1. La espectrofotometría
Es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones químicas y biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que
permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
Principio de la Espectrofotometría
Todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe radiación de
longitudes de ondas que no pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la región del infrarrojo.
La absorción de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las moléculas, y es característica para
cada sustancia química.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; la energía radiante no puede producir ningún efecto sin ser
absorbida.
El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan
pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbidas.
La espectrofotometría ultravioleta-visible usa haces de radiación del espectro electromagnético, en el rango UV de 80 a 400 nm,
principalmente de 200 a 400 nm y en el de la luz visible de 400 a 800 nm , por lo que es de gran utilidad para caracterizar los
materiales en la región ultravioleta y visible del espectro.
Al campo de luz uv de 200 a 400 nm se le conoce también como rango de uv cercano , la espectrofotometría visible solamente usa el
rango del campo electromagnético de la luz visible , de 400 a 800 nm.
Ademas, no esta de menos mencionar el hecho de que la absorción y trasmitancia de luz depende tanto de la cantidad de la
consentracion y de la distancia recorrida.
Las aplicaciones principales son:
• Determinar la cantidad de concentración en una solución de algún compuesto utilizando las formulas ya mencionadas.
• Para la determinación de estructuras moleculares.
• La identificación de unidades estructurales especificas ya que estas tienen distintos tipos de absorbancia (grupos
funcionales o isomerías).
Cromatografía
La cromatografía es un metodo de separacion para la caracterizacion de mezclas complejas, la cual tiene aplicacion, en
todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo
es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos
componentes.
Las técnicas cromatográficas son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase móvil que consiste en un fluido (gas, líquido o fluido
supercrítico) que arrastra a la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido.
Anteriormente se utilizaban los metodos clasicos como lo son: la precipitación, extracción, decantación entre otros. aunque ahora en
la actualidad se utiliza la cromatografia electroforesis.
Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria y con la fase móvil. De este modo, los
componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando. Después de que los componentes hayan
pasado por la fase estacionaria, separándose, pasan por un detector que genera una señal que puede depender de la concentración y
del tipo de compuesto.
Electroforesis
La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico. La separación
puede realizarse sobre la superficie hidratada de un soporte sólido (p. ej., electroforesis en papel o en acetato de celulosa), o bien a
través de una matriz porosa (electroforesis en gel), o bien en disolución (electroforesis libre). Dependiendo de la técnica que se use,
la separación obedece en distinta medida a la carga eléctrica de las moléculas y a su masa.
La variante de uso más común para el análisis de mezclas de proteínas o de ácidos nucleicos utiliza como soporte un gel,
habitualmente de agarosa o de poliacrilamida. Los ácidos nucleicos ya disponen de una carga eléctrica negativa, que los dirigirá al

2. polo positivo, mientras que las proteínas se cargan al unirse con sustancias como el SDS (detergente) que incorpora cargas negativas
de una manera dependiente de la masa molecular de la proteína. Al poner la mezcla de moléculas y aplicar un campo eléctrico, éstas
se moverán y deberán ir pasando por la malla del gel (una red tridimensional de fibras cruzadas), por lo que las pequeñas se moverán
mejor, más rápidamente. Así, las más pequeñas avanzarán más y las más grandes quedarán cerca del lugar de partida.
Tamizado molecular
El Tamizado es un método físico para separar mezclas. Consiste en hacer pasar una mezcla de partículas sólidas de diferentes
tamaños por un tamiz o colador. Las partículas de menor tamaño pasan por los poros del tamiz atravesándolo y las grandes quedan
retenidas por el mismo.
Es un método muy sencillo utilizado generalmente en mezclas de sólidos heterogéneos, como piedras y arena, en la cual la arena
atravesará el tamiz y las piedras quedaran retenidas. Los orificios del tamiz suelen ser de diferentes tamaños y se utilizan deacuerdo al
tamaño de las partículas que contenga la mezcla.
Centrifugación
La centrifugación es un método por el cual se pueden separar sólidos de líquidos de diferente densidad mediante una
centrifugadora, la cual imprime a la mezcla un movimiento rotatorio con una fuerza mayor que la de la gravedad,
provocando la sedimentación de los sólidos o de las partículas de mayor densidad. Este es uno de los principios en los
que la densidad: Todas lículas, por posa, sectadas por cualquier y una extensa variedad de técnicas derivadas de esta.
Donde la fuerza es mayor a la gravedad.
Fundamento teórico: El objetivo de la centrifugación es separar partículas de diferentes características. Para ello, se aplica un fuerte
campo centrífugo, con lo cual las partículas tenderán a desplazarse a través del medio en el que se encuentren con la aceleración G.
G=velocidad angular2 x radio de giro. U otra formula es G=velocidad angular + radio
Vaso de precipitados
Un vaso de precipitados es un simple contenedor de líquidos, usado muy comúnmente en el laboratorio. Son
cilíndricos con un fondo plano; se les encuentra de varias capacidades, desde un mL hasta de varios litros.
Normalmente son de vidrio (Pyrex en su mayoría) o de plástico. Aquéllos cuyo objetivo es contener ácidos o químicos
corrosivos, tienen componentes de Teflon u otros materiales resistentes a la corrosión. Suelen estar graduados, pero
esta graduación es inexacta por la misma naturaleza del artefacto; su forma regular facilita que pequeñas variaciones en
la temperatura o incluso en el vertido pasen desapercibidas en la graduación. Es recomendable no utilizarlo para medir
volúmenes de sustancias, ya que es un material que se somete a cambios bruscos de temperatura, lo que lo descalibra
y en consecuencia nos entrega una medida errónea de la sustancia.
Este tal como su graduación es inexacta es comúnmente usado para transportar líquidos hacia otro recipiente como un probeta o a un
tubo de ensayo por un embudo.Son resistentes a los cambios bruscos de temperatura. Tiene múltiples usos en el laboratorio: calentar,
disolver, etc.
Aforo (química)
En química, un aforo es una marca circular grabada con precisión sobre el vidrio (o material que corresponda) del
material volumétrico para indicar que ese es el volumen determinado. Además, en el caso del material de doble aforo,
poseen una marca adicional; en este caso el volumen determinado es el comprendido entre ambos aforos.
Para llevar el líquido al volumen indicado por el aforo, es necesario saber cómo enrasar.
calibración de temperatura
La base del método de calibración consiste en la comparación, en el mismo punto de temperatura, del
termómetro a calibrar con una sonda calibrada por un laboratorio acreditado y considerada patrón primario.
Sensibilidad (instrumento de medida)
La sensibilidad de un instrumento se determina por la intensidad de corriente necesaria para producir una desviación completa de la
aguja indicadora a través de la escala. El grado de sensibilidad se expresa de dos maneras, según se trate de un amperímetro o de un
voltímetro.
En el primer caso, la sensibilidad del instrumento se indica por el número de amperios, miliamperios o microamperios que deben
fluir por la bobina para producir una desviación completa. Así, un instrumento que tiene una sensibilidad de 1 miliamperio, requiere
un miliamperio para producir dicha desviación, etcétera.

3. En el caso de un voltímetro, la sensibilidad se expresa de acuerdo con el número de ohmios por voltio, es decir, la resistencia del
instrumento. Para que un voltímetro sea preciso, debe tomar una corriente insignificante del circuito y esto se obtiene mediante alta
resitencia.
El número de ohmios por voltio de un voltímetro se obtiene dividiendo la resistencia total del instrumento entre el voltaje máximo
que puede medirse. Por ejemplo, un instrumento con una resistencia interna de 300000 ohmios y una escala para un máximo de 300
voltios, tendrá una sensibilidad de 1000 ohmios por voltio. Para trabajo general, los voltímetros deben tener cuando menos 1000
ohmios por voltio
capacidad
El volumen es una magnitud definida como el espacio ocupado por un cuerpo. Es una función derivada ya que se halla multiplicando
las tres dimensiones. En física, el volumen es una magnitud física extensiva asociada a la propiedad de los cuerpos físicos de ser
extensos, que a su vez se debe al principio de exclusión de Pauli. La unidad de medida de volumen en el Sistema Internacional de
Unidades es el metro cúbico, aunque temporalmente también acepta el litro, que se utiliza comúnmente en la vida práctica. V = m /
densidad
Precisión
En ingeniería, ciencia, industria y estadística, se denomina precisión a la capacidad de un instrumento de dar el
mismo resultado en mediciones diferentes realizadas en las mismas condiciones. Esta cualidad debe evaluarse a corto
plazo. No debe confundirse con exactitud ni con reproducibilidad.
Es un parámetro relevante, especialmente en la investigación de fenómenos físicos, ámbito en el cual los resultados se expresan como
un número más una indicación del error máximo estimado para la magnitud. Es decir, se indica una zona dentro de la cual está
comprendido el verdadero valor de la magnitud.
Exactitud
En ingeniería, ciencia, industria y estadística, se denomina exactitud a la capacidad de un instrumento de medir un valor cercano al
valor de la magnitud real.
Para laboratorio electrotecnia exactitud es cuando algo esta casi exacto nada sigue buscando normas... Suponiendo varias mediciones,
no estamos midiendo el error de cada una, sino la distancia a la que se encuentra la medida real de la media de las mediciones (cuán
calibrado está el aparato de medición).
Esta cualidad también se encuentra en instrumentos generadores de magnitudes físicas, siendo en este caso la capacidad del
instrumento de acercarse a la magnitud física real.
Por ejemplo, sí leemos la velocidad del velocímetro de un auto, esta tiene una precisión de 3 cifras significativas y una exactitud de 5
Kph
¿Qué es calibración?
Calibración es simplemente el procedimiento de comparación entre lo que indica un instrumento y lo que "debiera
indicar" de acuerdo a un patrón de referencia con valor conocido, Por ejemplo:
Valor de referencia = 1,08 mm, Valor indicado = 1,09 mm Dependiendo del instrumento, a veces la calibración incluye
un preajuste, por ejemplo, del valor cero.
Los resultados de la calibración son informados en un documento llamado Certificado de Calibración. Hay dos formas
de indicar los resultados:
- Como la corrección a aplicar, obtenida como Valor de referencia - Valor indicado. Para el ejemplo anterior la corrección
es -0,01 mm. - Como el error del instrumento: Valor indicado - Valor de referencia. Para el ejemplo anterior, el error es
0,01 mm.
El laboratorio puede informar los resultados de cualquiera de las dos maneras, siempre que al usuario le quede claro
cuál de los dos términos es el informado. A veces, la corrección es más conveniente pues, cuando el instrumento está
en servicio, la corrección en el punto calibrado debe sumarse algebraicamente al valor leído (en vez de restar) para
obtener el valor correcto.