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HONGOS Y
LEVADURAS
CID LEÓN WILLIAM RICARDO
CASTRO SALAZAR DIANA
REINOSO PALACIOS WILLIAMS EDUARDO
GÓMEZ HERNÁNDEZ CRISTIAN
LOVERA CICILIANO GUILLERMO
HERNÁNDEZ DIAZ LORENA
GRUPO 610
¿QUE ES UN HONGO?

Los hongos son un grupo de seres vivos diferentes de las plantas y de los animales, razón por la cual se
clasifican en un reino aparte llamado Fungí.
• ya que transforman la materia orgánica en sustancias más simples y asimilables por otros seres vivos.

• Los hongos han jugado y juegan un papel muy importante en la medicina, la industria y la alimentación.
La era de los antibióticos se inicia con el descubrimiento de la penicilina, obtenida a partir del hongo
Penicillium notatum;
¿QUE ES UNA LEVADURA?

• cualquiera de los diversos hongos microscópicos unicelulares que son importantes por su capacidad
para realizar la descomposición mediante fermentación de diversos cuerpos orgánicos, principalmente
los azúcares o hidratos de carbono, produciendo distintas sustancias.
• hongos microscópicos, unicelulares, la mayoría se multiplican por gemación y algunas por escisión
•

levaduras son los agentes de la fermentación y se encuentran naturalmente en la superficie de las
plantas, el suelo es su principal hábitat encontrándose en invierno en la capa superficial de la tierra.
CARACTERÍSTICAS GENERALES
•

La mayoría de las levaduras son hongos

•

unicelulares sencillos microscópicos

•

la mayoría se reproducen asexualmente por gemación, y otras especies lo hacen por fisión múltiple.

•

Son eucariotas

•

Los hongos son muy abundantes y ubicuos en la naturaleza.

•

Son excelentes degradadores de materia orgánica

•

No tienen clorofila

•

Tienen paredes celulares definidas con quitina o celulosa

•

No son móviles

•

Los hongos son muy abundantes y ubicuos en la naturaleza.

•

Son excelentes degradadores de materia orgánica
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS
Levaduras

Hongos

-Tienen forma esférica.
-Presentan diferentes colores: blanco,
rosado, beige.
-Su tamaño oscila entre 2,5-10 micras de
ancho y 4,5-21micras de largo.

-Presentan una forma redonda u ovalada.
-La mayoría son aeróbicos.
-Su nutrición es heterótrofa.
-Tienen un tamaño superior al de las
bacterias
DIFERENCIAS
HONGOS LEVADURIFORMES

HONGOS FILAMENTOSOS

Unicelulares

Redondos u ovales

Diámetro de 3 a 30 μm

Reproducción por gemación,
esporulación o fisión

Algunos pueden llegar a formar
seudohifas
 facultativos
Son
 osmofilos, pueden ser
Son
halofilicos
 acidofilos (crecen a pH 3.5 –
Son
3.8)

Colonias similares a las bacterianas

Diámetro de 3 a 7 mm
 cremosas, opacas
Son

Visibles en 24 – 72 horas

Pluricelulares

Células alargadas

Diámetro de 3 a 15 μm

Reproducción sexual y/o asexual

Forman hifas
 hifas forman micelios
Las
 aerobios
Son
 acidofilos (crecen a pH 2 - 9)
Son

Requieren 4 % de azúcar en el
medio

Colonias de mayor tamaño (10 – 30
μm)

Crecen de forma radial
 vellosas, algodonosas o
Son
pulvurulentas

Visibles de 3 a 20 días
MORFOLOGIA Y ESTRUCTURA DE HONGOS Y
LEVADURAS
• MORFOLOGIA: es la disciplina encargada del estudio y la
reproducción y estructura de un organismo y sistema
• LOS HONGOS SON MUY DIFERENTES A OTRO
MICROORGANISMOS VIVOS,CARESEN DE CLOROFILA, NO
PUEDEN SER AUTOTROFOS,PORLOTANTO NESESITAN
OBTENER REQUERIMIENTOS NUTRISIONALES DE MATERIAL
ORGANICO YA FORMADO
ANATOMIA
• LA CELULA FUNGICA ES UNA DE LAS CELULAS CONOSIDAD. POSEE
ORGANISACION EUCARIOTA TAMBIEN
• SE SUELE DESIR A MENUDO QUE SEPARESE ALA CELULA ANIMAL
• ELEMENTOS DE LA ENVOLTURA:

• Capsula
• Pared celular
• Membrana plasmática
• ELEMENTOS INTERNOS:

• Sistema endomenbranal
• ribosomas
HONGOS UNICELULARES
• SELES LLAMAN HONGOS LEVADURIFORMES O LEVADURAS

Las levaduras son muy parecidas a bacterias
macroscópicamente pero son más cremosas y los
colores que presentan son blancos, o un poco más
oscuros. Algunas son rosadas o rojas porque tienen
carotinoides; son unicelulares; sus células tienen forma
y dimensiones diversas.
ESTRUCTURA DE LAS LEVADURAS
• A. Pared celular
• presentan partes de una célula completa: pared celular y
protoplasma, La pared celular o cápsula en muy delgada
o gruesa según la edad de la célula y especie de
levadura; está formada principalmente de polisacáridos

• B. Membrana fundamental
• Tiene estructura, constitución y funciones semejantes

a las de otras células y en los fenómenos de
plasmosis se contrae junto con el citoplasma.
• C. El citoplasma
• En él se encuentran diversas estructuras meta
plasmáticas
(mitocondrias,
vacuolas
y
retículo
endoplasmática.

• D.

El

núcleo

• Está rodeado por una doble membrana.
• En su interior se alberga un área densa, en forma de
media luna, a la que se denomina nucléolo.
• La estructura del núcleo de las levaduras puede variar
según el grupo taxonómico al que pertenecen
REPRODUCCIÓN
 Sexual  Hongos perfectos
 Zycomycotina
 Ascomycotina
 Basidiomycotina

 Asexual  Hongos Imperfectos
 Deuteromycotina
• Zigosporas

• Zigosporas
• Se forman por la unión de dos hifas
diferenciadas. Donadora (+) y receptora (-)

sexualmente

• Una vez que se lleva a cabo la unión se inicia el fenómeno de
plasmogonia, de donde se forma un huevo o zigosporas.
• Posteriormente a la meiosis nace el nuevo hongo (Mucor,
Rhizopus, Absidia)
CICLO DE VIDA DE
ZIGOMICETOS
ASCOSPORAS.
• Ascosporas.
• Resultan de la meiosis
• Se forman a partir de una bolsa o asca que produce un número determinado y
característico de esporas. (Saccharomyces, Hansenula y Pichia)
• Lo pueden presentar una diversidad de hongos patógenos y oportunistas, como algunos
dermatofitos.
CICLO DE VIDA DE ASCOMICETOS
Ascocarpo
Conidia
germinando

Plasmogamia

2

Conidióforo
con conidias
(n)

1

Reproducción
sexual

Reproducción
asexual

3
Hifas dicarióticas
con ascas (n + n)
mitosis

7

Ascaspora
germinando

Asca con
ascasporas (n)

6

meiosis

5

Kariogamia
(2n)

4
BASIDIOSPORAS

Ejemplo:
 Cryptpcpccus

neoformans
ESPORAS SEXUALES
• Basidiosporas.
• Son propios de las setas u hongos
• Estructuras unicelulares y haploides
• Se forman de una bolsa o basidio
• De las bolsas nacen esterigmas que producen basidiosporas
CICLO DE VIDA DE BASIDIOMICETOS
Plasmogamia

4
1
Basidiocarpo

3

Germinación de
basidiosporas

Basidia con
basidiosporas
Agalla mostrando las
basidias

Meiosis

Kariogamia

2
REPRODUCCIÓN ASEXUAL
• Esporas asexuales o imperfectas
• Representa el estado anamorfo del hongo
• Propágulas: esporas o conidias

• Hongos patógenos se identifican en su estado anamorfo
• Muchos hongos pueden tener 2 denominaciones
•

Estado anamorfo (ej. Aspergillus nidulans)

•

Estado teleomorfo (ej. Emeridella nidulans)
ESPORAS
• Pueden ser:
•

Móviles  zoosporas

•

Inmóviles  endosporas

• Una endospora está en el interior del esporangio
• El esporangio está en el extremo del esporangióforo
• Las esporas quedan libres al romperse el esporangios
• Cada esporangio puede contener 1 espora o muchas de ellas
ESPORULACIÓN
CONIDIAS








Exosporas
Producidas en estructuras externas
Frecuentes en Ascomycotina
Único medio de reproducción de los Deuteromycotina
Base de identificación de los hongos
Producidos por gemación o segmentación
Estructura que las origina: conidióforo
CONIDIÓFORO
 Constituido por:
 Célula pie
 Vesícula
 Fialide (Células
coniógenas)
 Fialoconidias
LAS ESPORAS ASEXUALES
TIPOS: ESPORANGIOSPORAS Y CONIDIOS

1.-

Tipo Esporangiosporas

Esporangiosporas

Esporangioforo

Columela

(Reproducción asexual interna).
LAS ESPORAS ASEXUALES
2.-

Tipo Conidios
CONIDIOS
CELULA CONIDIOGENICA
O
FIALIDE

CABEZA
CONIDIAL

CONIDIOFORO

Conidioforos y conidios

(Reproducción asexual externa)
TIPOS DE CONIDIAS
• Fialoconidias
• Simpuloconidias
• Aleurioconidias
• Blastoconidias
• Artroconidias
• Clamidioconidias

• Blastoartroconidias
• Poroconidias
• Aneloconidias
CULTIVO
• Hongos y levaduras

Es donde se ponen a crecer los hongos. Se pueden usa los siguientes medios:
 Agar Sabouraud
 Agar Neopeptone-glucose-rose Bengal-aureomycin
 Agar Czapek (para Aspergillus, penicillium y hongos relacionedos

 Agar Yeast extract-malt extract-glucose
 Agar Diamalt (para levaduras)
Medios De Cultivo
Para el aislamiento primario de los hongos, se utilizan diversos medios de cultivo. Estos
medios hay que seleccionarlos en función del hongo que se sospeche y del tipo de muestra.
Los medios de cultivo se pueden utilizar en tubos cerrados con tapón de rosca o en
placas de petri. La gran superficie de estas últimas facilita el aislamiento y la dilución
de sustancias inhibitorias en las muestras. Es importante que el medio no se
deseque por lo que el espesor de las mismas debe ser por lo menos de 25 mm,
aproximadamente 35-40 mL de medio. Las placas se contaminan con facilidad
durante la incubación por lo que es aconsejable sellarlas con cinta adhesiva. Los
medios en tubo tienen la ventaja de que no se deshidratan y se contaminan menos,
pero en cambio tienen menos superficie.
PARÁMETROS QUE AFECTAN EL
CRECIMIENTO
• Atmósfera
• Temperatura
• Luz
• Actividad de agua
• pH
La temperatura de incubación debe ser seleccionada teniendo en cuenta el tipo de
hongo, en general, los medios deben incubarse a 25ºC y a 37ºC durante 4 semanas
antes de considerarse como negativos. Si se emplean tubos con tapón de rosca
deben estar flojos para permitir la entrada de aire.
Medios más utilizados

Agar Dextrosado de Saboureaud con Cicloheximida y Cloranfenicol: se utiliza
para el aislamiento e identificación de dermatófitos y Cándidas.
Agar Dextrosado con Cloranfenicol sin Cicloheximida: se utiliza para el
aislamiento e identificación de patógenos ambientales y oportunitas.
Agar de harina de maíz (“Corn Meal Agar”):
Suplementado con Tween 80: para diferenciar distintas especies de
Cándida y para realizar subcultivos ya que estimula la esporulación de
hongos miceliales.
Suplementado con 10 gramos de Glucosa: para diferenciar Trichophyton
Agar de Urea: se utiliza para diferenciar entre levaduras e identificar diferentes
especies de Trichophyton.
LOS PRINCIPALES CRITERIOS UTILIZADOS
PARA LA CLASIFICACIÓN E IDENTIFICACIÓN
DE LAS LEVADURAS
•Producción de ascosporas.
• Aspecto de las células vegetativas: forma, tamaño, color, inclusiones.
• Forma de reproducción asexual.
• Producción de micelio.

• Forma de película en medio liquido.
• Color de la colonia.
• Propiedades fisiológicas: producción de ácido, actividad eureásica.
LOS PRINCIPALES CRITERIOS UTILIZADOS
PARA LA CLASIFICACIÓN E IDENTIFICACIÓN
DE LAS LEVADURAS
•

Fermentación de glucosa, galactosa, sacarosa, maltosa, lactosa y
rafinosa.

•

Crecimiento en 18 sustratos carbonados:
Pentosas: D-xilosa, L-arabinosa, D-ribosa, L-ramnosa.
Hexosas: D-glucosa.
Disacáridos: sacarosa, maltosa, celobiosa, trehalosa, lactosa.
Trisacáridos: rafinosa.
Polisacáridos: almidón.
Alcoholes: eritriol, ribitol, D-manitol, inositol.
Ácidos orgánicos: ácido succínico, ácido cítrico.
LOS PRINCIPALES CRITERIOS UTILIZADOS
PARA LA CLASIFICACIÓN E IDENTIFICACIÓN
DE LAS LEVADURAS
•

Asimilación de nitratos.

• Crecimiento a 37ºC.
•

Crecimiento en medio con vitaminas.

•

Producción de almidón
TINCIÓN
• Definición:

Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en
microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al
microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias que
usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar
estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados
con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. Los
diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar
la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando
por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo),
poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes
células sanguíneas) o incluso para resaltar organelas dentro
de células individuales.
TIPOS DE TINCION
• Tinciones simples: En las tinciones simples se usa un único
colorante, que siempre es de tipo básico.

•

Se utilizan solamente para incrementar el contraste; todas las
células absorberán el colorante y quedarán teñidas del mismo color.
Por tanto, la tinción simple mejora la observación de la célula
completa.

• Se fija el espécimen, se añade el colorante y se deja el tiempo
adecuado para que se absorba, se retira el exceso de colorante y la
preparación ya está lista para ser observada. Si se utiliza un
mordiente, hay que añadirlo justo antes del colorante
TIPOS DE TINCIÓN
• Tinciones diferenciales: Las tinciones diferenciales se utilizan para distinguir entre tipos de
microorganismos.
• La técnica de tinción diferencial consta de dos etapas: una tinción primaria (siguiendo el mismo
método que en una tinción simple) seguida de una tinción de contraste.

•

En la tinción de contraste se utiliza otro colorante que tiñe (y por tanto, revela) las células no
teñidas por el primer colorante. Estas tinciones son muy utilizadas en microbiología. Por
ejemplo, la tinción de Gram y la tinción de ácido-alcohol resistencia, ambas aplicadas a
bacterias.
TINCIÓN DE ÁCIDO-ALCOHOL RESISTENCIA
•

son bacterias Gram positivas que resisten la
decoloración con decolorantes enérgicos,
como las soluciones de etanol en ácido
clorhídrico

• Solo se tiñen bien forzando la tinción (con
calor como en la endospora o con una solución
muy concentrada de colorante (fuchina) en
fenol).
TINCIÓN DE ÁCIDO-ALCOHOL RESISTENCIA
• Materiales
• Para realizar esta práctica estos son los materiales que se van a necesitar: Cultivos de Mycobacterium
smegmatis o de M. phlei. Fuchina básica (fuchina (1 g), fenol (5 g), etanol (15 ml) y agua destilada 100 ml).
Etanol-HCl : HCI 12N (3 ml), agua destilada 100 ml.

• Método
• 1. Teñir con fuchina durante 2 minutos. Lavar con agua.
• 2. Decolorar con etanol-HCI . Lavar con agua.
• 3. Teñir con azul de metileno durante 1 minuto. Lavar con agua. Observar con objetivo de inmersión.
• Resultado

• Las bacterias ácido-alcohol resistente se ven de color violeta y las no acido-alcohol resistentes
de color azul. (en la imagen M. smegmatis)
TINCION DE GRAM
• La técnica de la tinción de Gram fue desarrollada por el bacteriólogo
danés Christian Gram en 1884. Esta tinción clasifica las bacterias en dos
grupos: Gram positivas y Gram negativas La técnica incluye tinción
primaria, decoloración y tinción de contraste:
• 1. Se tiñe el espécimen con el primer colorante, cristal violeta, que tiñe de violeta.
• 2. Se añade el mordiente, yodo
• .3. Se aplica el agente decolorante, normalmente una solución de acetona o
etanol. En este momento, las bacterias Gram negativas pierden su tinción violeta,
pero las Gram positivas retienen el colorante.

• 4. Como colorante de contraste se añade safranina, que tiñe de rosa las bacterias
Gram negativas, previamente decoloradas; mientras que a las bacterias Gram
positivas les proporciona un color violeta más intenso.
TIPOS DE TINCIÓN

• Tinciones específicas: Mientras las tinciones diferenciales permiten distinguir entre distintos
tipos de microorganismo.
• las tinciones específicas incrementan el contraste en las células microbianas y revelan
estructuras particulares, entre las que se incluyen las endosporas, los flagelos y las cápsulas.
TINCIÓN ESPECIFICA

•

La tinción de Wirtz-Conklin :permite diferenciar las esporas de las células vegetativas.

1. La tinción primaria se realiza con Verde de Malaquita en caliente que tiñe las células de verde. El calor
es necesario para que las endosporas se tiñan. Si la preparación se lava con agua, sólo las células
vegetativas
se
decoloran
mientras
que
las
esporas
retienen
el
color.
2. La tinción de contraste se realiza con rosa safranina que tiñe las células vegetativas de color rosa,
mientras
que
las
esporas
permanecen
verdes.
TINCIÓN ESPECIFICA

• La tinción de flagelos de Leifson es una tinción simple que usa un colorante, la rosanilina y ácido tánico
que engrosa los flagelos para que puedan verse. Es imprescindible fijar las células con formol y realizar
la tinción muy cuidadosamente para poder observar los flagelos.
• La mejor técnica para visualizar cápsulas se basa en realizar una tinción negativa utilizando tinta china o
nigrosina, colorantes que no penetran en la célula sino que ennegrecen el medio. Las células se
observan brillantes, sin teñir y se aprecia una zona clara alrededor de las mismas. En ocasiones se utiliza
un
colorante
posterior
para
resaltar
las
células.
PROCESOS BIOQUÍMICOS

• son todas las reacciones químicas del metabolismo celular que se dan en las células de los organismos
vivos. Los procesos bioquímicos para obtención y transformación de la energía son los que se dan
durante la respiración celular
RESPIRACION - ANAEROBIA - GLUCOLISIS Y
FERMENTACION
Glucosa

Ciclo de Krebs

2 Alcoholes
etílicos

2 Gliceraldehido

Proceso aerobio

2 Acetaldehídos

2 Ácidos glicéridos

2 Ácidos Pirúvicos

2 Ácidos Lácticos
Tipos de metabolismo

• Metabolismo primario y secundario.
• ·
Primario à usa la célula para mantenerla viva (reacciones anabólicas y catabólicas necesarias para el
mantenimiento y crecimiento de la célula).
SECUNDARIO À RUTAS METABÓLICAS ALTERNATIVAS
DE SUSTANCIAS NO ÚTILES PARA LAS CÉLULAS.

• ·Son vías fundamentalmente anabólicas.

•

La estructura química es inusual para la célula y sin ninguna función celular.

• Las vías son específicas por un grupo de hongos o hongo concreto.
FERMENTACIÓN

• La fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, totalmente anaeróbico, siendo el
producto final un compuesto orgánico.
• En los seres vivos, la fermentación es un proceso anaeróbico y en él no interviene la mitocondria ni
la cadena respiratoria.
• Son propias de los microrganismos como algunas bacterias y levaduras.
• También se produce la fermentación en la mayoría de las células de los animales; algunas células, como
los eritrocitos, carecen de mitocondrias y se ven obligadas a fermentar;
• el tejido muscular de los animales realiza la fermentación láctica cuando el aporte de oxígeno a
las células musculares no es suficiente para el metabolismo aerobio y la contracción muscular.
TIPOS DE FERMENTACIONES

• Fermentación acética
es la fermentación bacteriana por Acetobacter.
La formación de ácido acético (CH3COOH) resulta de la oxidación de un alcohol por la bacteria del vinagre
en presencia del oxígeno del aire. Estas bacterias, a diferencia de las levadurasproductoras de alcohol,
requieren un suministro generoso de oxígeno para su crecimiento y actividad.
FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA

• Ausencia de aire originado por la actividad de algunos microorganismos que
procesan los hidratos de carbono para obtener: un alcohol en forma de etanol
dióxido de carbono en forma de gas y unas moléculas de ATP que consumen
los propios microorganismos en su metabolismo celular energético
anaeróbico.
FERMENTACIÓN BUTÍRICA
• Es la conversión de los glúcidos en ácido butírico por acción de bacterias de la
especie Clostridium butyricum en ausencia de oxígeno. Es característica de
las bacterias del género Clostridium y se caracteriza por la aparición de olores
pútridos y desagradables.
FERMENTACIÓN LÁCTICA

Es una ruta metabólica anaeróbica que ocurre en el citosol de
la célula, en la cual se oxida parcialmente la glucosa para obtener
energía y donde el producto de desecho es el ácido láctico.

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Hongos y levaduras

  • 1. HONGOS Y LEVADURAS CID LEÓN WILLIAM RICARDO CASTRO SALAZAR DIANA REINOSO PALACIOS WILLIAMS EDUARDO GÓMEZ HERNÁNDEZ CRISTIAN LOVERA CICILIANO GUILLERMO HERNÁNDEZ DIAZ LORENA GRUPO 610
  • 2. ¿QUE ES UN HONGO? Los hongos son un grupo de seres vivos diferentes de las plantas y de los animales, razón por la cual se clasifican en un reino aparte llamado Fungí. • ya que transforman la materia orgánica en sustancias más simples y asimilables por otros seres vivos. • Los hongos han jugado y juegan un papel muy importante en la medicina, la industria y la alimentación. La era de los antibióticos se inicia con el descubrimiento de la penicilina, obtenida a partir del hongo Penicillium notatum;
  • 3. ¿QUE ES UNA LEVADURA? • cualquiera de los diversos hongos microscópicos unicelulares que son importantes por su capacidad para realizar la descomposición mediante fermentación de diversos cuerpos orgánicos, principalmente los azúcares o hidratos de carbono, produciendo distintas sustancias. • hongos microscópicos, unicelulares, la mayoría se multiplican por gemación y algunas por escisión • levaduras son los agentes de la fermentación y se encuentran naturalmente en la superficie de las plantas, el suelo es su principal hábitat encontrándose en invierno en la capa superficial de la tierra.
  • 4. CARACTERÍSTICAS GENERALES • La mayoría de las levaduras son hongos • unicelulares sencillos microscópicos • la mayoría se reproducen asexualmente por gemación, y otras especies lo hacen por fisión múltiple. • Son eucariotas • Los hongos son muy abundantes y ubicuos en la naturaleza. • Son excelentes degradadores de materia orgánica • No tienen clorofila • Tienen paredes celulares definidas con quitina o celulosa • No son móviles • Los hongos son muy abundantes y ubicuos en la naturaleza. • Son excelentes degradadores de materia orgánica
  • 5. CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS Levaduras Hongos -Tienen forma esférica. -Presentan diferentes colores: blanco, rosado, beige. -Su tamaño oscila entre 2,5-10 micras de ancho y 4,5-21micras de largo. -Presentan una forma redonda u ovalada. -La mayoría son aeróbicos. -Su nutrición es heterótrofa. -Tienen un tamaño superior al de las bacterias
  • 6. DIFERENCIAS HONGOS LEVADURIFORMES HONGOS FILAMENTOSOS Unicelulares  Redondos u ovales  Diámetro de 3 a 30 μm  Reproducción por gemación, esporulación o fisión  Algunos pueden llegar a formar seudohifas  facultativos Son  osmofilos, pueden ser Son halofilicos  acidofilos (crecen a pH 3.5 – Son 3.8)  Colonias similares a las bacterianas  Diámetro de 3 a 7 mm  cremosas, opacas Son  Visibles en 24 – 72 horas Pluricelulares  Células alargadas  Diámetro de 3 a 15 μm  Reproducción sexual y/o asexual  Forman hifas  hifas forman micelios Las  aerobios Son  acidofilos (crecen a pH 2 - 9) Son  Requieren 4 % de azúcar en el medio  Colonias de mayor tamaño (10 – 30 μm)  Crecen de forma radial  vellosas, algodonosas o Son pulvurulentas  Visibles de 3 a 20 días
  • 7. MORFOLOGIA Y ESTRUCTURA DE HONGOS Y LEVADURAS • MORFOLOGIA: es la disciplina encargada del estudio y la reproducción y estructura de un organismo y sistema
  • 8. • LOS HONGOS SON MUY DIFERENTES A OTRO MICROORGANISMOS VIVOS,CARESEN DE CLOROFILA, NO PUEDEN SER AUTOTROFOS,PORLOTANTO NESESITAN OBTENER REQUERIMIENTOS NUTRISIONALES DE MATERIAL ORGANICO YA FORMADO
  • 9. ANATOMIA • LA CELULA FUNGICA ES UNA DE LAS CELULAS CONOSIDAD. POSEE ORGANISACION EUCARIOTA TAMBIEN • SE SUELE DESIR A MENUDO QUE SEPARESE ALA CELULA ANIMAL • ELEMENTOS DE LA ENVOLTURA: • Capsula • Pared celular • Membrana plasmática • ELEMENTOS INTERNOS: • Sistema endomenbranal • ribosomas
  • 10. HONGOS UNICELULARES • SELES LLAMAN HONGOS LEVADURIFORMES O LEVADURAS Las levaduras son muy parecidas a bacterias macroscópicamente pero son más cremosas y los colores que presentan son blancos, o un poco más oscuros. Algunas son rosadas o rojas porque tienen carotinoides; son unicelulares; sus células tienen forma y dimensiones diversas.
  • 11. ESTRUCTURA DE LAS LEVADURAS • A. Pared celular • presentan partes de una célula completa: pared celular y protoplasma, La pared celular o cápsula en muy delgada o gruesa según la edad de la célula y especie de levadura; está formada principalmente de polisacáridos • B. Membrana fundamental • Tiene estructura, constitución y funciones semejantes a las de otras células y en los fenómenos de plasmosis se contrae junto con el citoplasma.
  • 12.
  • 13. • C. El citoplasma • En él se encuentran diversas estructuras meta plasmáticas (mitocondrias, vacuolas y retículo endoplasmática. • D. El núcleo • Está rodeado por una doble membrana. • En su interior se alberga un área densa, en forma de media luna, a la que se denomina nucléolo. • La estructura del núcleo de las levaduras puede variar según el grupo taxonómico al que pertenecen
  • 14. REPRODUCCIÓN  Sexual  Hongos perfectos  Zycomycotina  Ascomycotina  Basidiomycotina  Asexual  Hongos Imperfectos  Deuteromycotina
  • 15. • Zigosporas • Zigosporas • Se forman por la unión de dos hifas diferenciadas. Donadora (+) y receptora (-) sexualmente • Una vez que se lleva a cabo la unión se inicia el fenómeno de plasmogonia, de donde se forma un huevo o zigosporas. • Posteriormente a la meiosis nace el nuevo hongo (Mucor, Rhizopus, Absidia)
  • 16. CICLO DE VIDA DE ZIGOMICETOS
  • 17. ASCOSPORAS. • Ascosporas. • Resultan de la meiosis • Se forman a partir de una bolsa o asca que produce un número determinado y característico de esporas. (Saccharomyces, Hansenula y Pichia) • Lo pueden presentar una diversidad de hongos patógenos y oportunistas, como algunos dermatofitos.
  • 18. CICLO DE VIDA DE ASCOMICETOS Ascocarpo Conidia germinando Plasmogamia 2 Conidióforo con conidias (n) 1 Reproducción sexual Reproducción asexual 3 Hifas dicarióticas con ascas (n + n) mitosis 7 Ascaspora germinando Asca con ascasporas (n) 6 meiosis 5 Kariogamia (2n) 4
  • 20. ESPORAS SEXUALES • Basidiosporas. • Son propios de las setas u hongos • Estructuras unicelulares y haploides • Se forman de una bolsa o basidio • De las bolsas nacen esterigmas que producen basidiosporas
  • 21. CICLO DE VIDA DE BASIDIOMICETOS Plasmogamia 4 1 Basidiocarpo 3 Germinación de basidiosporas Basidia con basidiosporas Agalla mostrando las basidias Meiosis Kariogamia 2
  • 22. REPRODUCCIÓN ASEXUAL • Esporas asexuales o imperfectas • Representa el estado anamorfo del hongo • Propágulas: esporas o conidias • Hongos patógenos se identifican en su estado anamorfo • Muchos hongos pueden tener 2 denominaciones • Estado anamorfo (ej. Aspergillus nidulans) • Estado teleomorfo (ej. Emeridella nidulans)
  • 23. ESPORAS • Pueden ser: • Móviles  zoosporas • Inmóviles  endosporas • Una endospora está en el interior del esporangio • El esporangio está en el extremo del esporangióforo • Las esporas quedan libres al romperse el esporangios • Cada esporangio puede contener 1 espora o muchas de ellas
  • 25. CONIDIAS        Exosporas Producidas en estructuras externas Frecuentes en Ascomycotina Único medio de reproducción de los Deuteromycotina Base de identificación de los hongos Producidos por gemación o segmentación Estructura que las origina: conidióforo
  • 26. CONIDIÓFORO  Constituido por:  Célula pie  Vesícula  Fialide (Células coniógenas)  Fialoconidias
  • 27. LAS ESPORAS ASEXUALES TIPOS: ESPORANGIOSPORAS Y CONIDIOS 1.- Tipo Esporangiosporas Esporangiosporas Esporangioforo Columela (Reproducción asexual interna).
  • 28. LAS ESPORAS ASEXUALES 2.- Tipo Conidios CONIDIOS CELULA CONIDIOGENICA O FIALIDE CABEZA CONIDIAL CONIDIOFORO Conidioforos y conidios (Reproducción asexual externa)
  • 29. TIPOS DE CONIDIAS • Fialoconidias • Simpuloconidias • Aleurioconidias • Blastoconidias • Artroconidias • Clamidioconidias • Blastoartroconidias • Poroconidias • Aneloconidias
  • 30.
  • 31. CULTIVO • Hongos y levaduras Es donde se ponen a crecer los hongos. Se pueden usa los siguientes medios:  Agar Sabouraud  Agar Neopeptone-glucose-rose Bengal-aureomycin  Agar Czapek (para Aspergillus, penicillium y hongos relacionedos  Agar Yeast extract-malt extract-glucose  Agar Diamalt (para levaduras)
  • 32. Medios De Cultivo Para el aislamiento primario de los hongos, se utilizan diversos medios de cultivo. Estos medios hay que seleccionarlos en función del hongo que se sospeche y del tipo de muestra.
  • 33. Los medios de cultivo se pueden utilizar en tubos cerrados con tapón de rosca o en placas de petri. La gran superficie de estas últimas facilita el aislamiento y la dilución de sustancias inhibitorias en las muestras. Es importante que el medio no se deseque por lo que el espesor de las mismas debe ser por lo menos de 25 mm, aproximadamente 35-40 mL de medio. Las placas se contaminan con facilidad durante la incubación por lo que es aconsejable sellarlas con cinta adhesiva. Los medios en tubo tienen la ventaja de que no se deshidratan y se contaminan menos, pero en cambio tienen menos superficie.
  • 34. PARÁMETROS QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO • Atmósfera • Temperatura • Luz • Actividad de agua • pH
  • 35.
  • 36. La temperatura de incubación debe ser seleccionada teniendo en cuenta el tipo de hongo, en general, los medios deben incubarse a 25ºC y a 37ºC durante 4 semanas antes de considerarse como negativos. Si se emplean tubos con tapón de rosca deben estar flojos para permitir la entrada de aire. Medios más utilizados Agar Dextrosado de Saboureaud con Cicloheximida y Cloranfenicol: se utiliza para el aislamiento e identificación de dermatófitos y Cándidas. Agar Dextrosado con Cloranfenicol sin Cicloheximida: se utiliza para el aislamiento e identificación de patógenos ambientales y oportunitas.
  • 37. Agar de harina de maíz (“Corn Meal Agar”): Suplementado con Tween 80: para diferenciar distintas especies de Cándida y para realizar subcultivos ya que estimula la esporulación de hongos miceliales. Suplementado con 10 gramos de Glucosa: para diferenciar Trichophyton Agar de Urea: se utiliza para diferenciar entre levaduras e identificar diferentes especies de Trichophyton.
  • 38. LOS PRINCIPALES CRITERIOS UTILIZADOS PARA LA CLASIFICACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LAS LEVADURAS •Producción de ascosporas. • Aspecto de las células vegetativas: forma, tamaño, color, inclusiones. • Forma de reproducción asexual. • Producción de micelio. • Forma de película en medio liquido. • Color de la colonia. • Propiedades fisiológicas: producción de ácido, actividad eureásica.
  • 39. LOS PRINCIPALES CRITERIOS UTILIZADOS PARA LA CLASIFICACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LAS LEVADURAS • Fermentación de glucosa, galactosa, sacarosa, maltosa, lactosa y rafinosa. • Crecimiento en 18 sustratos carbonados: Pentosas: D-xilosa, L-arabinosa, D-ribosa, L-ramnosa. Hexosas: D-glucosa. Disacáridos: sacarosa, maltosa, celobiosa, trehalosa, lactosa. Trisacáridos: rafinosa. Polisacáridos: almidón. Alcoholes: eritriol, ribitol, D-manitol, inositol. Ácidos orgánicos: ácido succínico, ácido cítrico.
  • 40. LOS PRINCIPALES CRITERIOS UTILIZADOS PARA LA CLASIFICACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LAS LEVADURAS • Asimilación de nitratos. • Crecimiento a 37ºC. • Crecimiento en medio con vitaminas. • Producción de almidón
  • 41. TINCIÓN • Definición: Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo), poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltar organelas dentro de células individuales.
  • 42. TIPOS DE TINCION • Tinciones simples: En las tinciones simples se usa un único colorante, que siempre es de tipo básico. • Se utilizan solamente para incrementar el contraste; todas las células absorberán el colorante y quedarán teñidas del mismo color. Por tanto, la tinción simple mejora la observación de la célula completa. • Se fija el espécimen, se añade el colorante y se deja el tiempo adecuado para que se absorba, se retira el exceso de colorante y la preparación ya está lista para ser observada. Si se utiliza un mordiente, hay que añadirlo justo antes del colorante
  • 43. TIPOS DE TINCIÓN • Tinciones diferenciales: Las tinciones diferenciales se utilizan para distinguir entre tipos de microorganismos. • La técnica de tinción diferencial consta de dos etapas: una tinción primaria (siguiendo el mismo método que en una tinción simple) seguida de una tinción de contraste. • En la tinción de contraste se utiliza otro colorante que tiñe (y por tanto, revela) las células no teñidas por el primer colorante. Estas tinciones son muy utilizadas en microbiología. Por ejemplo, la tinción de Gram y la tinción de ácido-alcohol resistencia, ambas aplicadas a bacterias.
  • 44. TINCIÓN DE ÁCIDO-ALCOHOL RESISTENCIA • son bacterias Gram positivas que resisten la decoloración con decolorantes enérgicos, como las soluciones de etanol en ácido clorhídrico • Solo se tiñen bien forzando la tinción (con calor como en la endospora o con una solución muy concentrada de colorante (fuchina) en fenol).
  • 45. TINCIÓN DE ÁCIDO-ALCOHOL RESISTENCIA • Materiales • Para realizar esta práctica estos son los materiales que se van a necesitar: Cultivos de Mycobacterium smegmatis o de M. phlei. Fuchina básica (fuchina (1 g), fenol (5 g), etanol (15 ml) y agua destilada 100 ml). Etanol-HCl : HCI 12N (3 ml), agua destilada 100 ml. • Método • 1. Teñir con fuchina durante 2 minutos. Lavar con agua. • 2. Decolorar con etanol-HCI . Lavar con agua. • 3. Teñir con azul de metileno durante 1 minuto. Lavar con agua. Observar con objetivo de inmersión. • Resultado • Las bacterias ácido-alcohol resistente se ven de color violeta y las no acido-alcohol resistentes de color azul. (en la imagen M. smegmatis)
  • 46. TINCION DE GRAM • La técnica de la tinción de Gram fue desarrollada por el bacteriólogo danés Christian Gram en 1884. Esta tinción clasifica las bacterias en dos grupos: Gram positivas y Gram negativas La técnica incluye tinción primaria, decoloración y tinción de contraste: • 1. Se tiñe el espécimen con el primer colorante, cristal violeta, que tiñe de violeta. • 2. Se añade el mordiente, yodo • .3. Se aplica el agente decolorante, normalmente una solución de acetona o etanol. En este momento, las bacterias Gram negativas pierden su tinción violeta, pero las Gram positivas retienen el colorante. • 4. Como colorante de contraste se añade safranina, que tiñe de rosa las bacterias Gram negativas, previamente decoloradas; mientras que a las bacterias Gram positivas les proporciona un color violeta más intenso.
  • 47.
  • 48. TIPOS DE TINCIÓN • Tinciones específicas: Mientras las tinciones diferenciales permiten distinguir entre distintos tipos de microorganismo. • las tinciones específicas incrementan el contraste en las células microbianas y revelan estructuras particulares, entre las que se incluyen las endosporas, los flagelos y las cápsulas.
  • 49. TINCIÓN ESPECIFICA • La tinción de Wirtz-Conklin :permite diferenciar las esporas de las células vegetativas. 1. La tinción primaria se realiza con Verde de Malaquita en caliente que tiñe las células de verde. El calor es necesario para que las endosporas se tiñan. Si la preparación se lava con agua, sólo las células vegetativas se decoloran mientras que las esporas retienen el color. 2. La tinción de contraste se realiza con rosa safranina que tiñe las células vegetativas de color rosa, mientras que las esporas permanecen verdes.
  • 50. TINCIÓN ESPECIFICA • La tinción de flagelos de Leifson es una tinción simple que usa un colorante, la rosanilina y ácido tánico que engrosa los flagelos para que puedan verse. Es imprescindible fijar las células con formol y realizar la tinción muy cuidadosamente para poder observar los flagelos. • La mejor técnica para visualizar cápsulas se basa en realizar una tinción negativa utilizando tinta china o nigrosina, colorantes que no penetran en la célula sino que ennegrecen el medio. Las células se observan brillantes, sin teñir y se aprecia una zona clara alrededor de las mismas. En ocasiones se utiliza un colorante posterior para resaltar las células.
  • 51. PROCESOS BIOQUÍMICOS • son todas las reacciones químicas del metabolismo celular que se dan en las células de los organismos vivos. Los procesos bioquímicos para obtención y transformación de la energía son los que se dan durante la respiración celular
  • 52. RESPIRACION - ANAEROBIA - GLUCOLISIS Y FERMENTACION Glucosa Ciclo de Krebs 2 Alcoholes etílicos 2 Gliceraldehido Proceso aerobio 2 Acetaldehídos 2 Ácidos glicéridos 2 Ácidos Pirúvicos 2 Ácidos Lácticos
  • 53. Tipos de metabolismo • Metabolismo primario y secundario. • · Primario à usa la célula para mantenerla viva (reacciones anabólicas y catabólicas necesarias para el mantenimiento y crecimiento de la célula).
  • 54. SECUNDARIO À RUTAS METABÓLICAS ALTERNATIVAS DE SUSTANCIAS NO ÚTILES PARA LAS CÉLULAS. • ·Son vías fundamentalmente anabólicas. • La estructura química es inusual para la célula y sin ninguna función celular. • Las vías son específicas por un grupo de hongos o hongo concreto.
  • 55. FERMENTACIÓN • La fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, totalmente anaeróbico, siendo el producto final un compuesto orgánico. • En los seres vivos, la fermentación es un proceso anaeróbico y en él no interviene la mitocondria ni la cadena respiratoria. • Son propias de los microrganismos como algunas bacterias y levaduras.
  • 56. • También se produce la fermentación en la mayoría de las células de los animales; algunas células, como los eritrocitos, carecen de mitocondrias y se ven obligadas a fermentar;
  • 57. • el tejido muscular de los animales realiza la fermentación láctica cuando el aporte de oxígeno a las células musculares no es suficiente para el metabolismo aerobio y la contracción muscular.
  • 58. TIPOS DE FERMENTACIONES • Fermentación acética es la fermentación bacteriana por Acetobacter. La formación de ácido acético (CH3COOH) resulta de la oxidación de un alcohol por la bacteria del vinagre en presencia del oxígeno del aire. Estas bacterias, a diferencia de las levadurasproductoras de alcohol, requieren un suministro generoso de oxígeno para su crecimiento y actividad.
  • 59. FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA • Ausencia de aire originado por la actividad de algunos microorganismos que procesan los hidratos de carbono para obtener: un alcohol en forma de etanol dióxido de carbono en forma de gas y unas moléculas de ATP que consumen los propios microorganismos en su metabolismo celular energético anaeróbico.
  • 60. FERMENTACIÓN BUTÍRICA • Es la conversión de los glúcidos en ácido butírico por acción de bacterias de la especie Clostridium butyricum en ausencia de oxígeno. Es característica de las bacterias del género Clostridium y se caracteriza por la aparición de olores pútridos y desagradables.
  • 61. FERMENTACIÓN LÁCTICA Es una ruta metabólica anaeróbica que ocurre en el citosol de la célula, en la cual se oxida parcialmente la glucosa para obtener energía y donde el producto de desecho es el ácido láctico.