: 17
  • 61. Evaluación del MGIT SIRE y el MMC Resultados obtenidos sobre 1690 aislamientos clínicos Drug-resistance DR-isolates/DST N° (%) INH 286/1,532 (18.7) EMB 71/1,532 (4.6) MGIT LX 10/1,532 (0.7) SIRE RIF 156/1,532 (10.2) SM 195/1,532 (12.7) I-REMA/ I-CMM AMK 25/94 (26.6) CPM 8/94 (8.5) CS 19/94(20.2) ETH 25/94 (26.6) KM 29/94 (30.9) LZ 1/94 (1.1) MOX 3/94 (3.2) OFX 13/94 (13.8) PAS 4/94 (4.3) Morcillo N., Imperiale B., Di Giulio B. Evaluation of MGIT 960® and the colorimetric-based method for tuberculosis drug-susceptibility testing". Int J Tuberc Lung Dis. 2010; 14: 1169- 1175
  • 62. Evaluación del MGIT SIRE y el MMC Drug Method/drug-concentration (µg/mL) MGIT SIRE First-line CMM MGIT960 ILJ I-REMA/ 1.00 to 0.03 0.10 0.20 I-CMM INH EMB 32.00 to 1.00 5.00 2.00 LX 4.00 to 0.13 - 4.00 RIF 2.00 to 0.06 1.00 40.00 SM 8.00 to 0.25 1.00 4.00 Second-line PM-M7H11 AMK 8.00 to 0.25 8.00, 4.00, 2.00 5.00 CPM 10.00 to 0.65 10.00, 5.00, 2.50 30.00 CS 120.00 to 3.75 60.00, 30.00, 15.00 5.00 ETH 10.00 to 0.065 10.00, 5.00, 2.50 5.00 KM 10.00 to 0.65 10.00, 5.00, 2.50 5.00 LZ 2.00 to 0.06 2.00, 1.00, 0.50 1.00 MOX 1.00 to 0.03 10.00, 5.00, 2.50 0.50 OFX 4.00 to 0.13 2.00, 1.00, 0.50 2.00 PAS 8.00 to 0.25 - 1.00 Morcillo N., Imperiale B., Di Giulio B. Evaluation of MGIT 960® and the colorimetric-based method for tuberculosis drug-susceptibility testing". Int J Tuberc Lung Dis. 2010; 14: 1169- 1175
  • 63. Evaluación del MGIT SIRE y el MMC DST method/Nº of isolates and correlation coefficient Method/Drug ILJ r MGIT9601 r 717 2 0.97 368 3 0.96 CMM1 INH 0.98 0.96 SM 0.92 0.93 RIF 0.99 1.00 EMB 0.95 0.96 LX 0.99 - MGIT9601 10524 0.97 INH 0.98 - - SM 0.99 RIF 1.00 EMB 0.90 PMM7H11 MGIT9602 CMM2 94 0.96 94 0.94 AMK 1.00 1.00 CPM 1.00 1.00 CS 0.78 0.70 ETH 0.94 0.90 KM 0.96 0.95 LZ 1.00 1.00 MOX 1.00 1.00 OFX 1.00 1.00 PAS 1.00 - MGIT9602 94 0.97 - - MGIT AMK 1.00 SIRE CPM 1.00 CS 0.82 ETH 0.94 I-REMA/ KM 0.96 LZ 1.00 I-CMM MOX 1.00 OFX 1.00
  • 64. Evaluación del MGIT SIRE y el MMC MGIT SIRE Critical Drug S (%) SP (%) ACC concentration (µg/mL) MGIT960 CMM MGIT960 CMM MGIT960 CMM MGIT960 CMM INH 100.0 94.8 98.2 97.3 0.99 0.97 0.10 0.25 EMB 95.2 80.0 96.2 90.0 0.96 0.96 5.00 4.00 LX ND 100.0 ND 98.0 ND 0.98 ND 1.00 100.0 100.0 100.0 99.7 1.00 1.00 1.00 0.50 SM 93.0 83.3 96.7 96.6 0.91 0.92 1.00 2.00 AMK 100.0 100.0 100.0 100.0 1.0 1.0 4.00 4.00 CPM 100.0 100.0 95.0 100.0 0.95 1.0 5.00 2.00 CS 80.0 87.5 94.3 93.5 0.94 0.95 30.00 15.00 ETH 91.7 90.0 90.5 95.7 0.98 0.91 5.00 2.00 KM 90.0 100.0 100.0 99.0 0.97 0.99 5.00 2.00 LZ 100.0 100.0 100.0 100.0 ND* ND* 1.00 1.00 MOX ND 100.0 ND 100.0 ND ND* ND 0.50 OFX 100.0 100.0 100.0 100.0 1.00 1.00 2.00 1.00 PAS ND 100.0 ND 100.0 ND 1.00 ND 1.00 Morcillo N., Imperiale B., Di Giulio B. Evaluation of MGIT 960® and the colorimetric-based I-REMA/ method for tuberculosis drug-susceptibility testing". Int J Tuberc Lung Dis. 2010; 14: 1169- I-CMM 1175
  • 65. Características de las técnicas Técnica TAT Dific Aut Costo Uso (días) ZN 1-2 2 0 1 Microscopía y Dec+concentración cultivo Cultivos en 15-60 3 0 2 aislamiento medios sólidos MGIT 960 12-23 2 1 3 aislamiento ICROM 7-25 1 0 4 ID BCHID 45-65 4 0 2 ID GenoType® 15-20 2 0 5 ID Mycobacterium CM ZN: Ziehl-Neelses stain; TAT: includes time for administrative procedures; DIFF: Compelxity of the technique; IID: immunodifussion identification; BCHID: biochemical identification: genus or species identification
  • 66. Características de las técnicas Técnica TAT Dif Aut Costo* Uso (días) D-REMA 10-21 2 0 2 DST D-NRA 10-21 3 0 2 DST I-REMA 25-42 4 0 3 DST I-NRA 25-42 3 0 3 DST MGIT SIRE 25-35 1 1 4 DST D-GenoType MTBDR 3 2 0 5 DST plus I-GenoType MTBDR 17-22 2 0 5 DST plus Cost estimated on the bases on: Acuna-Villaorduna C, Vassall A, Henostroza G, Seas C, Guerra H1, Vasquez L, Morcillo, N, Saravia J, O’Brien R, Perkins MD, Cunningham J, Llanos-ZavalagaL, Gotuzzo E. Cost-Effectiveness Analysis of the Introduction of Rapid, Alternative Methods to Identify Multidrug-Resistant Tuberculosis in Middle-Income Countries. Clin Infectious Diseases 2008; 47:487–95
  • 67. Estrategias para combatir la XDR-TB Control básico de TB Capacidad para el manejo clínico de MDR/XDR-TB Incremento de la capacidad de los laboratorios para el diagnóstico de MDR/XDR-TB Implementación de las medidas prácticas del control de la infecciones Acceso a ARVs Gestión para la disponibilidad de recursos Incremento de la investigación epidemiológica Vigilancia epidemiológica para determinar la magnitud real del problema Desarrollo de pruebas rápidas de diagnóstico Desarrollo de nuevas drogas
  • 68. Flujograma propuesto en Buenos Aires Procedimiento de diagnóstico de MDR-TB Elemento: Planilla PPCTB notificación del Niveles: caso de MDR-TB NOTIFICACIÓN Regional Diagnóstico Responsable municipal de TB NOTIFICACIÓ Notificación Confirmado N Elementos: Hoja de derivación/planilla Centros hospitalarios notificación-ficha rosa Información Provincial CAPS referenciales local para (1er o 2do nivel de TDO complejidad) Centros hospitalarios de DERIVACIÓN DERIVACIÓN referencia local del PACIENTE del PACIENTE para TDO (2do nivel de complejidad) Nacional Clínica DERIVACIÓN del PACIENTE para TDO Laboratorio
  • 69.
  • 70.
  • 71. Graduate implementation 1952 • ZN, culture on solid media: LJ and SB; DST by PM in LJ 1992 • IS6110 RFLP; GelCompare® • MGIT manual version 1995 1996 •Spoligotyping, Rifoligotyping 1998 •LCx Abbott, molecular diagnosis of TB •CMM for first and second line drugs 1999 2000 • MGIT 960, EpiCenter Microsoft, DST: MGIT 960 SIRE; BioNumerics®; IID; 2011 • GenoType MDRTBplus, TBeXIST (SL- DST)
  • 72. Graduate implementation • 2500 RS analyzed 1980 • 250 TB cases 1 MDR/3 years 1995 • TB: 10% 1996 •3250 RS analyzed 1998 •375 TB cases 3 MDR/year •TB: 11.5% 1999 2000 • 5000 RS analyzed • 577 TB cases MDR: 6.5 cases/year 2011 • TB: 11.5% MDR: 3.5%; NTP: 6.3% PTP: 22.2%