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Conceptos Básicos       ABI - UNSA   8
    Sistema Cardiovascular     El Sistema Cardiovascular está formado por el corazón, la sangre y los vasossanguíneos; ca...
    Partes del Corazón    1. Aurícula derecho, 2. Aurícula izquierdo, 3. Vena cava superior,4. Aorta, 5. Arteria    pulmo...
   Sangre    La sangre tiene una densidad de 1.04 g/cm³, muy cercana a la del agua que es de 1.00    g/cm³ y su pH es lig...
   La Aorta    La aorta es la principal arteria del cuerpo. Sale directamente del corazón, concretamente del    ventrícul...
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   El Endotelio    Es la capa de células que cubre el interior de los vasos sanguíneos, como una epidermis    que facilit...
Entre las principales sustancias vasodilatadoras se encuentra el Oxido Nítrico (NO) al quese le reconocen además propiedad...
   Muestra Biológica    En el presente estudio de investigación se debe tener en cuenta las consideraciones éticas y de s...
   Procesamiento Digital de Imágenes    El procesamiento digital de imágenes no sólo se usa en el ámbito científico y tec...
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   Ventajas del Uso de MATLAB                                                         MATLAB                             ...
Ingeniería del Proyecto         ABI - UNSA       23
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   Construcción de Cámara de Órganos Aislados y Repotenciación de un    Termorregulador    Para esta fase de la construcc...
 ESQUEMA OPTIMO DEL SUBSISTEMA DE ACONDICIONAMIENTO DEÓRGANOS AISLADOSTemperatura:37.5 C 0.01 CFlujo:7 ml/seg            ...
ETAPA CONTROL DE TEMPERATURA           ABI - UNSA          27
ETAPA CONTROL DE FLUJO        ABI - UNSA       28
   Subsistema De Adquisición y Procesamiento de Imágenes    Para el siguiente subsistema de adquisición de imágenes se ut...
   Desarrollo del Software de Adquisición y Procesamiento      Como para todo diseño de productos lo esencial es la creat...
   El software Biométrico Aórtico SBAT-ABI                                  ABI - UNSA   31
   Interfaz principal de SBAT-ABI    A continuación se describen los tres bloques mostrados en la siguiente figura.      ...
Imagen para ser procesada por SBAT-ABI                            ABI - UNSA   33
ResultadosLinea base Estable                       t          ABI - UNSA       34
   Proceso de Estabilización con Ringer     Las tomas fueron hechas cada 10 segundos, el Ringer es un suero fisiológico e...
   Proceso de Vasodilatación con Acetil-colina 3 µM (Ach).                                              Diametro Aortico ...
   Proceso de Vasoconstricción con Cloruro de Potasio 70mM (KCl).                                                Diametro...
   Data de los Tres Casos del Proceso de Investigación              Tiempo       Ringer         Vasodilatación      Vasoc...
   Grafica Comparativa Entre Ringer, Ach(3µM ) y KCl(70mM).Fármacos    Estándares.                                       ...
Conclusiones   Se logro diseñar e implementar una cámara de órganos aislados adecuado para la presente    investigación l...
Recomendaciones   Se propone en una siguiente etapa poder trabajar con otros fármacos existentes en el mercado, ya que   ...
GRACIAS POR SU ATENCIONInvestigando por un sueño, la Ciencia.!!                            ABI - UNSA     42
Referencias Bibliográficas[1]     R.F. Furchgott, J.V. Zawadzki. The obligatory role of endothelial cells in the      rela...
[16] J. Monedero. ”Conceptos Fundamentales de Teoría de Imagen Digital”, capítulo 6 del libro Aplicaciones Informáticas en...
INSTITUTO DE BIOINGENIERIA APLICADA               ABI – UNSADirección: San Agutin115, 2do. Piso, Cercado–Arequipa.Telf. : ...
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Renée Condori Apaza. ABI-UNSA/Bioingeniería

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El presente proyecto de investigación tiene como finalidad realizar una cámara de órganos aislados y un software biometrico con el cual podamos medir las diferencias fisiológicas que sedan al someter una aorta torácica con estándares de vaso dilatación y vaso constricción (Acetil colina y Cloruro de potasio), simulando el proceso que se da en la aorta en un equipo in vitro.

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  1. 1. Universidad Nacional San Agustín de Arequipa INSTITUTO DE BIOINGENIERIA APLICADA Diseño e implementación de un Prototipo “Cámara Órganos Aislados” Para la Adquisición y Procesamiento Digital de Imágenes que permita medir la Vasoreactividad en el Tejido Muscular de la Aorta Torácica in Vitro. Ing. Renée M. Condori Apaza Ing. Nancy Orihuela Ordoñez Md. Víctor Bellido Vela Ing. Ulises Gordillo Zapana ABI - UNSA 1
  2. 2. ANTECEDENTES DEL PROBLEMA Los estadounidenses Robert F. Furchgott Louis J. Ignarro y Ferid Murad; fueron los tres Premio Nobel en Fisiología / Medicina en 1998, “por descubrir que el óxido nítrico (NO) puede ser utilizado para: Alterar el comportamiento de las arterias y provocar artificialmente un mayor o menor flujo sanguíneo” en diversos órganos del cuerpo. Los investigadores demostraron que el óxido nítrico (NO) ayuda a mantener el sistema cardiovascular estable, protege el corazón y estimula el cerebro. Además de inhibir la contracción de las células musculares de las arterias, favorece la dilatación de los vasos sanguíneos, distribuye la sangre, regulariza la presión arterial e impide la formación de trombos [Furchgott Robert F, 1998]. ABI - UNSA 2
  3. 3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMAEl uso de fármacos para la prevención, conservación y restablecimiento de labuena salud es una práctica ampliamente aceptada.Pero la falta de una herramienta adecuada para poder obtener dichas respuestasde la calidad de estos fármacos con un adecuado tratamiento al tejido en estudio(aorta torácica) in vitro; es que nos condujo al diseño de un sistema que seacapaz de ofrecernos esta información, de gran importancia para los investigadoresen el área de la Ingeniería Biomédica y Medicina.Por las consideraciones expuestas y por tener una herramienta para las BuenasPracticas de Calidad, nuestra meta es: ¿Cómo determinar de manera eficiente yefectiva el efecto vasodilatador y vasoconstrictor en la aorta torácica? ABI - UNSA 3
  4. 4. JUSTIFICACIÓN DEL PROBLEMALa presente investigación se justifica en el hecho de que no existe unaherramienta para la prueba de fármacos y productos naturales.La Bioingeniería nos proporciona herramientas que nos permiten medir, evaluar,analizar los fenómenos físicos/químicos y biológicos haciendo uso de técnicas ymétodos para poder cuantificar parámetros fisiológicos.Las mediciones logradas anteriormente en los laboratorios de Investigación denuestra universidad lo realizábamos manualmente y usando un sensor detensión conectado a un polígrafo Grass (Polygraph DC Driver Amplfier). Paraluego por análisis estadístico demostrar las variaciones de porcentaje derelajación del anillo de aorta eran registradas. ABI - UNSA 4
  5. 5. ABI - UNSA 5
  6. 6.  OBJETIVO GENERAL Diseñar e implementar un Prototipo “Cámara Órganos Aislados” Para la Adquisición y Procesamiento Digital de Imágenes que permita determinar el efecto vasodilatador y vasoconstrictor producido por un fármaco en la Aorta Torácica de un Guinea Pig in Vitro. OBJETIVOS ESPECÍFICOS Diseñar e implementar una cámara de órganos aislados que mantenga el tejido muscular en condiciones adecuadas para las pruebas in Vitro, con los respectivos fármacos. Controlar el flujo, temperatura de la solución fisiológica Ringer y fármacos a través del tejido muscular. Adquirir, almacenar y procesar imágenes capturadas durante el comportamiento del tejido muscular (aorta torácica) de acuerdo a los estímulos aplicados (según los fármacos usados; Acetil colina y KCL). Validar el funcionamiento del sistema in vitro de la aorta torácica mediante el análisis de la data. ABI - UNSA 6
  7. 7.  METODOLOGIA El presente trabajo de investigación es del tipo experimental el cual permite descartar y explorar los factores variables que intervienen en el fenómeno que nos proponemos a investigar. Partiendo del trabajo realizado por Robert F. Furchgott, Louis J. Ignarro y Ferid Murad, Premios Nobel en Fisiología Medica en 1998. La Bioingeniería nos proporciona herramientas que nos permiten evaluar, medir y analizar los fenómenos físicos, químicos y biológicos haciendo uso de técnicas y métodos para poder cuantificar parámetros fisiológicos. ABI - UNSA 7
  8. 8. Conceptos Básicos ABI - UNSA 8
  9. 9.  Sistema Cardiovascular El Sistema Cardiovascular está formado por el corazón, la sangre y los vasossanguíneos; cada uno desarrolla una función vital en el cuerpo humano. La funciónprincipal del sistema circulatorio es transportar materiales en el cuerpo: la sangrerecoge el oxígeno en los pulmones, y en el intestino recogenutrientes, agua, minerales, vitaminas y los transporta a todas las células del cuerpo. Corazón Es un órgano muscular hueco que funciona como una bomba aspirante eimpelente, con dos funciones que desempeñar:Bombear la sangre venosa a los pulmones para que los eritrocitos intercambien sucarga de bióxido de carbono por una nueva carga de oxígeno. Bombear la sangre oxigenada recibida de los pulmones a todas las partes delcuerpo. ABI - UNSA 9
  10. 10.  Partes del Corazón 1. Aurícula derecho, 2. Aurícula izquierdo, 3. Vena cava superior,4. Aorta, 5. Arteria pulmonar, 6. Vena pulmonar, 7. Válvula mitral, 8. Válvula aórtica, 9. Ventrículo izquierdo, 10. Ventrículo derecho, 11. Vena cava inferior, 12. Válvula tricúspide, 13. Válvula pulmonar. ABI - UNSA 10
  11. 11.  Sangre La sangre tiene una densidad de 1.04 g/cm³, muy cercana a la del agua que es de 1.00 g/cm³ y su pH es ligeramente básico (pH= 7,36), por lo que podemos hablar del sistema circulatorio como un sistema hidráulico donde las venas y las arterias son similares a mangueras. Como sucede con cualquier circuito hidráulico, la presión en el sistema circulatorio varía a través del cuerpo, la acción de la gravedad es muy notoria en las arterias donde la presión varía de un punto a otro. ABI - UNSA 11
  12. 12.  La Aorta La aorta es la principal arteria del cuerpo. Sale directamente del corazón, concretamente del ventrículo izquierdo, y da origen a todas las arterias del sistema circulatorio (excepto a las arterias pulmonares, que salen del ventrículo derecho). Termina a nivel de la IV vértebra lumbar, donde se bifurca para dar origen a las arterias iliacas primitivas. Su porción central o proximal se conoce con el nombre de arco o cayado aórtico, constando de una parte ascendente, otra transversal y descendente (aorta torácica descendente). La parte ascendente tiene una disposición libre (sin ramificaciones), pero en la parte transversal la aorta tiene su primera Arteria. ABI - UNSA 12
  13. 13.  Estructura de la pared arterial La pared arterial está compuesta de tres capas: Túnica íntima: reviste al vaso, consiste en endotelio (células que están en contacto con la sangre en el lumen o espacio del vaso).Tejido parecido al epitelio escamoso. Túnica media: tejido conectivo y células de músculo liso. Túnica externa: fibras elásticas y tejido conectivo rico en colágeno. Estas le dan capacidad de dilatarse y recuperarse. ABI - UNSA 13
  14. 14.  El Endotelio Es la capa de células que cubre el interior de los vasos sanguíneos, como una epidermis que facilita el desplazamiento de la sangre. También es considerado actualmente como un órgano, que está constituido por millones de células que forman una capa muy delgada que recubre la totalidad de la superficie interna del corazón, de las arterias, de nuestros vasos capilares y de nuestras venas, siendo su peso aproximado de casi 3.5 kg. (5% del peso corporal total en un adulto de 70 kg.), consumiendo sus células gran cantidad de energía, fruto de su activo metabolismo. Función Principal del Endotelio Mantenimiento de un tono vascular dilatado en la proporción exacta para conservar la presión arterial en valores normales y permitir la perfusión tisular. Esta función la cumple a través de la fabricación del OXIDO NITRICO (NOs), mediante la enzima convertidora Endotelina. El Oxido Nítrico El óxido nítrico (NO) es una molécula multifuncional que interfiere con los mecanismos anteriormente mencionados activados tras la denudación del endotelio. El NO inhibe la interacción de las plaquetas con la pared vascular, la activación leucocitaria, la proliferación de las CMLV y la síntesis de proteínas de matriz. ABI - UNSA 14
  15. 15. Entre las principales sustancias vasodilatadoras se encuentra el Oxido Nítrico (NO) al quese le reconocen además propiedades antiagregantes y antiproliferativas.Las sustancias vasoconstrictoras más conocidas son la Angiotensina II (A II) de acciónconstrictora directa e indirecta a través del estímulo para la liberación de la Endotelina (ET-1), ésta última es la más potente sustancia vasoconstrictora conocida.Generación de NO por parte de la NOs y su interacción con la Guanilato Ciclasa. ABI - UNSA 15
  16. 16.  Muestra Biológica En el presente estudio de investigación se debe tener en cuenta las consideraciones éticas y de sentido común que restringen la investigación en humanos. Por esta razón el uso de modelos animales para el estudio de “desórdenes humanos” ha jugado un rol crítico en entender los procesos de enfermedades y, de hecho, han sido de gran valor para el diseño y test de regímenes de tratamiento. Una gran variedad de especies, vertebrados e invertebrados, han sido utilizados con estos fines. Por tanto un animal de laboratorio es cualquier especie animal utilizada en experimentación con fines científicos. Para la investigación se uso un Cobayo nombre científico Cavia Porcellus y/o Guinea Pig. ABI - UNSA 16
  17. 17.  Procesamiento Digital de Imágenes El procesamiento digital de imágenes no sólo se usa en el ámbito científico y tecnológico, también en el ámbito de mercadotecnia y en la cinematografía (procesamiento digital de video). ABI - UNSA 17
  18. 18.  Imagen Se entiende por "imagen" la apariencia visible de una forma. Esta definición se extiende corrientemente hasta aceptar que una imagen es, así, la "representación" de una forma o de una entidad determinada. ABI - UNSA 18
  19. 19.  Sistema Procesamiento de Imágenes Un Sistema de Procesamiento de imágenes sirve para representar en forma digital una imagen y someterla a una serie de operaciones que permitan obtener una imagen resultante que muestre algunas características deseadas no presentes en la imagen original o que permita obtener Información para el logro de un objetivo particular. Sistema de Nueva(s) Imagen(s) IMAGEN procesamiento de Comandos de Control Imágenes Datos(Información) ABI - UNSA 19
  20. 20.  Etapas del Procesamiento Digital de Imágenes ABI - UNSA 20
  21. 21.  Modelo de una Imagen Digital m Mi 1, j Mi 1, j 1n M i, j 1 Mi, j M i, j 1Mi, j 0,1,2,,255 Mi Mi 1, j 1 1, ji 1,2,, n; j 1,2,, m. Imagen Digital en nivel de gris ABI - UNSA 21
  22. 22.  Ventajas del Uso de MATLAB MATLAB  Fuera de línea  En línea, usando VFM ABI - UNSA 22
  23. 23. Ingeniería del Proyecto ABI - UNSA 23
  24. 24.  Subsistema De Acondicionamiento de Órganos Aislados El diseño de este subsistema partió del rediseño de las cámaras realizadas en investigaciones anteriores, para órganos aislados y agentes de vasoreactividad, las cuales eran pequeñas y poco eficientes en la recirculación de agua. Estas nueva cámara es conectada en paralelo con el Termo Regulador rediseñado en el Instituto de Bioingeniería Aplicada el cual era un MEDINGEN/SITZ FREITAL, en el cual recircula agua a 37,5º C por las cámaras antes descritas, con la finalidad de someter a Baño María la aorta torácica, la aorta en espera, la solución fisiológica denominada Ringer, la que es usada para mantener con vida la aorta en estudio y las aortas en espera, y los fármacos de vasodilatación y vasoconstricción. El subsistema mencionado anteriormente se muestra en la figura siguiente: ABI - UNSA 24
  25. 25.  Construcción de Cámara de Órganos Aislados y Repotenciación de un Termorregulador Para esta fase de la construcción de la cámara se procedió hacer los planos respectivos en Autocad y construir con un material inerte el cual no afecte a ningún tejido que se pueda trabajar, para lo cual se uso Acrílico y accesorios de teflón y materiales usados en venoclisis. Como se muestra en las siguientes Figuras. La cámara estuvo provista también de un controlador de flujo para el Ringer 2 ml/s a 50 ml/s (7 ml/s). ABI - UNSA 25
  26. 26.  ESQUEMA OPTIMO DEL SUBSISTEMA DE ACONDICIONAMIENTO DEÓRGANOS AISLADOSTemperatura:37.5 C 0.01 CFlujo:7 ml/seg ABI - UNSA 26
  27. 27. ETAPA CONTROL DE TEMPERATURA ABI - UNSA 27
  28. 28. ETAPA CONTROL DE FLUJO ABI - UNSA 28
  29. 29.  Subsistema De Adquisición y Procesamiento de Imágenes Para el siguiente subsistema de adquisición de imágenes se utilizó una video cámara Sony Handycam DCR-TRV250 y su adecuado Video Visualizer, se utilizo este sistema por su excelente capacidad de zoom, focalización y la disponibilidad de las salidas de video RCA. También se conto con una HP Pavilion dv1000-Laptop para realizar el procesamiento en si de las imaginas y darnos la data procesada., en las siguiente figuras se muestran los equipos usados. ABI - UNSA 29
  30. 30.  Desarrollo del Software de Adquisición y Procesamiento Como para todo diseño de productos lo esencial es la creatividad y para el caso de software no es la excepción es una actividad eminentemente creativa, en la cual se toma en cuenta las necesidades del cliente, una interfaz amigable, guardado de información, modularidad en el software. Se siguieron estrategias de Diseño de Jerarquías hacia Abajo, pues se tuvo que partir de información general para obtener información específica, la cuales son las variaciones de contornos laterales y superficies de la aorta torácica.  Estructura del Diseño Para la adquisición y procesamiento de imagen se conto con una video cámara Sony Handycam DCR-TRV250 y con el Software denominado MATLAB primordialmente. Con estas herramientas se logro desarrollar el software SBAT-ABI. La representación de todo el proceso se muestra a continuación en el siguiente grafico. ABI - UNSA 30
  31. 31.  El software Biométrico Aórtico SBAT-ABI ABI - UNSA 31
  32. 32.  Interfaz principal de SBAT-ABI A continuación se describen los tres bloques mostrados en la siguiente figura. ABI - UNSA 32
  33. 33. Imagen para ser procesada por SBAT-ABI ABI - UNSA 33
  34. 34. ResultadosLinea base Estable t ABI - UNSA 34
  35. 35.  Proceso de Estabilización con Ringer Las tomas fueron hechas cada 10 segundos, el Ringer es un suero fisiológico especial con sus respectivos nutrientes útiles para mantener vivo cualquier tejido o célula a un Ph de 7.45 y debidamente oxigenado (95% de O2 y 5% CO2). Este grafico es de 20 minutos V.S. Diámetro externo (mm). Diametro Aortico Base 2.95 5 4 3 2 y = - 2e-006*x + 9.8e-005*x - 0.0017*x + 0.011*x - 0.022*x + 2.8 2.9 Diametro 2.85 2.8 2.75 Datos Base Ringer Funcion RepresentativaMáximo: 2.89195592 mm 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20Mínimo: 2.79591513 mm TiempoPromedio: 2.84574813 mm ABI - UNSA 35
  36. 36.  Proceso de Vasodilatación con Acetil-colina 3 µM (Ach). Diametro Aortico VasoDilatacion 4 3 2 y = 3.2e-005*x - 0.0013*x + 0.017*x - 0.042*x + 2.9 3.2 3.15 3.1 3.05 Diametro 3 2.95 2.9 2.85 Datos Vasodilatacion 2.8 Funcion Representativa 2.75 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 TiempoMáximo: 3.20510969 mmMínimo: 2.84873416 mmPromedio: 3.05246625 mm ABI - UNSA 36
  37. 37.  Proceso de Vasoconstricción con Cloruro de Potasio 70mM (KCl). Diametro Aortico VasoContraccion 3.4 6 5 4 3 2 y = - 1.3e-006*x + 8e-005*x - 0.0018*x + 0.02*x - 0.11*x + 0.23*x + 3 3.3 3.2 3.1 3 Diametro 2.9 2.8 2.7 2.6 2.5 Datos VasoContraccion Funcion Representativa 2.4 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 TiempoMáximo: 3.27115048 mmMínimo: 2.50873416 mmPromedio: 2.82737704 mm ABI - UNSA 37
  38. 38.  Data de los Tres Casos del Proceso de Investigación Tiempo Ringer Vasodilatación Vasoconstricción Cloruro de minutos Estabilización Acetilcolina (Ach) Potasio (KCl) D.Ext. - mm D.Ext. - mm D.Ext. - mm 1 2.839942322 2.86074776 3.187928726 2 2.819136883 2.848734164 3.115109692 3 2.808734164 2.86074776 3.271150479 4 2.871150479 2.891955917 3.056720569 5 2.854372232 2.96074776 3.015109692 6 2.871150479 2.971150479 2.987928726 7 2.850364024 3.008734164 2.967123288 8 2.891955917 3.091955917 2.998350781 9 2.850345041 3.131571975 2.850345041 10 2.829539602 3.119136883 2.871150479 11 2.808734164 3.079961374 2.891955917 12 2.86074776 3.160766674 2.691955917 13 2.79591513 3.102358636 2.629539602 14 2.871150479 3.205109692 2.512761355 15 2.871150479 3.087928726 2.687928726 16 2.798331445 3.139942322 2.508734164 17 2.881571975 3.118331445 2.656720569 18 2.881571975 3.108734164 2.508734164 19 2.798331445 3.139961374 2.598331445 20 2.860766674 3.16074776 2.539961374 ABI - UNSA 38
  39. 39.  Grafica Comparativa Entre Ringer, Ach(3µM ) y KCl(70mM).Fármacos Estándares. Analisis Comparativo de Diametro Ringer - VasoDilatacion - VasoContraccion 3.3 5 4 3 2 y = 5.7e-008*x - 8.3e-006*x + 0.0004*x - 0.0075*x + 0.052*x + 2.8 3.2 3.1 3 Diametro 2.9 2.8 2.7 Comportamiento de Aorta 2.6 Funcion Representativa del Comportamiento 2.5 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Time ABI - UNSA 39
  40. 40. Conclusiones Se logro diseñar e implementar una cámara de órganos aislados adecuado para la presente investigación la cual mantuvo el tejido muscular de la aorta torácica en condiciones adecuadas para las pruebas in Vitro (Ringer), con los respectivos fármacos. En la cámara de órganos aislados se implemento y adecuo los controladores de flujo, temperatura de la solución fisiológica Ringer y fármacos a través del tejido muscular y el respectivo control del baño maría. Se pudo obtener un software para la Adquisición, almacenamiento y procesamiento de imágenes capturadas durante el comportamiento del tejido muscular (aorta torácica) de acuerdo a los estímulos aplicados (según los fármacos usados; Acetil colina o KCL). Con los resultados obtenidos del procesamiento de datos e imágenes se comprobó nuevamente que la Acetil colina es un buen vasodilatador y el KCl cumple su función como vasoconstrictor. ABI - UNSA 40
  41. 41. Recomendaciones Se propone en una siguiente etapa poder trabajar con otros fármacos existentes en el mercado, ya que se tiene una base de datos como parámetros estándar para realizar las respectivas evaluaciones y análisis, también es recomendable mejorar este software para poder analizar los tramos de aorta torácica o cualquier otro tejido similar en 3 dimensiones y poder realizar reconstrucciones en estos tejidos como un objeto tridimensional. Al hacer la adquisición de las imágenes procurar evitar la mayor cantidad de sombras que se puedan generar en la imagen por el posicionamiento de la iluminación y/o contra poner un fondo oscuro. Este sistema como un equipo de análisis de imágenes de tejidos en bioingeniería puede ser usado por ejemplo en bronquios, intestinos, etc., donde se desee observar las variaciones de los Diámetros, perímetros y áreas. ABI - UNSA 41
  42. 42. GRACIAS POR SU ATENCIONInvestigando por un sueño, la Ciencia.!! ABI - UNSA 42
  43. 43. Referencias Bibliográficas[1] R.F. Furchgott, J.V. Zawadzki. The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine. Nature 1980; 288: 373-376.[2] A.C. Guyton. Tratado de Fisiología Médica. 11ª ed. Madrid: Elsevier España.2006.[3] A. Mrad de Osorio. Cardozo de Martinez: Utilización de Animales de Laboratorio en la Experimentación Biológica. Ed. Universidad Nacional de Colombia, 2000, 27 pp[4] M. Rivera, Sistema Cardiovascular, Laboratorio de transporte de oxigeno, UPCH, 2006.[5] Brian R. Crane; Andrew S. Arvai; Ratan Gachhui; Chaoqun Wu; Dipak K. Ghosh; Elizabeth D. Getzoff; Dennis J. Stuehr; John A. Tainer. The Structure of Nitric Oxide Synthase Oxygenase Domain and Inhibitor Complexes. Science, New Series, Vol. 278, No. 5337. (Oct. 17, 1997), pp. 425-431.[6] Newby A, Henderson A. Stimulus secretion coupling in vascular endothelial cells. Ann Rev Physiol 1990, 52: 61-666.3. Vanhoutte P. The other endothelial derived vasoactive factors. Circulation 1993, 87 (suppl V): V9-V17.[7] Lüscher T, Seo B, Bühler F. The role of endothelin in hypertension. Affirmative part of the controversy. Hypertension 1993, 21: 252-257.[8] Boulanger C, Lüscher T. Release of endothelin from the porcine aorta: inhibition by endothelium-derived nitric oxide. J Clin Invest 1990, 85: 587-593.[9] Clozel M, Kuhn A, Hefti F. Effect of angiotensin converting enzyme inhibitors and of hydralazine on endothelial function in hypertensive rats. Hypertension 1991, 16:532-40.[10] Vanhoutte P. The endothelium modulator of vascular smooth-muscle tone. N Engl J Med 1988, 319: 512-513.[11] Tuncer M, Vanhoutte P. Response to the endothelium-dependent vasodilator acetylcholine in perfused Kidneys of normotensive and spontaneously hypertensive rats. Blood Press 1993, 2: 217-220.[12] Taddei S, Victor A, Mattei P, et al. Vasodilatation to acetylcholine in primary and secondary forms of human hypertension. Hypertension 1993, 21: 929-933.[13] Baltazares Lipp M., Rodriguez Crespo H., Ortega Martinez J., Sortres-Vega A. Sistema endotelina. REV INST NAL ENF RESP MEX. Vol. 18 – Nro. 4 .2005.Pags. 308-320[14] Coloccini Roberto, Endotelina: ¿una nueva frontera en Hipertensión Arterial?. Instituto de Cardiolog ía Sanatorio Britanico, Rosario, Santa Fe, Argentina.[15] Qiao Li, Roger G Mark and Gari D Clifford. Artificial arterial blood pressure artifact models and an evaluation of a robust blood pressure and heart rate estimator. BioMed Central Journal, 2009. ABI - UNSA 43
  44. 44. [16] J. Monedero. ”Conceptos Fundamentales de Teoría de Imagen Digital”, capítulo 6 del libro Aplicaciones Informáticas en Arquitectura, UPC, 1999.[17] R. Gonzales. Tratamiento Digital de Imagenes Editorial Addison-Wesley. 1996. 773 p.[18] S. Hervella Azouzi, Editor de Imágenes basado en Regiones.Aplicación en entorno Matlab.2005.[19] A. Vera Tasamá, A. Ramírez Sánchez, D. Moreno Martínez. Aplicación Didáctica para el Procesamiento de Imágenes Digitales Usando Interfaz Gráfica de Usuario en MATLAB. 2008.[20] L. Flórez Valencia. Procesamiento y análisis de imágenes digitales Visión artificial. 2009.[21] M. Vetterli, y J. Kovacevic. “Wavelets and Subband Coding”. Pretince Hall Signal Processing Series, 1995.[22] S. E. Zarantonello. “Theory and application of Wavelets”. Santa Clara University, 1997.[23] Murray Speigel. “Teoría y Problemas de Análisis de Fourier”. McGraw-Hill serie de compendios Schaum, 1981.[24] Ruel Churchill. “Series de Fourier y Problemas de Contorno”. McGraw-Hill, 1978.[25] Young IT, Gerbrands JJ, and Van Vliet LJ, Fundamentals of Image Processing 1995, Delft: PH Publications.[26] R. Molina Introducción al Procesamiento y Análisis de Imágenes Digitales, Departamento de Ciencias de la Computación e IA Universidad de Granada 1998[27] Shoichiro Nakamura, Análisis Numérico y Visualización Gráfica con MATLAB, Prentice Hall 1997[28] Matlab Image Processing Toolbox User’s Guide Version 2, The Matworks inc. 1997[29] Image Acquisition Toolbox For use with Matlab Version 1, The MathWorks Inc. 2003[30] Creating Graphical User Interfaces Version 7, The MathWorks Inc. 2004[31] Report Generator For use with Matlab and Simulink User’s Guide Version 1, The MathWorks Inc. 1999[32] Fundamentos del Procesamiento Digital de Imágenes, Comisión Nacional de Actividades Espaciales (CONAE) Mendoza – Argentina[33] Sidnei Paciornik and Marcos Henrique de Pinho Mauricio, Digital Imaging, Department of Materials Science and Metallurgy Catholic University of Rio de Janeiro.[34] “Visión Artificial” (Ingeniería Informática), Curso académico 2003/2004. Universidad Rey Juan Carlos Escuela Superior de Ciencias Experimentales y Tecnológicas (ESCET). ABI - UNSA 44
  45. 45. INSTITUTO DE BIOINGENIERIA APLICADA ABI – UNSADirección: San Agutin115, 2do. Piso, Cercado–Arequipa.Telf. : 54-286256 renee.condori @ abi-unsa.edu.pe Arequipa - Perú ABI - UNSA 45

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