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トコジラミの検出
つくば遺伝子研究所
空気中の浮遊物でトコジラミを検出
つくば遺伝子研究所 http://www.tsukuba-genetech.com/
トコジラミについて
• トコジラミ(床虱、学名:Cimex lectularius、英語: Bed bug)
とは、吸血性の寄生昆虫である。「シラミ」と命名されている
が、シラミ目ではなく、カメムシ目トコジラミ科の昆虫で捕食
性のカメムシであるマキバサシガメ科などに近縁である。トコ
ジラミ科の昆虫は全て吸血性であるが、そのほとんどは主に鳥
類やコウモリ類を宿主とする[1]。一方で本種および近縁種のタ
イワントコジラミ(台湾床虱。学名:Cimex hemipterus。別
名、ネッタイトコジラミ、ネッタイナンキンムシ、熱帯南京
虫)のみが、ヒトを主な吸血源とする。
Cimex lectularius/Cimex hemipterusのミトコンドリアCox1に着目
Cimex lectularius
登録されている配列は2種類
Cimex hemipterus
登録されている配列は52種類
これらの配列を基に、それぞれの種を区別し、同種内では、全ての亜
種を検出するプライマーセットを作成
中国/米国 米国
インドネシア
トコジラミ
サンプル
PCR条件
Primer:
Cime-HF22/Cime-HR22(熱帯トコジラミ)
Cime-LF25/Cime-LR25(日本トコジラミ)
Template
Dw
10倍希釈To (x10), Yo (x10), Ne (x10), Am (x10), Ma (x10), Ku (x100)
95C 9min (1cycle), 95C 20sec 66C 20sec 72C 30sec (35cycles), 72C 5min (1cycle)
2.5%アガロースゲル
M Dw To Yo Ne Am Ma Ku M
500bp
M:マーカー
Dw: 水
To: 東京の一般住宅で採取したトコジラミのDNA
Yo: 吉村先生の実験室トコジラミのDNA
Ne: 熱帯トコジラミのDNA
Am: アメリカで採取したトコジラミのDNA
Ma: マルカメムシのDNA
Ku: クサギカメムシのDNA
M Dw To Yo Ne Am Ma Ku M
Cime-HF22/Cime-HR22 Cime-LF25/Cime-LR25
124bp 156bp
考察1
• トコジラミ用プライマーと熱帯トコジラミ用プイラマーは、それぞれを区
別することが出来る。
• トコジラミプイラマー群は、マルカメムシ、クサギカメムシのDNAとは反
応しない。
• 米国で採取されたトコジラミは1匹で、DNAが必要量回収せれているかわ
からない。一つの可能性は、異なった配列を持っている可能性もある。と
りあえず、出来ることとしては、PCRサイクル数を50にまで増やし検出を
試みることにする。
PCR条件
Primer:
Cime-HF22/Cime-HR22(熱帯トコジラミ)
Cime-LF25/Cime-LR25(日本トコジラミ)
Template
Dw
10倍希釈To (x10), Yo (x10), Ne (x10), Am (x10), Ma (x10), Ku (x100)
95C 9min (1cycle), 95C 20sec 66C 20sec 72C 30sec (50cycles), 72C 5min (1cycle)
2.5%アガロースゲル
M Ne Dw To Yo Am Ma Ku M
500bp
M:マーカー
Dw: 水
To: 東京の一般住宅宅で回収したトコジラミのDNA
Yo: 吉村先生の実験室トコジラミのDNA
Ne: 熱帯トコジラミのDNA
Am: アメリカトコジラミのDNA
Ma: マルカメムシのDNA
Ku: クサギカメムシのDNA
M Dw Ne Am Ma Ku M To Yo
Cime-HF22/Cime-HR22 Cime-LF25/Cime-LR25
124bp 156bp
考察2(最終)
• PCRサイクル数を50にして行ったが、35サイクルと結果は変わらなかっ
た。このことから言えることは、確実に、①トコジラミ用プライマーと熱
帯トコジラミ用プイラマーは、それぞれを区別することが出来る。②トコ
ジラミプイラマー群は、マルカメムシ、クサギカメムシのDNAとは反応
しない。
• トコジラミプライマーセットは、中国/米国でのトコジラミの配列を基に、
作成しているので、米国で採取したトコジラミを検出できないとは考えら
れない。その結果、サンプルの損壊等により、DNAが回収出来なかった
と判断した。
サンプル内の
トコジラミ(日
本)ゲノム数を
数値化
サンプル内の
熱帯トコジラ
ミのゲノム数
を数値化
Aホテル
経過月 トコジラミの検出ゲノム数
0 10
1 15
2 10
3 100
4 300
5 0
駆除

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