Clinical management of men with nonobstructive azoospermia - Sperm Retrieval ...
Curso Azoospermia Extração Espermatozoides
1. Curso de Pós-graduação Lato Sensu em Reprodução Humana Assistida
Associação Instituto Sapientiae
São Paulo, 2014
Dr. Sandro C. Esteves
Diretor, ANDROFERT
Centro de Referência para Reprodução Masculina
Campinas, SP
2. http://www.androfert.com.br/aulas
Pdf slides
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Artigos de Referência
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3. Conteúdo e Objetivos
Parte 1: Aula Teórica
• Entender of conceito de azoospermia,
causas e tratamentos
• Conhecer as técnicas de extração de
espermatozoides para homens
azoospérmicos
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4. Conteúdo e Objetivos
Parte 2: Videos
PESA: aspiração percutânea de
espermatozoides do epididimo
MESA: aspiração microcirúrgica de sptz do
epidídimo
TESA: aspiração percutânea de sptz do
epididimo
Micro-TESE: microdissecção testicular
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5. ESPERMATOGÊNESE
45 Kg
64 cc
>1 billhão/
mL
270 Kg
14 cc
5 M/mL
80 Kg
20 cc
64 M/mL
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6. Homens Idade Reprodutiva
2.5%
50%
97.5%
4 M/mL
64 M/mL
237 M/mL
Azoospermia:
Ausência completa de Sptz no ejaculado
1-3% população masculina
10-15% homens inférteis
Cooper et al. Hum Reprod Update 2009; Esteves et al, Clinics 2011
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7. Análise Seminal na Azoospermia
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computer, and then open the file again. If the red x still appears, you may have to delete the image and then insert it again.
Diagnosis
-‐
Semen
Analysis
(x2)
Centrifugação
3,000g
por
15
minutos
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Descarte
do
sobrenadante
e
exame
microscópico
do
sedimento
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8. Azoospermia: Conceitos
• Ausência completa
espermatozoides no ejaculado
após a centrifugação
• Diagnóstico laboratorial
Esteves et al. An update on the initial assessment of the infertile male.
CLINICS 2011;66:1-10.
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9. Tipos de
Azoospermia
Obstrutiva
• Produção espermática normal
• Bloqueio mecânico no trato
reprodutivo
• Epidídimo
• Canal Deferente
• Duto Ejaculatório
Não-obstrutiva
• Espermatogênese mínima ou
ausente
• Pré-testicular
• Testicular
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10. Azoospermia Obstrutiva
Locais de Obstrução
Epidídimo
Dutos
Ejaculatórios
Deferente
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11. Azoospermia Obstrutiva: Etiologia
Pós-infecciosa (epididimite, prostatite,
Vesiculite seminal)
Pós-cirúrgica (vasectomia, cisto epidídimo, hérnia, cirurgia
escrotal, colo vesical, prostatectomia)
Iatrogênica (instrumentação endoscópica)
Congênita
Agenesia congênita canais deferentes (CBAVD)
Cistos: duto ejaculador e próstata
Adquirida
Idiopática (causa desconhecida)
Esteves et al. Clinics 2011;66(4):691-700
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12. AO: Diagnóstico
Exame Físico:
Testículos tamanho normal
Epidídimo normal ou engurgitado
Deferente normal ou espessado ou ausente
Toque retal: normal ou presença de cisto prostático
Espermograma:
Volume normal ou reduzido (<1,5 mL)
pH normal ou ácido (<7,2)
Exames Hormonais:
FSH, LH, testosterona - níveis séricos normais
Biópsia de Testículo:
Espermatogênese normal
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13. AO
não-tratável
tratável
Cirurgia
reconstrutiva
Extração Sptz
TRA
Manejo Clínico
Esteves, Miyaoka, Agarwal. Surgical treatment of male infertility in the era of
intracytoplasmic sperm injection. CLINICS 2011; 66:1462-77.
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14. Cirurgia Reconstrutiva (1)
Esteves, Miyaoka, Agarwal. Surgical treatment of male infertility in the era of
intracytoplasmic sperm injection. CLINICS 2011; 66:1462-77.
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15. Cirurgia Reconstrutiva (2)
Ressecção Transuretral dos Ductos
Ejaculatórios (TURED)
Esteves et al. CLINICS 2011; 66:1462-77;
Netto Jr, Neves, Esteves. J Urol. 1998;159: 2048-53.
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16. Tratamento Cirúrgico
Azoospermia
Obstrutiva
Obstrução
Deferente/
Epidídimo
Patência: 50-95%;
Gestação: 30-75%
Obstrução Duto
Ejaculatório
Patência: 50-75%
Gestação: 20-30%
Esteves, Miyaoka, Agarwal. Surgical treatment of male infertility in the era of
intracytoplasmic sperm injection. CLINICS 2011; 66:1462-77.
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17. 1. Azoospermia termo que
descreve ejaculados com
ausência completa de
espermatozóides, sem implicar
causa específica
2. Azoo obstrutiva produção espermática normal, mas
existe obstrução mecânica trato seminal que
impede a saída espermatozóides na ejaculação
3. Opções de tratamento AO incluem reconstrução
microcirúrgica ou endoscópica e extração de
espermatozóides para RA
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18. Azoospermia Não-obstrutiva
Diagnóstico Diferencial
Tipos
Falência
Espermatogênica
Hipogonadismo
Hipogonadotrófico
Espermatogênese
Deficiente
/
ausente
Clínica
FSH/LH:
ñ
ou
nl
TT:
diminuida/nL
TesHculos:
pequenos/nL
FSH/LH
<1.2
mUI/mL
TT
diminuida
TesHculos
pequenos
VirilizaQon
pobre
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19. Hipogonadismo Hipogonadotrófico
• Virilização deficiente; testículos hipotróficos
• Azoospermia
• Níveis baixos FSH e LH (<1.2 mIU/L)
• Testosterona diminuída (<300 ng/dL)
Congênita:
Ø Síndrome Kallman
Ø Prader-Willi
Adquirida:
Ø Tumor hipófise; Uso esteróides
Ø Terapia reposição testosterona
Fraietta et al. Clinics 68; 2013
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20. Hipo-hipo adquirido
Tratamento
Injeções IM hCG urinário
1000-2000 UI IM
2-3x/semana
Mínimo 3 meses
Rec-hCG: SC auto-aplicação
Fraietta et al., Clinics 2013;68(Suppl.1):81-8.
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21. Rec-hCG for male hypo-hypo
11 homens adultos com HH adquirido
hCG recombinante (Ovidrel 250 mcg)
Baseline
Pós-Tx
Esteves & Papanikolaou Fertil Steril 2011
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22. Falência Espermatogênica
Exame Físico:
Testículos pequenos (ou normal)
Epidídimo pequenos (ou normal)
Deferente normal; Toque retal normal
Espermograma:
Volume normal; pH normal
Exames Hormonais:
FSH e LH: níveis séricos elevados ou normais
Testosterona: níveis séricos diminuídos ou normais
Biópsia de Testículo:
Espermatogênese deficiente ou ausente
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23. ANO & Falência
espermatogênica: Etiologia
Congênita
Disgenesia Testicular/Criptorquidia
Alterações genéticas (Sind. Klinefelter, Microdeleções Y, etc.)
Adquirida
Torsão testicular; Trauma
Pos-infecciosa (ex. Orquite pós-caxumba)
Gonadotoxinas (medicamentos, drogas citotóxicas, radiação)
Cancer Testículo
Doenças sistêmicas (cirrose hepática, insuficiência renal)
Idiopática (etiologia desconhecida)
Esteves et al. Clinics 2011;66(4):691-700.
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24. ANO*
Manejo Clínico
Não tem
tratamento
Extração de Sptz
para ICSI
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*Falência espermatogênica
25. ANO & Falência Espermatogênica
40%-50% pacientes possuem
produção mínima Sptz no
interior do testículo, mas não o
suficiente para o aparecimento
no ejaculado
— Objetico é identificar local de
produção e extrair Sptz para
ICSI
— Localização geográfica
imprevisível
Esteves & Agarwal. Sperm Retrieval Techniques; In: Gardner D et al (Eds.), Human Assisted
Reproductive Technology. Cambridge University Press, pp. 41-53, 2011
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ANDROLOGY AND HUMAN REPRODUCTION CLINIC - REFERRAL CENTER FOR MALE REPRODUCTION
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26. Esteves et al. An update on the initial assessment of the infertile male.
CLINICS 2011;66:1-10.
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27. 1. Azoospermia não-obstrutiva
(ANO) é sinônimo de falência
espermatogênica, mas não de
esterilidade absoluta
2. 30-50% casos existe
produção mínima de
espermatozoides no testículo
3. ANO não tem tratamento. A opção é
utilizar uma técnica para extrair
espermatozoides para TRA
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28.
29. Conteúdo e Objetivos
Parte 1: Aula Teórica
• Entender of conceito de azoospermia,
causas e tratamentos
• Conhecer as técnicas de extração de
espermatozoides para homens
azoospérmicos
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30. Objetivos Técnicas Extração
Uso
imediato
ICSI
Criopreservação
Extrações
futuras
Preservar
função
testicular
Obter Sptz
ICSI
Minimizar
dano
testicular
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31. Técnicas de Captação Azoo Obstrutiva
Técnica
Acrônimo
Aspiração percutânea
de espermatozóides
do epidídimo
PESA
Aspiração
microcirúrgica de
espermatozóides do
epidídimo
MESA
Aspiração percutânea
de espermatozóides
do testículo
TESA;
TEFNA
Esteves et al. Sperm Retrieval Techniques. Int Braz J Urol 2011; 37: 570-83
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32. Sperm retrieval in CBAVD
146 patients
OBSTRUCTIVE
AZOOSPERMIA
100% 96.6% 96.3%
CBAVD Vasectomy Post-‐infection
PESA + rescue TESA
PESA alone
~100%
Successful Retrievals
Esteves et al. J Urol. 2013;189(1):232-7
78.1%
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33. Esteves et al. J Urol. 2013
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34. Esteves et al. J Urol. 2013
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36. 70
Fonte Sptz p/ICSI AO
Epidídimo x Testículo
Ejaculado
Epidídimo/Testículo
48.5
43.2
12.1
73.6
46.3
51.3
20
Taxa
Fertilização (%)
%TQE
Gravidez (%)
Aborto (%)
Verza Jr S & Esteves SC.Int Braz J Urol 2008; 34:49-56.
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Técnicas de Captação
Azoo Obstrutiva
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38. Azoospermia
Não-Obstrutiva
TESE
Técnica
Acrônimo
Aspiração percutânea Sptz
do testículo
TESA;
TEFNA
Extração Sptz testículo
(biópsia única ou múltipla)
TESE
Extração microcirúrgica Sptz
do testículo (microdissecção
testicular)
Micro-
TESE
Esteves et al. Sperm Retrieval Techniques.
Int Braz J Urol 2011; 37(5):570-83
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39. Schlegel 1999
Amer et al. 2000
Okada et al. 2002
Okubu et al. 2002
Tsujimura et al. 2002
Ramon et al. 2003
Esteves et al. 2011
43%-63%
17%-45%
Séries Controladas
Qual a Melhor Técnica?
TESE
Esteves et al. Int Braz J Urol 2011; Deruyver et al. Andrology 2014
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40. Microsurgical vs. conventional single-biopsy
TESE in nonobstructive azoospermia: a
Verza Jr S, Esteves SC. Fertil Steril 2011; 96 (3): S53
N=60
Method
P=0.0005
45%
prospective controlled study
Sperm Retrieval Success Rates
Micro-TESE
single-biopsy TESE
93%
64%
64%
Histology categories
pairwise
Comparisons: p<0.0001
25% 20%
9% 6%
Overall
Hypospermatogenesis
Maturation Arrest
Sertoli-cell Only
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41. Tissue removed (mg)
Open Large
Single-Biopsy
TESE
Micro-
TESE
P-value
65 ± 25
8.9 ± 2.5
<0.01
Facilitando o
manuseio no Lab FIV
ConvenQonal
TESE
Micro-‐TESE
Fragment
weight
Fragment
weight
Verza Jr & Esteves Fertil Steril 2011;
Esteves & Varghese J Reprod Sci 2013
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42. Selec7ng
candidates
for
SR
Can
biomarkers
predict
SR
success?
Fatores Preditivos Sucesso
Extração Testicular na ANO (1)
Níveis FSH
Níveis
Testosterona
Volume
Testicular
Marcadores refletem a função espermatogênica
global do testículo, mas não a existência de áreas
focais de espermatogênese
Esteves, Miyaoka & Agarwal. Clinics 2011; Verza Jr. & Esteves. Fertil Steril 2011;
Carpi et al. Fertil Steril 2009.
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43. Fatores Preditivos Sucesso
Extração Testicular na ANO (2)
Sperm Retrieval Success Rates
93%
Micro-TESE (N=60)
64%
20%
Hypospermatogenesis
Maturation Arrest
Sertoli-cell Only
Verza Jr & Esteves. Fertil Steril 2011
Histologia
Testicular
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44. Sertoli cell-only
Parada
Maturação
Germinativa
Hiposperma-togênese
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45. Fatores Preditivos Sucesso
Extração Testicular na ANO (3)
Etiologia
Taxa sucesso
Criptorchidia
52-74%
Pós-infecciosa
67%
Torsão
>50%
Pós-quimio/radioterapia
25-75%
Genética (Klinefelter, AZFc Yq microdeletions)
25-70%
Genética (AZFa and AZFb Yq microdeletions)
~0%
Idiopática
50-60%
Esteves et al., Fertil Steril 94; 2010; Raman and Schlegel. J Urol.170; 2003;
Hopps et al. Hum Reprod. 180, 2003; Damani et al. JCO. 15; 2002
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46. Fatores Preditivos Sucesso
Extração Testicular na ANO (4)
✕ ✕ ✕
Sucesso:0%
0%
50-70%
Hamada et al. 2013; Krausz et al. 2014; Esteves et al. 2013
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48. Non-obstructive (N=365)
Obstructive (N=146)
P<0.01
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41.4
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43.3
20
100
64
61
34.2
Sperm
retrieval (%)
2PN
Fertilization
(%)
Top Quality
Embryos (%)
Live Birth (%)
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51. Clinics (Sao Paulo) Feb 2013;
68(Suppl 1): 151–156. doi: 10.6061/clinics/2013(Sup01)17
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52. Clinics (Sao Paulo) Feb 2013; 68(Suppl 1): 157–167.
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doi: 10.6061/clinics/2013(Sup01)18
53. ANDROFERT
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54. Conclusões
1. Técnicas de Extração são
métodos cirúrgicos para
coleta Sptz do epidídimo ou
testículo de homens
azoospérmicos.
2. Escolha da técnica depende primariamente
do tipo de azoospermia, obstrutiva ou não-obstrutiva.
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55. Conclusões
3. Sucesso extração AO ~100%;
independe da etiologia da
obstrução e técnica
4. Sucesso na ANO 40-60%. Não depende da
etiologia da ANO, mas sim da técnica (micro-
TESE melhor)
5. Marcadores pré-operatórios tem valor
limitado para predizer sucesso extração, mas
presença de microdeleção AZFa ou AZFb
confere mal prognóstico
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56. 6. Espermatozóides extraídos
sempre usados na ICSI (uso
imediato ou criopreservado)
7. Sucesso ICSI não relacionado à técnica de
extração, mas sim ao tipo de azoospermia
8. ICSI na AO comparável sêmen ejaculado
(~40% nascidos vivos ET/fresco)
9. Potencial reprodutivo Sptz ANO inferior (~25%
nascidos vivos ET/fresco)
10. Saúde prole independe tipo de azoospermia
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58.
59. Conteúdo e Objetivos
Parte 2: Videos
PESA: aspiração percutânea de
espermatozoides do epididimo
MESA: aspiração microcirúrgica de sptz do
epidídimo
TESA: aspiração percutânea de sptz do
epididimo
Micro-TESE: microdissecção testicular
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61. Microsurgical Epididymal Sperm
Aspiration (MESA)
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