Fundamentos Biología Molecular 2013

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Fundamentos Biología Molecular 2013. Unidad de investigación Básica Oral. Universidad El Bosque

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Fundamentos Biología Molecular 2013

  1. 1. BIOLOGIA ORAL JUAN CARLOS MUNEVAR. Odontólogo PROFESOR ASOCIADO Unidad de Investigación Básica Oral. U.I.B.O UNIVERSIDAD EL BOSQUE. Postgrado en Biología Oral. MSc Maestría en Ciencias Básicas Biomédicas D.E.A Biología Ósea. Especialista en Bioética Especialista en Docencia Universitaria.
  2. 2. ANTECEDENTES HISTORICOS En 1665, Robert Hooke reportó por primera vez el descubrimiento de las células Observó el aspecto del corcho al microscopio y uso el término célula para describir los compartimentos que observó. Célula en griego significa “celda vacía” Casi 200 años después se estableció que los animales y las plantas estaban compuestos por células. Mathias Schleiden en 1838, mediante sus investigaciones determinó que las plantas estaban formadas por células y que el embrión de la planta se derivaba de una célula única. Theodor Schwann en 1839, publicó “las bases celulares de la vida animal” en el cual propuso: Los tejidos estaban formados por células, concluyó que todas las células son estructuras análogas, y que son las unidades funcionales de los organismos vivos © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  3. 3. ANTECEDENTES HISTORICOS En 1839, Theodor Schwann estableció la “TEORIA CELULAR”, la base para el inicio del análisis de la estructura y función celular. Una célula animal tiene en promedio de 10 – 20 µm de diámetro (los oocitos maduros pueden tener más de 100 µm) EL MICROSCOPIO OPTICO (MO) permite observar células y estructuras subcelulares hasta de 2 µm de diámetro Descubrimientos destacados al MO 1661, Kepler sugirió fabricar un microscopio compuesto 1665, Hooke utilizó un microscopio compuesto para descubrir las células 1674, Leeuwenhoek descubrió los protozoos. 9 años después observó una bacteria por primera vez. 1833, Brown observó los núcleos de las células. 1838, Schleiden y 1839 Schwann propusieron la teoría celular, células con núcleos son la unidad estructural y funcional de organismos vivos.
  4. 4. Descubrimientos destacados al MO 1857, Kolliker describió las mitocondrias de las células musculares. 1879, Flemming describió el comportamiento de los cromosomas durante la mitosis. 1881, Retzius y Cajal describieron los tejidos animales y dieron las bases de métodos de coloración para MO. 1882, Koch identificó las bacterias que causan tuberculosis y el cólera. En las 2 décadas siguientes Klebs y Pasteur, identificaron varios agentes que causan enfermedades infecciosas. 1886, Zeiss fabricó una serie de lentes, según el diseño de Abbé mejorando la resolución de los MO. 1898, Golgi describió el organelo celular al cual se le dio su nombre. 1924, Lacassagne y col, desarrollaron el primer método de auto radiografía en biología. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  5. 5. Descubrimientos destacados al MO 1930, Lebedeff y 1932 Zernicke inventaron el microscopio de interferencia y el de contraste de fase que permiten observar células vivas. 1941, Coons utilizó anticuerpos acoplados a la fluoresceína para detectar antígenos celulares. 1952, Nomarski inventó el sistema de contraste por interferencia diferencial para el MO. 1981, Allen e Inoué perfeccionaron el contraste en video para el MO. 1988, se comercializó el MO confocal de barrido. Para observar estructuras más pequeñas se debió esperar:  El invento del microscopio electrónico (ME) en 1931 por Ruska y col.  El mejoramiento de las técnicas de preparación de las células para observarlas por Pease y Baker en 1948. El ME permite observar estructuras hasta de 2 nm de diámetro.
  6. 6. Descubrimientos destacados al ME 1897, Thomson anunció la existencia de partículas cargadas negativamente que mas tarde se conocieron como electrones 1931, Ruska y col. construyeron el primer ME de transmisión. 1939, Siemens produjo comercialmente el primer MET. 1948, Pease y Baker prepararon cortes finos (0,1 – 0,2 µm de espesor) de material biológico. 1952, Palade, Porter, Sjostrand y Huxley desarrollaron métodos de fijación y cortes finos de los tejidos que permitieron observar estructuras intracelulares. 1957, Robertson observó y describió por primera vez la estructura trilaminar de la membrana plasmática. 1959, Singer utilizó anticuerpos acoplados a la ferritina para detectar moléculas celulares al ME. Brenner y Horne desarrollaron la técnica de coloración negativa para observar virus, bacterias y proteínas filamentosas. 1965, Cambridge Instruments produjo comercialmente el MEB. 1979, Heuser, Reese y col. Desarrollaron una técnica de alta resolución, deep- etching utilizando tejido congelado. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  7. 7. BIOLOGIA MOLECULAR © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  8. 8. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  9. 9. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  10. 10. Historia del ADN • Inicialmente los científicos consideraron que las proteínas eran el material hereditario de la célula pues son más complejas que el ADN Las Proteínas estaban constituidas de 20 aminoácidos diferentes en largas cadenas polipéptidicas. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  11. 11. Transformación • Fred Griffith trabajo con cepas de Pneumoccocus virulentas S y no virulentas R. • Encontro que la cepa R podría volverse virulenta cuando captaba ADN de la cepa S atenuada por calor El estudio sugería que el ADN posiblemente era el material genético © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  12. 12. Experimento de Griffith © Dr. Juan Carlos Munévar Niño National Library of Medicine
  13. 13. • Los Cromosomas están constituidos de ADN y Proteínas • Experimentos con bacteriofagos por Hershey & Chase demostraron que el ADN era el material genético de la célula. 32P radioactivo fue inyectado en la bacteria! © Dr. Juan Carlos Munévar Niño Historia del ADN
  14. 14. Descubrimiento de la estructura del ADN • Erwin Chargaff demostró las proporciones de las cuatro bases nitrogenadas en el ADN (A,T,C,G) • En una célula somática: A = 30.3% T = 30.3% G = 19.5% C = 19.9% © Dr. Juan Carlos Munévar Niño National Library of Medicine
  15. 15. Reglas de Chargaff • Adenina debe aparearse con Timina • Guanina debe aparearse con Citosina • Las bases nitrogenadas forman puentes de hidrógeno G CT A © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  16. 16. • Rosalind Franklin tomo fotografías de difracción de rayos X del ADN Estructura del ADN © Dr. Juan Carlos Munévar Niño En 1950, Watson & Crick construyerón el primer modelo de ADN empleando el metodo de difracción de Rosalind Franklin
  17. 17. Ácidos nucleícos • El acido Desoxirribonucleico (ADN) contiene la información que codifica la secuencia de aminoácidos de las proteínas. • Esta información esta organizada en unidades denominadas genes. • El ácido ribonucleico (ARN) participa en la maquinaria celular que selecciona y relaciona los aminoácidos en la secuencia correcta • El Dogma central: DNA  RNA  Proteína • El ADN y ARN son polímeros de subunidades de nucleótidos © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  18. 18. Los nucleótidos presentan una estructura común © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  19. 19. Existen 5 bases nitrogenadas en los ácidos nucleícos A, G, T, C presentes en ADN A, G, U, C presentes en ARN
  20. 20. Los Nucleótidos están unidos mediante enlaces fosfodiéster © Dr. Juan Carlos Munévar Niño Bases nitrogenadas: información genética Azúcares y fosfatos: función estructural formando el esqueleto de polinucleótido
  21. 21. Terminología de nucleótidos © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  22. 22. DIFERENCIAS ADN / ARN ADN • Peso molecular mayor al del ARN. • Azúcar del ADN: Pentosa Desoxirribosa carece de un oxígeno en el carbono 2’, de ahí su nombre. • Almacenamiento de la información, disponible en cualquier momento. ARN • Peso molecular menor. • Azúcar del RNA: Pentosa Ribosa posee un OH en el carbono 2’ • Configuración espacial polinucleótido lineal, que ocasionalmente puede presentar apareamientos intracatenarios. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  23. 23. ADN • Transmisión de la información de generación en generación. • Presenta una mayor estabilidad que el ARN. Forma cadenas dobles (bicatenario) que adoptan una morfología de hélice a similar a la de las proteínas. • Bases nitrogenadas Purinas: Adenina, Guanina. Pirimidinas: Timina, Citosina. ARN • Intermediario entre la información almacenada en la secuencia de nucleótidos del ADN y las proteínas. • En comparación con el ADN es muy fácilmente degradado por enzimas lo que le confiere poca estabilidad. • Se encuentra en la célula monocatenario, es decir constituido por una sola cadena Bases Nitrogenadas Purinas: Adenina, Guanina. Pirimidinas: Uracilo, Citosina. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  24. 24. El ADN es una doble hélice de cadenas complementarias anti paralelas Los puentes de hidrogeno entre pares de bases complementarios (A-T/G-C) mantiene ensambladas entre sí las 2 cadenas. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  25. 25. CONFORMACIONES ALTERNATIVAS DEL ADN FORMA A-ADN: • Conformación que adopta la molécula cuando las fibras están deshidratadas, por lo que se presenta un acortamiento de la fibra entera © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  26. 26. CONFORMACIONES ALTERNATIVAS DEL ADN FORMA B-ADN: • Se encuentra en todos los organismos y se presenta cuando la molécula está hidratada.
  27. 27. CONFORMACIONES ALTERNATIVAS DEL DNA FORMA Z-ADN: • Hélice levógira (en sentido contrario a las manecillas del reloj), la conformación que adquiere la estructura de la molécula es muy diferente a la común , ya que el surco que hay entre las cadenas adquiere la forma de Zig-Zag. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  28. 28. El ADN puede someterse a separación reversible de sus cadenas © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  29. 29. REPLICACION DEL ADN 1. Modelos de Replicación del ADN: Experimento de Meselson-Stahl 2. Síntesis y elongación del ADN 3. ADN polimerasas 4. Origen e iniciación de la replicación del ADN 5. Replicación del Telómero © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  30. 30. Modelos de replicación del ADN © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  31. 31. 1958: Experimento de Matthew Meselson & Frank Stahl Centrifugación en gradientes de densidad © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  32. 32. 1958: Experimento de Matthew Meselson & Frank Stahl Modelo Semiconservativo de replicación del ADN © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  33. 33. 1955: Arthur Kornberg Trabajo con E. coli. Descubrió los mecanismos de Síntesis de ADN. Se requieren 4 componentes: 1. dNTPs: dATP, dTTP, dGTP, dCTP (deoxiribonucleósidos 5’-trifosfatos) (azúcar-base + 3 fosfatos) 2. Cebador de ADN 3. ADN polimerasa (enzima de Kornberg) 4. Mg 2+ (optimiza la actividad de la ADN polimerasa) 1959: Arthur Kornberg (Stanford University) & Severo Ochoa (NYU) © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  34. 34. 3 aspectos principales en la reacción de síntesis de ADN: 1. La ADN polimerasa I cataliza la formación de enlaces fosfodiester entre 3’-OH de la desoxirribosa (sobre el último nucleótido) y el fosfato 5’ del dNTP. • La energía para esta reacción proviene de la liberación de 2 de 3 fosfatos del dNTP. 2. La ADN polimerasa “localiza” el dNTP complementario correcto en cada etapa durante el proceso de elongación. • Tasa ≤ 800 dNTPs/segundo • Baja tasa de error! 3. La dirección de síntesis es 5’ hacia 3’ ADN polimerasa Protein Data Bank © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  35. 35. Elongación del ADN © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  36. 36. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño Elongación del ADN
  37. 37. Tipos diferentes de ADN polimerasa Polimerasa Polimerización (5’-3’) Exonucleasa (3’-5’) Exonucleasa (5’-3’) No Copias I Si Si Si 400 II Si Si No ? III Si Si No 10-20 •Actividad exonucleasa 3’ - 5’= Capacidad de remover nucleótidos desde el extremo 3’ de la cadena •Importante capacidad de corrección de errores •Tasa de mutaciones sin la capacidad de corrección es 1 x 10-6 •Con capacidad de corrección la tasa es 1 x 10-9 (1000-veces menos) •La actividad exonucleasa 5’ - 3’ funciona en la replicación y reparación del ADN. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  38. 38. Enzimas eucariotas: 5 ADN polimerasas en mamíferos. 1. Polimerasa  (alfa): nuclear, replicación de ADN, no corrección de errores 2. Polimerasa  (beta): nuclear, reparación de ADN, no corrección de errores 3. Polimerasa  (gamma): mitocondria, síntesis de ADN, corrección de errores 4. Polimerasa  (delta): nuclear, replicación de ADN, corrección de errores 5. Polimerasa  (épsilon): nuclear, reparación de ADN (?), corrección de errores • Polimerasas diferentes para el núcleo y el ADNmt • Algunas polimerasas corrigen errores; otras no. • Algunas polimerasas se emplean durante la replicación; otras para reparación. • Las polimerasas varían entre las especies. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  39. 39. Origen de replicación (ej, procariotas):  Empieza con la desnaturalización de la doble hélice en cadenas sencillas dejando expuestas las bases.  Se constituye una burbuja de replicación desde la cual se desencadena la síntesis de ADN en ambas direcciones. ~245 pb en E. coli
  40. 40. Inicio de la replicación, principales elementos:  Segments of single-stranded DNA are called template strands.  Gyrase (a type of topoisomerase) relaxes the supercoiled DNA.  Initiator proteins and DNA helicase binds to the DNA at the replication fork and untwist the DNA using energy derived from ATP (adenosine triphosphate). (Hydrolysis of ATP causes a shape change in DNA helicase)  DNA primase next binds to helicase producing a complex called a primosome (primase is required for synthesis),  Primase synthesizes a short RNA primer of 10-12 nucleotides, to which DNA polymerase III adds nucleotides.  Polymerase III adds nucleotides 5’ to 3’ on both strands beginning at the RNA primer.  The RNA primer is removed and replaced with DNA by polymerase I, and the gap is sealed with DNA ligase.  Single-stranded DNA-binding (SSB) proteins (>200) stabilize the single-stranded template DNA during the process.
  41. 41. Model of replication in E. coli
  42. 42. DNA replication is continuous on the leading strand and semidiscontinuous on the lagging strand: Unwinding of any single DNA replication fork proceeds in one direction. The two DNA strands are of opposite polarity, and DNA polymerases only synthesize DNA 5’ to 3’. Solution: DNA is made in opposite directions on each template. •Leading strand synthesized 5’ to 3’ in the direction of the replication fork movement. continuous requires a single RNA primer •Lagging strand synthesized 5’ to 3’ in the opposite direction. semidiscontinuous (i.e., not continuous) requires many RNA primers , DNA is synthesized in short fragments.
  43. 43. 3 Polymerase III Leading strand base pairs 5’ 5’ 3’ 3’ Supercoiled DNA relaxed by gyrase & unwound by helicase + proteins: Helicase + Initiator Proteins ATP SSB Proteins RNA Primer primase 2Polymerase III Lagging strand Okazaki Fragments 1 RNA primer replaced by polymerase I & gap is sealed by ligase
  44. 44. Fig. 3.8 Model of DNA Replication
  45. 45. DNA ligase seals the gaps between Okazaki fragments with a phosphodiester bond (Fig. 3.7)
  46. 46. Peter J. Russell, iGenetics: Copyright © Pearson Education, Inc., publishing as Benjamin Cummings. Fig. 3.5 - Model of DNA replication
  47. 47. Peter J. Russell, iGenetics: Copyright © Pearson Education, Inc., publishing as Benjamin Cummings. Fig. 3.5 - Model of DNA replication
  48. 48. Concepts and terms to understand: Why are gyrase and helicase required? The difference between a template and a primer? The difference between primase and polymerase? What is a replication fork and how many are there? Why are single-stranded binding (SSB) proteins required? How does synthesis differ on leading strand and lagging strand? Which is continuous and semi-discontinuous? What are Okazaki fragments? © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  49. 49. Replication of circular DNA in E. coli (3.10): 1. Two replication forks result in a theta-like () structure. 2. As strands separate, positive supercoils form elsewhere in the molecule. 3. Topoisomerases relieve tensions in the supercoils, allowing the DNA to continue to separate. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  50. 50. Rolling circle model of DNA replication (3.11): 1. Common in several bacteriophages including . 2. Begins with a nick at the origin of replication. 3. 5’ end of the molecule is displaced and acts as primer for DNA synthesis. 4. Can result in a DNA molecule many multiples of the genome length (and make multiple copies quickly). 5. During viral assembly the DNA is cut into individual viral chromosomes.
  51. 51. DNA replication in eukaryotes: Copying each eukaryotic chromosome during the S phase of the cell cycle presents some challenges: Major checkpoints in the system 1. Cells must be large enough, and the environment favorable. 2. Cell will not enter the mitotic phase unless all the DNA has replicated. 3. Chromosomes also must be attached to the mitotic spindle for mitosis to complete. 4. Checkpoints in the system include proteins call cyclins and enzymes called cyclin-dependent kinases (Cdks). © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  52. 52. • Cada cromosoma eucariótico es una doble hélice de ADN lineal • En Promedio ~108 pares de bases de longitud • Con una tasa de replicación de 2 kb/minuto, la replicación de 1 cromosoma humano requiere ~35 días. • Solución ---> la replicación del ADN comienza en varios sitios diferentes de manera simultanea. Las tasas son especificas de las células!
  53. 53. Horquillas de Replicacion visibles en Drosophila © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  54. 54. Que sucede con los extremos (o telómeros) en los cromosomas lineales? La ADN polimerasa/ligasa no rellena el espacio en el extremo del cromosoma después de la remoción del cebador de ARN. De ese modo los cromosomas se reducen al final de cada replicación! Solución: 1. Las eucariotas poseen secuencias repetidas en tándem en los extremos de sus cromosomas. 2. La Telomerasa (compuesta de proteína y ARN complementario a la repetición del telomero) se acopla a la repetición terminal del telómero y cataliza la incorporación de nuevas repeticiones. 3. Compensación mediante alargamiento del cromosoma. 4. La ausencia o mutación de la actividad telomerasa resulta en el acortamiento del cromosoma y división celular limitada. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  55. 55. Peter J. Russell, Genetics: Copyright © Pearson Education, Inc., publishing as Benjamin Cummings. Síntesis de ADN telomérico por la ARN telomerasa
  56. 56. Etapa Final – Ensamble en Nucleosomas: • A medida que el ADN se desenrolla los nucleosomas deben desensamblarse. • Las Histonas y las proteínas asociadas a la cromatina deben duplicarse mediante nueva síntesis de proteínas. • El ADN recién replicado se ensambla en nucleosomas casi de inmediato. • Las proteínas chaperonas de las histonas controlan el ensamble. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  57. 57. ADN POLIMERASAS • Topoisomerasas: pueden producir o eliminar nudos o enlaces en una hélice. • Helicasas: son enzimas que rompen los puentes de hidrógeno que mantienen unidas las dos cadenas de la doble hélice. • La ADN Pol III es la enzima que realiza la mayoría de la replicación del DNA. complejo enzimático que lleva a cabo la replicación es un multímero denominado Holoenzima de DNA Pol III que posee muchas cadenas o subunidades polipeptídicas • A la ADN Pol II se la asigna exclusivamente una función reparadora, pero muchas de sus características y el papel que juega en la replicación del DNA, si es que juega alguno, son desconocidas. • La ADN Pol I tiene un papel reparador, retira los cebadores con su actividad exonucleasa 5'- 3' y rellena el espacio con su actividad polimerasa 5'- 3'.
  58. 58. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  59. 59. http://oak.cats.ohiou.edu/~ballardh/pbio475/Heredity/DNA-replication.JPG http://www.seinan-gu.ac.jp/~djohnson/DNARepl.htmel
  60. 60. REPARACION DE ADN MECANISMOS DE REPARACION • Reparación de los errores de apareamiento • Reparación directa • Reparación por escisión de bases • Reparación por escisión de nucleótidos • Otros tipos de reparación de ADN BENJAMIN A. PIRCE. GENETICA Un enfoque conceptual, Edit. Medica panamericana, Edición 2da, Madrid España, 2005
  61. 61. REPARACION DE DNA Cuando hablamos de la replicación del ADN, la propia ADN polimerasa III posee la subunidad ε que tiene una función correctora de pruebas que permite detectar cuando la ADN polimerasa ha introducido un nucleótido que no es el correcto y retirarlo. Este es un primer mecanismo que evita que se produzcan mutaciones durante la replicación Además de este mecanismo existen otros que previenen posibles daños y que reparan las lesiones producidas. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  62. 62. ARN • Filamento de una sola cadena. • Presencia de un oxígeno en la posición 2' de la ribosa impide que se forme la doble cadena. • ARN puede enrollarse sobre sí mismo mediante formación de pares de bases en algunas secciones de la molécula.
  63. 63. CONFORMACIONES DE ARN © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  64. 64. • ARN ribosomal (ARNr): forman parte de las subunidades de los ribosomas • ARN de transferencia (ARNt): tiene la función de transportar los aminoácidos activados, desde el citosol hasta el lugar de síntesis de proteínas en los ribosomas. • RNA mensajero (ARNm): portador de la información genética y la transportan del genoma (molécula de ADN en el cromosoma) a los ribosomas © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  65. 65. ORGANIZACIÓN DEL GENOMA HUMANO © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  66. 66. ESTRUCTURA DE LOS CROMOSOMAS HUMANOS • Única doble hélice de DNA continua. • Excepción cromosoma circular mitocondrial. • Histonas: Proteínas de bajo peso molecular • Cromatina: DNA + proteínas © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  67. 67. ESTRUCTURA DE LOS CROMOSOMAS HUMANOS Nucleosoma: complejo de DNA + histonas nucleares Cromatina: complejo de DNA + proteína Histonas + proteínas ácidas Solenoide: 6 nucleosomas, estructura cromática secundaria helicoidal
  68. 68. Doble hélice Nucleosoma Solenoide Asa de DNA Cromosoma en metafase
  69. 69. FUNDAMENTOS DE LA EXPRESIÓN GÉNICA Cadena no transcrita Cadena transcrita 1. Transcripción 2. Procesamiento y ensamblaje de RNA 3. Transporte 4. Traducción 5. Montaje de proteínas © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  70. 70. CLASES DE ADN EN EL GENOMA HUMANO • DNA de copia única simple: 75%, incluye la mayor parte de los genes, se localiza a lo largo de todo el genoma. • DNA disperso repetitivo: 15%, está mezclado con los genes y otros tipos de DNA, dos familias principales. • DNA satélite: 10%, secuencias muy repetidas, varias familias principales, muy localizados en sitios específicos (centrómeros, telómeros). © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  71. 71. ARN POLIMERASAS • RNA pol I: Transcribe los RNA ribosomales mayores • RNA pol II: Transcribe los genes para RNAm • RNA pol III: Hace el RNA 5s de los ribosomas y los RNAt © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  72. 72. TRANSCRIPCIÓN DE GENES CODIFICADORES DE PROTEÍNAS Y FORMACION DE ARNm FUNCIONAL. Polimerización de ribonucleótidos por la RNA Polimerasa, durante la transcripción LODISH, Harvey; Et. Al. Biología Celular y Molecular.
  73. 73. ETAPAS DE LA TRANSCRIPCION INICIACION LODISH, Harvey; Et. Al. Biología Celular y Molecular.
  74. 74. ETAPAS DE LA TRANSCRIPCION ELONGACION LODISH, Harvey; Et. Al. Biología Celular y Molecular. Buenos Aires.
  75. 75. ETAPAS DE LA TRANSCRIPCION TERMINACION LODISH, Harvey; Et. Al. Biología Celular y Molecular. Buenos Aires.
  76. 76. ESTRUCTURA DE LA RNA POLIMERASA • Dos subunidades Beta` y Beta • Dos copias de subunidades mas pequeñas α. •Una quinta subunidad έ (Epsilon) LODISH, Harvey; Et. Al. Biología Celular y Molecular. Buenos Aires.
  77. 77. ORGANIZACIÓN DE LOS GENES EN EUCARIOTAS EXONES: Secuencias codificantes Intrones: Segmentos no codificadores de proteínas LODISH, Harvey; Et. Al. Biología Celular y Molecular. Buenos Aires.
  78. 78. MODIFICACION DE TRANSCRITOS PRIMARIOS DE ARN Casquete : Protege al RNAm de la degradación enzimática y contribuye a su desplazamiento hacia el citoplasma LODISH, Harvey; Et. Al. Biología Celular y Molecular. Buenos Aires. Poli A: La enzima Poli A, agrega acido Adenilico al extremo 3´ (Cola Poli A)
  79. 79. CORTE Y EMPALME (SPLICING) DEL ARN Escisión del transcripto Elimina intrones. Ligación de exones © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  80. 80. Procesamiento de ARN en eucariotas
  81. 81. EL CORTE Y EMPALME ALTERNATIVO DEL RNA INCREMENTA EL NUMERO DE PROTEINAS EXPRESADAS A PARTIR DE UN GEN EUCARIOTE UNICO. ISOFORMAS: DIFERENTES FORMAS DE UNA PROTEINA LODISH, Harvey; Et. Al. Biología Celular y Molecular. Buenos Aires. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  82. 82. 3 ETAPAS: inicio, elongacion, y terminacion FUNCION DEL ARN EN LA TRADUCCION
  83. 83. Marcos de lectura del código genético © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  84. 84. Copyright (c) by W. H. Freeman and Company EL CODIGO GENETICO
  85. 85. El codón de inicio AUG es reconocido por el metionil-tRNAi Met © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  86. 86. El inicio de la traducción en eucariotas generalmente ocurre en el extremo 5’ del ARNm pero podría ocurrir ocasionalmente en sitios internos
  87. 87. SINTESIS DE PROTEINAS. © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  88. 88. La estructura plegada del ARN especifica su función Figure 4-26 © Dr. Juan Carlos Munévar Niño
  89. 89. Copyright (c) by W. H. Freeman and Company La Aminoacil-tARN sintetasa activa aminoácidos uniéndolos al ARNt Cada molécula de ARNt es reconocida por una aminoacil ARNt sintasa
  90. 90. Copyright (c) by W. H. Freeman and Company Estructura de los Ribosomas en procariotas & eucariotas
  91. 91. Copyright (c) by W. H. Freeman and Company La síntesis de proteínas termina por liberación de los factores al alcanzar un codón STOP
  92. 92. EFICIENCIA DE LA SINTESIS DE PROTEINAS
  93. 93. Elongación de cadenas de proteínas y ácidos nucleícos por adición secuencial de monómeros © Dr. Juan Carlos Munévar Niño

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