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Juan Carlos Munévar N


                        1
ESTIMULO /
RESPUESTA CELULAR




          TRANSCRIPCION
             DE GENES
                          2
CONTENIDO.

INTRODUCCION.



         ADAPTACION.


                  GENERALIDADES.


                              EVENTOS
                            MOLECULARES
                                     3
CONTENIDO.

RECEPTORES
CELULARES.

          SEGUNDOS
         MENSAJEROS.

                   RESPUESTAS
                   CELULARES.


                        AUTOREGULACION.
                                    4
DEFINICION.

Mecanismo por el cual una célula responde a los
estímulos que recibe del medio ambiente mediante
difusión de esas señales hacia sus compartimentos
internos.



                                                           5
                                         Juan Carlos Munévar N
ESQUEMA GENERAL DE UN SISTEMA DE
     SEÑALIZACIÓN CELULAR



                          RECEPTOR




                         RESPUESTA




LIGANDO
                                             6
                           Juan Carlos Munévar N
ETAPAS DE LA COMUNICACIÓN CELULAR POR
              SEÑALES EXTRACELULARES


(1) Sintesís de la molécula señal.
(2) Liberación de la molécula señal
(3) Transporte de la señal a la célula blanco
(4) Deteccción de la señal por una proteína receptora especifica.
(5) Cambio en el metabolismo celular, en la función, o desarrollo
    desencadenado por el complejo señal – receptor.
(6) Remoción de la señal, lo cual termina usualmente la respuesta
    celular


                                                                         7
                                                       Juan Carlos Munévar N
8
BIOQUIMICO.         BIOFISICO.
   •FACTOR
   SOLUBLE.          •FUERZAS
                  BIOMECANICAS
 •INTERACCION
CELULA - CELULA   • TEMPERATURA
•INTERACCION        • PRESION
CELULA - M.E.C.
                  ATMOSFERICA
                                            9
                          Juan Carlos Munévar N
MECANISMO DE ACCION DE LA
        INSULINA




                        10
HIDROFÍLICAS: se unen a
                                  receptores de superficie.




HIDROFÓBA: tienen como ligandos
Receptores intracelulares.
                                                        11
HORMONAS.
                                •Esteroides.
     Receptores                 • Tiroxina.
   Intracelulares.
                             • Acido retinóico.
     • Hormonas
     Lipofílicas.             • Colecalciferol.
                             • Prostaglandinas
                                (Lipofílicas)
    Receptores
   Membranales.            • Hormonas peptidicas
                                (Hidrófilas).
• Hormonas Lipofílicas /
                           •Moléculas cargadas
      Hidrófilicas
                              (Hidrófilas).    12
                                        Juan Carlos Munévar N
SINTESIS, LIBERACION Y DEGRADACION DE HORMONAS.




                                           13
MOLECULA CAPAZ DE LIGAR ESPECIFICAMENTE
AL ESTIMULO EXTRACELULAR GENERANDO UNA
RESPUESTA EN LA CELULA DIANA.



 • MEMBRANALES         • INTRACELULARES



                                                14
                                Juan Carlos Munévar N
15
16
FUNCIONES.
                     EVENTOS
•COMPORTAMIENTO.
                   MOLECULARES
 •METABOLISMO.
                    • PROTEINAS.
  • MIGRACION.
                    • PROTEASAS.
 • PROLIFERACION
                    • CITOQUINAS.
 • CRECIMIENTO.
                    • EXPRESION
•DIFERENCIACION.     GENETICA.

                                          17
                          Juan Carlos Munévar N
18
TRANSDUCCION DE SEÑALES:
Mecanismo molecular por medio del cual el
estímulo recibido por el RECEPTOR CELULAR es
interpretado como SEÑAL INTRACELULAR.




                                                      19
                                      Juan Carlos Munévar N
SEÑALIZACION INTERCELULAR
SEÑALIZACION INTERCELULAR


INTRACRINA.
INTRACRINA.        PARACRINA.
                   PARACRINA.

AUTOCRINA.
AUTOCRINA.         SINAPTICA.
                   SINAPTICA.


   ENDOCRINA.   COMBINATORIA


                                          20
                          Juan Carlos Munévar N
21
MECANISMO.       SEÑAL.

 ENDOCRINA.     HORMONA.

 PARACRINA.    Neurotransmisor

                 Factores de
 AUTOCRINA.      crecimiento

 INTRACRINA.    Quemoquinas.

 SINAPTICA.    Neurotransmisor

                                       22
                       Juan Carlos Munévar N
PROCESO
RECEPTOR.   DE SEÑALIZACION

  LENTA.     PROTEINA G.

  RAPIDA.     PROTEINAS
            DE QUIMIOTAXIS


                                     23
                     Juan Carlos Munévar N
Mecanismo reversible de regulación de la sensibilidad
            de una célula al estímulo.


 Disminución progresiva del número de receptores (Lenta)



      Rápida inactivación de receptores. (minutos)



   Modificaciones de los 2dos mensajeros (Intermedio)

                                                             24
                                             Juan Carlos Munévar N
Membranales
    •Acoplados a
    Proteínas G.
                         Intracelulares.
  • Canales Iónicos       •Hormonas
                          Lipofílicas.
  • Tirosin - quinasa
• Actividad Enzimática
      Intrínseca.
                                                   25
                                   Juan Carlos Munévar N
26
27
RECEPTORES ACOPLADOS A PROTEINAS G




Los receptores acoplados a proteínas G están implicados en
  varias vías de señalización: detección de la luz y olores,
               hormonas y neurotransmisores                  28
LAS PROTEINAS G




                  29
30
31
32
MOLECULAS DE SEÑALIZACION
         INTRACELULAR


 Nucleótidos cíclicos o productos de hidrólisis
lipídica sintetizados por ciclasas o fosfolipasas
           asociadas a la membrana.


                                                        33
                                        Juan Carlos Munévar N
SEGUNDOS MENSAJEROS.

3’ 5’ cAMP

3’5’ cGMP
                      IP 3
1,2 DAG
                     Ca 2


                 Fosfolípidos
                  de inositol34
                   Juan Carlos Munévar N
FOSFOLIPÍDOS DE INOSITOL.


Fosfolipasa C   Fosfatidilinositol
                 4,5 bisfosfato.
   4 Formas
  enzimáticas

 , , ,       IP 3     1,2 DAG


                                           35
                           Juan Carlos Munévar N
FOSFOLIPASA                  D.


Fosfatidilcolina                     1,2 DAG
                    Fosfolipasa D


 • Rc (Proteínas G)
  • Ca 2 citosólico
 •Agonistas de PKC
                               Fosfolipasa D
    •Proteínas G.
                                                         36
                                         Juan Carlos Munévar N
ADENILATO CICLASA.
 Complejo
Ligando / Rc
        Proteína Gs
                      Adenil ciclasa

                      ATP             c AMP


                                             37
                             Juan Carlos Munévar N
ADENILATO CICLASA.
 Complejo
Ligando / Rc
       Proteína Gs
                      Adenil ciclasa
                                         PDE

                         c AMP
 Proteína Quinasa A
                                        AMP

                                             38
                             Juan Carlos Munévar N
LA ADENILCICLASA ES ESTIMULADA E INHIBIDA POR
   DISTINTOS COMPLEJOS LIGANDO / RECEPTOR




                                          39
PROTEINAS                 CINASAS.

                                         Proteínas Blanco:
1. Proteínas Tirosina quinasas.
                                   • Factores de Transcripción.
2. Proteínas Ser / Tre quinasas.
                                             • Enzimas.
                                     • Proteínas de Transporte

   • Proteína Quinasa A
   •Proteína Quinasa C               1. Conformación.
• Proteínas Quinasas Ca2 /              2. Función.
       Calmodulina.
                                                                  40
                                                  Juan Carlos Munévar N
PROTEINAS FOSFATASAS.

Fosfatasas Ser / Tre:                   Sustratos:
    •Fosfatasa 1                         • P.K C
  •Fosfatasa 2B                  • PK A (reguladora)
   •Fosfatasa 2A                         • P.K C
   •Fosfatasa 2C                     • Inhibidor 1.


        Desfosforilan residuos Ser / Tre o Tir de
                    Quinasas activas


                                                                41
                                                Juan Carlos Munévar N
Proceso de señalización:
• Síntesis y liberación del Estímulo
• Reconocimiento del Estímulo por el Receptor.
• Difusión de la señal a través del plasmalema.
• Transmisión y amplificación de la señal (2dos mensajeros)
• Llegada de la señal al organelo diana (Respuesta celular)
• Inactivación o degradación de la señal (Cese de la respuesta)




                                                   Juan Carlos Munévar N
43
44
Toll
          • Rc. esencial en                  Superfamilia de IL-1R
      embriogénesis de insectos
• Respuesta inmune innata en insectos
  • Homólogos de Toll en mamíferos         • Mamíferos: 10 miembros TLR
                                         • Homología en región citoplásmica


                                        • Región conservada de ~ 200 a.a.



                                                  Dominio TIR
                                                  (Toll/IL-1R)
                                                                         45
                                                         Juan Carlos Munévar N
46
Juan Carlos Munévar N
IL-1R / TLR


          • MyD88
           (adaptador)
          • IRAKs
   (IL-1RI associated kinases)
           • TAK1
    (TGFB activated kinase)
         • TAB1 / 2
     (TAK binding protein)
          • TRAF6
(TNF receptor associated factor 6)

                                                         47
                                         Juan Carlos Munévar N
48
AUTOREGULACION
El comportamiento celular no está simplemente
gobernado por una sola VIA DE SEÑALIZACION


     Feedback                   Cross - talk


 Retroalimentación            Intercomunicación


 Vía de señalización         Vías de señalización


                                                         49
                                         Juan Carlos Munévar N
RETROALIMENTACION


A nivel:             Receptor
• RECEPTOR.
                       Afinidad.
• ENZIMAS.
                        Número.
• 2dos MENSAJEROS.
                     Internalización




                                              50
                              Juan Carlos Munévar N
RETROALIMENTACION

                              Feedback negativo
Vía D.A.G / P.K.C.
                              • SECUESTRO
                              DEL RECEPTOR
 Esteres de Forbol


Rc 1 adrenérgicos             P.K.C
                     D.A.G.
                                                       51
                                       Juan Carlos Munévar N
FEEDBACK ENZIMATICO.

                            Feedback negativo
                            •   ENZIMA
Esteres de Forbol


Rc CELULARES
                                    P.K.C
                    PLC 
                        P                ATP

    PLC 
              P

                                                     52
                                     Juan Carlos Munévar N
RETROALIMENTACION.

                          Quinasa
                      Ca2/ Calmodulina
Feedback negativo                          P
•   2dos mensajeros                  Rc IP3


                          < [Ca 2]


                                                      53
                                      Juan Carlos Munévar N
COMUNICACIÓN             RECIPROCA.

LA RESPUESTA CELULAR A DIFERENTES ESTIMULOS
EXTRACELULARES SE INTEGRAN POR MECANISMOS
DE COMUNICACIÓN CRUZADA (CROSS - TALK) ENTRE
 VARIAS VIAS DE TRANSDUCCION DE SEÑALES.



                  CROSS TALK:
          MECANISMOS DE FOSFORILACION



                                                    54
                                    Juan Carlos Munévar N
RETROALIMENTACION.
Complejo
PDGF/ Rc
    P                D.A.G / I.P 3
        PLC 
                P


                        [Ca 2]
Proteína Quinasa C


                                             55
                             Juan Carlos Munévar N
RETROALIMENTACION.
Complejo
                           •Actividad
PDGF/ Rc                Tirosin quinasa
P                    •Afinidad por PDGF
                     • Internalización Rc.
        PLC 
                 P

                             [Ca 2]
Proteína Quinasa C


                                                  56
                                  Juan Carlos Munévar N
ADENILATO CICLASA.
 Complejo
Ligando / Rc
       Proteína Gs
                      Adenil ciclasa
                                         PDE

                         c AMP
 Proteína Quinasa A
                                        AMP

                                             57
                             Juan Carlos Munévar N
CROSS TALK.

Ligando / Rc
                                D.A.G / I.P 3
         P. Gs      ADC

                          PDE      > [Ca 2]

   P.K. A         c AMP

                          AMP     < c AMP

                                                     58
                                     Juan Carlos Munévar N
Juan Carlos Munévar N
60
REGULACION DE LA EXPRESION DE GENES.


        1. Estructura de la cromatina
      2. Inicio de la transcripción
3. Procesamiento y modificación del transcrito
            4. Transporte del ARNm
          5. Estabilidad del transcrito
            6. Inicio de la traducción
    7. Modificaciones post - traduccionales
           8. Transporte de proteínas
      9. Control de la estabilidad proteíca

                                                         61
                                        Juan Carlos Munévar N
Factor de Transcripción activado por:   Heterodímero inactivo en el citosol:
               Citocinas                     2 subunidades p50 / p65
                                          asociado con un inhibidor IkB
          Esteres de forbol
       Factores de crecimiento
          Lipopolisacáridos
                 TNF
           Ácido Okadaico
         Análogos de AMPc

   p50 / p65
Poseen dominios que reconocen motivos
        específicos de ADN.
                                                                      62
Factor de Transcripción con dominios que
  reconocen motivos específicos de ADN.


La disociación del complejo p50 / p65 / IkB:
                                                    IkB
                                                Inactivado por PKC / PKA
                                               Fosforilación / Desfosforilación
NFkB se transloque al núcleo


        Motivo kB en el ADN




  5’-GGGPuNNPiPiCC-3’

Secuencias promotoras / enhancers
                                                                           63
Genes con motivo kB
                                             • IL-6

  Regula:                              Linfocitos T y B
  ♣ Expresión de citocinas
                                       • Interferón B


                             Actividad antiviral / antiproliferativa

  •Proliferación celular
                                           • GM-CSF
  • Diferenciación celular
  • Respuesta inflamatoria   Activación de neutrófilos, macrófagos
  • Respuesta inmune
Sensible a estímulos que señalan un proceso infeccioso
                                                 64
La transcripción de genes activados por el
 AMPc está regulada por FACTORES DE
TRANSCRIPCION que se unen al elemento de
         respuesta CRE en el ADN.



CRE: AMPc response element.

                                                        65
                                     Juan Carlos Munévar N
GENES CON MOTIVO C.R.E.

                1. Tiroxina hidroxilasa
                2. Somatostatina


          1. Enzimas metabolismo intermedio
          2. Péptidos Bioactivos.
          3. Fibronectina plasmática.
          4. Proto oncogen c-fos




                              Juan Carlos Munévar N
MOTIVO C.R.E.

    Elementos de respuesta           Motivos octaméricos
    al AMPc del ADN                  Secuencia CONSENSUS:
                                        5’-TGACGTCA - 3’


                                           Localización:
CREB: CRE BINDING PROTEINS.
                                           1. Núcleo celular.
Factores de transcripción de genes
                                           2. Fosforilados por PKA
que poseen el motivo C.R.E.


                                                     Juan Carlos Munévar N
MECANISMO DE ACCION.
  > [cAMP]° inducen la translocación de la
        subunidad catalítica P.K. A



1. La P.K. A fosforila las proteínas CREB.
2. Factores de Transcripción se une a C.R.E.
3. TRANSCRIPCION DE GEN ESPECIFICO



                                      Juan Carlos Munévar N
EXPRESION DE GENES.

Los factores de transcripción C.R.E.B pueden ser
fosforilados por:
1. P.K.A             (Células mesenquimatosas.)
2. Quinasas I y II Ca2/Calmodulina (Neuronas.)



  Transcripción de genes distintos.


                                                          69
                                          Juan Carlos Munévar N
FACTOR                                   MOTIVO                            INFORMACION
                                                                   C-Myc: oncogen retroviral, se asocia
             C-Myc / Max                               CACGTG
                                                                                  con Max.
                                                                           Oncogenes retrovirales
             c-Fos / c-Jun                          TGAC/GTC/AA
                                                                                Factor AP-1
                                                                     Une a CRE, familia de al menos 10
                 CREB                             TGACGC/7C/AG/A
                                                                        factores, dímeros con c-Jun
                                                                     Oncogen retroviral, miembro de la
 C-ErbA; (TR: Receptor de la
                                                 G/CA/CGGAA/TGT/C superfamilia de receptores hormonales
     hormona Tiroidea)
                                                                             esteroides/tiroides
                                                                   Oncogen retroviral predominante en
                  C-Ets                          G/CA/CGGAA/TGT7C
                                                                                células B y T
                                                                  Familia de factores específicos de líneas
                 GATA                                  T/AGATA
                                                                                  eritroides
                                                                  Oncogen retroviral, factor especifico de
                 C-Myb                               T/CAACG/TG
                                                                          células hematopoyéticas
                                                                  c-Rel: Oncogen retroviral, predominan
            NFkB & c-Rel                          GGGAA/CTNT/CCC
                                                                              en células B y T
                                                                  Une elementos RARES, así como sitios
                  RAR                             ACGTCATGACCT
                                                                                c-Jun / c-Fos
                                                                      Presente en genes inducibles por
                                                GGATGTTCCATATTAGG
  SRF (Serum response factor)                                       factores de crecimiento presentes en
                                                       ACATCT
                                                                                    suero
                                                                              Activación por proteínas quinasa. El motivo ISRE
ISGF3 (Interferon  stimulated gene factor 3)      A/GGAAAA/GNGAAACT                                                 70
                                                                                  presente en genes de respuesta antiviral y
                                                                                                antitumoral
                                                      Juan Carlos Munévar N
71
RESIDENTES

Esto es una simple introducción, deben profundizar
más …

Juan Carlos Munévar N




                                                 72

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  • 2. ESTIMULO / RESPUESTA CELULAR TRANSCRIPCION DE GENES 2
  • 3. CONTENIDO. INTRODUCCION. ADAPTACION. GENERALIDADES. EVENTOS MOLECULARES 3
  • 4. CONTENIDO. RECEPTORES CELULARES. SEGUNDOS MENSAJEROS. RESPUESTAS CELULARES. AUTOREGULACION. 4
  • 5. DEFINICION. Mecanismo por el cual una célula responde a los estímulos que recibe del medio ambiente mediante difusión de esas señales hacia sus compartimentos internos. 5 Juan Carlos Munévar N
  • 6. ESQUEMA GENERAL DE UN SISTEMA DE SEÑALIZACIÓN CELULAR RECEPTOR RESPUESTA LIGANDO 6 Juan Carlos Munévar N
  • 7. ETAPAS DE LA COMUNICACIÓN CELULAR POR SEÑALES EXTRACELULARES (1) Sintesís de la molécula señal. (2) Liberación de la molécula señal (3) Transporte de la señal a la célula blanco (4) Deteccción de la señal por una proteína receptora especifica. (5) Cambio en el metabolismo celular, en la función, o desarrollo desencadenado por el complejo señal – receptor. (6) Remoción de la señal, lo cual termina usualmente la respuesta celular 7 Juan Carlos Munévar N
  • 8. 8
  • 9. BIOQUIMICO. BIOFISICO. •FACTOR SOLUBLE. •FUERZAS BIOMECANICAS •INTERACCION CELULA - CELULA • TEMPERATURA •INTERACCION • PRESION CELULA - M.E.C. ATMOSFERICA 9 Juan Carlos Munévar N
  • 10. MECANISMO DE ACCION DE LA INSULINA 10
  • 11. HIDROFÍLICAS: se unen a receptores de superficie. HIDROFÓBA: tienen como ligandos Receptores intracelulares. 11
  • 12. HORMONAS. •Esteroides. Receptores • Tiroxina. Intracelulares. • Acido retinóico. • Hormonas Lipofílicas. • Colecalciferol. • Prostaglandinas (Lipofílicas) Receptores Membranales. • Hormonas peptidicas (Hidrófilas). • Hormonas Lipofílicas / •Moléculas cargadas Hidrófilicas (Hidrófilas). 12 Juan Carlos Munévar N
  • 13. SINTESIS, LIBERACION Y DEGRADACION DE HORMONAS. 13
  • 14. MOLECULA CAPAZ DE LIGAR ESPECIFICAMENTE AL ESTIMULO EXTRACELULAR GENERANDO UNA RESPUESTA EN LA CELULA DIANA. • MEMBRANALES • INTRACELULARES 14 Juan Carlos Munévar N
  • 15. 15
  • 16. 16
  • 17. FUNCIONES. EVENTOS •COMPORTAMIENTO. MOLECULARES •METABOLISMO. • PROTEINAS. • MIGRACION. • PROTEASAS. • PROLIFERACION • CITOQUINAS. • CRECIMIENTO. • EXPRESION •DIFERENCIACION. GENETICA. 17 Juan Carlos Munévar N
  • 18. 18
  • 19. TRANSDUCCION DE SEÑALES: Mecanismo molecular por medio del cual el estímulo recibido por el RECEPTOR CELULAR es interpretado como SEÑAL INTRACELULAR. 19 Juan Carlos Munévar N
  • 20. SEÑALIZACION INTERCELULAR SEÑALIZACION INTERCELULAR INTRACRINA. INTRACRINA. PARACRINA. PARACRINA. AUTOCRINA. AUTOCRINA. SINAPTICA. SINAPTICA. ENDOCRINA. COMBINATORIA 20 Juan Carlos Munévar N
  • 21. 21
  • 22. MECANISMO. SEÑAL. ENDOCRINA. HORMONA. PARACRINA. Neurotransmisor Factores de AUTOCRINA. crecimiento INTRACRINA. Quemoquinas. SINAPTICA. Neurotransmisor 22 Juan Carlos Munévar N
  • 23. PROCESO RECEPTOR. DE SEÑALIZACION LENTA. PROTEINA G. RAPIDA. PROTEINAS DE QUIMIOTAXIS 23 Juan Carlos Munévar N
  • 24. Mecanismo reversible de regulación de la sensibilidad de una célula al estímulo. Disminución progresiva del número de receptores (Lenta) Rápida inactivación de receptores. (minutos) Modificaciones de los 2dos mensajeros (Intermedio) 24 Juan Carlos Munévar N
  • 25. Membranales •Acoplados a Proteínas G. Intracelulares. • Canales Iónicos •Hormonas Lipofílicas. • Tirosin - quinasa • Actividad Enzimática Intrínseca. 25 Juan Carlos Munévar N
  • 26. 26
  • 27. 27
  • 28. RECEPTORES ACOPLADOS A PROTEINAS G Los receptores acoplados a proteínas G están implicados en varias vías de señalización: detección de la luz y olores, hormonas y neurotransmisores 28
  • 30. 30
  • 31. 31
  • 32. 32
  • 33. MOLECULAS DE SEÑALIZACION INTRACELULAR Nucleótidos cíclicos o productos de hidrólisis lipídica sintetizados por ciclasas o fosfolipasas asociadas a la membrana. 33 Juan Carlos Munévar N
  • 34. SEGUNDOS MENSAJEROS. 3’ 5’ cAMP 3’5’ cGMP IP 3 1,2 DAG Ca 2 Fosfolípidos de inositol34 Juan Carlos Munévar N
  • 35. FOSFOLIPÍDOS DE INOSITOL. Fosfolipasa C Fosfatidilinositol 4,5 bisfosfato. 4 Formas enzimáticas , , ,  IP 3 1,2 DAG 35 Juan Carlos Munévar N
  • 36. FOSFOLIPASA D. Fosfatidilcolina 1,2 DAG Fosfolipasa D • Rc (Proteínas G) • Ca 2 citosólico •Agonistas de PKC Fosfolipasa D •Proteínas G. 36 Juan Carlos Munévar N
  • 37. ADENILATO CICLASA. Complejo Ligando / Rc Proteína Gs Adenil ciclasa ATP c AMP 37 Juan Carlos Munévar N
  • 38. ADENILATO CICLASA. Complejo Ligando / Rc Proteína Gs Adenil ciclasa PDE c AMP Proteína Quinasa A AMP 38 Juan Carlos Munévar N
  • 39. LA ADENILCICLASA ES ESTIMULADA E INHIBIDA POR DISTINTOS COMPLEJOS LIGANDO / RECEPTOR 39
  • 40. PROTEINAS CINASAS. Proteínas Blanco: 1. Proteínas Tirosina quinasas. • Factores de Transcripción. 2. Proteínas Ser / Tre quinasas. • Enzimas. • Proteínas de Transporte • Proteína Quinasa A •Proteína Quinasa C 1. Conformación. • Proteínas Quinasas Ca2 / 2. Función. Calmodulina. 40 Juan Carlos Munévar N
  • 41. PROTEINAS FOSFATASAS. Fosfatasas Ser / Tre: Sustratos: •Fosfatasa 1 • P.K C •Fosfatasa 2B • PK A (reguladora) •Fosfatasa 2A • P.K C •Fosfatasa 2C • Inhibidor 1. Desfosforilan residuos Ser / Tre o Tir de Quinasas activas 41 Juan Carlos Munévar N
  • 42. Proceso de señalización: • Síntesis y liberación del Estímulo • Reconocimiento del Estímulo por el Receptor. • Difusión de la señal a través del plasmalema. • Transmisión y amplificación de la señal (2dos mensajeros) • Llegada de la señal al organelo diana (Respuesta celular) • Inactivación o degradación de la señal (Cese de la respuesta) Juan Carlos Munévar N
  • 43. 43
  • 44. 44
  • 45. Toll • Rc. esencial en Superfamilia de IL-1R embriogénesis de insectos • Respuesta inmune innata en insectos • Homólogos de Toll en mamíferos • Mamíferos: 10 miembros TLR • Homología en región citoplásmica • Región conservada de ~ 200 a.a. Dominio TIR (Toll/IL-1R) 45 Juan Carlos Munévar N
  • 47. IL-1R / TLR • MyD88 (adaptador) • IRAKs (IL-1RI associated kinases) • TAK1 (TGFB activated kinase) • TAB1 / 2 (TAK binding protein) • TRAF6 (TNF receptor associated factor 6) 47 Juan Carlos Munévar N
  • 48. 48
  • 49. AUTOREGULACION El comportamiento celular no está simplemente gobernado por una sola VIA DE SEÑALIZACION Feedback Cross - talk Retroalimentación Intercomunicación Vía de señalización Vías de señalización 49 Juan Carlos Munévar N
  • 50. RETROALIMENTACION A nivel: Receptor • RECEPTOR. Afinidad. • ENZIMAS. Número. • 2dos MENSAJEROS. Internalización 50 Juan Carlos Munévar N
  • 51. RETROALIMENTACION Feedback negativo Vía D.A.G / P.K.C. • SECUESTRO DEL RECEPTOR Esteres de Forbol Rc 1 adrenérgicos P.K.C D.A.G. 51 Juan Carlos Munévar N
  • 52. FEEDBACK ENZIMATICO. Feedback negativo • ENZIMA Esteres de Forbol Rc CELULARES P.K.C PLC  P ATP PLC  P 52 Juan Carlos Munévar N
  • 53. RETROALIMENTACION. Quinasa Ca2/ Calmodulina Feedback negativo P • 2dos mensajeros Rc IP3 < [Ca 2] 53 Juan Carlos Munévar N
  • 54. COMUNICACIÓN RECIPROCA. LA RESPUESTA CELULAR A DIFERENTES ESTIMULOS EXTRACELULARES SE INTEGRAN POR MECANISMOS DE COMUNICACIÓN CRUZADA (CROSS - TALK) ENTRE VARIAS VIAS DE TRANSDUCCION DE SEÑALES. CROSS TALK: MECANISMOS DE FOSFORILACION 54 Juan Carlos Munévar N
  • 55. RETROALIMENTACION. Complejo PDGF/ Rc P D.A.G / I.P 3 PLC  P [Ca 2] Proteína Quinasa C 55 Juan Carlos Munévar N
  • 56. RETROALIMENTACION. Complejo •Actividad PDGF/ Rc Tirosin quinasa P •Afinidad por PDGF • Internalización Rc. PLC  P [Ca 2] Proteína Quinasa C 56 Juan Carlos Munévar N
  • 57. ADENILATO CICLASA. Complejo Ligando / Rc Proteína Gs Adenil ciclasa PDE c AMP Proteína Quinasa A AMP 57 Juan Carlos Munévar N
  • 58. CROSS TALK. Ligando / Rc D.A.G / I.P 3 P. Gs ADC PDE > [Ca 2] P.K. A c AMP AMP < c AMP 58 Juan Carlos Munévar N
  • 60. 60
  • 61. REGULACION DE LA EXPRESION DE GENES. 1. Estructura de la cromatina 2. Inicio de la transcripción 3. Procesamiento y modificación del transcrito 4. Transporte del ARNm 5. Estabilidad del transcrito 6. Inicio de la traducción 7. Modificaciones post - traduccionales 8. Transporte de proteínas 9. Control de la estabilidad proteíca 61 Juan Carlos Munévar N
  • 62. Factor de Transcripción activado por: Heterodímero inactivo en el citosol: Citocinas 2 subunidades p50 / p65 asociado con un inhibidor IkB Esteres de forbol Factores de crecimiento Lipopolisacáridos TNF Ácido Okadaico Análogos de AMPc p50 / p65 Poseen dominios que reconocen motivos específicos de ADN. 62
  • 63. Factor de Transcripción con dominios que reconocen motivos específicos de ADN. La disociación del complejo p50 / p65 / IkB: IkB Inactivado por PKC / PKA Fosforilación / Desfosforilación NFkB se transloque al núcleo Motivo kB en el ADN 5’-GGGPuNNPiPiCC-3’ Secuencias promotoras / enhancers 63
  • 64. Genes con motivo kB • IL-6 Regula: Linfocitos T y B ♣ Expresión de citocinas • Interferón B Actividad antiviral / antiproliferativa •Proliferación celular • GM-CSF • Diferenciación celular • Respuesta inflamatoria Activación de neutrófilos, macrófagos • Respuesta inmune Sensible a estímulos que señalan un proceso infeccioso 64
  • 65. La transcripción de genes activados por el AMPc está regulada por FACTORES DE TRANSCRIPCION que se unen al elemento de respuesta CRE en el ADN. CRE: AMPc response element. 65 Juan Carlos Munévar N
  • 66. GENES CON MOTIVO C.R.E. 1. Tiroxina hidroxilasa 2. Somatostatina 1. Enzimas metabolismo intermedio 2. Péptidos Bioactivos. 3. Fibronectina plasmática. 4. Proto oncogen c-fos Juan Carlos Munévar N
  • 67. MOTIVO C.R.E. Elementos de respuesta Motivos octaméricos al AMPc del ADN Secuencia CONSENSUS: 5’-TGACGTCA - 3’ Localización: CREB: CRE BINDING PROTEINS. 1. Núcleo celular. Factores de transcripción de genes 2. Fosforilados por PKA que poseen el motivo C.R.E. Juan Carlos Munévar N
  • 68. MECANISMO DE ACCION. > [cAMP]° inducen la translocación de la subunidad catalítica P.K. A 1. La P.K. A fosforila las proteínas CREB. 2. Factores de Transcripción se une a C.R.E. 3. TRANSCRIPCION DE GEN ESPECIFICO Juan Carlos Munévar N
  • 69. EXPRESION DE GENES. Los factores de transcripción C.R.E.B pueden ser fosforilados por: 1. P.K.A (Células mesenquimatosas.) 2. Quinasas I y II Ca2/Calmodulina (Neuronas.) Transcripción de genes distintos. 69 Juan Carlos Munévar N
  • 70. FACTOR MOTIVO INFORMACION C-Myc: oncogen retroviral, se asocia C-Myc / Max CACGTG con Max. Oncogenes retrovirales c-Fos / c-Jun TGAC/GTC/AA Factor AP-1 Une a CRE, familia de al menos 10 CREB TGACGC/7C/AG/A factores, dímeros con c-Jun Oncogen retroviral, miembro de la C-ErbA; (TR: Receptor de la G/CA/CGGAA/TGT/C superfamilia de receptores hormonales hormona Tiroidea) esteroides/tiroides Oncogen retroviral predominante en C-Ets G/CA/CGGAA/TGT7C células B y T Familia de factores específicos de líneas GATA T/AGATA eritroides Oncogen retroviral, factor especifico de C-Myb T/CAACG/TG células hematopoyéticas c-Rel: Oncogen retroviral, predominan NFkB & c-Rel GGGAA/CTNT/CCC en células B y T Une elementos RARES, así como sitios RAR ACGTCATGACCT c-Jun / c-Fos Presente en genes inducibles por GGATGTTCCATATTAGG SRF (Serum response factor) factores de crecimiento presentes en ACATCT suero Activación por proteínas quinasa. El motivo ISRE ISGF3 (Interferon  stimulated gene factor 3) A/GGAAAA/GNGAAACT 70 presente en genes de respuesta antiviral y antitumoral Juan Carlos Munévar N
  • 71. 71
  • 72. RESIDENTES Esto es una simple introducción, deben profundizar más … Juan Carlos Munévar N 72