cultivos invitro de plantas

10,584 views

Published on

esta presentacion contiene informacion de los procesos que se llevan acabo para obtener cultivos de plantas inivtro y su aplicacion en la biotecnologia

Published in: Health & Medicine
0 Comments
5 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

No Downloads
Views
Total views
10,584
On SlideShare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
2,432
Actions
Shares
0
Downloads
464
Comments
0
Likes
5
Embeds 0
No embeds

No notes for slide

cultivos invitro de plantas

  1. 2. <ul><li>DEFINICIÓN </li></ul><ul><ul><li>Técnica mediante la cual un explante se cultiva asépticamente en un medio de composición química definida </li></ul></ul><ul><ul><li>El cultivo se desarrolla en condiciones de temperatura, humedad, fotoperíodo e irradiancia controlados </li></ul></ul><ul><ul><li>La manipulación se realiza en cabinas de flujo laminar </li></ul></ul><ul><ul><li>Importante en la propagación de especies de interés agroforestal </li></ul></ul><ul><ul><li>Producen innumerables productos de importancia en la industria farmacéutica, cosmética y alimentaria </li></ul></ul><ul><ul><li>Los cultivos in vitro permiten obviar los inconvenientes derivados de condiciones geográficas, climáticas y de tiempo de produccion. </li></ul></ul>
  2. 3. APLICACIONES • PRODUCCIÓN COMERCIAL • SANEAMIENTO DE CULTIVARES • CONSERVACIÓN DE GERMOPLASMA • OBTENCIÓN DE VARIACIÓN SOMACLONAL • RESCATE DE EMBRIONES • OBTENCIÓN DE HÍBRIDOS SOMÁTICOS • OBTENCIÓN DE HAPLOIDES • TRANSFORMACIÓN DE PLANTAS <ul><li>CLASES DE CULTIVOS </li></ul><ul><ul><li>CULTIVO DE CÉLULAS </li></ul></ul><ul><ul><li>CULTIVO DE TEJIDOS </li></ul></ul><ul><ul><li>CULTIVOS DE ÓRGANOS </li></ul></ul><ul><li>PLASTICIDAD </li></ul><ul><li>TOTIPOTENCIALIDAD </li></ul><ul><ul><li>Es la capacidad de una célula vegetal de dar lugar al desarrollo de una planta completa </li></ul></ul><ul><ul><li>Las células totipotentes son células somáticas que han retenido su capacidad de dividirse y diferenciarse en una planta madura si se coloca en el medio adecuado </li></ul></ul>
  3. 4. TERMINOLOGÍA Y TÉCNICAS 1. EXPLANTE Porción de tejido u órgano que se separa de la planta para iniciar el cultivo 2. ESTERILIZACIÓN procedimiento para la eliminación de microorganismos 3.AUTOCLAVE: Aparato en el que el medio, material de vidrio, instrumental, etc., Es esterilizado por vapor bajo presión (121ºc, 15 psi, 10-20 min) <ul><ul><li>REQUERIMIENTOS DE ASEPSIA </li></ul></ul><ul><ul><li>DESINFECCIÓN DE SUPERFICIE DEL EXPLANTO: </li></ul></ul><ul><ul><li>Generalmente usando HIPOCLORITO COMERCIAL diluido para evitar el desarrollo de microorganismos </li></ul></ul><ul><ul><li>CABINA DE FLUJO LAMINAR: Área de trabajo, mantenida estéril por el flujo continuo, no turbulento de aire estéril </li></ul></ul>
  4. 5. <ul><li>CÁMARAS DE CULTIVO </li></ul><ul><ul><li>Es un receptáculo diseñado para permitir el control de algunas variables del ambiente físico </li></ul></ul><ul><ul><li>Habitualmente se pueden controlar la temperatura, la iluminación y el fotoperíodo y en algunos casos, menos frecuentes, la humedad del aire y su composición </li></ul></ul><ul><li>Control de la temperatura </li></ul><ul><ul><li>La Temperatura Se Afecta Por La Temperatura Ambiente De La Sala Donde Se Sitúe Y El Calor Generado Por Las Fuentes De Luz De Que Dispone </li></ul></ul><ul><ul><li>El control de la temperatura se efectúa mediante un sistema de </li></ul></ul><ul><li>refrigeración-calefacción controlado a través termostato </li></ul>
  5. 6. <ul><ul><li>Subcultivo: pasaje de células, tejidos, órganos, etc. Desde un medio de cultivo agotado a otro medio fresco </li></ul></ul><ul><ul><li>Micropropagación: propagación vegetativa in vitro de plantas </li></ul></ul><ul><ul><li>Diferenciación: desarrollo de células o tejidos con una función específica y/o regeneración de órganos, estructuras tipo órganos (raíces, tallos) o embriones </li></ul></ul><ul><ul><li>Adventicios: Desarrollo de órganos (raíces, yemas, tallos, Flores, etc.) O embriones (embryo-like structures) Desde puntos de origen No usuales, incluyendo Callos </li></ul></ul>
  6. 7. <ul><li>CULTIVOS in vitro </li></ul><ul><ul><li>CULTIVOS DIFERENCIADOS ( RAÍCES, TALLOS, EMBRIONES, RAÍCES Y TALLOS TRANSFORMADOS) </li></ul></ul><ul><ul><li>CULTIVOS INDIFERENCIADOS ( CALLOS, SUSPENSIONES) </li></ul></ul>
  7. 8. <ul><ul><li>Mezcla de sustancias en las que las células, tejidos y órganos pueden crecer y desarrollarse </li></ul></ul><ul><ul><li>Sustancias inorgánicas, como: N, P, K, Ca, Mg, Cl, Na, Cu, Zn, Mn, Fe, Bo, Mo, Co, I </li></ul></ul><ul><ul><li>Suplementos orgánicos complejos, como: leche de coco, extracto de levadura </li></ul></ul><ul><ul><li>Reguladores de crecimiento (hormonas) </li></ul></ul><ul><ul><li>Fuente de carbono (sacarosa) ya que no son completamente autotróficas </li></ul></ul><ul><ul><li>Con o sin agar (medio semi -sólido o </li></ul></ul><ul><li>líquido) </li></ul><ul><ul><li>Sin agua y nutrientes minerales una planta no puede vivir in vitro e in vivo. </li></ul></ul>
  8. 9. Mezclas de sustancias poco definidas: Extracto de levadura Leche de coco Extractos vegetales Hidrolizados de caseína Peptona y triptona Fe Zn B Mn Cu Ni Co Al Mo I N P K Ca Mg S Azúcares Aminoácidos Auxinas Citoquininas Giberelinas Acido abcísico elementos Micro Macro Sustancias orgánicas Agua Necesidades nutricionales y hormonales de los cultivos de órganos y tejidos vegetales <ul><ul><li>El medio MS, o Murashige y Skoog (1962), es el mas usado, particularmente si el objetivo es regenerar plantas </li></ul></ul><ul><ul><li>El medio B5 o de Gamborg et al. (1968), o sus varios derivados, ha sido de un gran valor en el cultivo de células y protoplastos, y también es utilizado eficazmente en regeneración de plantas </li></ul></ul>
  9. 11. <ul><ul><li>FORMACIÓN DE TALLOS, RAÍCES, FLORES, ETC. </li></ul></ul>Explanto Organogénesis Formación de tallos Formación de raíces Enraizamiento Tallos Planta completa
  10. 12. REGULADORES DE CRECIMIENTO HORMONAS/ FITOHORMONAS AUXINAS: GRUPO DE HORMONAS VEGETALES (NATURALES O SINTÉTICAS) QUE INDUCEN LA ELONGACIÓN, O EN ALGUNOS CASOS LA DIVISIÓN CELULAR FRECUENTEMENTE INDUCEN RAÍCES ADVENTICIAS E INHIBEN LA FORMACIÓN DE TALLOS ADVENTICIOS CITOKININAS: GRUPO DE HORMONAS VEGETALES (NATURALES O SINTÉTICAS) QUE INDUCEN DIVISIÓN CELULAR Y FRECUENTEMENTE TALLOS ADVENTICIOS Y EN MUCHOS CASOS INHIBEN LA FORMACIÓN DE RAÍCES ADVENTICIAS REGLAS GENERALES PARA LA ACCIÓN HORMONAL: • AUXINA : CYTOKININA = ~1 CALLO • AUXINA : CYTOKININA < 1 TALLO • AUXINA : CYTOKININA > 1 RAÍCES
  11. 13. CULTIVOS INDIFERENCIADOS <ul><li>CALLOS </li></ul><ul><ul><li>En medio sólido, crecimiento lento, gran heterogeneidad celular </li></ul></ul><ul><ul><li>Tejidos no diferenciados ( a veces diferenciados), en división activa </li></ul></ul><ul><ul><li>Frecuentemente se desarrollan a partir de heridas </li></ul></ul><ul><li>CULTIVOS EN SUSPENSIÓN </li></ul><ul><ul><li>Derivan de los anteriores, en medio líquido de composición adecuada, crecimiento más rápido y homogéneo </li></ul></ul><ul><ul><li>Composición del medio de cultivo. Fuente de carbono, minerales, vitaminas, fitohormonas (auxinas, citoquininas) </li></ul></ul>
  12. 14. EMBRIOGENESIS Proceso mediante el cual se desarrolla un embrión a partir de una célula o huevo fertilizada o asexualmente desde un grupo de células somáticas (embriogénesis somática) <ul><li>PROCEDIMIENTO PARA LA REGENERACIÓN VÍA EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA </li></ul><ul><li>1. INICIACIÓN: </li></ul><ul><ul><li>CALLOS EMBRIOGÉNICOS </li></ul></ul><ul><li>2. PROLIFERACIÓN: </li></ul><ul><ul><li>CALLOS EMBRIOGÉNICOS, MASAS PROEMBRIOGÉNICAS (PEM) </li></ul></ul><ul><li>3. DESARROLLO Y MADURACIÓN DE EMBRIONES: </li></ul><ul><ul><li>EMBRIONES </li></ul></ul><ul><li>4. GERMINACIÓN DE EMBRIONES (REGENERACIÓN) </li></ul><ul><li>ESTADÍOS DE DESARROLLO EN DICOTILEDÓNEAS: </li></ul><ul><ul><li>MASAS PROEMBRIOGÉNICAS </li></ul></ul><ul><ul><li>ESTADÍO GLOBULAR </li></ul></ul><ul><ul><li>TORPEDO </li></ul></ul><ul><ul><li>EMBRIÓN SOMÁTICO </li></ul></ul>
  13. 15. MICROPROPAGACIÓN Es el proceso de multiplicar plantas in vitro , a partir de un fragmento (explanto) de una planta madre, se obtiene una descedencia uniforme en condiciones de asepsia. Este proceso incluye varias fases: FASE 0 : Preparacion de la planta madre FASE I : Establecimiento del cultivo en condiciones de asepsia FASE II : Multiplicación de brotes FASE III : Enraizamiento FASE IV: Aclimatación
  14. 16. <ul><li>CULTIVO DE MERISTEMOS </li></ul><ul><li>Es un método efectivo para la eliminación de infecciones virales y es el material preferido para la conservación de germoplasma </li></ul><ul><li>La razón principal por la cual las células meristemáticas son indemnes a los virus es que el meristemo carece de tejidos vasculares, que es por donde se propagan los virus que van contaminando a la planta </li></ul><ul><li>Existen otros factores: </li></ul><ul><ul><li>El meristemo apical tiene una mayor velocidad de crecimiento y en consecuencia el virus &quot;no alcanza&quot; al meristemo </li></ul></ul><ul><ul><li>En una célula meristemática el virus tiene mayor dificultad de acoplamiento con los ribosomas, debido a que estás células tienen un código de trabajo muy definido </li></ul></ul>

×