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EVOLUCIÓ DE LA CONCENTRACIÓ DE MICELI DE TUBER
MELANOSPORUM AL SÒLAL LLARG DE L´ANY
I
EVALUACIÓ DE LA BIODIVERSITAT FUNGICA EN ARBRES PRODUCTIUS
I NO PRODUCTIUS
Marcos Morcillo1, Javier Parladé2, Joan Pera2, Mónica Sanchez1, Xavier Vilanova1
1 MICOLOGIA FORESTAL & APLICADA. Cami Del Fou, s/n 08459 Sant Antoni De
Vilamajor. (Barcelona) SPAIN
2 IRTA. Proteccio Vegetal Sostenible Ctra. de Cabrils, Km 2, 08348 Cabrils
(Barcelona) SPAIN
marcosmorcillo@micofora.com xavier.parlade@irta.cat
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Objectius
1) evaluar les dinamiques estacionals del miceli de Tuber melanosporum en
plantatió
2) desenvolupar i validar un sistema per reinocular tòfona negra en plantacions
preproductives per afegir el sexe complementari
3) Determinar la biodiversitat d´altres fongs en tofoneres d´arbres productius i
no productius i analitzar com aquesta es veu afectada quan introduim més
espores
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Camps d´assaig
2 plantacions amb sòls francs
2013, 2014
Granollers: 10 anys Q. ilex, sense reg
-  Concentració de miceli al llarg de l´any
-  Metagenomica – biodiversitat fúngica
Batea: 4 anys Q. ilex, reg gota a gota
-  Concentració de miceli al llarg de l´any
-  Metagenomica – biodiversitat fúngica
-  Pous-reinoculacions esporals
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Quantificació biomassa miceliar al sòl (qPCR)
kit Power Soil (MoBio) 0,25 g. Soil.
sondes Taqman-MGB, for T. melanosporum,
Standard curves with known mycelium quantities for each trial site.
Parladé et al. 2013. Mycorrhiza 23:99–106.
Distance to tree
(m)
Concentration of
mycelum mg/g *
0,2 8,090
1,5 0,008
n=6 per cada tractament
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Evolució concentració
miceli tòfona al llarg de l´any
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Evaluació de la diversitat fúngica
Plataformes Metagenomiques
n=6 per tractament + control.
Mostres barrejades per un sol anàlisi
(no replicat)
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Diversitat fúngica
plantació Q. ilex de 10 anys x T. Melanosporum
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Diversitat fúngica
plantació Q. ilex de 10 anys x T. Melanosporum
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Substrats especials per truficultura
Millorar
contingut
orgànic
Millorar
textura y
forma de la
tòfona
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Pous amb substrat
CONTRES
PROS
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Millors collites
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Es cullen tòfones
inmadures
Reducció pH
Introducció altres
tòfones o plagues
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Com s´apliquen aquests substrats?
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Sovint no podem mecanitzar o
no podem fer els pous a finals de campanya…
Vam voler analitzar:
•  Efecte dosis
•  Efecte moment de reinocular
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qPCR després reinoculations
Concentració miceli de T. melanosporum al juny.
Control vs. Inoculacions en camp(5g/tree) a l´abril.
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Control vs. Inoculacions en camp al Juny
Dosi 1, 2 i 3 corresponen a 9, 5 i 2 grams de tòfona/arbre
No hi ha diferencies significatives
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METAGENOMICA
biodiversitat després de les reinoculacions
Plantació 4 anys no productiva
2 mesos després pous
4 mesos després pous
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Conclusions
•  Reg gota a gota sembla no afavorir expansió miceli al sòl. 1000 vegades menys fora la bossa de humitat!
•  Hi ha diferencies estacionals en la concentració de miceli de tòfona al sòl. Dinàmica depenent de reg.
•  Significativament més miceli i sequencies als arbres productius.
•  Idem per Scleroderma. Podría ser un fong amb efectes positius?
•  Fer pous a l´abril augmenta les sequencies de Tuber sp. i la concentració de miceli dos mesos després.
Quan inoculem al juny amb 5grams/arbre arribem a la mateixa quantitat de sequencies, però no a menor
dosi. No tindria sentit treballar a dosis molt altes d´espores.
No obstant les inoculacions a l´abril foren les recomenables per no trepitjar amb tractors ni afectar el miceli
actiu al juny.
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Poden aquestes corves ser utilitzades com a referencia?
Future
Els valors absoluts que ens dónen les PCR quantitatives són dificilment comparables entre
zones geogràfiques distants o quan mostrejades en diferents moments. Però és una molt
bona eina per comparar tractaments de una mateixa plantació quan es mostrejen alhora.
Aquests resultats tenen aplicació directe en truficultura:
-  Traçabilitat del miceli de tòfona al sòl
-  Mètodes per incrementar la collita
-  Evaluar els efectes dels tractaments en les comunitats microbianes beneficioses per la
tofonera.
Els resultats metagenomics són quantitatius, ens permetrien detectar especies fúngiques o
bacterianes associades (positiva o negativament) a la producció de tòfones.
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