Este documento presenta un resumen de los conceptos y contenidos de la microbiología oral. Explica la evolución histórica de la microbiología y el desarrollo específico de la microbiología oral. También describe la morfología, tamaño y métodos para la observación microscópica de bacterias, incluyendo diferentes tipos de microscopios y técnicas de tinción.

1. Presentación del sílabo

7. CONCEPTO Y CONTENIDOS DE LA
MICROBIOLOGÍA ORAL
MICROBIOLOGÍA
Microbiología Médica Microbiología Clínica
Microbiología General Microbiología Sistemática
Inmunología

8. Contenidos de la microbiología oral
Estructura Imperios o Reinos Organismos Microbiología oral
dominios

9. Evolución histórica de la microbiología
1632-1723 Antony van Descubridor del mundo microbiano
Leeuwenhoek
1822-1895 Louis Pasteur Rebatió la teoría de la generación
espontánea
1843-1910 Robert Koch Formuló los postulados de Koch
1729 Pier Micheli Nova Plantarum
1898 Martinus Beijerinck Acuña el término virus
1890 S.B. Prusiner Descubrió los priones
1849 Gros Descubre a Entamoeba gingivalis
1773 Mueller Descubrió a Trichomonas tenax
1867 Lister Asepsia y antisepsia
1929 Alexander Fleming Observó a Penicillum notatum
1942 Ernest Chain y Aislaron y purificaron la penicilina
Howard Florey

10. Desarrollo de la microbiología oral
1632-1723 Antony van Observó en la materia alba animálculos
Leeuwenhoek
1890 Willoughby Miller The microorganism of the human mouth.
Teoría quimioparasitaria MOHidratos de
carbono dieta  ácidos desmineralización del
diente.
1891 W. Miller Formuló teoría las bacterias bucales  a
partir de la cavidad oral  originan procesos
infecciosos en otros lugares del organismo
1897 León Williams Encontró en zonas de caries insipientes
acumulaciones de bacterias adheridas al
esmalte careado.
1898 Greene y V. Black Descubrió acumulaciones de bacterias
constituidas por estreptococos. Introdujo el
término placa y sugirió que las bacterias
producían una sustancia gelatinosas para
adherirse a la superficie del diente.
1924 J. K. Clark Descubre la bacteria Stroptococcus mutans

11. Desarrollo de la microbiología oral
1950-1960 Paúl Keyes Demostraron la capacidad de S. mutans de
producir caries
1745 Pierre Fauchard Relación placa y sarro  afección del
periodonto como gingivitis y periodontitis
(piorreas)
1773 John Hunter Las gingivitis y piorreas repercuten en otras
zonas del organismo
1890 W. Miller Relacionó los procesos anteriores con los
microorganismos
1934 H.A. Gins Bacterias en zonas afectadas del periodonto
1956 J. S. MacDanal Bacterias anaerobias formadoras de pigmento
negro.
1965 Max Lisgarten Estudió por microscopia electrónica los
microorganismos periodonto patógenos.
1979 Sigmund Emitió postulados que establecen
Sockransky características que debe reunir un
microorganismo para ser asociado a
enfermedades periodontales.

12. A. Cocos
1. Individualizados
Redondeados Ovoideos Lanceolados Reniformes
2. Agrupaciones
Diplococos Tétradas Sarcinas Estafilococos Estreptococos
B. Bacilos
Morfología de 1. Individualizados
las bacterias 2. Extremos 3. Agrupaciones
Cocobacilos
Diplobacilos Empalizadas Estreptobacilos
B. Helicoidales o formas incurvadas
Vibrios Espirilos Espiroquetas

13. Tamaño
• Micrometro (µm) = 1/1.000.000 = 0.000001m = 10-6m
• Micrometro (µm) = 1/1.000 = 0.001 mm = 10-3 mm
0.5 µm 1.0 µm
1.2 µm
1-10 µm

14. Observación de las bacterias
Tipos de microscopios
Microscopio Características Utilidad
De fondo claro •Luz visible •Tinciones
•Hasta 0.23 µm •Fácil uso
•Muestra sobre fondo brillante
De fondo oscuro •Luz visible difractada •Microorganismos de
•Muestra brillante sobre fondo difícil tinción.
oscuro.
De contraste de •Luz difractada •Estructuras internas.
fases •Muestra con diferentes grado de
brillo y contraste.
De fluorescencia •Luz UV •Inmunofluorescencia
•Muestra fluorescente sobre fondo •auramina-
no fluorescente.
Electrónico •Haces de electrones. •Virus
•Estructuras menores de 0.23 µm. •Ultraestructuras

15. Microscopio óptico compuesto de fondo claro

16. Métodos microscópicos para la
observación de las bacterias
1. Examen en fresco
Permite visualizar las bacterias vivas, moviéndose.
Muestras: bacterias presentes en un productos patológico líquido
(p. ej. orina) , bacterias en un caldo de cultivo. Cuando las
bacterias proceden de un medio sólido se incorporarán a un líquido
isotónico (p. ej. Solución salina con 0.9% de NaCl)
Técnicas:
b) Técnica de la gota pendiente
a) Técnica simple

17. 1. Exámenes Tintoreales
Permiten visualizar las bacterias teñidas con colorante
básicos.
Muestras: Igual que para el examen en fresco.
Preparación del frotis de la muestra
Secar al aire
Extensión del cultivo en una película
delgada sobre el portaobjetos.

18. Fijar la preparación a la llama
Cubrir la preparación con el
colorante azul de metileno, lavar
y secar en block de papel filtro
Aplicar una gota de aceite de
inmersión, observar con el
objetivo de 100x

19. Tipos de tinciones
2.1 Tinción simple
Utilizan un solo colorante (p. ej. Azul de metileno).
Permiten visualizar la morfología de las bacterias.
las tinciones simples se llevan a cabo con la fijación de
la muestra, se añade el colorante, transcurrido un
tiempo de 10 minutos se elimina el colorante con agua,
y después de secar se observa con el microscopio.
2.2 Tinciones diferenciales o compuestas
 Tinción de gram
Preparación del frotis.
Fijar la preparación por calor.
Teñir con cristal violeta, 15 segundos, lavar.
Aplicar el mordiente (solución de yodo, 15 segundos,
lavar.
Decolorar con alcohol – acetona, 15 segundos, lavar.
Teñir con el colorante de contraste, safranina, 15
segundos, lavar.
Secar la preparación.
Visualizar.

20. Las bacterias gram positivas
de color violeta.
Las bacterias gram negativas
de color rojo.

21.  Tinción de Ziehl – Neelsen
Preparar el frotis
Fijación de la muestra por calor.
Teñir con fucsina fenicada en
caliente, 3 vapores, lavar.
Decolorar con alcohol ácido,
lavar.
Teñir con Azul de metileno, 30
segundos, lavar.
Secar.
Visualizar las bacterias ácido
alcohol-resistentes (BAAR) de
color rojo y los no ácidos alcohol-
resistentes de color azul.

22.  Otras Tinciones
Tinción de giemsa para células
eucariotas (también permite
observar bacterias).
Tinción argéntica de sales de
plata para visualizar
espiroquetas.