Introducción a la microbiología

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  • El material de estudio estupendo y facil de entender felicitaciones a los editores Gracias
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Introducción a la microbiología

  1. 1. INTRODUCCIÓN ALA MICROBIOLOGÍATM YERKO BRAVO
  2. 2. CONCEPTO YDESARROLLO HISTÓRICO
  3. 3. ¿QUÉ ES LAMICROBIOLOGÍA?El estudio de los organismos tan pequeños que no puedenser observados a simple vista, es decir, microorganismosDentro de microorganismos se incluyen agentes acelulares(virus, viroides, priones), arqueobacterias, bacterias,protozoos, algas, y hongos
  4. 4. DESCUBRIMIENTO DELOS MICROORGANISMOSRobert Hooke (1635 - 1703) • Describe y construye el primer microscopio compuestoAntony van Leeuwenhoek (1632-1723) • Primera persona que observó y describió microorganismos de forma precisa
  5. 5. LA CONTROVERSIA DE LAGENERACIÓN ESPONTÁNEA • Los organismos vivos pueden desarrollarse de organismos no vivos o materia de descomposición ?Francesco Redi (1626-1697) • Demostró que era falsa en el caso de animales grandes • Mostró que los gusanos que aparecían sobre la carne en descomposición provenían de huevos de moscas
  6. 6. LA CONTROVERSIA DE LAGENERACIÓN ESPONTÁNEA John Needham (1713-1781) • Su experimento: Extracto de carne de cordero hervida sellada • resultado: el medio líquido se volvió turbio y contenía microorganismos Lazzaro Spallanzani (1729-1799) • Su experimento : Extracto en una botella sellado hervido • resultado: no crecían microorganismos
  7. 7. LOUIS PASTEUR (1822-1895)Su experimento • Introdujo solución nutritiva en un matraz • Curvó los cuellos de los matraces • Hirvió la solución • Dejó los matraces expuestos al aireresultado: nocrecieronmicroorganismos
  8. 8. GOLPE FINAL A LA TEORÍA DELA GENERACIÓN ESPONTÁNEA John Tyndall (1820-1893) • Demostró que el polvo transportaba microorganismos • Demostró que en ausencia de polvo los medios de cultivo permanecían estériles, incluso si estaban directamente expuestos al aire • También proporcionó evidencias de formas de bacterias excepcionalmente resistentes al calor
  9. 9. ¿QUÉ IMPULSA EL ESTUDIO DELA MICROBIOLOGÍA? – El papel de los microorganismos en las enfermedades – El desarrollo de técnicas para el estudio de los microorganismos patógenos – Estudios inmunológicos – La microbiología industrial y la ecología microbiana – La biotecnología 9
  10. 10. EL PAPEL DE LOSMICROORGANISMOS EN LASENFERMEDADES El reconocimiento no fue inmediato El descubrimiento de la relación microorganismo/enfermedad dependió del desarrollo de técnicas para el estudio de los microbios Una vez establecido, dio lugar al estudio de las defensas del huésped, la inmunología
  11. 11. RECONOCIMIENTO DE LARELACIÓN ENTRE LOSMICROORGANISMOS Y LASENFERMEDADESAgostini Bassi (1773-1856) • Mostró que la enfermedad de los gusanos de seda estaba causada por un hongo
  12. 12. MÁS EVIDENCIAS…M. J. Berkeley (ca. 1845) • Demostró que la roya de la patata de irlanda estaba causada por un hongoLouis Pasteur • Mostró que la enfermedad de la pebrina de los gusanos de seda estaba causada por un protozoo (Nosema bombycis)
  13. 13. OTRAS EVIDENCIAS…Joseph Lister (1827-1912) • Proporcionó evidencias indirectas de que los microorganismos eran los agentes causantes de enfermedades • Desarrollo un sistema de cirugía aséptica con el fin de evitar que los microorganismos infectasen las heridas (esterilizaba con calor, aplicaba fenol en vendajes, y en aerosoles) • Sus pacientes tenían menos enfermedades postoperatorias
  14. 14. LA PRUEBA DEFINITIVA ….Robert Koch (1843-1910) • Estableció la relación entre Bacillus anthracis y el carbunco (anthrax) • Usó criterios desarrollados por su profesor Jacob Henle (1809-1895) • Estos criterios se conocen actualmente como los postulados de Koch • Todavía se emplean actualmente para establecer la relación entre un microorganismos particular y una enfermedad
  15. 15. LOS POSTULADOS DE KOCHEl microorganismo causal debe estar presente en cada caso deenfermedad, pero ausente en los organismos sanos.Hay que aislar y desarrollar en cultivo puro al organismossospechoso.Al inocular el microorganismo aislado en un huésped sano, sedebe desarrollar la misma enfermedad.El mismo microorganismo debe aislarse de nuevo a partir delhuésped enfermo
  16. 16. DESARROLLO DE TÉCNICASPARA ESTUDIAR LOSPATÓGENOS MICROBIANOSEl trabajo de Robert Koch dió lugar aldescubrimiento y desarrollo de: • El agar • Las placas Petri • El caldo nutritivo y el agar nutritivo • Métodos para aislamiento de microorganismos
  17. 17. OTROS DESARROLLOS …Charles Chamberland (1851-1908) • Desarrollo el filtro bacteriano de porcelana • Empleado para aislar el primer virus estudiado (el virus del mosaico del tabaco)
  18. 18. ESTUDIOS INMUNOLÓGICOSEdward Jenner (ca. 1798) • empleo el procedimiento de vacunación para proteger a los individuos frente a la viruela (smallpox) NOTA: Esto fue anterior al reconocimiento de los microorganismos como agentes causantes de las enfermedades
  19. 19. OTROS DESARROLLOS…Pasteur y Roux • Observaron que incubando sus cultivos de cólera de gallina durante intervalos largos de tiempo entre cada transferencia se atenuaban las bacterias. Perdían su capacidad para generar la enfermedadPasteur y sus colaboradores • Desarrollaron vacunas contra la cólera del pollo, el carbunco (anthrax) y la rabia
  20. 20. MICROBIOLOGÍA INDUSTRIALY ECOLOGÍA MICROBIANALouis Pasteur • Demostró que la fermentación alcohólica y otras fermentaciones eran el resultado de la actividad microbiana • Desarrollo el proceso de pasteurización para conservar el vino durante su almacenamiento
  21. 21. MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL YECOLOGÍA MICROBIANASergei Winogradsky (1856-1953) y MartinusBeijerinck (1851-1931) • Estudiaron los microorganismos del suelo y descubrieron numerosos procesos metabólicos interesantes (ej., la fijación de nitrógeno) • Pionero en el empleo de medios enriquecidos y medios selectivos
  22. 22. ÁMBITO Y RELEVANCIADE LA MICROBIOLOGÍAImportancia de los microorganismos • Primeros seres vivos del planeta • Viven allí donde la vida es posible • Más numerosos que cualquier otro grupo de organismos y constituyen la mayor biomasa terrestre • El ecosistema global depende de su actividad • Influye la sociedad humana de muchas formas
  23. 23. LA MICROBIOLOGÍA ES UNACIENCIA BÁSICALos microbiólogos estudian la biologíade los microorganismos desde unpunto de vista básico • Ej. Morfología microbiana • Ej. Fisiología microbiana • Ej. Genética microbianaLa comprensión de losmicroorganismos ha mejorado lacomprensión de otros organismos.
  24. 24. LA MICROBIOLOGÍA TAMBIÉNES UNA CIENCIA APLICADA • Microbiología médica • Inmunología • Microbiología alimentaria y de productos lácteos • Microbiología y salud pública • Microbiología industrial • Microbiología agrícola
  25. 25. EL FUTURO DE LAMICROBIOLOGÍA:RETOS Y OPORTUNIDADES DE LOSFUTUROS MICROBIÓLOGOS• Nuevas enfermedades infecciosas• Mejora y desarrollo de nuevos procesos industriales• Diversidad y ecología microbiana • Menos del 1 % de los organismos terrestres han sido cultivados
  26. 26. MÁS RESTOS YOPORTUNIDADES…• Estudio de biofilms• Análisis de genomas• Los microorganismos como sistemas modelo• Valoración e implicaciones de nuevos procesos y tecnologías• La biología como sistema• Microbiología evolutiva
  27. 27. MICROBIOLOGÍACLÍNICAEL TECNÓLOGO MEDICO EN ACCIÓN
  28. 28. SANGRENunca debemos de encontrar bacterias de ningún tipo entorrente sanguíneo. Ya que las bacterias son eliminadasrápidamente.Bacteriemia: Denota la presencia de bacterias en la sangre.La presencia de bacterias en la sangre indicahabitualmente infección generalizada.
  29. 29. SANGRELa clásica infección en la sangre es conocidacomo septicemia.Septicemia: Es la entrada en la sangre de unmicroorganismos a partir de un foco séptico,que se multiplica y se propaga a distintostejidos del organismo para iniciar nuevasinfecciones.Sus síntomas son fiebre, y escalofríosseguidos de postración. Pero puede llevar ala muerte por intensa reducción en la presiónsanguínea y fallo en el funcionamiento deórganos (choque séptico).
  30. 30. SANGREMétodo de cultivo. • Se le conoce como hemocultivo al cultivo microbiológico de la sangre. • Extraer asépticamente 10 a 20 ml de sangre venosa. • Debe de utilizarse isodine para desinfectar el área. • Puede utilizarse anticoagulante. • Se debe de sembrar en un medio de cultivo rico en nutrientes como agar sangre complementado con tripticasa (Medio de cultivo para aeróbicos). • Además se debe de sembrar en el medio de cultivo de agar sangre con tioglicolato. (Medio de cultivo para anaerobios). • Se siembran por estría (cualitativamente) o por placa vertida (cuantitativamente). • Se incuban a 37 °C y se examinan a diario durante 5 días.
  31. 31. SANGREBACTERIAS RELACIONADAS CON EL DIAGNOSTICO CLINICO. • Pseudomonas aeruginosa. • Escherichia coli. • Klebsiella pneumoniae. • Staphilococcus aureus y Streptococcus beta hemolítico ( Infec. Piel) • Streptococcus pyogenes. • Haemofilus influenzae y Neisseria meningitidis (Meningitis). • Streptococcus alfa hemolitico (endocarditis). • Proteus (Complicaciones vías urinarias y quemaduras externas). • Salmonella tifi, Salmonella partifi y Shigella (Infec. Tracto digestivo).
  32. 32. SANGREFalsos positivos. • Estafilococcus albus y Estafilocuccus epidermidis dan un significado dudoso por lo que se requiere estudiar de nuevo la muestra o tener una considerable experiencia microbiológica y clínica para interpretar ya que algunas veces pueden causar infección la pared del corazón.
  33. 33. TRACTOGASTROINTESTINAL El tubo digestivo contiene abundante flora bacteriana normal que producen una función beneficiosa. El 99.9% son microorganismos anaeróbicos. Pero existen microorganismos (protozoos, bacterias y virus que pueden causar cuadros gastrointestinales caracterizados por diarrea acompañados en ocasiones por vómitos, dolor abdominal y fiebre.
  34. 34. TRACTOGASTROINTESTINALSe le conoce a la inflamación, infección o irritacióndel estomago o intestinos causada por bacteriascomo gastroenteritis bacteriana.La manera de aislar e identificar elmicroorganismos causante es través de uncoprocultivo.
  35. 35. TRACTOGASTROINTESTINALMétodo de cultivo. • Las heces fecales se recogen en un frasco estéril, con boca ancha y rosca. Pero pueden recolectarse mediante raspado anal con un hisopo. • Las heces fecales deben de protegerse contra la desecación. • Deben de analizarse de inmediato, si no fuera posible debe de mantenerse un medio de conservación y transporte para mantener vivos a los microorganismos. • Las heces fecales deben de mantenerse a 4°C. • Los medios de cultivo que se utilizaran son agar sangre, agar Mc Conkey, Agar S-S, Agar EMB, Manitol, Agar Hektoen, entre otros.
  36. 36. TRACTOGASTROINTESTINALMétodo de cultivo. • La siembra se realiza a través de estría en todos los medios de cultivo. • El crecimiento debe de llevarse a cabo por 24 horas a 37°C.
  37. 37. TRACTOGASTROINTESTINALBACTERIAS RELACIONADAS CON EL DIAGNOSTICO CLINICO. • Bacterias que producen diarrea sanguinolenta. • Salmonella . • Shigella. • Yersinia enterocolitica. • Yersinia psedotuberculosis. • Campylobacter jenuni. • Escherichia coli. • Bacterias que lesionan el tubo digestivo por la acción de toxinas. • Clostridium difficile • Clostridium perfringens. • Vibrio cholerae. • Staphylococcus aureos. • Escherichia coli.
  38. 38. VIAS RESPIRATORIAS.  El aparato respiratorio inferior es normalmente estéril.  Lo cual lleva a concluir que cualquier especie bacteriana se considera como infección en cualquier numero presente.
  39. 39. VIAS RESPIRATORIAS Para el análisis del aparato respiratorio inferior se toma como muestra el esputo. El esputo es la secreción que se produce en los pulmones y bronquios que puede ser expulsada por tos profunda. Las principales enfermedades que se pueden analizar son neumonía y tuberculosis.
  40. 40. VIAS RESPIRATORIAS. Método de cultivo. • Antes de la recolección de la muestra es necesario enjuagar la boca con solución salina o agua templada para reducir la contaminación con saliva. • En un recipiente estéril recoger el esputo tras una expectoración profunda, si es posible por la mañana. • Realizar análisis inmediatamente o refrigerar hasta su envió. • No debe de exponerse a temperatura ambiente por que puede provocar la perdida de algunos microorganismos causantes de las enfermedades.
  41. 41. VIAS RESPIRATORIAS.Método de cultivo. • Con el esputo fresco realizar los frotis necesarios para tinción Gram y Tinción Ziehl-Neelsen. • Sembrar por estría medios de cultivo como agar sangre, agar chocolate, agar Mc Conkey y agar manitol. • El tiempo de incubación es de 24 horas a 37 °C. • Si hay un crecimiento escaso resembrar todos medio de cultivo a excepción del agar Mc Conkey. Por un tiempo adicional de 24 horas a 37°C.
  42. 42. VIAS RESPIRATORIAS. BACTERIAS RELACIONADAS CON EL DIAGNOSTICO CLINICO. • Klebsiella pneumoniae. • Staphylococcus aureus. • Streptococcus pneumoniae. • Streptococcus pyogenes. • Haemofilus influenzae. • Haemofilus parainfluenzae • Mycobacterium tuberculosis.
  43. 43. VIAS URINARIAS Normalmente la orina de la vejiga es estéril. Así que cuando se sospecha de una infección bacteriana es necesario el cultivo que se le conoce como urocultivo. El urocultivo tiene la finalidad de detectar y cuantificar los microorganismos causante de la infección. Cuando hay presencia de bacterias en la orina se le denomina bacteriuria.
  44. 44. VIAS URINARIAS Se debe tener mucho cuidado en la toma de muestra de orina ya que puede ser contaminada fácilmente. En los hombres la orina atraviesa (uretra, genitales y periné) que poseen una flora bacteriana normal. Aquí predominan los cocos Gram negativos. En las mujeres las vías urinarias tienen contacto con la zona vaginal en la que predominan Lactobacilos y estreptococos. Por tal razón se utiliza el método de recolección llamado porción media.
  45. 45. VIAS URINARIAS Método de cultivo. • Debe de recolectarse la porción media de la primera micción del día. • Recolectarse en frascos estériles con tapón de rosca. • La orina debe de procesarse lo mas rápidamente posible ya que es un buen medio de cultivo para la proliferación. • Si no fuera posible mantenerse a 4°C nunca mas de un tiempo de 18 a 24 horas de almacenaje.
  46. 46. VIAS URINARIASEl urocultivo incluye tres fases. • 1. Aislamiento e identificación de microorganismos. • 2. Cuenta viable (recuento de bacterias por ml de orina). • 3. Antibiograma.• Aislamiento e identificación de microorganismos. • Se toman 10 ml de orina y se centrifugan. • Desechar el sobrenadante y colocar unas gotas de la orina residual en un portaobjetos y realizar tinción Gram y/o Ziehl- Nieelsen. • Observar al microscopio y además de observar tinciones se busca identificar leucocitos, eritrocitos, parásitos, etc.
  47. 47. VIAS URINARIAS • Aislamiento e identificación de microorganismos. • Sembrar por estría en agar EMB para el aislamiento de bacterias. • Incubar por 24 horas a 37 °C. • Si no se presenta crecimiento dejar por 24 horas mas. • Si existiera crecimiento se prepara frotis bacterianos para tinción gram. • Se preparan pruebas bioquímicas para identificación ( Indol,oxidasa,catalasa, urea).
  48. 48. VIAS URINARIAS Cuenta viable. o Se utiliza una asa calibrada de 4 mm de diámetro por 0.01 ml de capacidad, con ella se toma la muestra de orina y se realizan estrías por toda la caja petri que contenga agar sangre. o Se incuba a 37 °C durante 24 horas (en caso de ser necesario otras 24 horas). o Cuando se presente el crecimiento bacteriano se cuentan las colonias que se formaron y se realizan los cálculos necesarios para calcular cuantas colonias hay en un mi litro de orina. o Se considera como bacteriuria significativa si el resultado es mayor a 100 000 UFC por ml de orina. o Si el resultado es de 10 000 a 100 000 UFC se tendría que repetir el urocultivo para comprobar.
  49. 49. VIAS URINARIASAntibiograma. • Es un método de difusión en agar en la que se realiza un prueba de sensibilidad de las bacterias hacia algunos antibióticos. • Para realizarse se deben de hacer estrías por toda la caja petri que contenga agar mueller-hinton. Y agregar discos de papel filtro que absorbieron el antibiótico. • Se debe de cultivar a 37°C entre 18 a 24 horas. • Solo es adecuado para bacterias patógenas de rápido crecimiento.
  50. 50. VIAS URINARIASBACTERIAS RELACIONADAS CON EL DIAGNOSTICOCLINICO. • Escherichia coli. • Proteus. • Psedomonas. • Klebsiella. • Staphylococcus.
  51. 51. DIAGNÓSTICOLas bases del diagnóstico microbiológico corresponden a:- Sospecha- Toma de muestra- Diagnostico Presuntivo- Cultivo- Identificación- Estudio de sensibilidad
  52. 52. DIAGNÓSTICOPosterior a la toma de muestra en un medio de cultivo estéril,la clave es el cultivo microbiológico.Para este cultivo se necesitan varios materiales con el fin deobtener medios de cultivos.
  53. 53. MEDIOS DE CULTIVO • Aporte de nutrientes • pH • Necesisad de gases • Aerobias • Anaerobias • Anaerobias facultativas • Microaerófilas • Agregando un componente reductor • Quitando el oxígeno y remplazando N2, CO2 • Mediante reacción química • Suministro de luz • Control de la temperatura - Psicrófilos - Mesófilos – Termófilos • Otros requerimientos
  54. 54. MACRONUTRIENTES EN LANATURALEZA Y EN LOS MEDIOS DECULTIVOElemento Forma en el ambiente Forma en medios de cultivo Glucosa, malato, acetato piruvato,Carbono Dióxido de carbono compuestos orgánicos cientos de otros, extracto de levadura, peptonas, etc.Hidrógeno Agua, compuestos orgánicos Agua, compuestos orgánicosOxígeno Agua, oxígeno, compuestos orgánicos Agua, oxígeno, compuestos orgánicos Inorgánicos: Cloruro o sulfato de amonio, nitrato de potasio, nitrógeno Amoníaco, nitrato, nitrógeno, compuestosNitrógeno Orgánicos: aminoácidos, bases orgánicos nitrogenados nitrogenadas de nucleótidos, otros compuestos orgánicos nitrogenados Fosfato mono y dipotásico, fosfatoFósforo Fosfato mono y disódico Acido sulfhídrico, sulfatos, compuestosAzufre Sulfato, tiosulfato o sulfuro de sodio orgánicos azufrados, sulfuros metálicosPotasio Sales de potasio Cloruro o fosfatos de potasioMagnesio Sales de magnesio Cloruro o sulfato de magnesioSodio Cloruro u otras sales de sodio Cloruro de sodioCalcio Sulfato u otras sales de calcio Cloruro de calcio
  55. 55. MICRONUTRIENTES NECESARIOSPARA LOS MICROORGANISMOS Elemento Función celular Cobalto Vitamina B12, Transcarboxilasa de bacterias del ácido propiónico Proteínas implicadas en la respiración (citocromo c oxidasa) o en la Cobre fotosíntesis (plastocianina), algunas superóxido dismutasas Manganeso Activador de muchas enzimas, presente en superóxido dismutasas Presente en enzimas que tienen flavina, nitrogenasa, nitrato Molibdeno reductasa, sulfito oxidasa, algunas formiato deshidrogenasas La mayoría de las hidrogenasas, coenzima F430 de los Níquel metanógenos, ureasa Selenio Formiato deshidrogenasa, algunas hidrogenasas Algunas formiato deshidrogenasas, oxotransferasas de los Tungsteno hipertermófilos (Pyrococcus furiosus) Vanadio Vanadio nitrogenasa, bromo peroxidasa Anhidrasa carbónica, alcohol deshidrogenasa, RNA y DNA Zinc polimerasas, proteínas que unen DNA
  56. 56. TIPOS DE MEDIOS DECULTIVO 1 Estado a ) Líquidos, origen animal, vegetal, sintéticos b ) Sólidos: a base de agar. a base de albúmina, gelatina huevo suero a base de vegetales: papa, maiz etc. c ) Semi sólidos 2 COMPOSICIÓN a ) Medios sintéticos: líquido de Ouchinsky, Pateur b ) Medios complejos c ) Medios de enriquecimiento d ) Medios selectivos e ) Medios diferenciales f ) Medios de mantenimiento
  57. 57. CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO Según la diversidad de microorganismos que puedan desarrollar en él Contiene componentes que permiten el crecimiento de la mayoríaGenerales de los microorganismos Contiene algunos componentes que favorecen elDe enriquecimiento crecimiento de algunos microorganismos frente a otros Los componentes han sido añadidos selectivamente para inhibir elSelectivos crecimiento de ciertos microorganismos y no de otros Es aquel al que se ha añadido un componente (generalmente unDiferenciales colorante) que permite diferenciar entre distintas reacciones químicas que se producen durante el crecimiento
  58. 58. ALGUNOS MEDIOS DE CULTIVO SONSELECTIVOS Y DIFERENCIALES ALMISMO TIEMPOEl agar eosina-azul de metileno: se utiliza para elaislamiento de enterobacterias Gram negativas.Azul de metileno inhibe a las bacterias Gram positivas.La eosina responde a cambios de pH, virando de incoloro a negro en medio ácido.Contiene lactosa y sacarosa pero no glucosa.
  59. 59. Las bacterias fermentadoras de lactosa (entéricas como E. coli, Klebsiella,Enterobacter), acidifican el medio y dan colonias negras con brillo verdoso(metálico).Las bacterias no fermentadoras de lactosa (Salmonella, Shigella yPseudomonas) dan colonias translúcidas o rosadas.
  60. 60. SIEMBRA DEMICROORGANISMOSAislamiento de microorganismos Aislamiento de un Habitat natural microorganismos Elegir el habitat adecuado para aislarlo Enriquecimiento Como forma parte de una comunidad, es necesario eliminar los contaminantes Cultivo puro (axénico) Se deben utilizar medios de cultivo y condiciones de incubación selectivos
  61. 61. SIEMBRA DEMICROORGANISMOSSIEMBRA: * Sembrar es inocular microorganismos* Mediosde cultivo adecuados.* Debe tener una sola especie.* Conocer los requerimientos nutricionales.MUESTRA* La muestra debe ser representativa* Tomada de un lugar adecuado.* Cantidad suficiente.* Condiciones de esterilidadPARA QUE SE SIEMBRA* Aislamiento de gérmenes a partir de un producto natural* Conservar cepas.* Identificación de microorganismos* Clasificación y tipificación de microorganismos* Obtención de toxinas.* Elaboración de vacunas y antisueros
  62. 62. SIEMBRA POR DISPERSION(AISLAMIENTO)
  63. 63. SIEMBRA POR DISPERSION(AISLAMIENTO)
  64. 64. COLONIASForma Puntiforme Circular Filamentosa Irregular Rizoide LanceoladaElevaciónChata Elevada Convexa Cúpula Umbonada UmbilicadaMargen Entero Ondulado Lobado Ondeado Filamentoso
  65. 65. OTRASCARACTERISTICASSUPERFICIE: Lisa, rugosa, mate, brillante, húmeda, secaCONSISTENCIA: Cremosa, pastosa, viscosa, compacta,membranosa.OPACIDAD: transparente, opaca.COLOR: Incoloro, blanca, gris, amarilla,rosada, verde, azulesnegras.TAMAÑO: Desde puntiforme a unos centímetros, se mide enmilimetros.HEMOLISIS: Ausente, beta hemólisis, alfa hemólisis
  66. 66. HEMOLISIS EN AGAR SANGRE
  67. 67. PRUEBAS BIOQUIMICAS • OXIDASA • CATALASA • COAGULASA • MIO • TSI • LIA • CITRATO • INDOL • ETC
  68. 68. API
  69. 69. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIAMatraz de EnlermeyerEl matraz o frasco de Enlermeyer es un frascotransparente de forma cónica con una abertura en elextremo angosto, generalmente prolongado con uncuello cilíndrico, suele incluir algunas marcas.Por su forma es útil para realizar mezclas poragitación y para la evaporación controlada delíquidos; además, su abertura estrecha permite lautilización de tapones. El matraz de Enlermeyer nose suele utilizar para la medición de líquidos ya quesus medidas son imprecisas.Fue diseñado en el año 1861 por el químico alemánEmil Enlermeyer
  70. 70. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIAProbetaLa probeta o cilindro graduable es un instrumento volumétrico,que permite medir volúmenes superiores y más rápidamenteque las pipetas, aunque con menor precisión.Está formado por un tubo generalmente transparente de unoscentímetros de diámetro, y tiene una graduación (una serie demarcas grabadas) desde 0 ml (hasta el máximo de la probeta)indicando distintos volúmenes. En la parte inferior está cerradoy posee una base que sirve de apoyo, mientras que la superiorestá abierta (permite introducir el líquido a medir) y suele tenerun pico (permite verter el líquido medido). Generalmente midenvolúmenes de 25 ó 50 ml, pero existen probetas de distintostamaños; incluso algunas que pueden medir un volumen hastade 2000 ml.Puede estar constituido de vidrio (lo más común) o de plástico.En este último caso puede ser menos preciso; pero poseeciertas ventajas, por ejemplo, es más difícil romperla, y no esatacada por el ácido fluorhídrico.
  71. 71. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIAVaso de precipitadosUn vaso de precipitados es un simple contenedor de líquidos,usado muy comúnmente en el laboratorio. Son cilíndricos conun fondo plano; se les encuentra de varias capacidades,desde 1 ml. hasta de varios litros. Normalmente son de vidrio(Pyrex en su mayoría) o de plástico. Aquéllos cuyo objetivo escontener ácidos o químicos corrosivos tienen componentesde teflón u otros materiales resistentes a la corrosión. Suelenestar graduados, pero esta graduación es inexacta por lamisma naturaleza del artefacto; su forma regular facilita quepequeñas variaciones en la temperatura o incluso en elvertido pasen desapercibidas en la graduación.Debido a que su graduación es inexacta, es comúnmenteusado para transportar líquidos hacia otro recipiente como auna probeta o a un tubo de ensayo por un embudo. Sonresistentes a los cambios bruscos de temperatura. Tienemúltiples usos en el laboratorio: calentar, disolver, etc.
  72. 72. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIAPipetaLa pipeta es un instrumento volumétrico de laboratorio que permitemedir alícuotas de líquido con bastante precisión. Suelen ser de vidrio.Está formado por un tubo hueco transparente que termina en una desus puntas de forma cónica, y tiene una graduación (una serie demarcas grabadas) indicando distintos volúmenes.• Metodología de uso• Se introduce la pipeta (con la punta cónica para abajo) en elrecipiente del cual se desea extraer un volumen determinado demuestra.• Se disminuye leve y lentamente la presión ejercida por el dedo, hastaque el líquido comience a descender. Se vuelve a presionar cuando elmenisco del líquido llegó a 0. Si el líquido descendió demasiado, secomienza nuevamente.• Se traslada la pipeta al recipiente destino.• Se disminuye nuevamente la presión del dedo hasta llegar a lacantidad de mililitros necesarios.
  73. 73. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIATubos de ensayoConsiste en un pequeño tubo de vidrio con una punta abierta (quepuede poseer una tapa) y la otra cerrada y redondeada, que seutiliza en los laboratorios para contener pequeñas muestraslíquidas. Aunque pueden tener otras fases. Como realizarreacciones en pequeña escala, etc.Metodología de usoPara calentar durante intervalos cortos a llama directa puedesostenerse el tubo con la mano mediante su parte superior. Si sedesea exponerlo más intensamente al calor es necesaria lautilización de pinzas. En ambos casos debe tenerse la precauciónde no apuntar con la boca del tubo hacia alguna persona (paraevitar proyecciones de la muestra). Los tubos de ensayo no hande llenarse más allá del primer tercio.
  74. 74. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIAPlacas petriLa placa de Petri es un recipiente redondo, de cristal o plástico,con una cubierta de la misma forma que la placa, pero algo másgrande de diámetro, para que se pueda colocar encima y cerrarel recipiente.Técnicas de usoSe utiliza en los laboratorios principalmente para el cultivo debacterias y otros microorganismos, soliéndose cubrir el fondo condistintos medios de cultivo (por ejemplo agar) según elmicroorganismo que se quiera cultivar.Si se quieren observar colonias, durante el tiempo de incubacióndel microorganismo sembrado en la placa esta se mantiene bocaabajo, es decir, apoyada sobre la tapa. De este modo, el agarqueda en la parte superior y al condensarse el vapor de agua quegeneran los microorganismos por su metabolismo, cae sobre latapa, evitando que los microorganismos se diluyan,manteniéndose fijos al sustrato y formando colonias.
  75. 75. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIABalanza digitalLas balanzas digitales son instrumentos de pesaje defuncionamiento no automático que utilizan la acción dela gravedad para determinación de la masa. Secompone de un único receptor de carga (plato) dondese deposita el objeto para medir. Una célula de cargade carga mide la masa a partir de la fuerza (peso)ejercida por el cuerpo sobre el receptor de carga. Elresultado de esa medición (indicación) apareceráreflejado en un dispositivo indicador; con un grado deexactitud 0.0001g por lo cual nos arrojan mejoresresultados.La balanza digital suele ser un equipo de laboratorio yresultan equipos imprescindibles en operacionesquímicas, analíticas y de formulación en industrias y enlaboratorios de calidad
  76. 76. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIABaño María.El baño María o baño de María es un métodoempleado en las industrias (farmacéutica, cosmética,de alimentos y conservas), en laboratorio de químicay en la cocina, para conferir temperatura uniforme auna sustancia líquida o sólida o para calentarlalentamente, sumergiendo el recipiente que lacontiene en otro mayor con agua que se lleva a oestá en ebullición.El concepto de baño maría implica el calentamientoindirecto, por convección térmica del medio agua.Para calentar al baño maría hay que introducir unrecipiente pequeño dentro de otro más grande llenode agua y llevarlo al fuego. De este modo, lo que secalienta en primer lugar es el agua contenida en elrecipiente de mayor tamaño y ésta es la que poco apoco va calentando el contenido del recipientemenor, de un modo suave y constante.
  77. 77. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIAIncubadoraLa Incubadora es un equipo con funcionesespecíficas que permite controlar, según su diseño,temperatura y humedad para crear un ambienteadecuado apto para la reproducción y desarrollo deorganismos vivos. Algunas de las aplicaciones mascomunes son los cultivos microbiológicos,micológicos y virales, entre otros.Las incubadoras de laboratorio pueden serdiseñadas para aplicaciones donde se puedecontrolar parámetros como temperatura, demandabiológica de oxigeno (DBO) o condicionesatmosféricas, estos parámetros van acorde a lasaplicaciones que se pretendan realizar en ellaboratorio, estas incubadoras suministran CO2(Bióxido de carbono).
  78. 78. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIALaminas portaobjetosIn-vitro diagnostica.El día 7 de diciembre de 2003 la directiva europea98/79/EG ha entrado en vigor; yson fabricadas de vidrio sódico-cálcico de la clase hidrolítica3 de acuerdo con la norma ISO 8037-1.Las láminas porta-objeto son láminas de vidrio de cerca de1 mm. de espesor sobre las cuales los objetos pueden serobservados microscópicamente bajo una cubierta de vidrio.Hay también especiales para microscopio con unaindentación en el medio, lo cual facilita el examen delíquidos. Dentro de los diagnósticos nativos, la secreción aser examinada es extraída mediante un aplicador dealgodón y luego mezclada con una solución salinafisiológica sobre una lamina portaobjetos de microscopio.Se le añade una cubierta de vidrio y luego la secreciónpuede ser evaluada bajo el microscopio.
  79. 79. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIAAutoclaveUn autoclave de laboratorio es un dispositivo que sirve para esterilizarmaterial de laboratorio, utilizando vapor de agua a alta presión ytemperatura, evitando con las altas presiones que el agua llegue aebullir a pesar de su alta temperatura. El fundamento del autoclave esque coagula las proteínas de los microorganismos debido a la presión ytemperatura, aunque recientemente se ha llegado a saber de algunasformas acelulares, tal como los priones, que pueden soportar lastemperaturas de autoclave.Las autoclaves funcionan permitiendo la entrada o generación de vaporde agua pero restringiendo su salida, hasta obtener una presión internade 103 kPa, lo cual provoca que el vapor alcance una temperatura de121 grados centígrados. Un tiempo típico de esterilización a estatemperatura y presión es de 15-20 minutos.Ciertos materiales no pueden ser esterilizados en autoclave, como elpapel y muchos plásticos (a excepción del polipropileno).Este producto es de uso general en laboratorio y no es un productosanitario por tanto no lleva marcado CE según la directiva 93/42/EEC nile es de aplicación esta legislación. Cuando el autoclave esta destinadoa la esterilización de productos sanitarios tiene unos requisitosespeciales.
  80. 80. EQUIPO NECESARIO PARA ELTRABAJO EN MICROBIOLOGIAEsterilizadorEspecialmente para la destrucción de los microorganismos, sean cuálessean sus características, siendo lo mismo que sean patógenos o no, queestén sobre el material o dentro de el mediante el calor seco.Se trabaja a una temperatura de 180° C por un tiempo de 2 horas condeterminados materiales; ya sean de vidrio, madera o metal.
  81. 81. GRACIAS…

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